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2025—2026 学年度第二学期桦南一中期中考试
生物学
一、选择题：本题共 15 小题，每小题 2 分，共 30 分。在每小题给出的四个选项 中，只有
一项符合题目要求的。
1．下列工具组合中，可用于构建基因表达载体的是（ ）
A．限制酶、DNA 聚合酶、质粒
B． 限制酶、DNA 连接酶、噬菌体
C．解旋酶、DNA 连接酶、动植物病毒
D．逆转录酶、限制酶、质粒
2．人参皂苷是人参的主要活性成分。科研人员分别诱导人参根与胡萝卜根产生愈 伤组织并
进行细胞融合，以提高人参皂苷的产率。下列叙述错误的是（ ）
A．细胞融合前应去除细胞壁
B．聚乙二醇试剂可促进细胞融合
C．融合的细胞即为杂交细胞
D．杂交细胞可能具有生长快速的优势
3．将目的基因导入不同受体细胞时，需采用不同的方法。下列导入方法与受体细 胞的对应
关系错误的是（ ）
A．农杆菌转化法----棉花细胞
B．显微注射法---小鼠受精卵
C． Ca2+处理法---大肠杆菌细胞
D．花粉管通道法---噬菌体
4．下列关于基因表达载体构建的叙述，正确的是
A．启动子是 RNA 聚合酶识别和结合的位点，位于目的基因下游
B．标记基因的作用是筛选含有目的基因的受体细胞，不能用于筛选含有重组载体的细
胞
C．终止子的作用是终止转录过程，使 RNA 聚合酶从 DNA 上脱离
D．目的基因与载体的连接必须通过限制酶切割产生的黏性末端实现 r
5．某生物兴趣小组为验证“错误存放口罩会增加口罩上的微生物数量”,小组同学 在实验
室中将直接存放在书包中的口罩剪下一小块，用无菌镊子轻轻放置在平板 培养基上，然后
取走小块，一段时间后观察菌落的数目。下列叙述正确的是（ ）
A．实验中的培养基应为液体培养基，要进行严格灭菌处理
B．实验还应设置“剪取无菌包装口罩上等大的小块”进行对照实验
C．可以根据菌落数大致推测出活菌数，而菌落数往往大于活菌数
D．实验进行前需对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌
6．某质粒载体复制原点(ori)、四环素抗性基因(tetr)、氨苄青霉素抗性基因 (ampr),其中 ampr
中含 HindIII 切割位点， tetr 中含 BglII 切割位点
A．ori 的 存 在 保 证 质 粒 能 在 受 体 细 胞 中 复 制
B．导入该质粒的受体细胞可在含四环素的培养基中存活
C．若用 HindII 切割质粒，会破坏 ampr 的功能
D．该质粒具备基因工程载体的基本条件
7．琼脂糖凝胶电泳常用于核酸样品的分析，样品 1～4 的电泳结果如图所示（“+”“-”分别代
表电泳槽的阳极和阴极）。已知样品 1 和 2 中的 DNA 分子分别是甲和乙，甲只有限制酶 R
的一个酶切位点，样品 3 和 4 中有一个样品是甲的酶切产物。下列叙述错误的是（ ）
A．配制琼脂糖凝胶时需选用适当的缓冲溶液
B．该实验条件下甲、乙两种 DNA 分子均带负电荷
C．甲、乙两种 DNA 分子所含碱基对的数量可能不同
D．据图推测样品 3 可能是甲被酶 R 完全酶切后的产物
8．下列关于动物细胞培养及干细胞的应用的叙述，正确的是（ ）
A．细胞在贴壁生长的过程中会出现接触抑制现象，但不影响细胞分裂
B．CO2 培养箱中含有 95%O2 和 5%CO2，CO2 的主要作用是刺激细胞呼吸
C．胚胎干细胞具有全能性，主要存在于早期胚胎、骨髓和脐带血中
D．iPS 细胞有细胞周期，它分化形成的神经细胞一般不具有细胞周期
9．下列有关无菌技术的说法，其中正确的有几项（ ）
①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物
②煮沸消毒法中 100℃煮沸 5-6 分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子
