资源简介

2025-2026学年第二学期天津中学高二年级第一次阶段性检测生物试卷
一、单选题
1．人类利用微生物发酵制作食品已经有几千年的历史，下列相关叙述正确的是（ ）
A．酵母菌、毛霉、曲霉等多种微生物参与了腐乳的制作
B．家庭制作果醋时，发酵液表面产生的菌膜由乳酸菌形成
C．家庭制作酸奶时，加入少量抗生素可以避免杂菌污染
D．制作果酒过程中，定时拧松瓶盖为酵母菌发酵提供O2
2．近年来，随着技术更新速度的加快，植物细胞育种也在快速发展。研究人员发现马铃薯脱毒苗的成苗率和脱毒率与外植体的大小有关，结果如图1；图2是获得马铃薯-番茄的流程图。下列相关叙述正确的是（ ）
A．图2中再生植株是异源多倍体，含有同源染色体
B．图1表明马铃薯脱毒苗培育过程中适宜的茎尖大小为0.60mm
C．将X细胞培育为再生植株需要更换1次培养基，提高生长素的比例有利于根的分化
D．原生质体融合依赖生物膜的流动性，为防止杂菌污染，融合原生质体需放在无菌水中
3．科研人员进行了土壤中分解尿素的细菌的分离和纯化培养，实验流程如图。下列说法正确的是（ ）

A．步骤①获取土壤样品要遵循无菌操作原则，土壤样品要进行高压蒸汽灭菌
B．步骤④选择的纯化培养基，加入尿素的目的是为微生物提供碳源和氮源
C．通过步骤④培养基的筛选，得到的一定都是能分解尿素的细菌
D．若要鉴定步骤④平板上生长的是尿素分解菌，需要在培养基中加入酚红指示剂
4．细胞划痕实验(WHA)可用于研究癌细胞的迁移能力。在癌细胞长成单层状态时，人为制造一个空白区域(划痕)，然后观察、测量划痕边缘的细胞进入空白区域的速率，以此评估细胞的迁移能力。为探究姜黄素对癌细胞迁移的影响，研究人员进行了划痕实验，结果如图。下列叙述错误的是（　　）
A．细胞培养的气体环境为95%空气和5%
B．细胞贴壁生长时发生的接触抑制现象体现了细胞膜进行细胞间信息交流的功能
C．姜黄素可通过降低癌细胞之间的黏着性来提高其迁移能力
D．通过观察基因敲除或过表达癌细胞的迁移能力，可研究特定基因在细胞迁移中的作用
5．我国科学家经过多年的试验，成功得到体细胞克隆猴。为了提高胚胎的发育率和妊娠率，研究人员将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入重构胚，同时用组蛋白脱乙酰酶抑制剂TSA处理。培育克隆猴的流程如下图，下列叙述错误的是（　　）
A．该过程体现了猴的体细胞核具有全能性
B．用灭活的病毒短暂处理有利于诱导细胞融合
C．“去核”的“核”其实是纺锤体与染色体的复合物
D．Kdm4d的mRNA和TSA均通过修饰DNA来影响基因表达
6．我国科学家利用体细胞诱导产生多能干细胞（iPS细胞），并将其注射到无法发育到成体阶段的四倍体囊胚中，最终获得克隆鼠，经鉴定证实克隆鼠确实从iPS细胞发育而来，并可繁殖后代。实验流程见图，下列分析错误的是（　　）

A．小鼠iPS细胞在特定条件下可恢复受精卵时期的功能
B．四倍体囊胚可能因染色体数目变异而无法发育为成体
C．本实验使用到体外受精、胚胎移植和胚胎分割等技术
D．克隆鼠的肝脏移植给黑鼠可避免免疫排斥反应
7．单峰骆驼在野外几乎灭绝，科学家欲通过胚胎工程的方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示研究。请据图分析，下列说法正确的是（ ）
A．为提高胚胎利用率，可采用体外受精等无性繁殖技术
B．为使A野化单峰骆驼超数排卵，可注射适量的促性腺激素
C．胚胎移植后，胚胎进一步扩大导致囊胚腔破裂的过程称为孵化
D．若①表示体外受精，可利用B野化单峰骆驼的获能精子与处于MI期的初级卵母细胞完成受精作用
8．B细胞淋巴瘤是一种恶性肿瘤，对该肿瘤的治疗方案目前有双特异性抗体治疗、CAR-T细胞疗法等。生产用于治疗B细胞淋巴瘤的双特异性抗体过程及其作用机制如图所示。下列说法正确的是（　　）
注：CD20为癌细胞表面蛋白，CD3为T细胞表面蛋白
