资源简介

高二生物试卷
一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每个小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1．下列关于泡菜制作的叙述错误的是（ ）
A．腌制泡菜时如果加入一些陈泡菜汁，可以缩短腌制时间
B．泡菜的制作过程中可能有多种微生物参与发酵
C．适量的食盐水和酸性条件可以抑制杂菌的生长
D．泡菜坛中蔬菜装量不能超过2/3，以防发酵液溢出
2．近年来，在农牧业生产上，微生物肥料、微生物农药和微生物饲料得到广泛应用。下列相关叙述错误的是（ ）
A．微生物肥料是利用微生物代谢产生的有机酸、生物活性物质等发挥作用
B．微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害的
C．微生物饲料主要是利用微生物大量繁殖产生的高蛋白菌体来生产的
D．通过发酵工程从微生物细胞中提取的单细胞蛋白，可制成微生物饲料
3．iPS细胞被称为诱导多能干细胞，可通过转入相关因子来制备。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导成该类细胞。下列叙述错误的是（　　）
A．导入的物质可以是DNA、蛋白质，还可用小分子物质来诱导
B．iPS细胞的体外培养需要在无菌的CO2培养箱中进行
C．T细胞、B细胞能被诱导为iPS细胞，说明体内细胞的分化是可逆的
D．获得iPS细胞的过程不需要破坏胚胎，可以避免获取ES细胞涉及的伦理问题
4．合适的引物是利用PCR技术扩增目的基因的前提。下列关于引物的叙述，错误的是（　　）
A．引物设计的依据是目的基因两端部分脱氧核苷酸序列
B．引物过长或G、C含量过高则所需的复性温度较高
C．引物之间或内部存在互补序列则会影响其与模板链的结合
D．引物的3'端添加限制酶识别序列有利于目的基因的酶切与连接
5．SOD是一种抗氧化酶，它能将转化成,增强植物的抗逆性。下图为培育农作物新品种的一种方式。以下叙述正确的是
A．过程①可以用动物病毒作为运载体
B．从该农作物新品种的细胞中检测出了SOD基因，说明该基因工程成功了
C．新品种的获得属于可遗传的变异，可能将抗逆性状遗传给子代
D．基因工程又叫DNA重组技术，所用工具酶有限制酶、DNA连接酶和运载体
6．芽孢杆菌耐高温，是常见的蛋白酶生产菌。培养基中的蛋白质被蛋白酶降解后，会在菌落周围形成透明圈。如图是筛选蛋白酶高产菌株的过程。下列叙述错误的是（ ）
A．70~80℃水浴10min的目的是杀死部分非芽孢杆菌
B．在酒精灯火焰旁将样品用无菌水稀释并涂布接种
C．以奶粉为唯一氮源的培养基能起到选择作用
D．透明圈与菌落直径比值较小的菌株为高产菌株
7．研究者通过体细胞杂交技术，探索利用条斑紫菜和拟线紫菜培育杂种紫菜。下列相关叙述正确的是（　　）
A．从食用紫菜的动物消化道内提取蛋白酶，用于去除细胞壁
B．原生质体需在低渗溶液中长期保存，以防止过度失水而死亡
C．检测原生质体活力时可用苯酚品红或甲紫溶液处理，活的原生质体被染色
D．聚乙二醇促进原生质体融合后，以叶绿体颜色等差异为标志可识别杂种细胞
8．以下关于胚胎分割移植的说法，不正确的是（ ）
A．分割滋养层可对胚胎进行性别鉴定
B．胚胎分割所需要的主要仪器设备为实体显微镜和显微操作仪
C．可在囊胚阶段将胚胎随机分割成两份或多份，然后移植
D．用分割针将桑椹胚均分成两部分，可直接将裸半胚移植入受体
9．为了构建可以直接利用纤维素发酵的酿酒酵母工程菌，研究人员构建基因表达载体（如图所示），并导入不能合成尿嘧啶的酵母菌。

下列相关分析不正确的是（　　）
A．尿嘧啶合成基因可以作为表达载体上的标记基因
B．该方法需利用限制酶和DNA连接酶实现目的基因与载体的连接
C．扩增目的基因时应在引物的5'端添加与线性化载体两端相同的DNA序列
D．在以纤维素为唯一碳源的液体培养基中检测酒精含量确定工程菌发酵效果
10．将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞，可以提高玉米中的赖氨酸含量；更换赖氨酸形成过程中的天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的个别氨基酸，使两种酶的活性提高，也可以提高玉米中的赖氨酸含量。以上两种技术分别属于(　　)
A．基因工程、基因工程 B．蛋白质工程、蛋白质工程
C．基因工程、蛋白质工程 D．蛋白质工程、基因工程
