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答案
选择题：CDBBC ADABD DDBDD D
非选择题：
17.(除标注外,每空 1分,共 10 分)
(1)固体 稀释涂布平板法 灼烧 少
(2)不能 微生物培养需要一定的碳源、氨源等营养物质,无效磷只能作为唯一的磷源,否则解磷菌无法正
常生长(合理即可,3 分) 富集(扩大)培养(获得更多的解磷菌)
(3)M-3-01
18.（14 分，除标注外，其余每空 1分）
（1）茎尖（或芽尖） 75%酒精 30s 高压蒸汽灭菌锅\灭菌锅
（2）蔗糖 硝酸盐（或硝酸铵和硝酸钾） 一定浓度和配比的植物生长调节剂\植物激素 凝固剂
（3）脱分化 结构松散、细胞分裂旺盛 变异 传代
（4）产量高、培养过程更可控、生产周期更短、分离纯化更简单（2分，答出 2点即可）
19. (7 分)(1)用胰蛋白酶消化 离心
(2)受精能力
(3)垂体会产生或分泌促性腺激素
(4)第二极体
(5)变小 不明显
20.（10分，除标注外每空 1分）（1）卵母细胞的采集；精子的获取；受精
（2）①促性腺激素；让优良母畜能尽快进入下一个发情期（以提高优良种畜的繁殖效率）（2分）；
②胚胎分割；囊胚
（3）受体并不会改变供体胚胎的遗传特性； 雌性
21.（9 分）
(1)蛋白质
(2)③
(3)②
(4)标记基因
(5)筛选导入目的基因的大肠杆菌（2分） 5.7 （2 分）
(6)逆转录2025～2026 学年下学期期中试卷
高二生物
（考试时间：75 分钟 满分：100 分）
一、选择题（共 16小题，每题 3分，共 48分）
1 .某生物兴趣小组开展果酒和果醋制作实验。在制作过程中，下列操作及相关原理的叙述正确的是
（ ）
A.制作果酒时，葡萄汁要装满发酵瓶，以减少杂菌污染
B.果酒制作的菌种是酵母菌，它是一种兼性厌氧型细菌
C.当缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇转化为乙酸
D.果醋发酵时，发酵瓶需一直打开，以保证充足的氧气供应
2.微生物培养中的无菌技术是实验成功的关键，下列关于无菌操作的叙述，错误的是（ ）
A. 若培养皿盖和培养皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养基培养大肠杆菌
B. 接种时需要先用酒精擦拭双手，然后在酒精灯火焰附近进行操作
C. 对培养基进行高压蒸汽灭菌时，需要在 121℃的温度下维持 15~30 min
D. 微生物培养基中都需添加一定量的抗生素以防止杂菌污染
3.用稀释涂布平板法统计土壤样品中细菌数量，若稀释倍数为 10 ，涂布体积为 0.2mL，三个平板菌
落数分别为 180、200、220，则每克样品中细菌数约为（ ）
A. 1.0×10 个 B. 1.0×10 个 C. 1.0×10 个 D. 1.0×10 个
4. 辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。利用植株组织培养获得辣椒素的途径
如图所示，①②③④⑤代表过程。下列叙述正确的是（ ）
A．获得辣椒素的两条途径都反映了植物细胞的全能性
B．同一植株不同部位的细胞经过培养获得的植株基因型可能不同
C．②过程是再分化过程，培养基中必须加入适宜配比的天然植物激素
D．图中①→④→⑤过程发生分化
5. 植物甲抗旱、抗病性强，植物乙分蘖能力强、结实性好。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出
兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如图所示。下列叙述错误的是( ）
A.过程①中酶处理的时间差异，原因可能是两种亲本的细胞壁结构有差异
B.过程②中可采用电刺激、离心、PEG 等方法诱导原生质体融合
C.过程③杂种细胞的形成依赖细胞膜的流动性和植物细胞的全能性
D.过程④和⑤的培养基中均需要添加生长素类和细胞分裂素类物质
6 .某动物细胞培养过程中，细胞贴壁生长至接触抑制时，需分装培养，实验操作过程如图。下列叙述
错误的是（ ）
A．①加消化液的成分通常是胃蛋白酶液
B. ②加培养液的目的是促进细胞增殖
C．③分装时需调整到合适的细胞密度
D．整个过程需要在无菌、无毒条件下进行
7. 关于制备单克隆抗体的过程，下列叙述错误的是（ ）
A．为获得足量相应的 B细胞，可多次给小鼠注射特定抗原
B．细胞融合前，已免疫的脾细胞不需要经过原代培养扩大
C．用 PEG 诱导细胞融合后，可加入过量培养基终止融合
D．杂交瘤细胞在体外培养时，会贴培养瓶壁单层生长
8 .据英国《卫报》披露，纽卡斯尔大学研究人员不久前成功实现一项生殖医学技术，将患有线粒体疾