A．图中步骤①为细胞融合，常见的方法有Ca2+诱导法、灭活病毒诱导法等
B．图中抗原X应该为CD20，步骤①后的筛选均是使用选择培养基进行筛选
C．双特异性抗体既可以识别凝集癌细胞还可以令T细胞识别杀伤癌细胞
D．与CAR-T细胞疗法相比，双特异性抗体治疗更精准，且减少了排异反应
9．“庄庄”是2025年在河北出生的世界首批胚胎干细胞基因编辑克隆牛的一员。这是世界上首次将胚胎干细胞基因编辑技术系统应用于奶牛育种，实现了特定遗传性状的定向、高效改良，大幅缩短了育种周期，是我国动物生物育种领域的重大突破。以下叙述正确的是（　　）
A．为提高早期胚胎利用率，可对获取的囊胚进行胚胎分割，要特别注意均等分割②处细胞
B．向导RNA与目标DNA通过碱基互补配对方式实现特定识别，Cas9蛋白借此进行精确定位
C．④操作为胚胎移植技术，需要用性激素预先对受体奶牛进行同期发情处理
D．进行胚胎移植前，要对供体和受体进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应
10．外界因素或细胞自身因素均可引起DNA分子断裂。下图是断裂DNA的一种修复模式，其中DNA同源序列是指具有相同或相似核苷酸序列的片段。相关叙述错误的是（ ）
A．酶a的作用是形成黏性末端，便于侵入同源序列
B．过程②中含同源序列的DNA会发生解旋
C．酶b是DNA聚合酶，以同源序列为模板、侵入单链为引物
D．修复DNA的核苷酸序列可能改变，这种变异属于基因重组
11．双向启动子可同时结合两个RNA聚合酶来驱动下游基因的表达，研究人员构建了下图所示的表达载体，以检测双向启动子作用效果。相关叙述不正确的是（ ）
A．可用农杆菌转化法将构建好的表达载体导入植物细胞
B．为连入GUS基因，需用SalI和SphI酶切已整合了双向启动子及LUC基因的质粒
C．在培养基中添加壮观霉素可筛选出成功导入表达载体的微生物受体细胞
D．可通过观察是否出现荧光和蓝色物质确认双向启动子的作用
12．天然胰岛素制剂容易形成二聚体或六聚体，皮下注射后往往要逐渐解离为单体，才能发挥作用，在一定程度上延缓了疗效。科学家利用蛋白质工程（基本思路见下图）研发出速效胰岛素，已在临床上广泛应用。下列有关叙述正确的是（ ）
A．当前限制蛋白质工程发展的关键因素是基因工程技术还不成熟
B．利用基因工程和蛋白质工程生产胰岛素都经历①②过程
C．从六聚体胰岛素解离为单体形式是将胰岛素水解为氨基酸
D．利用蛋白质工程生产速效胰岛素要从推测b入手
13．完成下面微生物培养的有关问题。
Ⅰ．营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后，微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。以下是实验人员利用影印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程（利用影印法培养的优点是不同培养基中同种菌株的接种位置相同）。
(1)培养基灭菌常用的方法是____________。过程①的接种方法为__________，图中基本培养基与完全培养基存在差异的成分是________。
(2)分离计数土壤中自然突变的氨基酸缺陷型菌株的过程步骤①取5g土壤加入45mL无菌水中充分震荡得到土壤悬液。步骤②中，将1mL土壤悬液进行梯度稀释，每种稀释度经过步骤③各在3个平板上接种（每个平板的接种量为0.1mL），经适当培养后，在土壤悬液的稀释倍数为103和104两组平板上的菌落数分别为49、47、48和2、7、6．据此可得出每克土壤中的活菌数为_____个。接种后的平板应_____，以防止冷凝水滴落造成污染。
(3)为了进一步完成对初检的营养缺陷型菌株的鉴定，实验人员进行了如下操作：
①用接种针挑取菌落______（填“A”或“B”）接种于盛有完全培养液的离心管中，28℃振荡培养1～2天后，离心，取沉淀物用无菌水洗涤3次，并制成菌悬液。
