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安岳中学高 2024 级第四学期半期考试 转速（r/min） 55 65 75 85
相对生长速率 0.21 0.25 0.26 0.25
生 物 试 卷
细胞干重（g/L） 7.5 9.7 11.4 9.5
考试时间：75 分钟；满分：100 分
一、单选题（每小题 3 分，共计 45 分） 黄酮产量（g/L） 0.2 0.27 0.32 0.25
1．食醋和黄酒是我国传统的日常调味品，均通过发酵技术生产。下列叙述错误的是（ ） A．黄酮产量与细胞干重呈正相关
A．醋酸的发酵是好氧发酵，而酒精的发酵是厌氧发酵 B．黄酮是水母雪莲细胞生存和生长所必需的
C．氧气供给对于水母雪莲细胞生长、分裂和代谢是必需的
B．以谷物为原料酿造食醋和黄酒时，伴有 pH下降 D．转速为 75r/min时既利于细胞分裂，又利于黄酮的积累
C．食醋和黄酒发酵过程中，微生物繁殖越快发酵产物产率越高 5．如图为制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是（ ）
D．使用天然混合菌种发酵往往会造成传统发酵食品的品质不一
2．啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其工业化生产流程如图所示。发酵过程
分为主发酵和后发酵两个阶段。下列叙述正确的是（ ）
A．酵母菌将麦芽中的淀粉直接转化为酒精和 CO2
B．焙烤是为了加热杀死种子胚，并使淀粉酶失活
C．蒸煮能终止酶的进一步作用，并对糖浆灭菌
D．糖的分解和酒精的生成都在后发酵阶段完成 A．步骤①给小鼠注射 IL-6后，应从脾中分离筛选 T淋巴细胞
3．尿素容易保存，是目前使用量较大的一种化学氮肥，尿素分子并不能直接被农作物吸收， B．步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细胞悬液
只有被尿素分解菌分解成氨之后，才能被植物利用。如图是从土壤中分离、计数尿素分 C．步骤③加入灭活病毒或 PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性
D．步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞
解菌的过程，有关分析正确的是（ ）
6．细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域得到了广泛应用。下列关于动植物细胞工
程的叙述，正确的是（ ）
A．用离心法诱导植物细胞融合后，在液体培养基中加入激素，诱导愈伤组织形成
B．采用胚胎分割技术克隆动物常选用桑葚胚或囊胚
C．动物细胞在悬浮培养出现接触抑制后，需分瓶后进行传代培养
D．利用组织培养技术培养红豆杉细胞，可获得有药用价值的初生代谢物紫杉醇
7．下图表示某哺乳动物胚胎的早期发育过程，a～c表示相关过程，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ表示相关阶
段。下列相关叙述正确的是（ ）
A．若②过程稀释了 10倍，则乙锥形瓶里盛有 9 mL无菌水
B．③的接种方法可用平板划线法或稀释涂布平板法
C．a、b、c培养基可以用牛肉膏蛋白胨培养基
D．若①②过程稀释了 10倍，a、b、c培养基上的菌落数依次为 57、58、56个，则 10
g土样中的尿素分解菌数量为 5.7×109个 A．过程 a表示卵裂，该时期细胞数量和体积不断增加，有机物的含量减少
4．水母雪莲是我国的一种名贵药材，主要活性成分为次生代谢产物黄酮。水母雪莲生长缓 B．Ⅰ阶段形成的致密细胞团，形似桑葚，称为桑葚胚
慢，长期的掠夺性采挖导致该药材资源严重匮乏。研究人员开展了悬浮培养水母雪莲细 C．过程 b细胞逐渐分化，Ⅱ阶段出现内胚层、中胚层和外胚层等结构
胞合成黄酮的工程技术研究，结果如表所示。下列叙述错误的是（ ） D．Ⅲ阶段，随着胚胎逐步扩大，透明带破裂，胚胎从其中伸展出来，该过程叫做孵化
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8．梅花鹿和马鹿杂交后代生命力强、茸质好，但自然杂交很难完成，人工授精能解决此难 12．下列关于“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的有（ ）
