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盐池中学 2025-2026 学年度第二学期期中考试
高二生物试卷
5
.航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频，下列相关叙述错误的是（
）
A.培养心肌细胞时需要为其提供充足的营养和稳定的环境
B.培养心肌细胞时，应定期更换培养液，以便清除代谢物
C.心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂不断增殖
总分 100 分 答题时间 75 分钟
一、选择题（共 20 小题，每题 3 分，共 60 分）
D.传代培养时，悬浮培养的心肌细胞可直接用离心法收集
1
.微生物的纯培养既需要适宜的培养基，又要防止杂菌污染。下列相关叙述正确的是（
）
6
.为探究矮牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力，某研究小组的实验过程如图所示。下列叙述错误的
A.培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利
B.消毒和灭菌的杀菌程度存在差异
是（
）
C.微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物
D.培养微生物的培养基在配制时应在灭菌后再调节 PH
2
.毛豆腐是徽州地区的特色美食，其发酵菌种主要是毛霉(异养需氧型)。毛豆腐制作方法是先将切好的豆腐
块平整放在竹条上，每块之间留有间隙，适宜条件下放置 3 至 5 天，当豆腐表面长出一层均匀细密的绒毛，
即可煎炸食用。下列叙述错误的是（
A.图中④⑤过程中使用的培养基中均需要加入琼脂
）
B.过程④需提高细胞分裂素的比例以促进芽的分化
A.豆腐为毛霉生长提供了水、碳源、氮源和无机盐等营养物质
B.毛霉产生的蛋白酶，使蛋白质分解而易于消化吸收
C.为使毛霉发酵充分，须提供适宜的温度、湿度、无菌等条件
D.制作时每块豆腐之间留有间隙有利于毛霉菌丝的生长
C.悬浮原生质体时需要用到高渗溶液，以维持原生质体的正常形态
D.诱导矮牵牛愈伤组织生芽或生根的过程中发生了基因的选择性表达
7
.研究小组利用植物体细胞杂交技术培育三倍体无籽柑橘，过程如图所示。下列有关叙述错误的是（
）
3
.宁夏固原西吉县被称为“中国马铃薯之乡”，洋芋擦擦、土豆粉条等食品深受人们喜爱。但在种植过程中
易受病毒感染，导致产量低、品质差。利用马铃薯脱毒苗通过组织培养技术能生产出无病毒、健康、高产
的马铃薯植株。下列叙述正确的是（
）
A.马铃薯分生区含病毒极少，从此处取材易获得脱毒苗
B.一般采用高压蒸汽对培养基、外植体及镊子等进行灭菌处理
C.诱导形成愈伤组织的过程中要提供光照和植物激素
D.植物组织培养技术不同阶段使用的培养基种类相同
A.①过程需用胰蛋白酶处理以获得原生质体
B.②过程应在等渗溶液中诱导原生质体融合
C.一般可用适量的聚乙二醇（PEG）促进原生质体融合
D.植株 C 的同源染色体联会紊乱导致其无籽
4
.动物细胞培养技术是动物细胞工程的基础技术，悬浮培养的动物细胞后期分裂受阻，其主要原因包括
8
.科研人员利用 iPS 细胞（诱导多能干细胞）与心肌细胞融合形成杂交细胞，研究其生物学特性，为心肌梗
（
①
）
死后的细胞移植治疗提供一种新思路。下列叙述错误的是（
A.进行心肌细胞培养时，可用胰蛋白酶处理心肌组织
B.可用 PEG 诱导细胞融合，并用特定的选择培养基进行筛选
）
接触抑制 ②细胞贴壁 ③营养物质消耗 ④有毒代谢产物积累
A.①和②
B.③和④
C.①和③
D.②和④
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C.杂交细胞既有 iPS 细胞的增殖能力，又有心肌细胞的特点
EcoRI
XbaI 和 SacI ②SacI 和 EcoRI ③XbaI 和 HindIII ④SmaI 和 SacI ⑤HindIII 和 EcoRI ⑥XbaI 和 BclI
A.③⑤ B.①③⑤ C.②③⑤⑥ D.①②③⑤⑥
2.蛛丝有超强韧性，其主要成分蛛丝蛋白是一种特殊的纤维蛋白，具有独特的结构与性质。科学家将蛛丝
蛋白基因转入羊的乳腺中以生产蛛丝蛋白，下图是蛛丝蛋白基因的 DNA 片段。在基因工程中可通过 PCR
5'-A↓AATTT-3'
BclI
5'-G↓AATTC-3'
D.培养基中除含有细胞所需的各种营养成分外，还需添加抗生素和琼脂
①
9
.下表列举了一些限制酶的识别序列和切割位点。下列有关叙述正确的是（
）
限制酶
BamHⅠ
'-G↓
GATCC-3'
EcoRⅠ
SmaⅠ
XmaⅠ
1
5
5-G↓
5'-CCC↓
