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陕西渭南市普通高中联考2025-2026学年第二学期期中质量检测高二生物学试题
一、单选题
1．抗虫和耐除草剂玉米双抗12-5是我国自主研发的转基因品种。为给监管转基因生物安全提供依据，采用PCR方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．预变性过程可促进模板DNA边解旋边复制
B．后延伸过程可使目的基因的扩增更加充分
C．延伸过程无需引物参与即可完成半保留复制
D．转基因品种经检测含有目的基因后即可上市
2．我国科研人员借助CRISPR/Cas9技术对小麦的基因进行编辑，获得了抗白粉病小麦。CRISPR/Cas9基因编辑工作原理如图所示。下列说法错误的是（　　）

A．基因编辑过程中通过Cas9特异性识别目标DNA的碱基序列
B．Cas9-sgRNA复合物与限制酶均可断开特定部位的磷酸二酯键
C．基因编辑小麦没有引入外源基因，理论上来说其安全性高于传统转基因作物
D．sgRNA序列越短，进行基因编辑的过程中“脱靶”的风险越大
3．2014年出生在澳大利亚的一对姐弟被确认为一种极其罕见的半同卵双胞胎。该对半同卵双胞胎的受精及胚胎发育过程如下图所示，下列叙述错误的是（　　）
A．半同卵双胞胎极其罕见的主要原因是过程1有透明带反应和卵细胞膜反应
B．过程2所示的P1、P2和M包括了两个雄原核和一个雌原核
C．过程5内细胞团一分为二发育成的双胞胎共用一个胎盘
D．这对姐弟来源于母亲和父亲的染色体完全相同
4．“庄庄”是2025年在河北出生的世界首批胚胎干细胞基因编辑克隆牛的一员。这是世界上首次将胚胎干细胞基因编辑技术系统应用于奶牛育种，实现了特定遗传性状的定向、高效改良，大幅缩短了育种周期，是我国动物生物育种领域的重大突破。以下叙述正确的是（　　）
A．为提高早期胚胎利用率，可对获取的囊胚进行胚胎分割，要特别注意均等分割②处细胞
B．向导RNA与目标DNA通过碱基互补配对方式实现特定识别，Cas9蛋白借此进行精确定位
C．④操作为胚胎移植技术，需要用性激素预先对受体奶牛进行同期发情处理
D．进行胚胎移植前，要对供体和受体进行免疫检查，以防止发生免疫排斥反应
5．身患线粒体遗传疾病的女性可通过如下图技术获得更多的生育选择和机会。关于下图技术路线，下列叙述正确的是（　　）
A．①是新生儿患线粒体疾病的母亲
B．卵母细胞需要培养至MⅡ期才能用于体外受精
C．需要将受精卵培养至囊胚期才能进行胚胎移植
D．该新生儿无生物学父亲
6．三维细胞培养技术，是一种在实验室中以三维结构培养和繁殖活细胞的方法。与传统的二维细胞培养相比，三维细胞培养更接近人体内细胞的自然环境，能够更好地模拟体内细胞的生长和相互作用（如下图所示）。下列叙述正确的是（ ）
A．三维细胞培养通常采用与二维相同的胃蛋白酶处理时间进行传代，以保证细胞充分分散
B．三维细胞的培养不存在接触抑制现象，因此三维细胞培养增长速率比二维细胞培养更快
C．三维细胞与培养基的接触面积更大，有利于营养物质的吸收和代谢废物的排出
D．三维培养中细胞更容易维持正常的形态和分化功能，常用于构建器官模型进行疾病研究
7．2017年中国科学家成功培育了克隆猴中中和华华，流程如下。下列叙述错误的是（　　）
A．图中将体细胞与去核卵母细胞融合是因为卵母细胞具有促进核全能性表达的物质
B．图中除了“灭活病毒短暂处理”还可以用PEG融合法和电融合法诱导细胞融合
C．图中①②通过提高组蛋白的甲基化和脱乙酰化促进重构胚的胚胎发育
D．常用电刺激、钙离子载体、蛋白酶合成抑制剂等方法激活重构胚
