资源简介

绝密★启用前
2
025-2026 学年成县第一中学、第二中学、成州中学
高三三诊模拟考试（生物）试卷
注意事项：
1
．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息
．请将答案正确填写在答题卡上
2
第 I 卷（选择题）
A.①②阶段应持续照光,③④阶段应避光培养
B.愈伤组织是一团未分化、不定形的薄壁组织
一、单选题
C.经辐射处理后,芽和根的突变率高于愈伤组织
1
．酸笋是广西的传统发酵食品，以其独特乳酸风味闻名。其制作流程包括选笋、切块、蒸煮、冷却、装坛
D.三个培养瓶中的培养基添加植物激素的种类均不相同
．对贴壁生长的动物细胞进行传代培养，图示操作简易流程。下列相关叙述错误的是(
（
添加适量食盐）、密封发酵等。下列叙述错误的是(
A.煮笋可使蛋白质变性从而容易被微生物利用
B.装坛前用沸水冲洗容器，并用 75%酒精擦拭内壁
C.腌制过程中加入的食盐多会缩短发酵的时间
D.发酵初期可能出现少量气泡，与微生物代谢有关
)
6
)
A.步骤①中的消化液通常含有胰蛋白酶
2
3
4
5
．某同学用牛肉膏蛋白胨固体培养基进行大肠杆菌纯化培养,下列说法错误的是( )
A.蛋白胨可为大肠杆菌的生长提供碳源、氮源和维生素等营养成分
B.在牛肉膏蛋白胨培养基的配制过程中,需先调节 pH 后灭菌
C.倒平板操作中,待平板温度下降到 50℃左右时将平板倒过来放置
D.大肠杆菌纯化培养的关键是要防止杂菌的污染
B.步骤②中及时终止消化可防止消化过度损伤细胞
C.步骤③中对细胞进行计数可用血细胞计数板
D.步骤④中分瓶前无需灭菌，即可直接分装细胞悬液
7
．“早早孕试剂诊断盒”是利用女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白(HCG)制作的单克隆抗体，下图
是抗 HCG 单克隆抗体制备流程示意图。下列叙述正确的是(
)
．下列有关稀释涂布平板法计数和显微镜直接计数法计数的描述,正确的是( )
A.为确保结果准确,每个平板的菌落都要计数并取平均值
B.可以用细菌计数板直接计数法检测大肠杆菌菌落的数量
C.两种方法均能在计数时观察到所研究微生物的形态特征
D.使用显微计数时,活菌数的实际值比稀释涂布平板法计数所得的结果偏大
．发酵工程在现代生物工程中地位越来越重要。下列有关发酵过程叙述错误的是( )
A.首先要对发酵设备和培养基严格灭菌
A.灭活病毒诱导法中病毒的抗原结构被破坏、失去感染力
B.考虑两两融合，克隆化培养液中的细胞一共有 5 种
C.大规模培养时可通过胰蛋白酶处理，避免发生接触抑制
D.图中涉及到的原理有动物细胞膜的流动性和细胞增殖
B.要随时取样,检测培养液的微生物数量、产物浓度等,以了解发酵过程
C.在发酵过程中不需要向装置中再添加必需的营养组分
D.要严格控制温度、pH,溶解氧等发酵条件
．为解决康乃馨种质退化、易感染病虫害等问题,研究者对组织培养不同阶段的康乃馨进行辐射处理,以期获
8
．下图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图，有关叙述正确的是(
)
得性状优良的突变株。据图分析,下列叙述正确的是( )
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A.该过程用到动物细胞培养、动物细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等技术
B.过程②常使用显微操作去核法对受精卵进行处理
B.若酒的表层长出白膜，可能是酒坛密封不严导致乳酸菌大量繁殖所致
C.撒曲糖化是指利用酒曲中微生物分泌的淀粉酶催化淀粉分解为葡萄糖，葡萄糖为发酵的底物
D.微生物中的蛋白酶可将原料中的蛋白质分解为小分子多肽和氨基酸，增加酒的风味
C.形成重组细胞时已经完成了细胞分裂进程