②吸取1mL菌悬液加入无菌培养皿中，倾注15mL融化并冷却至50℃左右的基本培养基，待其冷凝后用记号笔在______（填“皿盖”或“皿底”）划分A、B、C、D、E五个区域。
③在划分的五个区域对应的培养基上放入少量分组的氨基酸粉末（如下表所示），经培养后，观察生长圈出现的区域，从而确定属于何种氨基酸缺陷型。在上述鉴定实验中，发现在培养基A、D区域出现生长圈，说明该氨基酸缺陷型菌株属于__________缺陷型。
组别 所含氨基酸
A 组氨酸 苏氨酸 谷氨酸 天冬氨酸 亮氨酸
B 精氨酸 苏氨酸 赖氨酸 甲硫氨酸 苯丙氨酸
C 酪氨酸 谷氨酸 赖氨酸 色氨酸 丙氨酸
D 甘氨酸 天冬氨酸 甲硫氨酸 色氨酸 丝氨酸
E 半胱氨酸 亮氨酸 苯丙氨酸 丙氨酸 丝氨酸
Ⅱ．青梅原产于中国，主要分布于广西、贵州等省份，以青梅为原料制成的青梅果醋，是一种很受城市白领喜欢的产品。该过程中菌种筛选及发酵生产涉及以下三种培养基：
培养基A 葡萄糖、酵母粉、无水碳酸钙、琼脂、3%乙醇
培养基B 葡萄糖、酵母粉、3%乙醇
培养基C 葡萄糖、酵母粉、6%乙醇
(4)为了提高出汁率，通常在青梅压榨之前加入一定浓度的____________________，去除细胞壁。加入装有培养基B的摇瓶中培养一段时间，用稀释涂布平板法接种于培养基______（填“A”或“B”或“C”）上，选取透明圈较大且生长良好的单菌落10株。将上述初筛的10株醋酸菌接种于培养基______（填“A”或“B”或“C”）中，并检测总酸含量和乙醇转化率。
14．中医治疗疾病多用复方，三白草（2n=22）和鱼腥草（2n=24）是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。研究人员欲利用植物体细胞杂交技术将复方中的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图所示:
(1)取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用酒精和次氯酸钠对其_______（填“消毒”或“灭菌”），每次处理后用无菌水冲洗叶片2～3次，去除残留在叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成小片备用。
(2)过程①通常使用___________酶去除细胞壁获取原生质体，同时向三白草和鱼腥草细胞的酶解液中分别加入红、绿荧光色素（荧光色素不影响原生质体的活性）。过程②诱导原生质体融合，随后在荧光显微镜下选择___________的融合细胞（杂种原生质体）。过程②的化学方法包括聚乙二醇融合法和_______________融合法。
(3)过程③为___________，该过程一般______（填“需要”或“不需要”）光照，得到的愈伤组织细胞通常含有______条染色体。
(4)研究人员研究了不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图所示。
注：双核异核融合体指具有两个不同来源细胞核的细胞。
由图可知，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的适宜密度为_______________。
(5)通常情况下，能增加免疫器官重量的物质一般具有一定的增强免疫力的作用。为判断杂种细胞的代谢物对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组；实验处理如表所示（溶剂为蒸馏水）。
组别 A组 B组 C组（空白对照组）
实验处理 三白草和鱼腥草杂种细胞代谢物溶液 三白草代谢物和鱼腥草代谢物混合溶液 ________
每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量