病妇女的受精卵中的细胞核移植到健康妇女捐献的去核卵子中，最终产下了健康的婴儿。下列叙述错
误的是（ ）
A．此项技术的基础是动物细胞培养
B．此项技术的原理与克隆羊“多莉”完全相同
C．健康妇女捐献的卵细胞的细胞质具有调控移入细胞核发育的作用
D．婴儿出生后具有患病夫妇以及捐献健康卵细胞的妇女三方的遗传特征
9 .下列关于图示模型的叙述正确的是（ ）
A.若 A和 B分别表示精子和卵子，则它们都需要获能处理才能融合
成 C
B.若 A和 B分别表示不同的植物细胞，则成功获得融合细胞 C的标
志是再生出细胞壁
C.若 D 表示单克隆抗体，则 A和 B可在小鼠体内融合成 C
D.若 C 表示杂交瘤细胞，则其具有 A和 B的所有特点
10.下列有关基因工程的说法，错误的是（ ）
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A.限制性核酸内切酶又称“分子手术刀”，主要来自原核生物
B.“分子运输车”是载体，最常用的载体是质粒
C.基因工程的核心原理是基因重组
D.DNA 连接酶是“分子缝合针”，连接 DNA 两条链中间的氢键
11.利用 PCR 技术从某种生物的基因组 DNA中获取目的基因。有关这一过程下列说法错误的是（ ）
A.有目的基因的 DNA 片段作为模板
B.目的基因的一段核苷酸序列已知,以便根据这一序列合成两种引物
C有足够的脱氧核苷酸作为原料
D.加入足够数量的 DNA 连接酶进行指数式扩增
12.下列关于目的基因导入受体细胞的描述，不正确的是（ ）
A．农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法
B．显微注射技术是转基因动物中采用最多的方法
C．大肠杆菌最常用的转化方法是用 Ca2+使细胞的生理状态发生改变
D．基因枪法导入植物体细胞的方法比较经济有效
13. 基因工程在农牧业、工业、环境、能源和医药卫生领域得到广泛的应用，下列关于基因工程应用
的叙述，错误的是（ ）
A.可利用转基因动物做器官移植供体
B.基因工程能定向改造生物性状，培育新物种
C.基因工程可用于环境检测和对被污染环境的净化
D.将胰岛素基因导入酵母菌中，通过发酵工程可批量生产胰岛素
14. 某二倍体动物种群有 100 个个体，其常染色体上某基因有 A1、A2、A3 三个等位基因。对这些个体
的基因 A1、A2、A3 进行 PCR 扩增，凝胶电泳及统计结果如图所示。该种群中 A3 的基因频率是( )
A．52% B．26% C．32% D．27%
15 .翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)是在翻译水平受到抑制的肿瘤相关蛋白，是一个高度保守且和细胞生长、
死亡等功能有关的蛋白。现从果蝇基因组 DNA 中扩增果蝇 dTCTP 基因，经限制酶 BamHⅠ和 EcoRⅠ双酶
切后，插入表达质粒 pGEX-4T-2 上构建基因表达载体，最终表达有活性的 dTCTP 融合蛋白。关于该基
因表达载体的构建，下列叙述错误的是( )
A．表达质粒 pGEX-4T-2 可以用限制酶 BamHⅠ和 EcoR Ⅰ进行双酶切
B．dTCTP 基因是该项研究中的目的基因
C．除了目的基因和标记基因外，该基因表达载体还必须有启动子和终止子
D．将 dTCTP 基因插入表达质粒 pGEX-4T-2 上时，需要用到 DNA 聚合酶
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16.关于生物技术的安全与伦理问题在我国相关法规明令禁止的是（ ）
A.试管动物的培育 B．转基因食品的生产
C．治疗性克隆的研究 D．生物武器的发展和生产
二、填空题（共 5小题，共 52分）
17.(10 分)土壤中大部分的磷难以被植物利用(无效磷),为筛选出能够将无效磷转化为植物易利用的磷
(速效磷)的微生物,科研人员进行了如图 1的实验,并分离出了两种解磷菌(B3-5-6、M-3-01)分别接种
于含有相同磷矿粉的培养液中,测定培养液中速效磷含量变化如图 2所示。回答下列问题:
(1) 按照物理性质划分,培养基①为 培养基,图 1中接种方法是 ,涂布器需要进行
灭菌,以保证实验过程中不会被污染;若用该接种方法对微生物进行计数,一般结果会比实际的活菌数
(填“多”或“少”)。
(2)若以无效磷作为培养基①中唯一的营养物质, (填“能”或“不能”)筛选出解磷菌,原因是
培养基②的作用是 。
（3）若想要在短时间内将土壤中的无效磷转化为有效磷,最好选用图2中解磷菌 对土壤进行处
理。
18. (14分)三七是我国传统名贵中药材，主要活性成分之一是皂苷，但三七自然繁殖率低栽培周期长。
