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同步练习3　动物细胞工程、胚胎工程
一、选择题(本题包括20小题，每小题3分，共60分。每小题只有一个选项符合题目要求。)
1．下面对动物细胞融合技术及意义的叙述，不合理的是(　　)
A．动物细胞融合是指将两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程
B．通过克服远缘杂交不亲和现象来获得新物种
C．杂交瘤技术是在动物细胞融合技术基础上发展起来的
D．灭活的病毒可以诱导细胞融合，和病毒表面的糖蛋白有关
2．(2025·邯郸高二月考)杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高等优点。下列有关叙述不正确的是(　　)
A．可用灭活病毒诱导法促进B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合
B．杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生特定抗体
C．在杂交瘤细胞的筛选过程中，需要用到抗原—抗体杂交技术
D．用单克隆抗体诊断肿瘤等疾病时，只能用荧光标记法
3．我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异种杂合二倍体胚胎干细胞(AdESCs)，过程如图所示。该细胞可分化成各种杂种体细胞，为研究不同物种性状差异的分子机制提供了模型。下列相关叙述错误的是(　　)
A．单倍体囊胚1最可能由小鼠的卵细胞经体外诱导培养获得
B．体外培养AdESCs需向培养液中添加动物血清等天然成分
C．该项技术突破生殖隔离获得了哺乳动物远亲物种的杂种细胞
D．AdESCs的染色体组数与大鼠和小鼠体细胞融合的杂种细胞相同
4．(2024·江西，16改编)某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S(含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体)。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人员采用杂交瘤技术制备了抗－S单克隆抗体(如图)。下列说法正确的是(　　)
A．体外培养骨髓瘤细胞时不需要在无菌环境下进行
B．制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B是相同的单克隆抗体
C．用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养，但不能冻存
D．单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特异性识别S蛋白
5．科研人员将两种不同的杂交瘤细胞融合得到双杂交瘤细胞AB，细胞AB能够悬浮在液体培养基中生长增殖，产生双特异性抗体AB，如图所示。下列说法错误的是(　　)
A．可用PEG诱导杂交瘤细胞A和杂交瘤细胞B融合
B．可利用抗体检测筛选出产抗体AB的双杂交瘤细胞
C．双杂交瘤细胞AB不需要识别α、β抗原就能产生双特异性抗体
D．双杂交瘤细胞AB传代培养时需用机械的方法或胰蛋白酶处理
6．(2025·鞍山高二月考)犬细小病毒(CPV)单克隆抗体(CPVMcAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制，进而杀灭幼犬体内病毒。下列与单克隆抗体制备有关的叙述，错误的是(　　)
A．在CPVMcAb的制备过程中用到了动物细胞培养和动物细胞融合技术
B．给幼鼠注射CPV抗原蛋白后，若CPV抗体检测呈阳性，则说明小鼠体内已经产生了相应的B淋巴细胞
C．经特定的选择培养基筛选出来的杂交瘤细胞都可以用来生产CPVMcAb
D．对符合要求的杂交瘤细胞体外培养时，需要无菌、无毒的环境，且温度、气体环境等其他培养条件都要适宜
7．将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合形成抗体—药物偶联物(ADC)，可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图所示。下列相关叙述错误的是(　　)
A．体外培养单个已免疫B淋巴细胞不能持续大量获得单克隆抗体
B．ADC通过主动运输进入肿瘤细胞内
C．ADC在溶酶体中被裂解后释放出药物
D．选择性杀伤肿瘤细胞利用了单克隆抗体特异性强的特点
8．(2025·邢台高二月考)科研人员以患病动物个体为供体培育的核移植胚胎干细胞，经诱导分化培养形成相应的细胞、组织或器官，然后移植给患病个体，从而降低免疫排斥。下列叙述错误的是(　　)
A．体细胞核移植技术在畜牧业、医药卫生等领域有广泛的应用前景
B．使用合成培养基培养细胞需要加入血清等物质
C．不同细胞的HLA不同是引起免疫排斥反应的原因
D．可利用上述过程的原理治疗人体镰状细胞贫血
9．我国科学家利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”。研究流程如图所示。下列相关叙述正确的是(　　)
A．睾丸中的精原干细胞也属于胚胎干细胞
B．③处的细胞将来可发育成胎儿的各种组织
C．需要在充满CO2的培养箱中培养胚胎干细胞
D．人工“猴胚胎”的遗传特性与代孕受体保持一致
10．(2025·北京市怀柔区高二月考)我国科学家从“优秀奶牛”的耳缘部位取体细胞，通过核移植技术获得首例体细胞克隆“优秀奶牛”。下列相关分析正确的是(　　)
A．体外培养的卵母细胞需发育为完全成熟的卵细胞后再进行核移植