5'-C↓
识别序列
技术和琼脂糖凝胶电泳技术检测目的基因是否导入受体细胞。下列说法错误的是（
）
AATTC-3'
GGG-3'
CCGGG-3'
A.限制酶的识别序列都是由 6 个脱氧核苷酸组成的
B.若某 DNA 片段能被 SmaⅠ切割，则其也能被 XmaⅠ切割
C.BamHⅠ切割产生的 DNA 片段能与 EcoRⅠ切割的片段连接
D.XmaⅠ切割产生的 DNA 片段的黏性末端是 5'-GGCCC-3'
A.用 PCR 技术扩增图中的蛛丝蛋白基因，可选择图中的引物①和④
B.科学家将蛛丝蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起
C.在凝胶中 DNA 分子的迁移速率不只与 DNA 分子的大小有关
1
0.下列关于“DNA 的粗提取与鉴定”实验叙述，正确的是（
）
A.将猪的红细胞置于清水中，红细胞涨破后 DNA 会释放出来
B.在研磨液中加入等体积的预冷的酒精析出的丝状物即为粗提取的 DNA
C.将白色丝状物溶于 2 mol/L 的 NaCl 溶液中，离心后弃去上清液
D.提取到的丝状物直接加入二苯胺试剂中，沸水浴加热后变蓝
D.检测蛛丝蛋白基因在受体细胞中是否转录出 mRNA，可用 PCR 等技术
1
3.研究人员用图 1 中质粒和图 2 中含目的基因的片段构建重组质粒（图中标注了相关限制酶切割位点），
将重组质粒导入大肠杆菌后进行筛选及 PCR 鉴定。下列叙述正确的是（
）
11.利用下图质粒和目的基因构建基因表达载体，为高效连接和筛选，结合表格中质粒上限制酶识别位点，
推测目的基因上游和下游含有的限制酶识别位点组合可以为（
）
A.构建重组质粒的过程应选用 BamHⅠ和 HindⅢ两种限制酶
B.使用 DNA 聚合酶将酶切后的质粒和目的基因片段进行重组
C.利用 PCR 鉴定含目的基因的大肠杆菌时应选用引物乙和引物丙
D.含有重组质粒的大肠杆菌不能在添加氨苄青霉素的培养基上生存
限制酶
XbaI
识别序列和切割位点
5'-T↓TCGAG-3'
5'-CCC↓GGG-3'
限制酶
SacI
识别序列和切割位点
5'-C↓TCGAG-3'
5'-A↓AGCTT-3'
SmaI
HindIII
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1
4.生物工程应用广泛，成果丰硕，下列对应工程技术应用正确的是（
）
B.倒平板时应将打开的培养皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
A.利用乳腺反应器生产药物，属于动物细胞工程
B.制造一种能降解石油的“超级细菌”属于发酵工程
C.利用苏云金芽孢杆菌制成生物农药属于基因工程
D.人工利用大肠杆菌产牛胰岛素属于蛋白质工程
C.培养基中 KH PO 等的作用之一是作为缓冲剂保持 pH 稳定
2
4
D.该实验已经形成了相互对照，不需要保留若干个不加入糖类，但加入等量无菌水的平板，待平板吸收干
燥后倒置培养作为对照
18.珍稀中草药蛇足石杉的有效成分为石杉碱甲，但含量较低。研究人员发现共生真菌可与植物细胞共用酶
系统，将蛇足石杉细胞与真菌进行共生培养可促进石杉碱甲的生成。图甲、图乙分别表示共生培养过程中
1
5.用限制酶 EcoRⅤ单独切割某普通质粒，可产生 14kb（1kb 即 1000 个碱基对）的长链，而同时用限制酶
EcoRⅤ、MboⅠ联合切割该质粒，可得到三种长度的 DNA 片段，见下图（其中*表示 EcoRⅤ限制酶切割
蛇足石杉细胞数量及石杉碱甲含量随时间的变化。下列叙述正确的是（
）
后的一个黏性末端）。
若用 MboⅠ限制酶单独切割该普通质粒，则产生的 DNA 片段的长度为（
A.2.5 和 11.5 B.14 C.5.5 和 8.5 D.6 和 8
6.水蛭素是一种蛋白质，可用于预防和治疗血栓。研究人员发现用赖氨酸替换水蛭素第 47 位的天冬酰胺
可以提高它的抗凝血活性。下列叙述正确的是（
）
A.利用植物细胞培养生产石杉碱甲需将外植体培育到完整植物体阶段
1
B.石杉碱甲属于次生代谢产物，一般认为次生代谢产物不是植物基本的生命活动所必需的
C.图甲实验结果可以确定第 4 天为传代培养和收集代谢物的最佳时间
）
A.该项替换研究中，目前可行的直接操作对象是蛋白质
B.该项替换研究中，改造前后水蛭素的空间结构未发生改变
C.该项替换研究的思路与按照中心法则合成蛋白质的思路一致
D.改造的水蛭素基因导入微生物后可利用发酵工程生产水蛭素
D.图乙实验结果证明共生真菌利用了蛇足石杉细胞的酶系统
19.如图是某科研人员制备新冠病毒（SARS-CoV-2）单克隆抗体的相关过程。相关叙述正确的是（
）
1
7.为测定某种大肠杆菌对糖类的需求情况，某兴趣小组配制了如下培养基：
成分
NaCl
1