①在表格中将C组的实验处理补充完整：________________________。
②若实验结果为：________________________，则支持利用植物体细胞杂交技术将复方中的配伍提前到生产过程，并实现有效成分的工厂化生产。
15．EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。
（1）将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1和VP2作为__________分别注射到3组小鼠体内，引发小鼠机体的________________免疫产生相应的抗体。
（2）多次免疫后，分别取上述3组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度，结果如图所示。
①EV71免疫的小鼠血清抗体________（填“是”或“不是”）单一抗体，判断依据是_________________________________________________________________________。
②制备抗EV71单克隆抗体时，选用__________免疫的小鼠B细胞效果最佳。
（3）双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图：
①固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是________________________________________。
②研究人员获得三种抗EV71单克隆抗体，分别记为A、B、C，为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法，科研人员需要进行_____组实验，检测并比较各组实验的产物量。
16．科学家从富含甲苯的污水中筛选出能高效分解甲苯的菌株M，克隆其相关分解酶基因X，并将此基因导入有高盐需求的需纳弧菌，用于治理海洋污染。回答下列问题。
(1)获取目的基因X：由于基因X含部分未知序列，科学家利用已知同源序列设计引物，通过反向PCR扩增两侧未知序列，后续通过测序和进一步实验获取X基因全长序列。反向PCR过程如图甲，据此回答：过程③应选用的一对引物为_________；获得双链等长的目标产物至少需扩增________轮。

(2)构建重组质粒：载体质粒和由（1）获得的基因X部分信息如图乙，据此设计方案：先用EcoRV对基因X两端进行完全酶切；再用EcoRV和SpeI对载体质粒进行完全酶切，并用_________酶将质粒的黏性末端补平；最后将酶切后包含基因X的片段与酶切并补平的质粒进行连接，获得重组质粒。
(3)筛选含正向连接质粒的受体菌：为检测连接方向，将导入重组质粒的需纳弧菌接种到含有卡那霉素的固体培养基，一段时间后挑取单菌落扩大培养并分别提取质粒，再选用限制酶________和________对质粒进行完全酶切，取酶切产物进行电泳。由图乙电泳结果可知，_______号样品来自正向连接质粒。

(4)重组受体菌的效能验证：将等量的野生型需纳弧菌（对照组）和含正向连接质粒的重组需纳弧菌（实验组）接种到_________的液体培养基中，在相同条件下培养并定期检测相关指标。若实验组_________，则表明重组菌株能高效发挥作用。
17．自然界中某些细菌可通过代谢将原油转化为稳定无害的终产物，科学家为获得能有效修复原油污染土壤的工程菌展开相关研究。
(1)获得能降解原油的目标菌可从_____取样，样品经_____水稀释后涂布于以原油为唯一碳源的固体培养基上培养，分离纯化后获得目标菌A。
(2)假单胞菌遭受环境压力时，会分泌大量胞外复合物将自身包裹于其中形成细菌聚集膜样物（生物被膜）。目标菌A成膜性差，不能有效控制原油向深层土壤渗透。研究人员将假单胞菌的bdlA基因（约1300bp）导入目标菌A体内，尝试构建成膜性好的工程菌。
