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高二生物学
考生注意：
1.本试卷分选择题和非选择题两部分。满分 100 分，考试时间 75 分钟。
2.答题前，考生务必用直径 0.5 毫米黑色墨水签字笔将密封线内项目填写清楚。
3.考生作答时，请将答案答在答题卡上。选择题每小题选出答案后，用 2B 铅笔把答题卡上对应题目
的答案标号涂黑；非选择题请用直径 0.5 毫米黑色墨水签字笔在答题卡上各题的答题区域内作答，
超出答题区域书写的答案无效，在试题卷、草稿纸上作答无效。
一、单项选择题：本题共 13 小题，每小题 2分，共 26 分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合
题目要求的。
1.下列关于传统发酵技术及发酵工程的叙述，正确的是
A.泡菜坛装八成满，以防止发酵液溢出和菜料变质腐烂
B.谷氨酸发酵过程中，在酸性条件下会积累谷氨酸，在弱碱性和中性条件下会形成谷氨酰胺
C.啤酒生产过程中通常加入啤酒花以提供发酵的菌种
D.为防止杂菌污染，菌液涂布均匀后需立即将平板倒置
2.聚羟基脂肪酸酯(PHA)是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃
后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产 PHA 菌种的流程如
图所示。下列说法正确的是
①取湖水→②接种在培养基上→③培养→④挑取单菌落，分别扩大培养→⑤检测菌体的数目和 PHA 的产
量→⑥获得目标菌株
A.步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上
B.扩大培养时，接种后需要将培养基放入恒温箱倒置培养，以防杂菌污染
C.④所用到的培养基应加入琼脂，以便挑取单菌落获得纯化菌株
D.挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的 PHA 含量
3.下列是某同学分离高产脲酶菌的实验设计，不合理的是
A.选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株
B.在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源
C.适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落
D.可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌
4.与传统发酵相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量均明显提高。下列说法正确的是
A.传统发酵无需进行消毒、灭菌，而发酵工程需要消毒、灭菌
B.发酵条件变化会影响微生物生长繁殖，但不影响其代谢途径
C.发酵罐配套传感器实时监测和控制，通过反馈控制使发酵过程处于最佳状态
D.发酵工程可获得大量微生物菌体并从菌体中提取单细胞蛋白
5.青枯病是一种严重危害马铃薯的病害，茄子对青枯病具有一定抗病性。研究者通过植物体细胞杂交技术
培育抗青枯病的马铃薯新品种，在获得的 90 个杂种植株中，有 6个具有明显的青枯病抗性。下列相关
叙述错误的是
A.通过灭活病毒诱导马铃薯原生质体与茄子原生质体融合，进一步筛选出杂种细胞
B.杂种细胞中来自茄子的染色体随机丢失可能是部分杂种植株无明显抗病性的原因
C.利用 PCR 技术可以检测杂种植株中是否具有来自茄子的青枯病抗性基因
D.茄子和马铃薯之间存在生殖隔离，不宜采用杂交育种的方法来培育抗病马铃薯
6.利用植物组织培养技术获得红豆杉试管苗，有助于解决紫杉醇药源短缺问题。下列叙述正确的是
A.细胞分裂素和生长素的比例会影响愈伤组织的形成
B.培养基先分装到锥形瓶，封口后用干热灭菌法灭菌
C.芽原基细胞由于基因选择性表达，不能用作外植体
D.紫杉醇不能通过细胞产物的工厂化生产来获取，植物组织培养优势明显
7.细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域得到了广泛应用。下列关于动物细胞工程的叙述，正确的
是
A.从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为传代细胞
B.将特定基因或特定蛋白导入已分化的 T细胞，可将其诱导形成 iPS 细胞
C.将 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合的细胞即为能分泌所需抗体的细胞
D.采用胚胎分割技术克隆动物常选用桑葚胚或囊胚，因这两个时期的细胞未发生分化