8．近年来，细胞工程领域成果迭出，方兴未艾。下列叙述正确的是（　　）
A．选择茎尖进行植物组织培养可获得脱毒苗，因为植物茎尖分裂旺盛
B．在制备原生质体时，可使用蜗牛消化道提取液来降解植物细胞的细胞壁
C．制备单克隆抗体的过程中，经特定选择培养基筛选出的杂交瘤细胞可直接大规模培养生产目标抗体
D．制备乳腺生物反应器时，可利用胚胎分割取内细胞团的个别细胞做染色体分析，进行性别鉴定
9．关于“琼脂糖凝胶电泳”实验，下列叙述错误的是（　　）
A．根据待分离DNA片段的大小，需用缓冲液配制0.8%～1.2%的琼脂糖溶液
B．向琼脂糖溶液中加入适量的核酸染料后，需在沸水浴内加热至琼脂糖熔化
C．将PCR产物和载样缓冲液混合后，需用微量移液器将混合液缓慢注入加样孔
D．待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，需及时断电并取出凝胶置于紫外灯下观察
10．科研人员为研究M蛋白，构建了编码M蛋白的M基因与编码荧光蛋白的G基因融合表达的重组质粒，该质粒的部分结构如图1。为确定融合基因是否正确表达，科研人员提取了发荧光的受体细胞中的总蛋白，分成两组进行相关实验，并分别用抗M蛋白抗体和抗荧光蛋白抗体检测相应蛋白的表达情况，结果如图2和图3（抗体与相应蛋白结合后会显示出条带，条带位置与蛋白质大小有关）。下列叙述错误的是（ ）
A．用PCR检测重组质粒中是否插入完整的G-M融合基因时，应选择引物2和引物3
B．G-M融合基因在受体细胞内转录时，以a链作为模板
C．条带1检出的蛋白为受体细胞表达的G-M融合蛋白
D．条带2检出的蛋白可能是受体细胞自身的M基因控制合成的M蛋白
11．某研究小组利用转基因技术，将绿色荧光蛋白基因（GFP）整合到野生型小鼠Gata3基因一端，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白质的杂合子雌雄小鼠各1只，交配以期获得Gata3-GFP基因纯合子小鼠。为了鉴定交配获得的4只新生小鼠的基因型，设计了引物1和引物2用于PCR扩增，PCR产物电泳结果如图乙所示。下列叙述正确的是（　　）
A．Gata3基因的启动子无法控制GFP基因的表达
B．Gata3基因转录后的mRNA可直接被翻译成相应蛋白质
C．2号条带的小鼠是野生型，4号条带的小鼠是Gata3-GFP基因纯合子
D．用引物1和引物3进行PCR，也能通过琼脂糖凝胶电泳法确定GFP基因是否整合成功
12．基因工程中，使用单个限制酶酶切构建的表达载体易出现连接方向错误和重复插入目的基因片段等现象，可通过酶切及筛选标记鉴定出符合预期的重组载体。研究小组选用的载体P和目的基因CDS片段特征如图，将CDS片段插入载体P的SacⅡ位点后对重组载体进行扩增、筛选和检测。下列叙述错误的是（　　）
注：LacZ基因表达产物为β-半乳糖苷酶，X-gal会被β-半乳糖苷酶分解，产生蓝色产物。
A．含重组载体的宿主细胞在含X-gal的培养基上，菌落颜色为白色
B．重组载体被PstⅠ充分酶切后电泳可能会获得长度为9.4kbDNA片段
C．用EcoRⅠ与PstⅠ充分酶切重组载体，可判断CDS片段的连接方向
D．用EcoRⅠ与SacⅡ充分酶切重组载体，可得到2个长度的DNA片段
13．科研人员将等量对T1噬菌体敏感的大肠杆菌接种到12个相同固体培养基上，培养后各平板均长出大量微菌落，接着进行如下表所示实验。下列说法正确的是（ ）
分组 实验处理 培养后统计抗T1噬菌体的菌落数
A组（6个平板） 直接喷T1噬菌体 28个
B组（6个平板） 先把平板上的微菌落重新均匀涂布一 遍，再喷等量T1噬菌体 353个
A．该实验用于培养大肠杆菌的培养基属于选择培养基