B．通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重构胚
C．体细胞克隆所得“优秀奶牛”的性别可以与体细胞供体不同
D．体细胞克隆所得“优秀奶牛”的遗传物质全部来自供体细胞
11．我国科学家突破重重困难，重复多次如图所示操作过程，获得了两只克隆猴——“中中”和“华华”，率先将体细胞核移植技术成功地应用于非人灵长类动物的克隆。下列有关说法正确的是(　　)
A．灭活病毒处理是为了促进体细胞核膜与卵母细胞的细胞膜融合
B．重构胚的培养需要一定浓度CO2、适宜的温度和pH等条件
C．用胎猴的体细胞进行克隆的成功率显著低于成年猴的体细胞
D．克隆猴“中中”和“华华”的遗传物质和性状表现完全相同
12．(2024·湖北，5)波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等优点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是(　　)
A．选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理
B．胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测
C．普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体
D．生产中对提供精子的波尔公山羊不需要筛选
13．如图为某哺乳动物受精作用及胚胎发育过程示意图。下列叙述错误的是(　　)
A．卵子成熟和①过程发生在雌性动物的输卵管中
B．②③④过程都发生有丝分裂，b时期胚胎发生孵化
C．桑葚胚细胞具有全能性，a时期细胞开始出现分化
D．在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体，是受精的标志
14．印度沙漠猫是一种珍稀猫科动物，通过胚胎工程技术，可以让家猫代孕而繁育，主要步骤如图所示。下列相关叙述正确的是(　　)
A．步骤甲、乙分别是指体外受精、胚胎移植
B．诱导超数排卵常用的方法是用肝素溶液处理
C．早期胚胎细胞分裂过程中会形成多个四分体
D．胚胎移植前应对代孕家猫连续注射免疫抑制剂
15．(2025·保定高二月考)体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可以为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，正确的是(　　)
A．从卵巢中获得的卵母细胞培养成熟后才能与刚获取的精子进行受精
B．需要对受体注射免疫抑制剂以降低其对外来胚胎的免疫排斥反应
C．给供体动物饲喂一定量的激素后可实现超数排卵，以增加胚胎的数量
D．经胚胎移植给受体获得的后代可能具有两个或多个个体的遗传物质
16．利用动物细胞融合方法，以SARS病毒刺突蛋白作为抗原制备出单克隆抗体(抗体D)。如图为使用不同抗体抑制病毒感染细胞的检测结果。下列相关叙述不正确的是(　　)
A．对照抗体应不与SARS病毒特异性结合
B．将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内，可获得大量抗体D
C．检测抗体效果时需将SARS病毒与细胞混合一段时间后再加入抗体
D．抗体D需达到一定浓度才有明显抑制效果
17．(2025·济宁高二月考)我国首例克隆猫“大蒜”的培育过程是从供体猫大腿部采集了一块皮下组织，提取体细胞与去核的卵母细胞融合，构建重构胚，再植入代孕猫的子宫内，直至分娩。下列说法正确的是(　　)
A．体细胞比胚胎细胞的分化程度高，但不影响通过核移植获得克隆动物的难度
B．去除卵母细胞的细胞核时，可通过显微操作技术用吸管吸出细胞核
C．用电融合法使体细胞与卵母细胞融合后，不需要再对重构胚进行激活
D．克隆猫“大蒜”的培育说明动物细胞具有全能性，其遗传物质来自供体细胞和受体细胞
18．在体细胞克隆猴培育过程中，成功的关键环节是将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入重构胚，同时用组蛋白去乙酰化酶抑制剂(TSA)处理，具体培育流程如图所示。下列说法不正确的是(　　)
A．灭活的仙台病毒所起的作用是诱导细胞融合
B．使用Kdm4d的mRNA和TSA处理重构胚是为了调控基因表达
C．去核的实质是去除卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物
D．胚胎移植前应对代孕母猴进行超数排卵处理
19．(2024·江苏，19改编)从牛卵巢采集卵母细胞进行体外成熟培养，探究高温对卵母细胞成熟的影响，结果如图所示。下列相关叙述正确的是(　　)
A．选取发育状态一致的卵母细胞进行培养
B．体外培养卵母细胞时通常加入湿热灭菌后的血清
C．对采集的卵母细胞传代培养以产生大量卵细胞
D．体外培养时高温提高了卵母细胞发育的成熟率
20．如图所示为早期胚胎发育过程。下列叙述错误的是(　　)
A．从a到e中，适宜于牛的胚胎移植的时期有d、e
B．可从图e的①中分离出胚胎干细胞
C．图e的③将来可发育成胎膜和胎盘的一部分
D．图中各阶段的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能
二、非选择题(本题包括3小题，共40分。)
21．(13分)(2025·郑州高二月考)双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。如图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术(免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术)生产双特异性抗体的部分过程，图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题：