D.激活并培养重组胚胎时可以用物理法或化学法，如用 Ca2+、聚乙二醇等
13．细胞工程中，正确选择实验材料是生物实验成功的关键。下列叙述不合理的是(
A.选择马铃薯幼苗根尖分生组织培养，可获得脱毒苗
)
9
．下图为科研人员培育良种秦川牛的过程示意图，下列叙述正确的是(
)
B.选择单倍体植株经诱导染色体加倍，作为研究遗传突变的理想材料
C.选择 X 射线处理培养瓶中的薄壁组织团块，进一步培养可获得突变体
D.选择胃蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞
1
4．科学家利用图示的 RNA 干扰技术流程，设计了一种针对某害虫关键基因 M 的生物防治策略。他们将靶
向基因 M 的双链 RNA(dsRNA)导入害虫体内，最终导致基因 M“沉默”。下列叙述正确的是(
)
A.对供体母牛注射促性腺激素，可使其超数排卵，获得大量卵原细胞
B.采集的精子需在获能液中培养获能，才能与处于减数第一次分裂中期的卵母细胞受精
C.胚胎移植前，需对受体母牛进行同期发情处理，以保证其生殖器官的生理状态适宜
D.为获得遗传性状相同的后代，可对原肠胚时期的胚胎进行均等分割
0．下列有关发酵工程及其应用的叙述,正确的是( )
1
1
A.图中 Dicer 是一种限制性内切核酸酶，负责将双链 RNA 切割成小片段核酸
B.将 dsRNA 导入害虫体内后，基因 M 的 mRNA 会与小核酸在核糖体上发生结合
C.图中 dsRNA 中的一条链与基因 M 的 mRNA 序列互补
A.用单细胞蛋白制成的微生物饲料,可通过发酵工程从微生物细胞中提取
B.菌种的选育是发酵工程的中心环节,优良菌种可从自然界筛选出来
C.酱油制作中利用黑曲霉将原料中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸
D.啤酒发酵过程中糖的分解和代谢物的生成主要在后发酵阶段完成
D.基因 M 沉默后，害虫细胞内所有基因的转录过程都会受到抑制
15．现代生物技术有着巨大的应用前景，但会涉及到生物安全问题。下列叙述错误的是(
A.消除生物武器威胁、防止生物武器扩散是生物安全防控的重要方面
B.我国禁止一切与生殖性克隆和治疗性克隆有关的研究
)
1．普通六倍体小麦基因组庞大，研究相对困难。拟南芥基因组测序已完成，遗传背景相对清晰。用紫外线
分别照射普通小麦愈伤组织的原生质体 30s、1min、2min，再与拟南芥原生质体进行融合，可将小麦染色体
小片段插入拟南芥基因组。下列叙述错误的是(
A.紫外线照射可随机破坏染色体结构
)
C.为避免可能产生的基因歧视，基因检测机构不能随意泄露基因检测的结果
D.设计试管婴儿需要经过国家有关部门的严格审批，不宜推广
B.可利用灭活病毒促进两种原生质体融合
16．进行下列实验时，所选用的材料和科学方法或技术如下表，能得到明显实验结果的是(
)
C.需设置单独培养的未融合原生质体作为对照组
实验名称
色素的提取
实验材料
洋葱管状叶细胞
酵母菌
科学方法/技术
层析液提取色素
对比实验法
D.借助拟南芥的遗传背景对小麦基因组进行研究
A
B
1
2．某酒厂以高粱为主料，辅以小麦、麸皮(干麦粒外层的表皮)，再加入大曲、麸曲及生香酵母进行发酵。大
曲和麸曲中所含的微生物主要有好氧型微生物霉菌、兼性厌氧型微生物酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等。酿
探究酵母菌的呼吸方式
造工艺流程如下图所示。下列叙述错误的是(
)
分离细胞中的各种细胞
器
C
D
家兔成熟红细胞
差速离心法
观察细胞减数分裂
大蒜根尖细胞
卡诺氏液固定细胞形态
A.蒸煮后摊晾，降低原料温度后才可撒曲，以免杀死菌种
A.A
B.B
C.C
D.D
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第 II 卷（非选择题）
有机会生一个能免于感染艾滋病的孩子。请回答：