③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，所以不能在常温长期保存
④用紫外线消毒前，适量喷洒苯酚或煤酚皂，可以加强消毒效果
⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌
⑥培养皿、吸管可用干热灭菌法灭菌
A．2 项 B．3 项 C．4 项 D．5 项
10．营养缺陷型菌株是突变后某些酶被破坏，导致代谢过程中某些合成反应不能 进行的菌
株。下图是科研人员利用影印法(用无菌绒布轻盖在己长好菌落的原培 养基上，然后不转动
任何角度，“复印”至新的培养基上)初检某种氨基酸缺陷型 菌株的过程。下列叙述错误的
是（ ）
A．①过程接种方法为稀释涂布平板法，接种后的培养皿不能立即进行倒置培养
B．进行②过程的顺序是先将丝绒布“复印”至完全培养基上，再“复印”至基本培养基上
C．氨基酸缺陷型菌株应从基本培养基上没有、完全培养基上对应位置有的菌落中挑选
D．①过程接种方法统计出的菌落数往往比活菌的实际数目多，因此统计结果用 菌落数
而不是用活菌数表示
11．下图是“三亲婴儿”培育过程示意图，相关叙述错误的是（ ）
A．透明带反应和卵细胞膜反应是过程①形成二倍体受精卵的保障
B．应用该技术可阻断血友病女性患者致病基因遗传给后代
C．捐献者卵母细胞受精更有利于重组受精卵的分裂分化
D．雌雄原核的融合是受精完成的标志
12．幽门螺旋杆菌于 2017 年被世界卫生组织列入一类致癌物。幽门螺旋杆菌主要寄生于人
体胃中，是引起很多消化道疾病的首要致病细菌。体检时可通过 13C 尿素呼气试验来检测
幽门螺旋杆菌感染情况。受试者口服 13C 标记的尿素胶囊后，尿素可被幽门螺旋杆菌产生的
脲酶催化分解为 NH3 和 13CO2。定时收集受试者吹出的气体并测定其中是否含有 13CO2。以
下叙述正确的是（ ）
A．幽门螺旋杆菌属于原核生物，代谢类型是自养型
B．受试者吹出的气体中不含有 13CO2 说明感染幽门螺杆菌的风险较高
C．幽门螺旋杆菌虽然可以产生脲酶，但是不具有内质网和高尔基体
D．幽门螺旋杆菌不适宜在酸性条件下生存
13．应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效益。如图表示培
育生物新品种的过程，请据图判断下列叙述中正确的是（ ）
A．图中①过程需要的工具酶是限制酶、DNA 连接酶和载体
B．图中⑤过程需要的培养基中只需加入无机营养和植物激素
C．将 prG 导入细胞 I，细胞 I 是 B 淋巴细胞
D．可用相应抗原进行抗原—抗体杂交，检测抗虫基因是否成功表达
14．我国是全球最大的发酵产品生产国，下图为发酵工程的基本环节，其中①~④代表不同
的过程。下列叙述错误的是（ ）
A．①过程也可用基因工程或人工诱变选育菌种，是发酵工程的中心环节
B．啤酒发酵和果醋发酵时，②过程中均需通入无菌空气进行扩大培养
C．在③过程中，发酵罐与配制好的培养基都必须经过严格的灭菌处理
D．如果要获得单细胞蛋白，④过程中可用过滤、沉淀等方法获得产品
15．马铃薯在生长期易受多种病毒侵染而严重减产。科研人员通过农杆菌介导法，将 4 种病
毒 CP 融合基因导入马铃薯，获得多抗转基因马铃薯，有效解决了多种病毒的侵染问题。其
转化中所涉及的 CP 融合基因、Ti 质粒部分结构如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
注∶ClaⅠ、BamHⅠ、HindⅢ、KpnⅠ、SacⅠ为相应限制酶的识别位点，Kan 片段为卡那霉
素抗性基因片段
A．具体操作过程中 CP 融合基因需先经 PCR 扩增，再进行凝胶电泳加以分离和鉴定
B．为了使 CP 融合基因能在马铃薯叶细胞中表达，可从马铃薯任何部位细胞中获取启
动子 1
C．应选择 BamHⅠ和 SacⅠ同时处理 CP 融合基因所在的 DNA 分子和 Ti 质粒
D．若经限制酶处理的 CP 融合基因与 Ti 质粒反向连接，会导致 CP 融合基因不能正常
表达
二、选择题：本题共 5 小题，每小题 3 分，共 15 分。在每小题给出的四个选项中， 有一