(1)(3分)如图1所示，杂交瘤杂交法是____________细胞与____________________
细胞进行了融合，目的是获得___________________________________________的抗体。
(2)(2分)对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行____________和____________，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
(3)(1分)与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是__________________________。
(4)(1分)体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为________________________
________________________________________________________________________而导致分裂受阻，需进行传代培养。
(5)(2分)动物细胞培养应提供适宜的气体环境，其中CO2的作用是____________________，
O2的作用是___________________________________________________________________。
(6)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是___________________________________________________________________
____________________________________________________________________________，
体现的是双特异性单克隆抗体在____________方面的用途。
22．(14分)我国研究人员利用去甲基化酶(Kdm4d)的mRNA，经过体细胞克隆技术克隆出了猕猴“中中”和“华华”，该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴为动物模型的时代。如图是体细胞克隆猴的技术流程，请据图回答问题：
(1)获得克隆猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是__________，
恢复其全能性较难。
(2)图中步骤①是克隆猴的技术难点之一，需要将卵母细胞培养到________后进行去核操作，而后将供体细胞注入，用物理或化学方法激活________，使其完成细胞分裂和发育进程。一般利用未受精的去核卵母细胞作为受体细胞，而不用精子，其原因是_________________
________________________(答出2点)。
(3)体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图中Kdm4d mRNA翻译产生的酶的作用是________________________________________________________。
(4)图中克隆猴的核遗传物质来自__________________。体细胞克隆可以得到大量遗传背景相似或相同的实验动物，这样的实验动物用于医学研究的好处是_______________________
____________________________________________________________________________。
23．(每空1分，共13分)和牛是世界公认的高档肉牛品种，其体型较小，肉质鲜嫩，营养丰富。我国科研人员利用胚胎移植技术，按如图所示流程操作，成功地批量培育了和牛这一优良品种。请回答下列问题：
(1)用______________激素处理，可使供体母牛超数排卵，过程①中产生的精子需要进行______处理后才具有与卵细胞受精的能力。
(2)试管牛的培育需要的工程技术有__________________、__________________和胚胎移植等。
(3)移植的胚胎处于______期，移入的甲胚胎能在代孕雌牛子宫中存活的生理基础是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________；
为培育子代雌性小牛，胚胎移植前要进行性别鉴定，宜取图中[　　]__________细胞做DNA分析。
(4)胚胎移植的实质是________________________________________________________
___________________________________________________________________________。
(5)为提高胚胎利用率，尽快获得数量较多的子代和牛，图中甲环节是对牛胚胎所做的处理，使用的技术称为____________，最终目的是_______________________________________
________________________________________________________________________；这一过程中，要特别注意
将内细胞团______分割，其原因是_______________________________________________
______________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________。
同步练习3　动物细胞工程、胚胎工程