KH2PO4
0.5
K2HPO4
0.5
（NH4）2SO4 MgSO 7H O
琼脂
4
2
质量（g）
2
0.2
20
同时配制质量分数为 10%的葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖溶液。实验操作流程如下：将大肠杆菌悬液与熔
化并冷却至 50℃的固体培养基混匀，倒平板；通过无菌操作分别向平板中加入蘸有不同糖类的无菌滤纸片，
待平板吸收干燥后倒置培养，观察大肠杆菌菌落的生长情况。下列叙述正确的是（
）
A.已免疫的小鼠脾脏中，每个脾 B 淋巴细胞可产生多种抗体，所以需要进行细胞筛选
A.上表中的培养基属于固体培养基且不含碳源，说明大肠杆菌是自养型微生物
B.过程③培养后的细胞均能产生抗新冠的单克隆抗体
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C.克隆化培养过程中杂交瘤细胞会出现接触抑制的现象
（5）为研究甲、乙、丙、丁四种酵母菌酿制杜康酒的效果，研究人员进行了有关实验，结果如图所示，甲、
乙、丙、丁四种酵母菌酿制杜康酒效果最差的是_____。6～7d，丁组酒精度不再上升的原因有_____（答出
一点）。
D.细胞筛选和细胞融合时所用的培养液在成分上有差异
2
0. 6–磷酸葡萄糖脱氢酶（G-6PD）有 F 和 S 两种类型，分别由一对等位基因 XF 和 XS 编码。基因型为
XFXS 的女性体细胞中的两个 X 染色体，有一个随机失活，且这个细胞的后代相应的 X 染色体均会发生同
样的变化。将基因型为 XFXS 的女性皮肤组织用胰蛋白酶处理后先进行细胞的原代培养，再对不同的单细
胞分别进行单克隆培养。分别对原代培养和单克隆培养的细胞进行 G-6PD 蛋白电泳检测，结果如下图所示。
有关叙述错误的是（
）
2
2.（除特殊标注外，每空一分，共 9 分）下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。
A.原代培养的细胞中都含 XF 基因和 XS 基因
B.单克隆培养的细胞 1、2、4、5、8、9 与 3、6、7 所含基因不同
C.用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理皮肤组织可使其分散成单个细胞
D.原代培养细胞电泳图有 2 个条带是因为同时检测了多个细胞
二、非选择题（共 40 分）
(1)___________技术是单克隆抗体技术的基础。其原理为___________。
2
1.（除特殊标注外，每空一分，共 12 分）据史书记载，杜康是春秋时用粮食酿酒的鼻祖，杜康酒是中国
(2)根据培养基的用途分类，图中 HAT 培养基属于___________培养基。经过___________次筛选可以选育出
高特异性抗体的细胞。
历史名酒，有“贡酒”“仙酒”之誉。某同学为了解酿酒酵母菌的特性，进行了一些研究。请回答下列问题：
（
1）粮食酿酒是酵母菌在_____条件下，利用葡萄糖产生酒精的过程。
(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是 ___________________（2 分）。
(4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用___________。
(5)体细胞核移植技术是克隆的核心技术。从伦理角度分析，我国禁止___________但允许___________。
（2）为确定发酵初期发酵液中酵母菌的数量，可采用显微镜计数法，此时应该使用_____（填写“血细胞计
数板”或“细菌计数板”）进行计数。也可以使用稀释涂布平板法进行计数，用该方法统计的数据往往会比实
际值_____（填偏小或偏大），原因是_____。（2 分）
（
3）酿酒过程中，容器密封不严，温度略高会导致酒变酸，在变酸的酒表面观察到的菌膜形成的原因是_____；
这种菌在氧气充足，缺少糖源时，可直接将_____。
4）发酵工程的产品包括微生物的代谢物、酶及菌体本身，发酵过程中__________是发酵工程的中心环节。
发酵工程中的啤酒生产包括_____和_____两个阶段。
2
3.（除特殊标注外，每空一分，共 7 分）生长激素可用于治疗垂体性侏儒症，但人体内含量微少，提取困
（
难。利用大肠杆菌通过基因工程生产人生长激素的过程如图所示。回答下列问题：
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Ⅱ
.黑腐皮壳菌（一种真菌）感染苹果植株可引发腐烂病。现对该菌进行分离培养和应用的研究，下表是分
离培养时所用的培养基配方。请分析回答问题：
物质
含量
马铃薯
葡萄糖
自来水
氯霉素
琼脂
200g
20g
1000mL