11．下面是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。下列相关叙述中，正确的是（　　）
A．利用葡萄制作果酒时， 需要对葡萄和发酵瓶进行消毒处理
B．根据图1可知，利用葡萄制作果醋时，必须先进行酒精发酵， 然后再进行果醋发酵
C．醋酸菌在有氧条件下可利用糖类或乙醇进行发酵
D．制作果醋要关闭充气口、打开排气口，制作果酒时充气口和排气口都要打开
12．3D培养系统能够在一个培养皿中重建人体器官，弥补了传统二维（2D）单层培养和组织模型之间的差距，因此在许多方面具有巨大应用前景。如表为用于多种哺乳动物细胞培养的DMEM培养基的部分组成，下列叙述错误的是（　　）
成分 种类
糖类 葡萄糖、核糖、脱氧核糖
氨基酸 缬氨酸、亮氨酸等多种氨基酸
无机盐 Na+、Cl-等
A．DMEM培养基中糖类的功能有为细胞提供能量、碳源和调节渗透压等
B．细胞必须从培养基中吸收缬氨酸、亮氨酸，而有些氨基酸不必添加
C．2D培养往往只能得到单层细胞是因为动物细胞培养时均会出现接触抑制
D．两种培养模式都需要控制无菌、无毒的环境，适宜的pH、氧气浓度和温度
13．我国科学家在进行抗虫棉的培育过程中独创了“花粉管通道法”， 该方法有多种操作方式。如图表示花粉管通道法介导植物基因转移。下列相关说法错误的是（　　）
A．必须在雌蕊成熟时才能进行图中所示的处理
B．相比于农杆菌转化法，花粉管通道法省去了植物组织培养这一操作
C．花粉管通道法的操作方式还可以用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中
D．外源DNA不需要构建基因表达载体，就能借助花粉管通道进入受体细胞并表达
二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每个小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项是符合题目要求的，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。
14．某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是（ ）
A．在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品
B．将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测
C．将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落
D．判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小
15．研究表明“渐冻症”是由突变的基因导致运动神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动。也有最新研究结果表明，利用诱导多功能干细胞(iPS细胞)制作前驱细胞，然后移植给渐冻症实验鼠，能延长其寿命。相关叙述错误的有（　　）
A．iPS细胞分化成的多种细胞中所含核酸相同，蛋白质不完全相同
B．iPS细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞种类增多
C．若将控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换，可能起到治疗作用
D．植入神经干细胞，恢复受损的运动功能，体现了神经干细胞的全能性
16．利用转基因植物生产药用蛋白主要有两条途径：瞬时表达途径和稳定表达途径。在瞬时表达状态的基因转移中，药用蛋白基因进入受体细胞后，存在于游离的载体上，不与基因组染色体相整合；在稳定表达状态的基因转移中，导入的药用蛋白基因整合到植物细胞基因组中，形成稳定表达的转基因植株。下列叙述错误的是（　　）
A．可利用农杆菌转化法将药用蛋白基因导入受体细胞获得转基因植物
B．利用瞬时表达途径生产目的蛋白简便快捷，目的蛋白的表达持久、稳定
C．利用稳定表达途径获得转基因植株时，载体进入宿主细胞后不需进行选择培养
D．将目的基因定点整合到染色体高活性位点可在较短时间内获得高表达植株
17．卡铂为广谱抗肿瘤药，通过抑制DNA复制而起效。卡铂微溶于水，其水溶液在光下不稳定，溶液中的Cl-也会促进其分解。临床上用5%葡萄糖溶液与卡铂制成卡铂试剂后注射治疗，相关实验的设计思路如图所示。下列叙述错误的是（　　）