8.将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞，其过程如图所示。
下列有关叙述错误的是
A.①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同
B.体外培养杂交瘤细胞时需要置于含 95%O 的培养箱中
C.②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞
D.抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性
9.研究显示，约 70%的小鼠体细胞核移植胚胎未能成功发育至囊胚期，且仅有约 2%的胚胎移植到代孕母鼠
后可正常发育。下列叙述错误的是
A.体细胞核进入去核的 MⅡ期卵母细胞形成重构胚
B.移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态
C.胚胎移植到代孕母鼠后成活率低，可能是早期胚胎未能及时从滋养层内孵化
D.为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植
10.近年来，亚洲黑熊数量骤减，为此科研人员期望通过如图所示方法拯救亚洲黑熊。据此分析，以下说
法正确的是
A.野生亚洲黑熊 C的精子获能是指获得能量
B.目前过程②普遍使用的去除细胞核的方法是梯度离
法
C. D 受体雌性必须和动物园亚洲黑熊 A、野生亚洲黑熊 B进
行同期发情处理
D.胚胎移植前将囊胚的内细胞团均等分割可提高胚胎利用
率，后代 E、F的性别可能不同
11.关于“DNA 片段的扩增及电泳鉴定”(实验Ⅰ)和“DNA 的粗提取与鉴定”(实验Ⅱ)的实验操作，下列
相关叙述正确的是
A.实验Ⅰ中，PCR 实验所需的微量移液器、枪头、蒸馏水等必须进行高压灭菌处理
B.实验Ⅰ中，将扩增得到的 PCR 产物进行凝胶电泳，加样前应先接通电源
C.实验Ⅱ中，取洋葱研磨液的上清液，加入等体积冷酒精后析出粗提取的 DNA
D.实验Ⅱ中，将白色丝状物直接加入到二苯胺试剂中并进行沸水浴，用于鉴定 DNA
12.限制酶、DNA 连接酶的发现为 DNA 分子的切割、连接及基因表达载体的构建创造了条件。下列关于重
组 DNA 技术基本工具的叙述，正确的是
A.限制酶在原核细胞内的主要作用是切割修剪自身的 DNA
B.噬菌体、动植物病毒均可作为载体将外源基因导入受体细胞
C.用作载体的质粒分子上可以不含有限制酶切割位点
D. DNA 连接酶可连接 DNA 分子两条链中碱基对之间的氢键
13.如图是将目的基因导入大肠杆菌内制备“工程菌”的示意图，其中引物 1~4 在含有目的基因的 DNA 上
的结合位置如图甲所示，限制酶 BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ在质粒上的识别位点如图乙所示。下列说法
错误的是
A. PCR 过程完成 4轮循环，理论上至少需加入引物 30 个
B.若已经合成了图甲所示 4 种引物，应选择引物 2 和 3 扩
增目的基因
C.过程①中应使用限制酶 BamHⅠ切割质粒
D.对于转化失败的大肠杆菌及其培养基应进行灭菌处理，以防其
污染环境
二、多项选择题：本题共 5小题，每小题 3分，共 15 分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以
上选项符合题目要求，全部选对得 3分，选对但不全的得 1分，有选错的得 0分。
14.在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平
板法是常用的获取纯培养物的方法。下列说法错误的是
A.平板划线法在每次划线前后灼烧接种环的目的都是防止杂菌污染
B.稀释涂布平板法也可用于微生物的计数，有时也可以不稀释直接涂布
C.两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度
D.接种环在划线前后都需要灼烧，涂布器在接种前也需要灼烧，两种处理方法相同
15.酥梨醋富含果胶、维生素以及多种矿物质等营养成分，具有开胃护肝、排毒养颜、减肥除脂等多种功
效，是近年来的流行饮品。下列相关叙述正确的是
A.当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将酥梨汁中的糖分解成乙酸
B.当缺少氧气时，醋酸菌将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸
C.在酥梨醋发酵液中，液面处的醋酸菌密度高于瓶底处的密度
D.随发酵时间的延长，发酵液中 pH 先降低，后维持稳定
16.我国科学家发现用体外受精胚胎的滋养层替换体细胞核移植胚胎的滋养层，能显著提升恒河猴体细胞
核移植成功率，主要技术流程如图所示。下列叙述正
确的是