0.3g
20g
(1)过程③可以利用______技术大量扩增目的基因，该反应需要在一定的缓冲液中进行，需要 DNA 模板、4
种脱氧核苷酸、2 种引物和______。
(4)上表培养基配方中，氯霉素的作用是________。
(5)为证明培养基灭菌是否合格，可进行如下操作：________（2 分）。
(6)为检测某苹果植株黑腐皮壳菌的感染程度，需对该植株患病组织进行病菌计数，若采用血细胞计数板计
数，则统计结果比实际值______；如何改进：________。
(2)为了使基因 A 在质粒中正确连接，需要在基因 A 的两端分别添加限制酶的酶切位点，需在图 2 的左、右
两侧分别添加______________（2 分）（填限制酶名称）的识别序列。
(3)步骤⑤在导入前，一般先用钙离子处理大肠杆菌，使之处于______________。
(4)为检测目的基因是否成功导入，可采用________技术进行分子水平检测；若要检测目的基因是否成功表
达，需从工程菌株中提取总蛋白，采用________技术进行检测。
(7)若要对该菌进行扩大培养，研究者应将该菌接种在______培养基中。
(8)为检测某苹果植株黑腐皮壳菌感染程度，需对该株患病组织进行病菌计数研究，则应将提取的菌液采用
______法进行接种。
2
4.（除特殊标注外，每空一分，共 12 分）Ⅰ.中国科学院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功
(9)为研究苹果黑腐皮壳菌数量增长规律，研究者将该菌在液体培养基和固体培养基中培养，获得下图所示
的生长速率曲线图。
培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实
验流程如图所示。请回答下列问题：
1
7h 后，该菌生长速率偏低的原因可能是_________________________。
(1)用________对雌性小鼠进行超数排卵处理可得到大量卵母细胞。
(2)体外培养动物细胞时，除需要满足无菌、无毒的环境及适宜的营养物质、温度等条件外，还需要满足的
气体条件是________。
(3)为了获得更多甲的后代，在得到的重构胚发育到_________时，对其进行分割；在分割囊胚阶段的胚胎时，
应注意_________，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育。
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一、选择题
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
B C A B C C A D B B
11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
C A D C D D C B D B
二、非选择题
21.（除特殊标注外，每空一分，共 12 分）
（1）无氧
（2）①. 血细胞计数板 ②. 偏小 ③. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到
的只是一个菌落（2 分）
（3）①. 醋酸菌在液面大量繁殖 ②. 乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸
（4）①. 发酵罐中发酵 ②. 主发酵 ③. 后发酵
（5）①. 丙 ②. 酒精度较高，对细胞有毒害作用或杜康酒中的葡萄糖已经耗尽，无法提
供能源物质（合理即可）
22.（除特殊标注外，每空一分，共 9 分）
(1) 动物细胞培养 细胞增殖
(2)选择 2/二/两
(3)特异性强、灵敏度高、可大量制备（2 分）
(4)灭活的病毒
(5)生殖性克隆 治疗性克隆
23.（除特殊标注外，每空一分，共 7 分）
(1) PCR 耐高温的 DNA 聚合酶
(2)AluⅠ、HindⅡ（2 分）
(3)一种能吸收周围环境中 DNA 分子的生理状态或感受态均可得分
(4) PCR（DNA 分子杂交） 抗原——抗体杂交
24.（除特殊标注外，每空一分，共 12 分）
(1)促性腺激素
(2)95%空气和 5%CO2 的混合气体
(3)桑葚胚或囊胚期 将内细胞团均等分割
(4)抑制细菌等杂菌的生长
(5)将接种的培养基与未接种的培养基一同放入培养箱中培养，观察未接种培养基中是否有
杂菌生长和接种的培养基中菌落的生长情况（2 分）
(6) 高/大 统计前对细胞进行染色，只统计视野中未被染色的细胞
(7)液体
(8)稀释涂布平板法
(9)培养基中营养成分不足，有害有毒物质积累、pH 改变

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