一、选择题(本题包括20小题，每小题3分，共60分。每小题只有一个选项符合题目要求。)
1．下面对动物细胞融合技术及意义的叙述，不合理的是(　　)
A．动物细胞融合是指将两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程
B．通过克服远缘杂交不亲和现象来获得新物种
C．杂交瘤技术是在动物细胞融合技术基础上发展起来的
D．灭活的病毒可以诱导细胞融合，和病毒表面的糖蛋白有关
答案　B
解析　动物细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能，其主要应用于单克隆抗体的制备，不是为了获得新物种，B不合理。
题点　动物细胞融合技术的原理及过程
2．(2025·邯郸高二月考)杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高等优点。下列有关叙述不正确的是(　　)
A．可用灭活病毒诱导法促进B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合
B．杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生特定抗体
C．在杂交瘤细胞的筛选过程中，需要用到抗原—抗体杂交技术
D．用单克隆抗体诊断肿瘤等疾病时，只能用荧光标记法
答案　D
解析　在杂交瘤细胞的筛选过程中，需要经过多次筛选，其中需要用到抗原—抗体杂交技术，C正确；用单克隆抗体诊断肿瘤等疾病时，可以使用荧光标记法或同位素标记法，D错误。
题点　单克隆抗体的制备
3．我国科研人员利用大鼠、小鼠两个远亲物种创造出世界首例异种杂合二倍体胚胎干细胞(AdESCs)，过程如图所示。该细胞可分化成各种杂种体细胞，为研究不同物种性状差异的分子机制提供了模型。下列相关叙述错误的是(　　)
A．单倍体囊胚1最可能由小鼠的卵细胞经体外诱导培养获得
B．体外培养AdESCs需向培养液中添加动物血清等天然成分
C．该项技术突破生殖隔离获得了哺乳动物远亲物种的杂种细胞
D．AdESCs的染色体组数与大鼠和小鼠体细胞融合的杂种细胞相同
答案　D
解析　由单倍体囊胚1可获得孤雌单倍体胚胎干细胞，因此单倍体囊胚1最可能由小鼠的卵细胞经体外诱导培养获得，A正确；血清等天然成分与细胞在体内需要的成分接近，含丰富的营养物质及各种生长因子等，因此体外培养AdESCs需向培养液中添加动物血清等天然成分，B正确；该AdESCs是杂合二倍体胚胎干细胞，故含有2个染色体组，但小鼠和大鼠体细胞融合产生的杂种细胞，通常含有4个染色体组，因此两者染色体组数不同，D错误。
题点　动物细胞融合技术的意义、应用
4．(2024·江西，16改编)某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S(含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体)。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人员采用杂交瘤技术制备了抗－S单克隆抗体(如图)。下列说法正确的是(　　)
A．体外培养骨髓瘤细胞时不需要在无菌环境下进行
B．制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B是相同的单克隆抗体
C．用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养，但不能冻存
D．单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特异性识别S蛋白
答案　D
解析　体外培养骨髓瘤细胞时需要在无菌、无毒的环境下进行操作，A错误；由题干可知，该实验制备的是抗－S单克隆抗体，因此抗原为S蛋白，S蛋白含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体，则按照图示过程可产生多种类型的不同杂交瘤细胞，单克隆抗体A和单克隆抗体B可能来自不同的杂交瘤细胞，故二者可能不是相同的单克隆抗体，B错误；用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养，也可冷冻保存，C错误；单克隆抗体A和单克隆抗体B都来自筛选出的杂交瘤细胞，因此都能够特异性识别S蛋白上的抗原决定基，D正确。
题点　单克隆抗体的制备
5．科研人员将两种不同的杂交瘤细胞融合得到双杂交瘤细胞AB，细胞AB能够悬浮在液体培养基中生长增殖，产生双特异性抗体AB，如图所示。下列说法错误的是(　　)
A．可用PEG诱导杂交瘤细胞A和杂交瘤细胞B融合
B．可利用抗体检测筛选出产抗体AB的双杂交瘤细胞
C．双杂交瘤细胞AB不需要识别α、β抗原就能产生双特异性抗体
D．双杂交瘤细胞AB传代培养时需用机械的方法或胰蛋白酶处理
答案　D
解析　诱导杂交瘤细胞A和杂交瘤细胞B融合可以用电融合法、PEG诱导融合法和灭活病毒诱导法等，A正确；可利用抗原—抗体杂交法筛选出产抗体AB的双杂交瘤细胞，B正确；双杂交瘤细胞AB由杂交瘤细胞A和杂交瘤细胞B融合而来，本身就能产生相应抗体，不需要识别α、β抗原就能产生双特异性抗体，C正确；双杂交瘤细胞AB不会出现接触抑制现象，传代培养时不需要用机械的方法或胰蛋白酶处理，D错误。
题点　单克隆抗体的制备
6．(2025·鞍山高二月考)犬细小病毒(CPV)单克隆抗体(CPVMcAb)可抑制病毒对宿主细胞的侵染及病毒的复制，进而杀灭幼犬体内病毒。下列与单克隆抗体制备有关的叙述，错误的是(　　)
A．在CPVMcAb的制备过程中用到了动物细胞培养和动物细胞融合技术