图1为bdlA基因与pX系列质粒连接构建的重组质粒模式图，为确认是否获得重组DNA分子，可选用限制酶_______对其切割，并对酶切产物及重组质粒进行凝胶电泳检测，结果如图2。据图可初步判断重组质粒构建成功，依据是______。
(3)上述方法获得的两种工程菌命名为KT2和KT5，在不同时间测定实验组中工程菌及对照组中______的生物被膜总量相对值，结果如图3所示。该结果表明________。
(4)若要将以上工程菌用于原油污染土壤的修复，举一例说明下一步还应进行哪些方面的研究______。
1．A
A、腐乳制作中，毛霉起主要作用，其分泌的蛋白酶和脂肪酶分解豆腐中的大分子物质。此外，酵母菌和曲霉等微生物在前期也可能参与发酵，共同促进腐乳风味形成，A正确；
B、果醋制作利用的是醋酸菌（需氧型），发酵液表面的菌膜由醋酸菌大量繁殖形成，而非乳酸菌（用于酸奶和泡菜，且为厌氧型），B错误；
C、抗生素会抑制或杀死乳酸菌（细菌），导致酸奶发酵失败。家庭制作酸奶通常通过高温灭菌原料和密闭环境控制杂菌，C错误；
D、果酒制作中，酵母菌在无氧条件下进行酒精发酵。定时拧松瓶盖的目的是排出产生的CO ，防止容器爆裂，而非提供O （无氧发酵不需要O ），D错误。
故选A。
2．A
植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。
A、图2中再生植株是体细胞杂交来的，属于异源多倍体，含有同源染色体，A正确；
B、由图1可知：在茎尖外植体大小为0.27mm时，脱毒率和成苗率均较高，因此马铃薯脱毒培养中茎尖外植体的适宜大小为0.27mm，B错误；
C、由X到出芽生根需要经历的过程是脱分化和再分化，生根培养基、出芽培养基中的激素的种类与比例与形成愈伤组织的培养基是不同的，需要更换2次培养基，C错误；
D、原生质体融合时没有细胞壁，若放在无菌水中会导致细胞吸水涨破，D错误。
故选A。
3．D
培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。
A、步骤①土壤样品的获取过程要遵循无菌操作原则，但不能进行高压蒸汽灭菌，不然会杀死土壤中的根瘤菌，A错误；
B、步骤④选择的纯化培养基的营养成分应该包括碳源、氮源水和无机盐等，加入尿素的目的是为微生物提供氮源，B错误；
C、某些固氮菌不需要培养基提供氮源，所以能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长，所以通过步骤④培养基的筛选，其上生长的不一定都是能分解尿素的细菌，C错误；
D、在培养基中加入酚红指示剂可进一步鉴定出尿素分解菌，因为尿素分解菌产生的脲酶能将尿素分解成氨和二氧化碳，氨可使培养基呈碱性，因而可使酚红指示剂变红，D正确。
故选D。
4．C
A、动物细胞培养的气体环境通常为95% 空气（提供氧气用于细胞呼吸）和5% CO2（维持培养液pH），A正确；
B、接触抑制是细胞相互接触时停止增殖的现象，体现了细胞膜 “进行细胞间信息交流” 的功能（细胞通过细胞膜传递信号），B正确；
C、从题图曲线可知，姜黄素处理组的细胞迁移速率低于对照组，说明姜黄素降低了细胞的迁移能力，而非提高；且细胞迁移能力与细胞间黏着性负相关，若黏着性提高，迁移能力会下降，C错误；
D、通过基因敲除（抑制基因表达）或过表达特定基因，观察细胞迁移能力的变化，是研究基因在细胞迁移中作用的常用方法，D正确。
故选C。
5．D
A、该过程是将体细胞核移植到去核卵母细胞中，最终发育成完整个体（克隆小猴），体现了猴的体细胞核具有全能性，A正确、
B、用灭活的病毒（如仙台病毒）进行短暂处理，是动物细胞融合的常用诱导手段，有利于诱导体细胞与去核卵母细胞融合，B正确；
C、将卵母细胞培养到减数第二次分裂中期后，进行去核操作，去核事实上是去除卵母细胞的纺锤体-染色体结构，C正确；