二、解答题
(1)CCR5 基因在____________(“T 细胞”、“B 细胞”、“T 细胞和 B 细胞”)中能表达。
(2)医学专家首先要卵子捐献者注射____________，已获得足够数量的卵子。在体外受精前，需要对精子进行
1
7．甘蓝易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，利用植物体细胞杂交方法，培
育得到抗黑腐病的甘蓝。
1）原生质体制备。取两种植物的部分组织经____________________________后，放入含有较高浓度
___________________________的水解酶混合液中处理，酶解结束后，经过滤、低速离心，去除细胞碎片及
_
___________处理。
(3)基因敲除是把 Cas9 蛋白和特定的引导序列通过____________技术导入到还处于单细胞的受精卵里，使
（
CCR5 基因失效。
_
(4)早期胚胎发育的过程大致为：受精卵→______→囊胚→原肠胚，囊胚中的____________层细胞将发育成胎
吸除____________________________，分离得到原生质体。水解细胞壁时维持较高渗透压的目的是使细胞处
于____________________________，从而有利于原生质体的释放。
膜和胎盘。
(5)中国政府对设计试管婴儿的态度是：____________。
（
2）原生质体融合。为便于筛选融合后的杂种细胞，取野生黑芥幼苗的叶片为外植体制备原生质体，并经紫
2
0．基因编辑技术可实现基因的敲除、修复或替换。CRISPR-Cas9 是一种常用的基因组编辑系统，由向导
RNA(sgRNA)和 Cas9 核酸酶组成。Cas9 蛋白带着 sgRNA 在目标 DNA 链上滑动搜索，寻找特定的识别序列：
’-NGG-3’(N 代表 A、T、C、G 中任意一种)。一旦发现 NGG，Cas9 会停下来，把 DNA 双链解开，让
外线照射失去增殖能力，则可取甘蓝幼苗的____________________________为外植体制备原生质体。经 PEG
诱导后，去除 PEG 转入培养液中进行培养，经观察，若某细胞具备____________________________的特点，
则可初步判断该细胞为杂种细胞。诱导融合时，PEG 处理时间要适宜，时间过长会使
5
sgRNA 去比对 NGG 旁边的 20 个碱基，如果和 sgRNA 完全匹配，Cas9 会在 NGG 序列上游 3 个碱基的位置
切断 DNA 双链。TIGR-Tas 是另一种 RNA 引导的新基因编辑系统，主要由 TiGR 和 TasR 蛋白组成。TIGR 有
独特序列，可转录加工为 36 个核苷酸序列组成的向导 RNA(tigRNA)，tigRNA 的两个短间隔区(spacerA/B)分
_
___________________________；时间过短则使融合率下降。此外影响两种原生质体融合率的因素还有 PEG
的浓度、融合培养条件及____________________________。
3）培育抗黑腐病甘蓝。将杂种细胞置于适宜培养基中培养，经器官发生途径或
___________________________途径形成再生植株，通过接种高浓度____________________________，筛选
出高抗性的杂种植株。
8．牛支原体能引起牛肺炎、关节炎等多种疾病危害养殖业。VspX 蛋白是牛支原体表面的一种脂蛋白，在牛
（
别与目标 DNA 的两条链配对，随后由两个 TasR 蛋白精确切割 DNA 双链。
_
1
支原体感染宿主细胞时起黏附作用。科研人员制备抗 VspX 单克隆抗体进行相关研究。回答下列问题：
(1)将纯化 VspX 蛋白作为______________注射到小鼠体内。
(2)在融合前三天，对实验小鼠加强免疫一次，目的是______________。然后取小鼠的 B 淋巴细胞用诱导动物