项或多项符合题目要求。全部选对得 3 分，选对但不全得 1 分，有选错得 0 分。
16．（多选）为培育具有市场竞争力的无籽柑橘，研究者设计如下流程。相关叙述正确的是
（ ）
A．过程①需使用胰蛋白酶处理
B．实现过程②依赖膜的流动性
C．过程③需应用植物组培技术
D．三倍体植株可产生无籽柑橘
17．科学家通过将细胞核尚未融合的小鼠受精卵中的雄原核移除后，获得了孤雌单倍体囊胚，
并从中获得孤雌单倍体胚胎干细胞（haESCs）。该细胞具有胚胎干细胞的特征和发育潜能。
科研人员将 haESCs 注入同种小鼠卵细胞中获得了“双母”小鼠。下列说法错误的是（ ）
A．通过显微操作法去除受精卵中的雄原核时可观察到两个极体
B．haESCs 可以取自孤雌单倍体囊胚的内细胞团或滋养层
C．haESCs 具备自我更新能力和分化为其他类型细胞的能力
D．“双母”小鼠的体细胞中遗传物质的含量多于普通小鼠
18．（多选）长春花所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图 1 是某双特异性抗体作用图，
图 2 是科研人员通过杂交-杂交瘤细胞技术（免疫的 B 淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生
产双特异性单克隆抗体的部分过程。下列叙述正确的有（ ）
A．与植物体细胞杂交相比，图 2 中过程②特有的诱导融合的方法是灭活病毒诱导法
B．双特异性单克隆抗体能将长春碱定向带到癌细胞所在位置，对人体的副作用较小
C．过程②选用的骨髓瘤细胞具有无限增殖的特点，该细胞产生原因是抑癌基因发生突
变
D．过程①⑤步骤分别注射癌胚抗原和长春碱的目的是刺激小鼠产生相应的 B 淋巴细胞
19．（多选）“低乳糖奶牛”的诞生有望给乳糖不耐受症患者提供“放心奶”。如图是“低乳
糖 奶牛”的培育过程，下列叙述正确的是（ ）
A．重组细胞 1 培养后可以不取核，直接注入去核卵母细胞
B．胚胎成纤维细胞分化程度高，核移植难度高于体细胞核移植
C．犊牛的遗传物质不完全来白黑白花奶牛和乳糖酶基因
D．犊牛成年后与普通牛杂交，子代有 1/2 是低乳糖奶牛
20．甜蛋白是一种高甜度的特殊蛋白质，某科研人员采用农杆菌转化法将甜蛋白基因（含有
1178 个碱基对）导入番茄，希望能提高番茄甜味，改善果实品质。甜蛋白基因和 Ti 质粒上
限制酶切位点如图 1、2 所示；提取培育出的转基因番茄细胞中的 DNA，依据甜蛋白基因两
端的特异性序列设计引物，进行 PCR 扩增，对扩增产物进行电泳，结果如图 3。下列叙述
错误的是（ ）
A．PCR 扩增甜蛋白基因时，应该根据基因两端的 3'端序列设计引物
B．选择限制酶 XbaI 和 EcoRI 切割质粒和含有甜蛋白基因的 DNA 片段
C．可用含有卡那霉素的培养基对成功导入表达载体的农杆菌进行筛选
D．仅由图 3 电泳结果不能判断 1、2、3、4 号转基因番茄是否培育成功
三、非选择题：本题共 5 小题，共 55 分。
21．(10 分)某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：
先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌 T，培养一段时间后，
再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌 T 不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行
乙醇发酵（酒精发酵）。实验流程如图所示
(1)在粉碎的秸秆中接种菌 T，培养一段时间后发现菌 T 能够将秸秆中的纤维素大量分解，
其原因是________。
(2)采用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，通常可采用________法
对培养基进行灭菌。