D、Kdm4d的mRNA通过翻译得到组蛋白去甲基化酶，通过修饰组蛋白来影响基因表达，TSA通过抑制组蛋白脱乙酰酶，来影响组蛋白的乙酰化修饰，进而影响基因表达，它们均不是通过修饰DNA来影响基因表达的，D错误。
故选D。
6．C
多能干细胞是一类具有自我更新、自我复制能力的多潜能细胞，多能干细胞具有分化出多种细胞组织的潜能，但失去了发育成完整个体的能力，发育潜能受到一定的限制。人或者动物都是二倍体，可用电融合的方法使两个细胞融合为一个细胞，这样就获得了四倍体胚胎，四倍体胚胎是不能正常发育的，但是可以形成胎盘，如果将一种多能干细胞注入四倍体囊胚，可以获得一个完整的动物个体，那证明移进去的干细胞是全能的干细胞。
A、多能干细胞（iPS细胞）已被证明可以发育成个体，小鼠体细胞在诱导因子的作用下产生多能干细胞，表明其可恢复全能性，A正确；
B、四倍体囊胚是由两个二倍体细胞融合发育而来，发生染色体数目变异，无法正常发育成个体，B正确；
C、本实验应用了细胞融合、多能干细胞移植、体外胚胎培养、胚胎移植技术，并没有使用到体外受精和胚胎分割移植等技术， C错误；
D、多能干细胞具有分化出多种细胞组织的潜能，可以经过诱导发育成特定器官，用于器官移植，克隆鼠的肝脏移植给黑鼠可避免免疫排斥反应，D正确。
故选C。
7．B
体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。
A、体外受精的过程属于有性生殖，A错误；
B、促性腺激素是作用于性腺细胞的激素,属于促进性激素生成，为使A野化单峰骆驼超数排卵，可注射促性腺激素，B正确；
C、孵化是指胚胎从透明带中伸展出来的过程，不是囊胚腔破裂的过程，C错误；
D、若①表示体外受精，可利用B野化单峰骆驼的获能精子与处于MⅡ期的初级卵母细胞完成受精作用，D错误。
故选B。
8．C
A、图中步骤①为诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，常见的诱导动物细胞融合的方法有灭活病毒诱导法、聚乙二醇融合法等，而Ca2+诱导法是将目的基因导入微生物细胞的方法，并非诱导细胞融合的方法，A错误；
B、由图注可知，CD20为癌细胞表面蛋白，要获得能产生识别癌细胞表面CD20抗体的B淋巴细胞，图中抗原X应该为CD20；步骤①后的第一次筛选是使用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，但第二次筛选是通过克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞，并非均使用选择培养基进行筛选，B错误；
C、从图中双特异性抗体的作用机制来看，该抗体一端能结合癌细胞表面的CD20，另一端能结合T细胞表面的CD3，所以既可以识别凝集癌细胞，还可以令T细胞识别杀伤癌细胞，C正确；
D、CAR-T细胞疗法是采集患者自身的T细胞进行基因改造后回输，这样的T细胞属于患者自身的细胞，发生免疫排斥反应的概率低。而双特异性抗体是在体外生产后输入患者体内，由于抗体对于患者来说是外来物质，容易引发免疫排斥反应，这就是双特异性抗体治疗相比CAR - T细胞疗法的明显缺点，D错误。
9．B
A、对囊胚进行胚胎分割时，需要注意将内细胞团（①）均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，A错误；
B、CRISPR-Cas9 系统中，向导 RNA（sgRNA）通过碱基互补配对的方式与目标 DNA 序列特异性结合，从而引导 Cas9 蛋白精确地定位到目标 DNA 位点，实现对特定基因的编辑，B正确；
C、④操作是胚胎移植， 胚胎移植技术是将重构后的胚胎移植到代孕母牛子宫中，并且对受体母牛进行同期发情处理使用的是孕激素，C错误；
D、在胚胎移植过程中，受体子宫对移入的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，因此不需要对供体和受体进行免疫检查。 进行胚胎移植前，主要是对供体和受体进行同期发情处理，以保证生理状态一致，D错误。