细胞融合特有的方法______________诱导与骨髓瘤细胞融合，筛选得到杂交瘤细胞。
(3)一段时间后，将杂交瘤细胞接种到 96 孔培养板上进行抗体检测，检测原理如图。
(1)基因组编辑系统的功能类似于基因工程中常用的__________酶。向导 RNA 识别目标基因的原理是，在实
际应用中，向导 RNA 的识别序列越__________(填“长”或“短”)，基因编辑的错误率往往越高。
(2)据图可知，与 CRISPR-Cas9 系统相比，TIGR-Tas 系统使目的基因的插入更广泛的主要原因是__________。
(3)科研人员利用酿酒酵母构建了敲除 ADE2 基因的突变体。用 PCR 技术和技术鉴定酿酒酵母 ADE2 基因是否
被敲除，根据图 2 分析，PCR 过程中需要添加的引物为__________，若 PCR 产物与预期大小__________bp
一致，则说明基因敲除成功。
①
在检测时，需将待测样本即 96 孔板培养槽中的_______(填“细胞”或“上清液”)，加入到含 VspX 蛋白的固相
载体的小孔中。
②
③
加入酶标抗体一段时间后，需要用洗涤剂将未与______________结合的酶标抗体洗去。
加入相应酶促反应底物显色后，蓝色的深浅可代表______________。
(4)将上述检测呈_______(填“阴性”或“阳性”)的杂交瘤细胞用______________酶处理制成细胞悬液，适宜条件
培养。
(4)有研究表明，在编辑小型猪基因从而实现为人体提供移植器官时发现猪的 A 基因编码的蛋白与免疫细胞识
1
9．2018 年 11 月一对基因编辑先天免疫艾滋病的双胞胎婴儿在中国诞生。其基因编辑免疫艾滋病的原理：
别相关；猪的 B 基因表达产生 B 蛋白是位于细胞表面的跨膜蛋白，能与巨噬细胞表面的受体结合，抑制巨噬
CCR5 基因是 HⅣV 病毒入侵机体细胞的主要辅助受体之一，通过基因敲除技术让 CCR5 基因失效，从而产生
对支滋病的免疫作用。该成果有望让那些感染艾滋病毒的夫妇
第 3 页 共 4 页
细胞活性。基于此，请写出利用基因工程等生物技术改造细胞，降低器官或细胞移植后出现“免疫排斥反应”
的方法__________。
第 4 页 共 4 页参考答案
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
C C D C B D D A C C B C D C B B
1．答案：C
解析：煮笋能使竹笋中的蛋白质变性，破坏其空间结构，更易被微生物分解利用，A
正确；装坛前用沸水冲洗容器可杀灭杂菌，75%酒精擦拭内壁能进一步消毒，减少杂
菌污染，B 正确；腌制时加入食盐过多，会导致发酵液渗透压过高，抑制乳酸菌等发
酵微生物的生长繁殖，从而延长发酵时间，而非缩短，C 错误；发酵初期，少量兼性
厌氧微生物(如酵母菌)会进行有氧呼吸产生 CO2，导致出现少量气泡，这与微生物代
谢有关，D 正确。故选 C。
2．答案：C
解析：A、蛋白胨富含蛋白质,可为大肠杆菌提供碳源、氮源和维生素等营养,符合培养
基营养成分知识。A 正确;
B、培养基配制需先调节 pH,再进行高压蒸汽灭菌,避免灭菌后调 pH 引入杂菌,表述正确。
B 正确;
C、倒平板时,待培养基冷却至 50℃左右倒平板,待培养基完全凝固后再将平板倒置,本
选项操作步骤错误。C 错误;
D、微生物纯化培养的关键是防止杂菌污染,保证培养物纯净,表述正确。D 正确。
故选 C。
3．答案：D
解析：A、稀释涂布平板法计数时,应选择菌落数在 30~300 之间的平板计数,并非每个
平板都计数,表述错误。A 错误;
B、细菌计数板直接计数的是细菌个体,而非菌落,菌落需在培养基上培养后观察,表述错
误。B 错误;
C、稀释涂布平板法计数的是菌落,无法观察微生物形态;显微镜直接计数可观察形态,二
者并非都能观察,表述错误。C 错误;
D、显微镜直接计数会将活菌和死菌一起计数,稀释涂布平板法计数时,多个活菌连在一