B．给幼鼠注射CPV抗原蛋白后，若CPV抗体检测呈阳性，则说明小鼠体内已经产生了相应的B淋巴细胞
C．经特定的选择培养基筛选出来的杂交瘤细胞都可以用来生产CPVMcAb
D．对符合要求的杂交瘤细胞体外培养时，需要无菌、无毒的环境，且温度、气体环境等其他培养条件都要适宜
答案　C
解析　给幼犬注射CPV后，会激发幼犬的体液免疫，产生相应的抗体，因此若 CPV抗体检测呈阳性，说明产生了相应的B淋巴细胞，B正确；经选择培养基筛选出来的杂交瘤细胞并不一定都符合人们需要，还需经过克隆化培养和专一抗体阳性检测，筛选出能分泌CPVMcAb的杂交瘤细胞，C错误。
题点　单克隆抗体的制备
7．将细胞毒素类药物与单克隆抗体结合形成抗体—药物偶联物(ADC)，可实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，过程如图所示。下列相关叙述错误的是(　　)
A．体外培养单个已免疫B淋巴细胞不能持续大量获得单克隆抗体
B．ADC通过主动运输进入肿瘤细胞内
C．ADC在溶酶体中被裂解后释放出药物
D．选择性杀伤肿瘤细胞利用了单克隆抗体特异性强的特点
答案　B
解析　ADC进入肿瘤细胞的方式为胞吞，B错误。
题点　单克隆抗体的应用、优点
8．(2025·邢台高二月考)科研人员以患病动物个体为供体培育的核移植胚胎干细胞，经诱导分化培养形成相应的细胞、组织或器官，然后移植给患病个体，从而降低免疫排斥。下列叙述错误的是(　　)
A．体细胞核移植技术在畜牧业、医药卫生等领域有广泛的应用前景
B．使用合成培养基培养细胞需要加入血清等物质
C．不同细胞的HLA不同是引起免疫排斥反应的原因
D．可利用上述过程的原理治疗人体镰状细胞贫血
答案　D
解析　为了保证细胞培养时营养物质和生长因子的供给，合成培养基中需添加一定量的动物血清等天然成分，可以补充合成培养基中缺乏的物质，B正确；不同细胞的主要HLA(组织相容性抗原)不同，会引起机体发生免疫排斥反应，而且HLA差别越大，引起的免疫排斥反应越强，C正确；人体患镰状细胞贫血的根本原因是基因突变，因此无法利用患病个体细胞培养的细胞、组织或器官进行移植来治疗镰状细胞贫血，D错误。
题点　体细胞核移植技术的应用前景
9．我国科学家利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”。研究流程如图所示。下列相关叙述正确的是(　　)
A．睾丸中的精原干细胞也属于胚胎干细胞
B．③处的细胞将来可发育成胎儿的各种组织
C．需要在充满CO2的培养箱中培养胚胎干细胞
D．人工“猴胚胎”的遗传特性与代孕受体保持一致
答案　B
解析　胚胎干细胞来自早期胚胎，睾丸中精原干细胞属于成体干细胞，A错误；③是内细胞团，具有发育全能性，可发育成胎儿的各种组织，B正确；动物细胞培养和早期胚胎培养需要在95%空气和5%二氧化碳的混合气体环境中培养，C错误；人工“猴胚胎”的遗传特性与提供胚胎干细胞的供体基本一致，代孕受体提供营养，D错误。
题点　干细胞及其应用
10．(2025·北京市怀柔区高二月考)我国科学家从“优秀奶牛”的耳缘部位取体细胞，通过核移植技术获得首例体细胞克隆“优秀奶牛”。下列相关分析正确的是(　　)
A．体外培养的卵母细胞需发育为完全成熟的卵细胞后再进行核移植
B．通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞，形成重构胚
C．体细胞克隆所得“优秀奶牛”的性别可以与体细胞供体不同
D．体细胞克隆所得“优秀奶牛”的遗传物质全部来自供体细胞
答案　B
解析　体外培养的卵母细胞需发育到MⅡ期再进行核移植，A错误；体细胞克隆所得“优秀奶牛”的过程属于无性繁殖，其性别与体细胞供体相同，C错误；体细胞克隆所得“优秀奶牛”的核遗传物质全部来自供体细胞，D错误。
题点　体细胞核移植的过程
11．我国科学家突破重重困难，重复多次如图所示操作过程，获得了两只克隆猴——“中中”和“华华”，率先将体细胞核移植技术成功地应用于非人灵长类动物的克隆。下列有关说法正确的是(　　)
A．灭活病毒处理是为了促进体细胞核膜与卵母细胞的细胞膜融合
B．重构胚的培养需要一定浓度CO2、适宜的温度和pH等条件
C．用胎猴的体细胞进行克隆的成功率显著低于成年猴的体细胞
D．克隆猴“中中”和“华华”的遗传物质和性状表现完全相同
答案　B
解析　灭活病毒处理是为了促进体细胞的细胞膜与卵母细胞的细胞膜融合，A错误；动物组织培养需要一定浓度CO2、适宜的温度和pH等条件，B正确；用胎猴的体细胞进行克隆的成功率显著高于成年猴的体细胞，C错误；遗传物质相同的个体性状表现还受环境因素的影响，不一定完全相同，D错误。
题点　体细胞核移植的过程
12．(2024·湖北，5)波尔山羊享有“世界山羊之王”的美誉，具有生长速度快、肉质细嫩等优点。生产中常采用胚胎工程技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述错误的是(　　)
A．选择遗传性状优良的健康波尔母山羊进行超数排卵处理
B．胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测
C．普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体
D．生产中对提供精子的波尔公山羊不需要筛选
答案　D
解析　选择遗传性状优良、生产能力强的健康波尔母山羊作为供体，进行超数排卵处理，A正确；滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘的一部分，胚胎移植前，可采集部分滋养层细胞进行遗传学检测，B正确；胚胎移植的受体需要满足的条件是与供体同种且生理状态相同，而山羊和绵羊是不同的物种，因此普通品质的健康杜泊母绵羊不适合作为受体，C正确；生产中需选择品质良好的波尔公山羊提供精子，D错误。