A.体细胞核移植和体外受精都属于克隆
B.图中进行核移植的卵母细胞需要去除纺锤体—染色
体复合物
C.为避免排斥反应，需要向植入重组囊胚的代孕猴注
射免疫抑制剂
D.滋养层细胞沿透明带内壁扩展，将来形成胎膜和胎盘的一部分
17.研究发现，人溶菌酶(hLZ)是天然抗生素替代品。科学家将该蛋白基因导入山羊体内使其能够在山羊乳
腺细胞中表达，从而从山羊乳汁中提取人溶菌酶。图 1表示被限制酶切割后的该蛋白基因，图 2表示
培育流程。下列叙述正确的是
A.切割该蛋白基因的限制酶有 2种，识别的序列可分别为-GGATCC-和-AAGCTT-
B.③过程是基因工程的核心步骤
C.②过程常采用显微注射的方法
D.转基因山羊乳腺细胞中检测到了 hLZ 基因的序列，说明目的基因在受体细胞中表达
18.利用 PCR 扩增下面 DNA 分子，下列叙述正确的是
5'-TAAACTTCAGGGT……TGATTTGTTGACC-3'
3'-ATTTGAAGTCCCA……ACTAAACAACTGG-5'
A.其中一种引物的部分碱基序列应为 3'-ATTTGAAGTCCCA-5'
B.变性时，在高温的作用下双链 DNA 解聚为单链 DNA
C.复性时，温度过低会导致 PCR 扩增出多种 DNA 片段
D.复制 n轮后，同时含有两种引物的子代 DNA 分子有 2"—2 个
三、非选择题：本题共 5 小题，共 59分。
19.(13 分)土壤中 95%的钾是不溶性钾，可供植物吸收利用的可溶性钾不超过全钾的 2%。解钾菌是一种能
将土壤中不溶性钾转化为可溶性钾的细菌。某研究小组从土壤中筛选出高效解钾菌制成生物菌肥。回
答下列问题：
(1)初筛解钾菌时，以去离子水反复冲洗的钾长石粉为唯一的钾源配制培养基，推测钾长石粉是
(填“可溶性钾”或“不溶性钾”)，该培养基从功能上分类属于 培养基。
(2)为了解土壤中解钾菌的数量，称取 10g 土样按照图 1进行操作，将接种后的平板置于适宜温度等条
件下培养，菌落稳定后统计不同稀释度下的菌落数。过程 a所用的接种方法为 。据
图计算，10g 土样中含有的解钾菌数量为 个。此方法统计的解钾菌数量比实际的少，原因
是 。
(3)为进一步探索扩增某高效解钾菌的培养条件，小组成员探究相同条件下不同氮源对菌体细胞数目的
影响，利用火焰分光光度仪测定菌体细胞的数目。测定结果如图 2。实验中还需增加一组
做对照，来检测培养基是否彻底灭菌。图中的氮源作为探索条件不合理的是 ，
原因为 。由实验结果可知，菌株生长最适
氮源是 。
(4)将筛选出的高效解钾菌菌种扩大培养后与其他微生物一同添加到有机肥中制成微生物肥料，在农
业生产中使用微生物肥料的作用是 (答 2点)。
20.(13 分)流程图是生物学研究中模型构建的一种表现形式。回答下列问题：
(1)半夏是我国常用的传统中药材，经过Ⅰ、Ⅱ阶段产生半夏试管苗 C。
①若要快速繁殖有优良性状的半夏，所给细胞中不能作为外植体的是 (填“表皮细胞”
“叶肉细胞”或“成熟筛管细胞”)，在Ⅰ、Ⅱ阶段中发生基因选择性表达的是 阶段，A、
B细胞中的蛋白质种类 (填“完全不”“不完全”或“完全”)相同。
②若要培育半夏新品种，常常用射线、化学物质等处理图中的 (填“A”“B”或“C”)，
原因是 。
(2)iPS 细胞增殖分化后能形成多种组织细胞，可用于多种疾病的治疗。科学家将 4 种基因导入小鼠成
纤维细胞后，经过 (填“Ⅰ”或“Ⅱ”)阶段的变化产生 iPS 细胞，该过程类似于植物组织
培养的 过程。科研人员已成功将Ⅱ型糖尿病病人的体细胞经重编程后诱导成 iPS 细胞，并
定向分化为胰岛组织回植患者体内，科学家普遍认为 iPS 细胞的应用前景优于胚胎干细胞，原因
是 (答 1点)。
(3)上述流程 (填“可以”或“不可以”)表示动物细胞培养技术的流程，理由是
。
21.(12 分)某女性患有输卵管阻塞，该夫妇借助“试管婴儿”技术，一次生殖过程中生出两个孩子，如图
所示。回答下列问题：
(1)过程 X若要顺利进行，首先来自父方的精子要进行 。
(2)若借助人工手段获得这样两个胎儿，需要用到的技术手段是胚胎分割，在分割囊胚阶段的胚胎时操
作过程中需要将 。
(3) (生物技术)是甲、乙产生的最后一道工序。一般来说，该技术操作比较合适的时期是
。
(4)2015 年，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。“三亲婴儿”的
培育过程可选用如图所示技术路线。
①由于女性自然周期产生的卵子太少，捐献者在取卵前通常需要注射 激素，促使一次有更
多的卵泡发育。
②“三亲婴儿”的染色体来自 (填细胞名称)，这种生殖方式属于
(填“有性”或“无性”)生殖。
③“三亲婴儿”的培育技术 (填“能”或“不能”)避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代。