B．B组的涂布使单个突变大肠杆菌形成一个菌落的概率增加
C．若两组在喷噬菌体前都用适宜紫外线诱变，A、B两组的抗性菌落数差异会消失
D．该实验证明重新涂布后再喷T1噬菌体导致了抗性突变的大量发生
14．厌氧菌乙醇梭菌可利用CO、CO2作为碳源合成乙醇，代谢途径如图所示。某乙醇梭菌突变株出现酶基因缺陷，在基础培养基（含有CO2）中不能产生乙醇。研究人员设置了甲、乙和丙三组培养基培养乙醇梭菌，检测有无乙醇生成，以确定菌株的突变情况，结果如表所示。下列有关分析合理的是（ ）
组别 培养条件 实验结果
甲 基础培养基 -
乙 基础培养基+中间产物1 -
丙 基础培养基+中间产物2 +
注：“-”表示无乙醇产生，“+”表示有乙醇产生。
A．培养该乙醇梭菌的培养基需要添加葡萄糖、牛肉膏等碳源
B．突变菌株缺乏T酶导致乙组培养基中不能检测到乙醇的生成
C．突变菌株的A酶基因正常使丙组培养基中可检测到乙醇的生成
D．实验结果说明，突变菌株的C酶基因缺陷，T酶基因和A酶基因正常
15．纳他霉素是链霉菌产生的一种真菌抑制剂。为解决发酵过程中链霉菌耐酸性差、产量低的问题，研究者尝试利用如下过程选育高产且耐低pH的菌株。相关叙述正确的是（　　）
A．过程①用盐酸和酒精混合液去除链霉菌细胞壁
B．多轮的融合筛选都应在低pH平板中培养
C．融合菌株中可能发生了染色体片段的交换与重组
D．目标菌株可直接用于纳他霉素的工业发酵生产
16．宋人张表臣曾在《珊瑚钩诗话》中说：“中古之时，未知曲蘖，杜康肇造，爱作酒醴，可为酒后，秫酒名也”。这显示出古人已经开始采用糵（发芽的谷物）来发酵产酒，目前该技术仍用于现代啤酒生产。下列叙述正确的是（　　）
A．大麦发芽程度越高，释放的淀粉酶越多越有利于啤酒生产
B．啤酒酵母的扩大培养与发酵产酒需要控制的条件相同
C．主发酵过程冷却水流量突然增大会导致的生成量增加
D．啤酒的后发酵降低发酵温度，有利于次生代谢物的积累
二、解答题
17．湖北十堰房县黄酒、白酒、酿醋历史源远流长，现在又有啤酒工厂。现代发酵技术生产啤酒，是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其工业化生产的简易流程如下：①大麦种子发芽，释放淀粉酶；②焙烤加热杀死种子胚但不使淀粉酶失活；③将干燥的麦芽碾磨成麦芽粉；④糖化并过滤得麦汁；⑤麦汁蒸煮；⑥加入酵母菌，发酵；⑦过滤，77℃保温30分钟；⑧过滤、分装啤酒进行出售。回答下列问题：
(1)发酵原料中的淀粉属于_____糖，为微生物提供_____（营养物质）。参与发酵的多种微生物种间关系属于_____。
(2)根据醋酸菌的代谢特点，米醋酿制过程需控制适宜的环境条件，如_____（答两点）。糖源充足时的产醋反应式为_____。
(3)米醋酿制的中后期，一般不会有其他杂菌干扰，其原因是_____。
(4)流程⑤蒸煮的目的是_____，从而杀菌并稳定麦汁组分，保证最终产品的质量。流程⑥在加入酵母菌前需将麦汁进行_____处理，该操作的目的是_____。
18．2019年7月21日代孕猫在胚胎移植66天后顺利分娩，我国首例完全自主培育的克隆猫“大蒜”诞生。“大蒜”是一只非常可爱的短毛猫，小猫现在健康状况良好。这次成功培育克隆猫是世界为数不多的成功案例之一，标志着我国在克隆领域又迈进了一大步。下图为克隆猫“大蒜”培育过程的示意图，请回答下列有关问题：
(1)进行过程①和③时，通常将细胞置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，培养过程中CO2主要作用是___________。需要为培养细胞提供无菌、无毒的环境，其具体操作有___________(答出2点)。