题。胚胎工程技术的应用，可提高繁殖率，增加鹿场经济效益。下列相关叙述合理的是 ①羊的成熟红细胞可作为提取 DNA的材料
（ ） ②预冷的酒精溶液能抑制核酸水解酶活性，防止 DNA水解
A．采集的精液无需固定、稀释，即可用血细胞计数板检测精子密度 ③研磨液在 4℃冰箱中放置几分钟后，应充分摇匀再倒入烧杯中
B．人工授精时，采集的精液经获能处理后才能输入雌性生殖道 ④实验中如果将研磨液更换为蒸馏水，DNA提取的效率会降低
C．超数排卵处理时，常用含促性腺激素的促排卵剂 ⑤将溶解的 DNA粗提物与二苯胺试剂反应，可检测溶液中是否含有蛋白质杂质
D．母体子宫对胚胎的免疫耐受性低下是胚胎移植的生理学基础 A．一项 B．二项 C．三项 D．四项
9．我国科学家体外诱导食蟹猴胚胎干细胞，形成了类似囊胚的结构（类囊胚），为研究灵长 13．兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术
类胚胎发育机制提供了实验体系（如图）。相关叙述错误的是（ ） 获得脱毒苗，操作流程如下图。下列叙述正确的是（ ）
A．①为脱分化过程，1号培养基中的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块
A．实验证实食蟹猴胚胎干细胞具有分化潜能 B．②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组
B．实验过程中使用的培养基含有糖类 C．3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于 1
C．类囊胚的获得利用了核移植技术 D．百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体
D．可借助胚胎移植技术研究类囊胚的后续发育 14．为研究治疗性克隆技术能否用于帕金森综合征的治疗，科研人员利用人帕金森综合征模
10．某实验小组利用下图所示质粒和目的基因来构建基因表达载体，将目的基因导入大肠杆 型鼠进行如下图实验，下列相关叙述错误的是（ ）
菌细胞并表达。下列叙述正确的是（ ）
A．过程①得到的细胞，其线粒体 DNA来自供卵母体
B．过程②重组细胞培养依次经历了桑葚胚、原肠胚和囊胚时期
C．过程③的关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达
A．图中的质粒用酶 A切割后，会产生 2个游离的磷酸基团 D．过程④对受体小鼠无需注射免疫抑制剂以抑制其细胞免疫功能
B．在构建重组质粒时，可用酶 A和酶 C切割质粒和目的基因 15．如图为用转基因牛生产人血清白蛋白（药用蛋白）的过程，分析图中操作过程。下列叙
C．成功导入目的基因的大肠杆菌可在含四环素的培养基中生长 述错误的是（ ）
D．若用酶 B和酶 C切割，可以避免质粒的自身环化
11．利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如下图所示，下列叙述正确的是（ ）
A．过程①需使用 DNA聚合酶
B．过程②需使用解旋酶和 PCR获取目的基因 A．图中的受体细胞是乳腺细胞，所以药用蛋白基因可以在乳腺细胞中表达
C．过程③使用的感受态细胞可用 NaCl溶液制备 B．上述过程实现了跨物种的基因重组
D．过程④可利用 DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞 C．过程①通常采用的方法是显微注射法
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D．③需要筛选性染色体组成为 XX的胚胎进行移植 装置，如下图 1所示。图 2是发酵过程中培养液 pH可能的变化情况。回答下列问题：
二、填空题（共 5 小题，共计 55 分）
16．（14分）为使大豆获得抗除草剂性状，科研人员将抗除草剂基因导入大豆植株，获取转
基因大豆。限制酶 SmaⅠ、XmaⅠ、BglⅡ、NheⅠ的识别序列和切割位点分别为 CCC↓
GGG、C↓CCGGG、A↓GATCT、G↓CTAGC。请回答下列问题：
（2）图 1发酵罐中并不装满发酵液，而是留出约 1/3的空间，一方面是为了______，
另一方面是为了______。
（3）由果酒发酵转为果醋发酵时，有些方面需要做出调整，例如，需要______（填“升