A．本实验的自变量是DNA复制抑制剂的有无
B．本实验可用生理盐水代替5%葡萄糖溶液来配制卡铂试剂
C．本实验预期结果为①与④组数据接近，②与③组数据接近
D．宫颈癌细胞无接触抑制因而培养时可形成多层细胞
18．研究人员发现某除草剂（含氮有机物）不易被降解， 且长期使用会导致土壤污染。为修复被该除草剂污染的土壤，科研人员按如图程序选育能降解该除草剂的细菌，已知含该除草剂的培养基不透明。下列叙述正确的是（　　）
A．操作Ⅱ中应该将接种环灼烧灭菌5次
B．培养基上形成的两种菌落中的细菌所利用的氮源不同
C．图中操作Ⅰ的接种方法为平板划线法，该方法可用于细菌计数
D．筛选能降解该除草剂的细菌的培养基中该除草剂是唯一的氮源
三、非选择题：本题共5小题，共59分。
19．发酵能让食物改头换面，拥有全新的模样和味道。利用不同微生物的发酵作用制作食品历史悠久，遍布民间，称为传统发酵技术。利用传统发酵技术制作的果酒、果醋、腐乳、泡菜极大地丰富了人们的饮食。请回答下列问题：
(1)在发酵过程中，微生物的参与是关键，人类已经发现了多种用于食品发酵的细菌和真菌。在上述几种饮品及食品加工过程中，利用真菌进行发酵的是_____。
(2)人类酿制葡萄酒利用的微生物主要是酵母菌。葡萄酒呈现深红色的原因是_____。将葡萄酒制作成果醋时，需要改变的环境条件是_____和_____。
(3)做酸菜鱼的“酸汤”是通过天然发酵制成的，参与该发酵过程的主要微生物是_____。出坛后的酸汤，若不及时食用，一段时间后会在其表面出现一层白膜，这是_____（填微生物名称）繁殖引起的。
(4)腐乳是经微生物发酵后制成的食品，多种微生物参与了该发酵过程，其中起主要作用的微生物是_____，其产生的蛋白酶可以使豆腐中的蛋白质被分解为_____。
20．某科研小组发现某种植物（M）耐盐碱，控制性状的基因位于细胞质中，另一种植物（N）高产氰化物，控制性状的基因位于染色体上。该科研小组利用植物体细胞杂交技术对培育耐盐碱高产氰化物植物进行了课题立项，研究思路如图（序号表示过程）。请回答下列问题：
(1)图中①过程常用______去除细胞壁。甲细胞通过④过程得到愈伤组织，该过程所用培养基除了加入基本的营养物质外，还需添加一定比例的_______。通过PCR技术发现，甲细胞含有耐盐碱基因，而部分愈伤组织细胞中没有检测到耐盐碱基因，从细胞分裂时基因分配的角度分析，主要原因是______。
(2)对处理后的M、N两种原生质体分别制成适宜浓度的细胞悬液，进行密度检测并等比例混合后，用PEG诱导融合。如果融合时只考虑两个原生质体的融合，一定时间后混合细胞悬液中的原生质体最多有______种。当原生质体融合到一定程度时，在混合悬液中加入过量的培养液可以阻止原生质体融合，主要原理是______。
(3)丙需要移栽到______的环境中才可以筛选出目的植株。
21．【生物——选修3：现代生物科技专题】
科学家通过利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因，提高了光合作用过程中Rubisco酶对CO2的亲和力，从而显著提高了植物的光合作用速率，请回答下列问题：
(1)PCR过程所依据的原理是_____，该过程需要加入的酶是_____。利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成_____。
(2)该技术不直接改造Rubisco酶，而通过对Rubisco酶基因进行改造，从而实现对Rubisco酶的改造，其原因是_____。和传统基因工程技术相比较，定点突变技术最突出的优点是_____，PCR定点突变技术属于_____的范畴。
(3)可利用定点突变的DNA构建基因表达载体。常用_____将基因表达载体导入植物细胞，将该细胞经植物组织培养技术培育成幼苗，从细胞水平分析所依据的原理是_____。
22．科学家仅使用小分子化合物的组合对体细胞进行处理，成功地将已高度分化的小鼠成纤维细胞诱导成多潜能干细胞，并将其命名为诱导多能干细胞（iPS细胞） 。如图是利用iPS细胞对镰状细胞贫血小鼠进行基因治疗的技术流程。回答下列问题：
(1)从小鼠体内获得成纤维细胞后，对其进行的初次培养称为_____。
(2)胚胎干细胞存在于_____中，具有分化为成年动物体内的_____的细胞，并进一步形成机体的_____甚至_____的潜能。