题点　胚胎移植的综合考查
13．如图为某哺乳动物受精作用及胚胎发育过程示意图。下列叙述错误的是(　　)
A．卵子成熟和①过程发生在雌性动物的输卵管中
B．②③④过程都发生有丝分裂，b时期胚胎发生孵化
C．桑葚胚细胞具有全能性，a时期细胞开始出现分化
D．在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体，是受精的标志
答案　B
解析　卵子的成熟及精子和卵子的相互结合发生在雌性动物的输卵管中，A正确；a囊胚期发生孵化现象，b为原肠胚时期，B错误；桑葚胚细胞尚未分化，实验证实，这一阶段前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能，a是囊胚期，此时细胞开始出现分化，C正确。
题点　胚胎早期发育综合考查
14．印度沙漠猫是一种珍稀猫科动物，通过胚胎工程技术，可以让家猫代孕而繁育，主要步骤如图所示。下列相关叙述正确的是(　　)
A．步骤甲、乙分别是指体外受精、胚胎移植
B．诱导超数排卵常用的方法是用肝素溶液处理
C．早期胚胎细胞分裂过程中会形成多个四分体
D．胚胎移植前应对代孕家猫连续注射免疫抑制剂
答案　A
解析　步骤甲表示在体外精子与卵细胞的结合，表示体外受精，乙将早期胚胎移入受体内，表示胚胎移植，A正确；诱导超数排卵常用的方法是注射促性腺激素，B错误；早期胚胎细胞分裂属于有丝分裂，分裂过程中不会形成四分体，C错误；胚胎移植的生理学基础之一是受体子宫对移入的外源胚胎基本上不发生免疫排斥反应，因此代孕家猫无须注射免疫抑制剂，D错误。
题点　胚胎移植的综合考查
15．(2025·保定高二月考)体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可以为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，正确的是(　　)
A．从卵巢中获得的卵母细胞培养成熟后才能与刚获取的精子进行受精
B．需要对受体注射免疫抑制剂以降低其对外来胚胎的免疫排斥反应
C．给供体动物饲喂一定量的激素后可实现超数排卵，以增加胚胎的数量
D．经胚胎移植给受体获得的后代可能具有两个或多个个体的遗传物质
答案　D
解析　从卵巢中获得的卵母细胞培养成熟后才能与获能的精子进行受精，刚获取的精子不具备受精的能力，A错误；受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，不需要对受体注射免疫抑制剂，B错误；促性腺激素能促进排卵，不可口服，因为促性腺激素的化学本质为多肽蛋白质类，只能注射，C错误；胚胎移植的胚胎，可能是核移植技术、体外受精等获得的，故经胚胎移植给受体获得的后代可能具有两个或多个个体的遗传物质，D正确。
题点　胚胎移植的综合考查
16．利用动物细胞融合方法，以SARS病毒刺突蛋白作为抗原制备出单克隆抗体(抗体D)。如图为使用不同抗体抑制病毒感染细胞的检测结果。下列相关叙述不正确的是(　　)
A．对照抗体应不与SARS病毒特异性结合
B．将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内，可获得大量抗体D
C．检测抗体效果时需将SARS病毒与细胞混合一段时间后再加入抗体
D．抗体D需达到一定浓度才有明显抑制效果
答案　C
解析　由图可知，加入对照抗体后病毒感染率基本不变，说明对照抗体不与SARS病毒特异性结合，不能抑制病毒感染细胞，A正确；抗体检测呈阳性，说明该杂交瘤细胞能产生相应的抗体D，因此将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内，可从小鼠腹水获取大量单克隆抗体D，B正确；检测抗体效果时，需先将SARS病毒与抗体混合，再让其侵染细胞，观察病毒感染细胞的效果，C错误；据图分析，当抗体D达到一定浓度后，感染率下降明显，抑制效果才明显，D正确。
题点　单克隆抗体的制备
17．(2025·济宁高二月考)我国首例克隆猫“大蒜”的培育过程是从供体猫大腿部采集了一块皮下组织，提取体细胞与去核的卵母细胞融合，构建重构胚，再植入代孕猫的子宫内，直至分娩。下列说法正确的是(　　)
A．体细胞比胚胎细胞的分化程度高，但不影响通过核移植获得克隆动物的难度
B．去除卵母细胞的细胞核时，可通过显微操作技术用吸管吸出细胞核
C．用电融合法使体细胞与卵母细胞融合后，不需要再对重构胚进行激活
D．克隆猫“大蒜”的培育说明动物细胞具有全能性，其遗传物质来自供体细胞和受体细胞
答案　B
解析　体细胞比胚胎细胞的分化程度高，表现全能性十分困难，故体细胞核移植获得克隆动物的难度明显高于胚胎细胞核移植，A错误；在核移植过程中，可通过显微操作技术去除卵母细胞中的细胞核，获得去核卵母细胞，B正确；用电融合法使体细胞与卵母细胞融合后，需用物理或化学方法(如电刺激、Ca2＋载体等)激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，C错误；克隆猫“大蒜”的培育说明动物体细胞核具有全能性，D错误。
题点　体细胞核移植的过程
18．在体细胞克隆猴培育过程中，成功的关键环节是将组蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入重构胚，同时用组蛋白去乙酰化酶抑制剂(TSA)处理，具体培育流程如图所示。下列说法不正确的是(　　)
A．灭活的仙台病毒所起的作用是诱导细胞融合
B．使用Kdm4d的mRNA和TSA处理重构胚是为了调控基因表达
C．去核的实质是去除卵母细胞中的纺锤体—染色体复合物
D．胚胎移植前应对代孕母猴进行超数排卵处理
答案　D
解析　进行胚胎移植时，为保证移植的胚胎能正常发育，需要对代孕母猴进行同期发情处理，D错误。