高”或“降低”）发酵温度。请写出该过程的反应式：______。
（4）图 2中，能表示整个发酵过程中 pH变化情况的是曲线______。
18．（11分）阅读下列关于能源、环境和农业生产方面的材料，回答相关问题：
材料 I：随着能源和环境问题日益严峻，利用纤维素酶降解秸秆生产燃料乙醇，对缓解
全球能源危机有着重大意义。某兴趣小组通过实验分离出能分解纤维素的微生物。
（1）为了筛选出分解纤维素的微生物，实验小组尝试从收割后的小麦田里取样，配制
（1）获取和扩增抗除草剂基因的常用技术是________，该技术需要用到引物，引物的 以纤维素为唯一碳源的________（填“选择”或“鉴别”）培养基。配制好的培养基需________
作用是______________。启动子的作用是________。过程①称为________。 灭菌。
（2）将抗除草剂基因导入大豆细胞中的方法是________________。若抗除草剂基因成 （2）若要对培养的细菌计数，则需要用________法进行接种，当样品的稀释度足够高
功转入植物细胞中，可检测到________（填“Tet R”“Amp R”或“Tet R和 Amp R”）的表达产物。 时，培养一段时间后，可根据________初步鉴定并挑取产纤维素酶菌株。
T—DNA的作用是将抗除草剂基因导入大豆细胞并____________。 材料Ⅱ：尿素是一种重要的农业氮肥，但尿素并不能直接被农作物吸收，只有当土壤中
（3）若获得的抗除草剂基因如图所示，质粒需要用限制酶________切开，才能与抗除 的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。某课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细
草剂基因高效连接。 菌并进行计数的过程如图所示。
（4）为防止抗除草剂基因污染，从提高转基因植物安全性的角度分析，可将目的基因
导入大豆细胞中的________（多选）。
A．细胞核 B．叶绿体 C．线粒体 D．核糖体
17．（7分）请分析回答下列问题：
Ⅰ、豆豉是以黄豆或黑豆为原料，经各种微生物发酵形成的具有特殊色、香、味的发酵
食品。某食品研发小组以黄豆为主要原料研制豆豉酱，工艺设计流程如下。回答下列问题：
（3）图中培养基应以________为唯一氮源。该琼脂培养基倒平板时需等待培养基冷却
后倒过来放置，原因是________。
（4）某同学选取 5个培养皿进行实验，其中 1个不进行涂布或者用无菌水涂布平板，
（1）毛霉可将黄豆种子中的蛋白质分解为______。 目的是________；接种其余 4个培养皿，一段时间后 3个培养皿中分别长出了 54、46、50
Ⅱ、某研究小组用玻璃发酵罐、充氧泵、回旋式单向阀等组装一种果酒、果醋两用发酵 个菌落，根据实验结果，该 1g土壤样本中约有分解尿素的细菌________个。培养基表面生
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长的是单菌落，运用这种方法统计的结果往往比实际值偏小的原因是________。 （1）X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。
19．（12分）Ⅰ．下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的 从含 X-gal的培养基中挑选目的菌时，应挑选的是_______。
过程。 Ⅱ．科学家采用基因工程技术将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组中，获得的转基因牛分泌
的乳汁中乳糖含量大大降低，用到的质粒和目的基因的部分结构如图 1和图 2所示，不同限
制酶的识别序列及切割位点如表所示。请回答下列问题：
限制酶 识别序列及切割位点
HindⅢ 5 -A↓AGCTT-3
Sma I 5 -CCC↓GGG-3
Kpn I 5 -GGTAC↓C-3
（1）步骤①常用含有____________酶的____________溶液处理离体细胞，既能获得 2 Sal I 5 -G↓TCGAC-3
种植物细胞的原生质体，又能避免原生质体因过度吸水而破裂。
（2）步骤③细胞融合完成的标志是____________，获得的融合细胞至少有____________ Nhe I