(3)配制培养液时，通常需要在合成培养基的基础上添加动物血清等一些天然成分，目的是_____。
(4)iPS细胞的诱导成功具有重要的医学价值，又因为诱导过程无须_____，而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免_____，所以科学家普遍认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。
23．科研人员构建了可表达J-V5融合蛋白的重组质粒并进行了检测，该质粒的部分结构如图甲所示，其中V5编码序列表达标签短肽V5。

(1)与图甲中启动子结合的酶是____________。除图甲中标出的结构外，作为载体，质粒还需具备的结构有________________（答出2个结构即可）。
(2)构建重组质粒后，为了确定J基因连接到质粒中且插入方向正确，需进行PCR检测，若仅用一对引物，应选择图甲中的引物___________。已知J基因转录的模板链位于b链，由此可知引物F1与图甲中J基因的_____________（填“a链”或“b链”）相应部分的序列相同。
(3)重组质粒在受体细胞内正确表达后，用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测相应蛋白是否表达以及表达水平，结果如图乙所示。其中，出现条带1证明细胞内表达了__________，条带2所检出的蛋白______________（填“是”或“不是”）由重组质粒上的J基因表达的。
1．D
泡菜的制作原理：在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。
A、陈泡菜汁中含有乳酸菌，坛中加一些陈泡菜汁的目的是加入乳酸菌菌种，缩短腌制时间，A正确；
B、泡菜的制作过程中利用的菌种主要是乳酸菌，泡菜坛中还可能有其他微生物，B正确；
C、食盐水能增大环境溶液的浓度、酸性条件会抑制细胞代谢，适量的食盐水和酸性条件在腌制过程中可以抑制杂菌生长，C正确；
D、泡菜坛中蔬菜装至半坛，再加入香辛料和酒至八成满，盐水没过蔬菜，D错误。
故选D。
2．D
A、微生物肥料可通过微生物的代谢活动产生有机酸、生物活性物质等，起到改善土壤养分、促进作物生长的作用，A正确；
B、微生物农药属于生物防治制剂，原理是利用微生物本身或者其代谢产物来抑制、消灭病虫害，B正确；
C、微生物繁殖速度快，菌体蛋白质含量高，微生物饲料的主要原料就是微生物大量繁殖产生的高蛋白菌体，C正确；
D、单细胞蛋白指的是微生物菌体本身，并非从微生物细胞中提取得到的蛋白质，D错误。
故选D。
3．C
A、诱导已分化细胞成为iPS细胞时，导入的诱导物质可以是编码诱导因子的DNA、诱导相关的蛋白质，也可使用小分子物质进行诱导，A正确；
B、iPS细胞属于动物细胞，体外培养时需要无菌无毒的环境，且CO2培养箱中的CO2可维持培养液的pH，符合动物细胞培养的要求，B正确；
C、细胞分化的特点之一是在生物体内具有不可逆性，T细胞、B细胞是在体外人工诱导的条件下脱分化为iPS细胞，不能说明体内细胞的分化是可逆的，C错误；
D、ES细胞（胚胎干细胞）需要从早期胚胎或原始性腺中获取，涉及伦理问题，而iPS细胞由已分化的体细胞诱导获得，不需要破坏胚胎，可避免相关伦理问题，D正确。
4．D
A、PCR过程中引物需要与目的基因两端的序列互补结合才能启动子链的延伸，因此引物设计的依据是目的基因两端部分脱氧核苷酸序列，A正确；
B、DNA中G、C之间有3个氢键，A、T之间有2个氢键，引物过长或G、C含量越高，引物与模板结合的稳定性越强，所需的复性温度就越高，B正确；
C、若引物之间或内部存在互补序列，会导致引物自身形成发夹结构或引物之间形成二聚体，无法正常与模板链结合，C正确；
D、DNA聚合酶只能从引物的3'端开始延伸子链，因此引物的3'端必须与模板链互补配对，限制酶识别序列应添加在引物的5'端，D错误。
5．C
本题考查植物组织培养和基因工程相关知识，意在考查考生能从课外材料中获取相关的生物学信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题。
病毒的寄生具有专一性，所以过程①不能用动物病毒作为运载体，A错误.
从该农作物新品种的细胞中检测出具有活性的SOD才能说明该基因工程成功了，B错误.
新品种的遗传物质发生了改变，属于可遗传的变异，抗逆性状可通过基因的传递遗传给子代，C正确.
运载体通常有质粒、动植物病毒互和噬菌体，不是工具酶，D错误.