(3)酵母菌扩大培养的过程中，利用血细胞计数板进行计数，发现血细胞计数板每 个小方格
平均含有 9 个酵母菌，则对应的酵母菌种群密度是________个/mL。将酵母 菌接种到灭菌
后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖________的主要目的是
________。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖，目的是________。发酵液中的乙
醇可用_______溶液检测。
(4)本实验收集的淋洗液中的________可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发
酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的优点是________。(写出两点)
22．(10 分)两只克隆小猴“中中”和“华华”是世界首例非人灵长类动物的体细胞克隆猴，这是
我国的研究成果。一年后 5 只世界首例生物节律紊乱的体细胞克隆猴诞生。下图为培育克隆
猴的流程，回答下列问题：
(1)在“中中”“华华”之前，科学家已培育了胚胎细胞克隆猴，胚胎细胞核移植难度明显低于体
细胞核移植的原因是_____。
(2)科学家首先将采集的卵母细胞培养至____期，然后去核，这里的“去核”实际上是指去除
____。核移植过程中用灭活的仙台病毒进行了短暂处理，其目的是_____。体外培养重构胚
时，需提供适宜的营养及环境条件，推测环境条件包括_____（答出 2 点）。最后将胚胎移植
到经过_____处理的代孕母猴体内，最终产出克隆小猴。
(3)我国科研团队采集一只睡眠紊乱最明显的 BMAL1 基因敲除的猕猴的体细胞，通过核移植
技术获得了 5 只克隆猴，理论上这 5 只克隆猴之间的细胞核基因型_____（填“相同”“不相同”
或“不一定相同”）。为验证上述 5 只基因敲除猕猴存在昼夜节律紊乱问题，科学家用检测设
备监测实验猴，通过行为学分析检测其是否明显表现出睡眠紊乱的症状，对照组的设置应
为_____。
23． (10 分)白菜（AA，2n=20）、甘蓝（CC，2n=18）是人们餐桌上的常见蔬菜，营养价值
高、染色体数目少。研究人员通过植物体细胞杂交技术培育了甘蓝型油菜（流程如图），并
展开了深入研究。请回答下列问题：
(1)甘蓝型油菜的叶肉细胞中含有____条染色体，含有____个染色体组。
(2)进行上述杂交过程前，应使用____酶去除植物细胞壁，再用____（试剂名称）处理白菜
和甘蓝的原生质体进行膜融合。获得杂种细胞后进行植物组织培养，脱分化阶段的光照条件
为____，再分化过程的影响因素有____（请写出两点）。
(3)甘蓝型油菜有平展叶和上卷叶两种叶形，研究人员分别测定 12 叶期幼苗单株的叶绿素含
量、光合速率、气孔导度等，其结果如下表：
叶绿素 a 叶绿素 b 净光合速率 气孔导度 胞间 CO2 浓度 组别
（mg/g） （mg/g） （umolCO2/m2·s） （molH2O/m2·s） （umolCO2/mol）
平展
4.2 2.7 8.7 0.18 461.0 叶
上卷
6.7 3.5 12.6 0.21 397.5 叶
①叶绿素存在于叶绿体的_____（场所名称），主要吸收可见光中的_____光。
②在两组植株呼吸速率相同的情况下，据表中数据分析，上卷叶净光合速率大于平展叶的原
因是_____（答 2 点）。
24．(12 分)重组质粒构建及导入流程：目的基因(人胰岛素基因) → 与含氨苄 青霉素抗性基
因、四环素抗性基因的质粒(含 EcoRI、BamHI 酶切位点) → 双酶 切后连接 → 导入大肠杆
菌 → 筛选培养。
胰岛素是治疗糖尿病的重要药物，科学家利用基因工程技术生产人胰岛素的部分流程如
下。
回答下列问题：
(1)获取人胰岛素基因时，可从人体胰岛 B 细胞中提取 mRNA,通过逆转录 获得 cDNA,该方
法的优点是______