起只形成一个菌落,因此显微计数的活菌实际值比涂布法偏大。D 正确。
故选 D。
4．答案：C
解析：A、发酵前需对发酵设备和培养基严格灭菌,防止杂菌污染,保证发酵正常进行,表
述正确。A 正确;
B、发酵过程中随时取样检测微生物数量、产物浓度,可实时掌握发酵进程,表述正确。
B 正确;
C、发酵过程中微生物会消耗营养组分,需适时添加必需营养,保证微生物生长繁殖,本选
项表述错误。C 错误;
D、温度、pH、溶解氧等会影响微生物代谢,需严格控制发酵条件,表述正确。D 正确。
故选 C。
5．答案：B
解析：A、①脱分化阶段需避光,②③④再分化阶段需照光,光照阶段表述错误。A 错误;
B、愈伤组织是脱分化形成的未分化、不定形的薄壁细胞团,符合植物组织培养概念。B
正确;
C、愈伤组织分裂能力强,突变率高于芽和根,表述错误。C 错误;
D、不同阶段培养基中植物激素比例不同,种类基本相同(生长素、细胞分裂素),表述错
误。D 错误。
故选 B。
6．答案：D
解析：A、动物细胞传代培养时，步骤①的消化液常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，分解
细胞间的蛋白质，使细胞分散，A 错误；
B、消化液会损伤细胞，步骤②及时终止消化，可防止消化过度导致细胞结构破坏，B
错误；
C、步骤③对动物细胞计数，可使用血细胞计数板直接计数，操作简便，C 错误；
D、步骤④分瓶前，细胞悬液、培养瓶均需保证无菌，需严格无菌操作，并非无需灭
菌，D 正确。
故选 D。
7．答案：D
解析：A、灭活病毒诱导细胞融合时，病毒的感染能力被破坏，但抗原结构保留，能
诱导细胞膜融合，A 错误；
B、细胞两两融合的类型有 B 淋巴细胞自身融合、骨髓瘤细胞自身融合、B 淋巴细胞
与骨髓瘤细胞融合，共 3 种，B 错误；
C、杂交瘤细胞能无限增殖，不发生接触抑制，无需用胰蛋白酶处理，C 错误；
D、细胞融合利用动物细胞膜的流动性，杂交瘤细胞培养利用细胞增殖的原理，D 正
确。
故选 D。
8．答案：A
解析：A、该过程用到动物细胞培养、动物细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植等
技术，A 正确；B、过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进行处理，B 错误；C、
形成重组细胞时还未完成细胞分裂进程，需进一步分裂分化成重组胚胎，C 错误；D、
激活并培养重组胚胎时可以用物理法或化学法，如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶
合成抑制剂等，聚乙二醇是用于细胞融合，D 错误。故选 A。
9．答案：C
解析：A、对供体母牛注射促性腺激素，使其超数排卵，获得大量卵母细胞，而非卵
原细胞，A 错误；
B、采集的精子需获能处理，才能与处于减数第二次分裂中期的卵母细胞完成受精，B
错误；
C、胚胎移植前对受体母牛同期发情处理，使供、受体生殖器官生理状态一致，保证
胚胎移植后正常发育，C 正确；
D、胚胎分割应选择桑椹胚或囊胚时期的胚胎，原肠胚细胞分化程度高，分割后难以
发育成新个体，D 错误。
故选 C。
10．答案：C
解析：A、单细胞蛋白是微生物菌体本身,并非从细胞中提取的物质,表述错误。A 错误;
B、发酵工程的中心环节是发酵罐内发酵,菌种选育是前期步骤,表述错误。B 错误;
C、酱油制作中,黑曲霉产生蛋白酶,将原料中蛋白质分解为小分子肽和氨基酸,是酱油发
酵的关键步骤,表述正确。C 正确;
D、啤酒发酵中,糖的分解和代谢物生成主要在主发酵阶段完成,后发酵主要是成熟澄清,
表述错误。D 错误。
故选 C。
11．答案：B
解析：A.紫外线照射可随机破坏染色体结构，导致发生染色体变异，A 正确；
B.可利用 PEG 促进两种原生质体融合，灭活病毒只能用于动物细胞，B 错误；