题点　胚胎移植的综合考查
19．(2024·江苏，19改编)从牛卵巢采集卵母细胞进行体外成熟培养，探究高温对卵母细胞成熟的影响，结果如图所示。下列相关叙述正确的是(　　)
A．选取发育状态一致的卵母细胞进行培养
B．体外培养卵母细胞时通常加入湿热灭菌后的血清
C．对采集的卵母细胞传代培养以产生大量卵细胞
D．体外培养时高温提高了卵母细胞发育的成熟率
答案　A
解析　体外培养卵母细胞时通常加入血清，但是动物血清并不能进行湿热灭菌，否则会使其中部分有效成分失活，B错误；卵母细胞不能进行传代培养，因为卵母细胞是生殖细胞，不具有连续分裂的能力，C错误；由图可知，高温降低了卵母细胞发育的成熟率，D错误。
题点　动物细胞工程及应用综合
20．如图所示为早期胚胎发育过程。下列叙述错误的是(　　)
A．从a到e中，适宜于牛的胚胎移植的时期有d、e
B．可从图e的①中分离出胚胎干细胞
C．图e的③将来可发育成胎膜和胎盘的一部分
D．图中各阶段的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能
答案　D
解析　e阶段的③(滋养层细胞)已分化，不具有发育成完整胚胎的潜能，D错误。
题点　胚胎早期发育各阶段与细胞全能性
二、非选择题(本题包括3小题，共40分。)
21．(13分)(2025·郑州高二月考)双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。如图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术(免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术)生产双特异性抗体的部分过程，图2是某双特异性抗体作用图。请分析回答下列问题：
(1)(3分)如图1所示，杂交瘤杂交法是____________细胞与____________________
细胞进行了融合，目的是获得___________________________________________的抗体。
(2)(2分)对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行____________和____________，才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
(3)(1分)与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是__________________________。
(4)(1分)体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为________________________
________________________________________________________________________而导致分裂受阻，需进行传代培养。
(5)(2分)动物细胞培养应提供适宜的气体环境，其中CO2的作用是____________________，
O2的作用是___________________________________________________________________。
(6)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是___________________________________________________________________
____________________________________________________________________________，
体现的是双特异性单克隆抗体在____________方面的用途。
答案　(1)单克隆杂交瘤　经长春碱免疫后的B淋巴　既能与长春碱结合，又能与肿瘤细胞结合(2)克隆化培养　抗体检测　(3)能准确地识别抗原的细微差异，能与特定抗原发生特异性结合，能大量制备　(4)营养物质缺乏、有害代谢物的积累等因素　(5)维持培养液的pH　参与细胞代谢　(6)双特异性单克隆抗体能将长春碱定向带到肿瘤细胞所在位置　运载药物(靶向治疗)
解析　(1)为了获得既能与长春碱结合，又能与肿瘤细胞结合的抗体，需要将单克隆杂交瘤细胞和经长春碱免疫后的B淋巴细胞进行融合获得杂交—杂交瘤细胞。(2)为选出能产生专一抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞的稀释液滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中有一个细胞，然后进行克隆化培养和抗体检测。(4)体外培养单克隆杂交—杂交瘤细胞，由于营养物质缺乏、有害代谢物的积累等因素，分裂受阻，需进行传代培养。(5)O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。(6)双特异性单克隆抗体能将药物定向带到肿瘤细胞所在位置，在原位置杀死肿瘤细胞，对人体的副作用更小，这是利用单克隆抗体治疗疾病，体现的是双特异性单克隆抗体在治疗疾病(运载药物和靶向治疗疾病)方面的用途。
题点　单克隆抗体的制备
22．(14分)我国研究人员利用去甲基化酶(Kdm4d)的mRNA，经过体细胞克隆技术克隆出了猕猴“中中”和“华华”，该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴为动物模型的时代。如图是体细胞克隆猴的技术流程，请据图回答问题：
(1)获得克隆猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是__________，