(2)核移植前需将采集到的卵母细胞培养至___________期。目前普遍使用的去核方法是___________。为了避免取核过程对细胞核造成损伤，在核移植过程中通常采用___________的做法。这里的“去核”实质上是去除___________。哺乳动物利用胚胎细胞核移植较体细胞核移植更易成功，原因是___________。
(3)为了激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，常用物理法或化学法(如电刺激、___________、___________、蛋白酶合成抑制剂等)
19．红富士是我国北方广泛栽培的苹果优良品种，但容易感染苹果轮纹病菌。研究人员发现一种扩展蛋白基因MdEXPA8与苹果果实细胞壁的扩展和生长发育密切相关。为探究MdEXPA8蛋白在苹果生长发育及抗病性中的作用，现以红富士苹果为实验材料，利用MdEXPA8基因以及超量表达启动子，构建超量表达载体，并最终获得转基因植株用于研究。回答下列问题：
(1)从苹果细胞中提取mRNA，在______酶的作用下可获得互补DNA（cDNA）；mRNA 3′端的poly-A尾是由12～18个腺嘌呤核糖核苷酸重复组成，获得cDNA时需要向反应液中加入由12～18个连续的胸腺嘧啶脱氧核苷酸组成的短单链核酸，其功能是____________；随反应进行溶液中含量逐渐减少的物质有____________。
(2)建构超量表达载体时所用质粒的结构如图所示。获得的cDNA两端没有限制酶的切割位点，则在进行PCR扩增时，应该在上游和下游引物的______端分别添加______（填限制酶的名称）的识别序列；转化成功后欲用Bar（抗除草剂基因）筛选出可超量表达MdEXPA8蛋白的苹果植株，则应该将Bar基因插入图中载体的位点______（填“1处”或“2处”）。
(3)获得转化成功的苹果体细胞后，利用植物组织培养技术获得转基因植株，此过程中需要调整培养基中_______（填植物激素的名称）的浓度配比，以有效调控愈伤组织的形成及生芽或生根。
(4)研究结果表明MdEXPA8基因超表达的植株对轮纹病菌更敏感，结合MdEXPA8蛋白的作用，形成该结果的原因可能是__________。
20．吉林省是东北亚重要的陆路口岸，近几年出现了输入性疟疾病例。疟原虫感染人体后，疟原虫的pfcrt基因编码的蛋白第76位氨基酸（赖氨酸→苏氨酸）的突变会使疟原虫获得对氯喹的抗药性。为快速筛查氯喹抗性疟原虫，研究人员根据pfcrt基因的序列，设计了F1、F2、R1、R2四种备选引物（见图甲），用于扩增目的片段。以疟原虫基因组DNA为模板进行PCR，产物的电泳结果如图乙所示，再将获得的产物用限制酶Dra Ⅰ（识别序列为5＇-AAATTT-3＇）处理。回答下列问题：
(1)PCR扩增pfcrt基因时，因参与合成反应，不断消耗而浓度下降的组分有_________。
(2)根据图甲和图乙信息，若要特异性扩增出包含完整Dra Ⅰ酶切位点区域的目的片段，应选择的引物组合是________。据图可以判断泳道2（F1-R2组合）的条带长度________（填“长于”或“短于”）泳道1（F1-R1组合）。导致两条带在电泳中迁移速率不同的直接原因是_______。
(3)已知敏感型pfcrt基因序列中Dra Ⅰ酶识别位点处编码赖氨酸的密码子为AAA，而抗性型突变后此处变为ACA（编码苏氨酸）。据此判断，Dra Ⅰ酶能切割________（填“敏感型”或“抗性型”）基因的PCR产物，原因是__________。
(4)在进行电泳鉴定实验时，将配制的琼脂糖溶液在沸水浴或微波炉内加热至琼脂糖熔化。稍冷却后加入适量的________混匀。