C.为了排除无关变量的影响，对照组为单独培养的未融合原生质体，C 正确；
D.将小麦染色体小片段插入拟南芥基因组，借助拟南芥的遗传背景对小麦基因组进行
研究，D 正确。
故选 B。
12．答案：B
解析：A、蒸煮后原料温度过高，摊晾降温可避免高温杀死酒曲中的微生物菌种，保
证发酵正常进行，A 正确；
B、酒表层白膜是醋酸菌大量繁殖形成，乳酸菌为厌氧菌，密封不严时无法大量繁殖，
B 错误；
C、酒曲中霉菌分泌淀粉酶，可将淀粉水解为葡萄糖，葡萄糖作为酵母菌发酵的底物，
C 正确；
D、微生物产生的蛋白酶能分解原料中蛋白质为小分子肽和氨基酸，提升酒的风味与
口感，D 正确。
故选 B。
13．答案：D
解析：A.选择马铃薯幼苗根尖分生组织培养，可获得脱毒苗，因根尖分生组织代谢旺
盛且不含病毒，因而通过植物组织培养技术可获得脱毒苗，A 正确；
B.单倍体植株经秋水仙素诱导染色体加倍后获得纯合体，可排除杂合基因型干扰，是
研究基因突变和性状遗传的理想材料，B 正确；
C.X 射线可诱发基因突变，薄壁组织团块，即愈伤组织分生能力强，细胞中不断进行
DNA 复制过程，因而突变频率高，可进一步从突变体中筛选出目标类型，C 正确；
D.胃蛋白酶最适 pH 为 1.5-2.0（强酸性），而动物细胞培养需中性环境（pH7.2-7.4），
在该条件下胃蛋白酶会失活，因而不能起到相应的作用，若胃蛋白酶起作用则酸性条
件会破坏细胞结构。动物细胞分散应使用胰蛋白酶或胶原酶，D 错误。
故选 D。
14．答案：C
解析：A、Dicer 酶切割的是双链 RNA，限制性内切核酸酶切割的是 DNA，二者作用
底物不同，Dicer 不是限制性内切核酸酶，A 错误；
B、基因 M 的 mRNA 与小核酸的结合发生在细胞质基质，核糖体是翻译场所，不参与
该结合过程，B 错误；
C、dsRNA 经切割形成的小核酸能与基因 M 的 mRNA 互补配对，说明 dsRNA 中有一
条链与基因 M 的 mRNA 序列互补，C 正确；
D、RNA 干扰具有特异性，仅靶向沉默基因 M，不会抑制害虫细胞内所有基因的转录，
D 错误。
故选 C。
15．答案：B
解析：A、生物安全防控包括消除生物武器威胁、防止扩散，保障生物安全，A 错误；
B、我国禁止生殖性克隆，支持治疗性克隆研究，该选项表述错误，B 正确；
C、基因检测结果需保密，避免基因歧视，保护个人基因隐私，C 错误；
D、设计试管婴儿需严格审批，限制应用范围，不宜推广，D 错误。
故选 B。
16．答案：B
解析：A、提取光合色素用无水乙醇，层析液用于分离色素，洋葱管状叶含光合色素，
提取方法错误，A 错误；
B、探究酵母菌呼吸方式设置有氧、无氧两组对比实验，采用对比实验法，酵母菌为
常用实验材料，B 正确；
C、家兔成熟红细胞无细胞核和众多细胞器，无法分离多种细胞器，分离细胞器应选
用含多种细胞器的细胞，C 错误；
D、大蒜根尖细胞进行有丝分裂，不能观察减数分裂，卡诺氏液用于固定细胞形态，
材料选择错误，D 错误。
故选 B。
17．答案：（1）消毒；甘露醇；水解酶；微弱的质壁分离状态
（2）根（根尖）；既有叶绿体又有增殖能力；原生质体活性下降（多个原生质体融合，
任写一点即可）原生质体密度和比例
（3）体细胞胚发生；黑腐病菌
解析：(1)原生质体制备。取两种植物的部分组织经消毒后，放入含有较高浓度甘露醇
的水解酶混合液中处理，使细胞处于微弱的质壁分离状态，从而有利于原生质体的释
放。酶解结束后，经过滤、低速离心，去除细胞碎片及吸除剩余的水解酶，分离得到
原生质体。
(2)原生质体融合。甘蓝易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性
基因，为便于筛选融合后的杂种细胞，取野生黑芥幼苗的叶片为外植体制备原生质体，
并经紫外线照射失去增殖能力，同时取甘蓝幼苗的根为外植体制备原生质体。经 PEG
诱导后，去除 PEG 转入培养液中进行培养，经观察，若某细胞具备既有叶绿体又有增