恢复其全能性较难。
(2)图中步骤①是克隆猴的技术难点之一，需要将卵母细胞培养到________后进行去核操作，而后将供体细胞注入，用物理或化学方法激活________，使其完成细胞分裂和发育进程。一般利用未受精的去核卵母细胞作为受体细胞，而不用精子，其原因是_________________
________________________(答出2点)。
(3)体细胞克隆猴的另外一个技术难点是猴的体细胞克隆胚胎发育差。科学家发现，胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关。由此推测，图中Kdm4d mRNA翻译产生的酶的作用是________________________________________________________。
(4)图中克隆猴的核遗传物质来自__________________。体细胞克隆可以得到大量遗传背景相似或相同的实验动物，这样的实验动物用于医学研究的好处是_______________________
____________________________________________________________________________。
答案　(1)体细胞分化程度高　(2)MⅡ期　重构胚　卵母细胞中含有的细胞质成分更能促进细胞核全能性的表达；卵母细胞体积大，易操作(3)催化组蛋白的去甲基化　(4)猕猴胚胎成纤维细胞　有利于解决动物遗传背景差异大造成的实验可重复性差的问题；可使实验组和对照组的比较更具有说服力等(合理即可)
解析　(3)由于胚胎发育障碍与克隆胚胎基因组上大量组蛋白的甲基化密切相关，为了使胚胎顺利发育，需要对组蛋白进行去甲基化操作，因此可推知图中Kdm4d mRNA翻译产生的酶的作用是催化组蛋白去甲基化。(4)克隆猴的核遗传物质来自核供体，即猕猴胚胎成纤维细胞。体细胞克隆可以得到大量遗传背景相似或相同的实验动物，这样的实验动物用于医学研究的好处是有利于解决动物遗传背景差异大造成的实验可重复性差的问题；可使实验组和对照组的比较更具有说服力等。
题点　体细胞核移植技术的应用前景
23．(每空1分，共13分)和牛是世界公认的高档肉牛品种，其体型较小，肉质鲜嫩，营养丰富。我国科研人员利用胚胎移植技术，按如图所示流程操作，成功地批量培育了和牛这一优良品种。请回答下列问题：
(1)用______________激素处理，可使供体母牛超数排卵，过程①中产生的精子需要进行______处理后才具有与卵细胞受精的能力。
(2)试管牛的培育需要的工程技术有__________________、__________________和胚胎移植等。
(3)移植的胚胎处于______期，移入的甲胚胎能在代孕雌牛子宫中存活的生理基础是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________；
为培育子代雌性小牛，胚胎移植前要进行性别鉴定，宜取图中[　　]__________细胞做DNA分析。
(4)胚胎移植的实质是________________________________________________________
___________________________________________________________________________。
(5)为提高胚胎利用率，尽快获得数量较多的子代和牛，图中甲环节是对牛胚胎所做的处理，使用的技术称为____________，最终目的是_______________________________________
________________________________________________________________________；这一过程中，要特别注意
将内细胞团______分割，其原因是_______________________________________________
______________________________________________________________________________
___________________________________________________________________________。
答案　(1)外源促性腺　获能　(2)体外受精　早期胚胎培养　(3)囊胚　受体雌牛子宫对移入的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应　乙　滋养层　(4)早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移　(5)胚胎分割　产生多个基因型相同的后代　均等　若分割不均匀，将影响分割后的胚胎恢复和发育，如含内细胞团少的部分发育不良或不发育
解析　(1)用外源促性腺激素处理雌牛后，可使供体母牛超数排卵，图中过程①表示精子的采集，采集的精子往往需要经过获能处理后才具有与卵细胞受精的能力。 (3)题图中移植的胚胎处于囊胚期；移入的胚胎能在受体雌牛子宫中存活，其生理基础是代孕雌牛子宫对移入的外来胚胎基本不会发生免疫排斥反应；另外，为培育雌性奶牛，胚胎移植前要进行性别鉴定，应取早期胚胎的[乙]滋养层细胞做DNA分析。(5)为提高胚胎利用效率，尽快获得数量较多的子代和牛，应对牛胚胎进行胚胎分割处理，此操作的最终目的是获得多个基因型相同的后代。该处理过程需要特别注意的是要将内细胞团均等分割，否则将影响分割后胚胎的恢复和发育，比如含内细胞团少的部分发育不良或不发育。
题点　胚胎分割的综合考查

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