(2)构建重组表达载体时，用 EcoRI 和 BamHI 两种限制酶对目的基因和质粒进 行双酶切，
与单酶切相比，双酶切的优势是______。(答 出 两 点 ) 。
(3)将重组质粒导入大肠杆菌时，需用 Ca +处理大肠杆菌，使其成为感受态细 胞，感受态细
胞的特点是______。
(4)筛选含重组质粒的大肠杆菌时，将转化后的菌液接种到含氨苄青霉素的培养基上，长出
的菌落______(填“一定”或“不一定”)含重组质粒，原因是________若要进一步筛选，可
采用的方法是______________(答出一种即可)
25．(13 分)将天然 Ti 质粒改造成含有 Vir 基因的辅助质粒(作用为辅助 T-DNA 转移)和不含
有 Vir 基因、含有 T-DNA 的穿梭质粒，共同转入农杆菌，可提高转化效率。细菌和棉花对
密码子偏好不同，为提高翻译效率，增强棉花抗病虫害能力，进行如下操作。回答下列问题。
(1)从苏云金杆菌提取 DNA 时，需加入蛋白酶，其作用是___________。提取过程中加入体
积分数为 95%的预冷酒精，其目的是___________。
(2)本操作中获取目的基因的方法是_____和______。
(3)穿梭质粒中 p35s 为启动子，驱动目的基因转录，插入两个 p35s 启动子， 其目的可能是
___________。
(4)根据图中穿梭质粒上的 KanR 和 HygBR 两个标记基因的位置，用___________基因对应的
抗生素初步筛选转化的棉花愈伤组织。
(5)为检测棉花植株是否导入目的基因，提取棉花植株染色体 DNA 作模板，进行 PCR，应选
用的引物是___________和___________。
(6)本研究采用的部分生物技术属于蛋白质工程，理由是______。
A.通过含有双质粒的农杆菌转化棉花细胞
B.将苏云金杆菌 Bt 基因导入棉花细胞中表达
C.将 1-1362 基因序列改变为棉花细胞偏好密码子的基因序列
D.用 1-1362 合成基因序列和 1363-1848 天然基因序列获得改造的抗虫蛋白2025一2026学年度第二学期桦南一中期中考试
生物答案
1-5、BCDCB6-10、BDDCD
11-15、BCCAB
16、BCD17、ACD18、ABD19、AC20、B
21(10分)【答案】
(1)菌T能够分泌纤维素酶
(②)高压蒸汽灭菌法（湿热灭菌法）
(3)3.6×107(2分)
制造无氧环境
排出二氧化碳
酸性的重铬酸钾
溶液
(4)
葡萄糖
节约粮食、废物利用、清洁环保、不污染环境、生产成本
低、原料来源广(2分)
22(10分)【答案】
(1)胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易
(2)MⅢ（或减数第二次分裂中期）纺锤体-染色体复合物
诱导细胞融合
无菌、无毒的环境；温度、pH、渗透压；气体环境同期发情
(3)
相同
与克隆猴生理状态相同的正常个体(2分)
23(10分)【答案】
(1)
38
4
(2)纤维素酶和果胶酶
避光
生长素和细胞分裂素的比例及光照(2分)
(3)类囊体
红光和蓝紫
叶绿素含量高，光反应强；气孔导度大，吸收利
用CO2多，暗反应强
24(12分)【答案】
(1)可直接获得编码蛋白质的基因，不含内含子(2分)
(②)防止目的基因自身环化、防止质粒自身环化、保证目的基因与质粒定向连接
(2分其他合理答案也可给分)
(3)细胞膜的通透性改变，能吸收周围环境中的DNA分子(2分)
(4)不一定(2分)
未连接目的基因的空质粒也含氨苄青霉素抗性基因，会在
该培养基上生长(2分)
DNA分子杂交技术（或抗原·抗体杂交技术，或
PCR技术)(2分)
25(13分)【答案】
(1)除去蛋白质杂质
溶解蛋白质等物质，析出不溶于酒精的DNA
(2)PCR技术扩增
人工合成
(3)增强目的基因的表达(2分)
(4)HygBR
(5)F3(2分)
R2(2分)
(6)D(2分)

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