某研究小组尝试利用植物组织培养技术繁育幼苗和生产皂苷，过程如图所示。回答下列问题:
(1) 欲获得脱病毒苗，应选择三七幼苗的 作为外植体。外植体需用 (填“50%酒精”、
“75%酒精”或“95%酒精”)溶液消毒 (填“30s”、“30min’或“30h”)，再用无菌水冲
洗。解剖刀、子、剪刀等实验器材放入 中灭菌。
(2)植物组培通常使用 MS培养基,该培养基的碳源主要是 ,氮源主要是 ,配制过程①
所用的培养基时，除了 MS培养基的基本成分外还需加入 调控代谢，加入琼脂作为 。
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(3)①是 过程，形成的愈伤组织具有 等特点，有利于获得生长迅速的悬浮细
胞系，但在培养过程中往往会发生 ，工业化细胞培养获得高产细胞株可通过多次 培
养来确定是否为稳定的高产细胞株。
(4)与途径③获得皂苷相比，途径④可能有 等优势(答出 2 点即可)。
19. (7 分)某同学欲开展小鼠的排卵、受精以及观察受精卵发育的实验，其基本过程如下。
(1)制备垂体细胞提取液：取小鼠的垂体，加入少量的培养液，剪碎， ，经处理制成垂体细胞
悬液。取垂体细胞悬液，稀释后制成某一浓度的垂体细胞悬液。将垂体细胞培养一段时间后，破碎，
，取上清液，经处理获得提取液。
(2)采集精子：将人工采集的精子置于培养液中，培养一段时间。此过程的目的 。
(3)采集卵细胞：给成年雌鼠注射垂体细胞提取液，一段时间后，采集卵子。注射垂体细胞提取液可促
进雌鼠排卵的原因是 。
(4)受精：将精子和卵细胞混合培养。精子入卵后，会使卵子完成减数第二次分裂，排出 ，形成
雌原核。
(5)观察受精卵的发育：受精卵开始卵裂，其中的细胞体积 ，细胞数量增加，胚胎总体积变化
。
20.（10 分）1890 年，W·希普成功实现了世界上第一例胚胎移植：将纯种安哥拉兔的两个胚胎移植
到一只比利时兔的输卵管内，结果生出两只纯种的安哥拉兔。从此，科学家对胚胎移植等技术进行一
系列研究并取得丰硕成果。回答下列问题：
（1）体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，还可以为胚胎移植提供可用的胚胎，体外受精主
要包括_____________、_____________、_____________等步骤。
（2）通过胚胎工程能加快优良种畜的繁殖速率，如：
①可使用_________让优良母畜进行超数排卵，体内受精后将早期胚胎移植到受体母畜子宫内发育，
目的是_________________。
②冲取优良种畜的早期胚胎，对其进行__________操作，以获得更多的胚胎，这一操作最晚可以在
胚胎发育到_____________时期进行。
（3）胚胎移植到受体子宫能正常发育成具有优良性状的子代个体，这说明______________对早期胚胎
进行转基因，制备乳腺生物反应器来获得蛋白质类药物，则要选择发育正常的__________（“雄性”
或“雌性”）胚胎移植到受体子宫，若制备膀胱生物反应器则无此要求。
21.（9分）天然β-淀粉酶大多耐热性差，不利于工业化应用。我国学者借助PCR改造β-淀粉酶基因，
并将改造的基因与 pLN23 质粒重组后导入大肠杆菌，最终获得耐高温的β-淀粉酶。回答下列问题：
(1)上述过程属于_____工程。
(2)PCR 中使用的聚合酶属于______(填写编号)。
①以 DNA 为模板的 RNA 聚合酶 ②以 RNA 为模板的 RNA 聚合酶
③以 DNA 为模板的 DNA 聚合酶 ④以 RNA 为模板的 DNA 聚合酶
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(3)某天然β-淀粉酶由 484 个氨基酸构成，研究发现，将该酶第 476 位天冬氨酸替换为天冬酰胺，耐
热性明显提升。在图1所示的β-淀粉酶基因改造方案中，含已替换碱基的引物是________(填写编号)。
(4) 为了使上述改造后的基因能在大肠杆菌中高效表达，由图 2所示的 pLN23 质粒构建得到基因表达
载体。除图示信息外，基因表达载体中还应该有目的基因(即改造后的基因)和______。
(5) 目基因(不含 EcoRⅠ酶切位点)全长为 1.5 kb，将其插入 BamHⅠ位点。用 EcoRⅠ酶切来自不同大
肠杆菌菌落的质粒DNA，经琼脂糖凝胶电泳确定DNA片段长度，这一操作的目的是______，正确连接的
基因表达载体被 EcoRⅠ酶切后长度为_____kb。
（6）采用PCR还能在分子水平上确定目的基因是否转录，根据中心法则，可通过________过程获得PCR
的模板。
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