5 -G↓CTAGC-3
种。若换用矮牵牛的叶肉细胞和粉蓝烟草的____________细胞重做该实验，则更易筛选出杂
种细胞。
（3）“矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含____________条染色体，属于
____________倍体植株。
Ⅱ．银杏的次生代谢产物银杏黄酮、银杏内酯等具有良好的药用效果，一般从叶片中取
得，但传统栽植方法周期长、成本高、受环境影响大，无法很好满足市场需求。因而利用组
织培养技术，从愈伤组织中提取，具有一定的研究意义与应用前景。
（4）将愈伤组织转入到____________培养基中进行扩大培养，以提取次生代谢物。该
过程与植物组织培养相比的优点有____________。
A细胞与培养基的结合更加充分 B．受培养基中成分差异的影响较小
C．对环境不敏感 D．对营养物质的吸收更容易
20．（11分）乳糖酶缺乏症患者体内乳糖酶（LCT）的分泌量较少，导致患者无法完全消化
母乳或牛乳中的乳糖，从而引起非感染性腹泻。工业化生产无乳糖奶粉时，需用乳糖酶将奶
中的乳糖除去。
Ⅰ.为了提高乳糖酶的产量，科研人员从牧民的奶酪（一种近似固体的发酵牛奶制品）
中分离纯化出了能高效生产乳糖酶的酵母菌，下图为流程示意图。请回答下列问题：
（2）为了将图 2中的目的基因准确插入图 1质粒中，需要在肠乳糖酶基因的两端分别
添加限制酶_______的识别序列。为保证肠乳糖酶基因的正确复制和与质粒的正确连接，需
要设计 PCR 引物，请写出与β链结合的引物的序列：________（写 10个碱基）。
（3）在构建基因表达载体时，肠乳糖酶基因应插入_______之间。将含有肠乳糖酶基因
注：X-gal为乳糖酶的显色底物，乳糖酶可以将无色的 X-gal分解成半乳糖和蓝色的溴 的表达载体导入受体细胞的常用方法是_______。
靛蓝。 （4）利用胚胎工程技术将导入目的基因的受体细胞培育成个体，采用分子杂交技术检
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测肠乳糖酶基因在转基因奶牛中是否转录出 mRNA 的大致思路为_______。
《生物》参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 C C D B C B B C C D
题号 11 12 13 14 15
答案 D C D B A
16．(共 14 分，除标注外每空 1 分）
(1) PCR技术 使 DNA聚合酶能够从引物的 3'端开始连接脱氧核苷酸（2分） RNA聚合酶
识别和结合的部位，驱动基因转录出 mRNA （2 分） 基因表达载体的构建（2 分）
(2) 农杆菌转化法 Tet R 整合到大豆细胞的染色体 DNA 上
(3)Xma Ⅰ和 BglⅡ（2 分）
(4)BC（2 分）
17．（共 7 分，除标注外每空 1 分）
(1)氨基酸和小分子肽
(2) 酵母菌在初期进行有氧呼吸而大量繁殖 防止发酵液溢出
(3) 升高 C2H5OH+O2 CH3COOH+H2O（2 分）
(4)②
18．（共 11 分，除标注外每空 1 分）
(1) 选择 高压蒸汽
(2) 稀释涂布平板 菌落的特征（或菌落的形状、大小、颜色等）
(3) 尿素 防止皿盖上的水珠滴落在培养基上，造成污染 / 避免培养基中的水分过快挥发(2 分）
(4) 检测培养基是否被污染 5×109 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一
个菌落（2 分）
19．（共 12 分，除标注外每空 1 分）
(1) 纤维素酶和果胶酶 （2 分） 等渗或略高渗（2 分）
(2) 融合细胞再生出细胞壁 3/三 根尖等非绿色组织
(3) 48 四
(4) 液体 AD（2 分）
20．（共 11 分，除标注外每空 2 分）
(1)直径最大的蓝色菌落 （1 分）
(2) KpnI、SmaI 5'-GGTACCATGC-3'
(3) 启动子和终止子 显微注射法
(4)用放射性同位素标记的肠乳糖酶基因片段作探针，与从转基因个体的乳腺细胞中提取的 mRNA杂交，
观察是否出现杂交带，若出现杂交带，则说明肠乳糖酶基因在转基因奶牛中转录出了 mRNA
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