22.(12 分)如图表示利用生物技术制备抗 X的单克隆抗体的过程，回答下列问题：
(1)图中所示过程所用的生物技术有动物细胞培养和 ，将特定的抗原注入小鼠，需在
一定时间内间隔注射 3次以上，其目的是 。
(2)将经免疫处理后的 B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得能分泌抗 X的单克隆抗体的杂交瘤细胞的过
程中，至少要进行两次筛选，一次是通过选择培养基(如 HAT 培养基)，该培养基对
和 生长具有抑制作用，从而筛选出杂交瘤细胞，另一次是通过 检测，
筛选出能分泌抗 X的单克隆抗体的杂交瘤细胞。
(3)培养杂交瘤细胞的培养基中需加入动物血清，作用是 ，提供
气体条件 CO 的作用是 ，杂交瘤细胞体外培养过程中，为避免细胞代谢产物积累
对细胞自身造成危害，常采取的措施是 。
(4)与采用传统的血清分离法得到的抗体相比，单克隆抗体的优点是
。
23.(9 分)苯丙酮尿症是单基因遗传病，科学家将正常基因 D导入该病患者的细胞，以治疗该病。图甲为 A、
B、C 三种质粒，图乙为含有目的基因 D的 DNA 片段，图丙为重组载体的示意图。AmpR 为氨苄青霉素抗
性基因，Tet 为四环素抗性基因，LacZ 为蓝色显色基因，其表达产物可以将无色化合物 X-gal 转化成
蓝色物质，使菌落呈蓝色，EcoRⅠ(0.6 kb)、PvuⅠ(0.8kb)为限制酶及其切割位点与复制原点之间的
距离。回答下列问题：
(1)基因工程操作的核心步骤是 。图甲中三种质粒适宜作为载体的是质粒 ，
与另外两种质粒相比，其作为载体的优点是 。
(2)获取目的基因 D时对应选择图乙中的 对其所在的 DNA 进行切割。如果仅知道基因 D首尾的
部分核苷酸序列，需要根据基因 D已知核苷酸序列合成 ，以便利用 PCR 技术扩增目的基因，
该技术的原理为 。
(3)将目的基因 D和图甲中相应质粒连接后，得到图丙中三种方式。为选出正向连接的重组质粒，使用
对质粒完全酶切后，进行电泳分析。若是正向连接载体，电泳图谱中出现长度为
kb 和 kb 两条带。高二生物学参考答案、提示及评分细则
一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。
1.A2.D3.D4.C5.A6.A7.B8.B9.C10.D11.C12.B13.B
二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。
14.AD 15.ACD 16.BD 17.AC 18.BCD
三、非选择题：本题共5小题，共59分。
19.(13分)
(1)不溶性钾(1分)选择(1分)
(2)稀释涂布平板法(1分)2.9×10？(1分)当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(2分)
(3)无接种的空白培养基(1分)硝酸钾(1分)本实验目的是筛选能分解不溶性钾的解钾菌，硝酸钾中的钾会干扰
实验结果(2分)蛋白陈(1分)
(4)增进土壤肥力；改良土壤结构，促进植株生长；有的微生物肥料还可以减少病害发生（答出2点且合理即可）(2分)
20.(13分)
(1)①成熟筛管细胞(1分)I、Ⅱ(1分)不完全(1分)②B(1分)这种细胞一直处在不断增殖的状态，容易受到
培养条件和诱变因素的影响产生突变（合理即可，2分）
(2)I(1分)脱分化(1分)PS细胞来自病人的体细胞，不发生免疫排斥（或无需破坏胚胎，不涉及伦理问题）(2分)
(3)不可以(1分)动物细胞培养只涉及细胞增殖，不涉及细胞分化(2分)
21.(12分)
(1)获能处理(1分)
(2)内细胞团均等分割(2分)
(3)胚胎移植(1分)桑葚胚期或囊胚期(2分)
(4)①促性腺(2分)②母亲卵（母）细胞和精子(2分)有性(1分)③能(1分)
22.(12分)
(1)动物细胞融合技术(1分)加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的淋巴细胞(2分)
(2)未酿合的亲本细胞(1分)融合的具有同种核的细胞（可与前一空互换）(1分)抗体（抗体阳性）(2分)
(3)补充细胞生长所需的未知营养物质(1分)维持培养液的pH(1分)定期更换培养液(1分)
(4)能准确识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备(2分)
23.(9分)
(1)基因表达载体的构建(1分)B1分)有标记基因，复制原点不会被限制酶切割(1分)》
(2)PuI(1分)引物(1分)DNA半保留复制(1分)
(3)EcoR T(1分)1.2(1分)5.5（可与前一空互换）(1分)
【高二4月·生物学参考答案第1页（共1页）】
BD

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