21．In-Fusion技术是一项新型的无缝克隆技术。技术关键是要在目的基因两端构建与线性化质粒末端相同的DNA序列（即同源序列，通常为15~20bp），然后用In-Fusion酶（能识别双链线性化DNA片段5′→3′末端16个碱基，并使其降解）处理即可实现无缝连接。如图是将氨苄青霉素抗性基因（目的基因）与线性化质粒无缝连接的操作步骤。回答下列问题：
(1)过程①反应体系中，除图中所示物质外还需添加__________，质粒线性化前后所含有的游离磷酸基团的个数分别为_________、________个。反应②中加入m个大分子靶DNA，经3次循环后，目标DNA片段所占的比例为_________。
(2)In-Fusion酶的作用原理是：该酶识别线性化DNA片段末端，按照5′→3′方向，依次断裂_________键，最终使线性化DNA片段两端出现黏性末端。为保证过程②扩增出能与线性化质粒连接的目的基因，设计引物A或引物B的依据是_______的碱基序列，以保证扩增出的目的基因和线性质粒两侧含有同源序列。
(3)过程④中，用________处理大肠杆菌，以便重组质粒导入受体细胞。重组质粒利用大肠杆菌细胞中的DNA聚合酶和_________酶，实现完全环化。
(4)用液体培养基培养大肠杆菌，然后用稀释涂布平板法进行计数，计数结果较真实值会偏_______，原因是_______。
(5)与传统构建重组质粒的方法相比，In-Fusion技术的优势之一是________。
参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 B A D B B D C B B B
题号 11 12 13 14 15 16
答案 D D B C B D
17．(1) 多 碳源 种间竞争
(2) 氧气充足、温度为30-35℃
(3)醋酸菌产生的醋酸是酸性的，抑制其他微生物生长
(4) 破坏全部酶的活性（终止酶的进一步作用） 冷却 避免高温杀死菌种
18．(1) 维持培养液的pH 定期更换培养液；对培养皿和所有培养用具进行无菌处理；在培养液中添加一定量的抗生素
(2) MⅡ期(减数第二次分裂中) 显微操作法 直接将猫“大蒜”的体细胞注入去核卵母细胞 纺锤体—染色体复合物 动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易
(3) Ca2+载体 乙醇
19．(1) 逆转录 作为引物（使逆转录酶从引物的3'端连接脱氧核苷酸） 引物、脱氧核苷酸
(2) 5′ BamHⅠ和SacⅠ 1处
(3)细胞分裂素与生长素
(4)MdEXPA8蛋白能使细胞壁变得松弛，过表达后使细胞壁过度松弛，从而便于病原菌的侵入和果实细胞壁扩展，使植株更易患病害
20．(1)引物、dNTP
(2) F1和R1 长于 DNA片段长度
(3) 敏感型 敏感型pfcrt基因的PCR产物含有DraI酶的识别序列(5’-AAATTT-3’)，而抗性型基因突变导致该识别序列被破坏，无法被DraI酶识别切割
(4)核酸染料
21．(1) Taq酶、dNTP（脱氧核苷酸）、含Mg2+的磷酸缓冲液 0 2 1/4
(2) 磷酸二酯（键） 目的基因和质粒
(3) CaCl DNA 连接
(4) 偏小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
(5)不受限制酶切位点的限制；可以把目的基因插入任何位点；避免限制酶切割对质粒功能区的破坏

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