故选B。
10．D
A、据图可知酶a的作用是将断裂后的平末端转化为黏性末端，便于侵入同源序列，A正确；
B、从图中可以看出，过程②中含同源序列的DNA会发生解旋，为单链入侵的延伸做准备，B正确；
C、酶b连接的是游离的脱氧核苷酸，为DNA聚合酶，以同源序列为模板、侵入单链为引物，催化DNA单链的延伸，C正确；
D、DNA同源序列是指具有相同或相似核苷酸序列的片段，而修复DNA的过程是以同源序列的单链为模板实现的，因此修复部位的核苷酸序列可能改变，这种变异属于基因突变，D错误。
故选D。
11．B
基因工程的基本操作程序是：目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。
A、将基因表达载体导入植物细胞，常用的方法是农杆菌转化法，A正确；
B、如果用SphI 酶切已整合了双向启动子及LUC基因的质粒时就会破坏LUC基因，B错误；
C、如果成功导入含有壮观霉素抗性基因的基因表达载体，受体细胞就具有抗壮观霉素的能力，在含有壮观霉素的培养基上能生存，因此可以筛选出成功导入表达载体的微生物受体细胞，C正确；
D、双向启动子如果正常表达，就会合成荧光素酶和β-葡萄糖苷酶，催化底物分别产生荧光和生成蓝色物质，从而确定双向启动子的作用，D正确。
故选B。
12．B
蛋白质工程的流程：预期蛋白质的功能→设计预期的蛋白质结构(a)→推测应有氨基酸序列(b)→找到对应的脱氧核苷酸序列(基因)→转录(①)形成mRNA(c)→翻译(②)获得所需要的蛋白质。
A、当前限制蛋白质工程发展的关键因素是蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构，而这种高级结构往往很复杂，人们对蛋白质的高级结构了解太少，A错误；
B、利用基因工程和蛋白质工程生产胰岛素都经历找到对应的脱氧核苷酸序列(基因)→转录(①)形成mRNA(c)→翻译(②)获得所需要的蛋白质过程，B正确；
C、由题干信息可知，经过蛋白质工程改造后，发挥作用的仍是胰岛素分子，所以从六聚体胰岛素解离为单体形式是将六个胰岛素形成的六聚体水解为单个胰岛素的过程，C错误；
D、蛋白质工程中，首先根据预期的蛋白质功能设计预期的蛋白质结构，因此利用蛋白质工程生产速效胰岛素要从设计预期的蛋白质结构(a)入手，D错误。
故选B。
13．(1) 高压蒸汽灭菌##湿热灭菌 稀释涂布平板法 氨基酸
(2) 4.8×106 倒置
(3) A 皿底 天冬氨酸
(4) 纤维素酶和果胶酶 A C
14．(1)消毒
(2) 纤维素酶和果胶 同时含有红色和绿色荧光 高Ca2+-高pH
(3) 脱分化 不需要 46
(4)1×106个/mL
(5) 等量蒸馏水 A组小鼠胸腺重量明显大于B组和C组
15． 抗原 体液 不是 EV71免疫的小鼠血清可以结合EV71、VP1和VP2多种抗原 VP1 与待测抗原结合；酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量 6
16．(1) 引物1和引物4 3
(2)DNA聚合
(3) XhoⅠ EcoRV ②
(4) 以甲苯为（唯一）碳源且高盐培养液中 甲苯含量明显低于对照组
17．(1) 原油污染土壤 无菌
(2) Csp45 I、Xba I 连接到两个质粒上的目的基因一致（两个重组质粒酶切后分别产生5144bp、1254bp和4768bp、1254bp，说明两个重组质粒中都有长度约为1300bp的bdlA基因）
(3) （导入普通质粒的）目标菌A 在36t/h时KT2和KT5两种工程菌的生物被膜量相对值显著提高
(4)如何扩大培养、工程菌降解原油的效率、对生态环境的影响等。
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