殖能力的特点，则可初步判断该细胞为杂种细胞。诱导融合时，PEG 处理时间要适宜，
时间过长会使原生质体活性下降，时间过短则使融合率下降。影响两种原生质体融合
率的因素还有 PEG 的浓度、融合培养条件及原生质体密度和比例。
(3)培育抗黑腐病甘蓝。将杂种细胞置于适宜培养基中培养，经器官发生途径或体细胞
胚发生途径形成再生植株，通过接种高浓度黑腐病菌，筛选出高抗性的杂种植株。
18．答案：(1)抗原
(2)刺激机体产生更多的能分泌抗 VspX 抗体的 B 细胞；灭活的病毒
(3)上清液；抗 VspX 抗体；抗 VspX 抗体的含量
(4)阳性；胰蛋白
解析：(1)制备抗 VspX 单克隆抗体，需将纯化 VspX 蛋白作为抗原注射到小鼠体内，
刺激小鼠发生特异性免疫。
(2)加强免疫可刺激小鼠机体产生更多能分泌抗 VspX 抗体的 B 淋巴细胞；动物细胞融
合特有的诱导方法是灭活的病毒诱导法。
(3)杂交瘤细胞分泌抗体到培养液中，因此检测时取培养槽上清液；酶标抗体可与抗
VspX 抗体结合，需洗去未结合的酶标抗体；蓝色深浅与抗体含量正相关，可代表抗
VspX 抗体的含量。
(4)检测呈阳性的杂交瘤细胞能产生特异性抗体，用胰蛋白酶处理制成细胞悬液，进行
扩大培养。
19．答案：(1)T 细胞
(2)促性腺激素获能
(3)显微注射
(4)桑椹胚滋养
(5)禁止生殖性克隆人,不反对治疗性克隆。(或四不原则:不赞成、不允许、不支持、不
接受任何生殖性克隆人的实验)
解析：(1)CCR5 基因是 HⅣV 病毒入侵机体细胞的主要辅助受体之一，而 HIV 主要侵
染 T 细胞，因此 CCR5 基因在 T 细胞中能表达。
(2)给女性注射促性腺激素可促使其超数排卵，以足够数量的卵子。在体外受精前，需
要对精子进行获能处理。
(3)将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法。
(4)早期胚胎发育的过程大致为：受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚，囊胚中的滋养层细
胞将发育成胎膜和胎盘。
(5)中国政府对设计试管婴儿的态度是：禁止生殖性克隆人，不反对治疗性克隆。(或四
不原则：不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人的实验)。
20．答案：(1)限制；碱基互补配对；短
(2)CRISPR-Cas9；依赖靶点附近存在特定的识别序列才能进行基因编辑，而 TIGR-Tas
系统不受特定识别序列限制；且 TIGR 阵列转录加工成的 tigRNA 可通过两个短间隔区
与目标 DNA 两条链配对(需要配对的序列较 CRISPR-Cas9 系统更长，双重识别特异性
更高)；TIGR-Tas 系统极大地拓展了可编辑的基因组位点(基因序列)。
(3)(琼脂糖凝胶)电泳；引物 b、引物 c；849
(4)在移植器官的细胞中敲除 A 基因，降低免疫细胞对移植细胞的识别；插入 B 基因
(或增强 B 基因的表达)，增加细胞表面的 B 蛋白，抑制巨噬细胞活性，从而降低免疫
排斥反应。
解析：(1)基因组编辑系统可切割 DNA，功能类似于限制酶；向导 RNA 识别目标基因
的原理是碱基互补配对；识别序列越短，匹配概率越高，基因编辑错误率越高。
(2)TIGR-Tas 系统使目的基因插入更广泛的原因是该系统不依赖特定识别序列，可通过
两个间隔区与目标 DNA 双链配对，编辑位点更广泛，特异性更高。
(3)鉴定基因敲除用琼脂糖凝胶电泳技术；PCR 需添加引物 b、c；预期产物大小为
849bp。
(4)降低免疫排斥的方法：敲除猪细胞的 A 基因，减少免疫细胞识别；增强 B 基因表达，
提高 B 蛋白含量，抑制巨噬细胞活性。

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