运载体是工具但不是酶；基因工程属于基因重组，是可遗传变异。
6．D
分析题图所示过程从土壤中筛选能降解蛋白质的细菌，实验流程：土壤取样→样品的稀释→将稀释液涂布到以奶粉为唯一氮源的培养基上→挑选能生长的菌落→鉴定。
A、细菌中的芽孢杆菌较为耐高温，70~80℃水浴10分钟的目的是杀死非芽孢菌，A正确；
B、为防止杂菌污染，在酒精灯火焰旁将样品用无菌水稀释并涂布接种，B正确；
C、蛋白酶降解培养基中的蛋白质可在菌落周围形成透明圈，奶粉富含蛋白质，以奶粉为唯一氮源的培养基能起到选择作用，C正确；
D、透明圈与菌落直径比值越大芽孢杆菌分解蛋白质的能力越强，故透明圈与菌落直径比值较大的菌株为高产菌株，D错误。
故选D。
7．D
植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种新培育成新植物体的技术。
A、从食用紫菜的动物消化道内提取蛋白酶，不能用于去除细胞壁，因为紫菜细胞的细胞壁成分中没有蛋白质，A错误；
B、获得的原生质体若处在低渗溶液中，会吸水涨破，B错误；
C、检测原生质体活力时可用台盼蓝染色，活的原生质体不能被染色，C错误；
D、聚乙二醇作为诱导剂可促进原生质体融合，对于杂种细胞可以叶绿体颜色等差异为标志来进行识别，D正确。
故选D。
8．C
胚胎分割：
1、特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一。目前以二分胚的分割和移植效率最高。
2、主要仪器设备：实体显微镜和显微操作仪。
3、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚，对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。
4、存在问题：胚胎分割的分数越多，操作的难度越大，移植的成功率也越低。
A、对胚胎进行性别鉴定可用滋养层细胞，A正确；
B、胚胎分割所需要的主要仪器设备为实体显微镜和显微操作仪，B正确；
C、对囊胚阶段的胚胎进行分割时，需要将内细胞团均等分割后移植，C错误；
D、用分割针将桑椹胚均分成两部分，可直接将裸半胚移植入受体，D正确。
故选C。
9．B
基因工程中常用限制酶切割目的基因和质粒（载体），用DNA连接酶连接目的基因和载体。
A、由题意可知，表达载体导入不能合成尿嘧啶的酵母菌，所以可将尿嘧啶合成基因作为表达载体上的标记基因，若导入表达载体后酵母菌能产生尿嘧啶，说明导入成功，A正确；
B、该方法需利用DNA连接酶实现目的基因与载体的连接，不需要使用限制酶，B错误；
C、扩增目的基因时应在引物的5'端添加与线性化载体两端相同的DNA序列，以便使目的基因两端也具有与载体相同的序列，以便线性化载体与目的基因的连接，C正确；
D、在以纤维素为唯一碳源的液体培养基中检测酒精含量确定工程菌发酵效果，若能利用纤维素发酵，则证明转基因成功，D正确。
故选B。
10．C
1、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质）
2、蛋白质工程的基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行。（注意：目的基因只能用人工合成的方法）
将富含赖氨酸的蛋白质编码基因导入玉米细胞属于基因工程，富含赖氨酸的蛋白质是自然界中已有的蛋白质，基因工程只是把该蛋白质基因从一种生物转入玉米体内，并使之合成该蛋白质；更换赖氨酸合成过程中的天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的个别氨基酸，是对自然界中已有的蛋白质进行改造，属于蛋白质工程。故选C。
明确基因工程和蛋白质工程的主要区别，要生产的蛋白质是否是自然界已存在的。
11．C
A、利用葡萄制作果酒时，菌种主要来自葡萄表面的酵母菌，所以不能对葡萄进行消毒处理，A错误；
B、图1是果酒-果醋串联制作的流程，但制作果醋并非必须先进行酒精发酵；当氧气和糖源都充足时，醋酸菌可直接利用葡萄汁中的糖类发酵产生醋酸，B错误；
C、当氧气、糖原都充足时，醋酸菌能将葡萄汁中的糖分解成醋酸，当氧气充足、缺少糖原时，醋酸菌将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为醋酸，C正确；
D、制作果酒要关闭充气口、打开排气口，制作果醋时充气口和排气口都要打开，D错误。
12．C
A、糖类中的葡萄糖是细胞主要的能源物质，可提供能量、作为碳源合成其他物质，同时糖类作为培养基的溶质可参与调节渗透压，A正确；
B、缬氨酸、亮氨酸属于必需氨基酸，动物细胞无法自行合成，必须从外界吸收，非必需氨基酸可由细胞自身合成，因此培养基中不必添加非必需氨基酸，B正确；
C、正常的动物细胞培养时会出现接触抑制，但癌细胞等发生基因突变的细胞不存在接触抑制的特点，C错误；
D、2D和3D动物细胞培养的基础条件一致，都需要控制无菌、无毒的环境，以及适宜的温度、pH、氧气和二氧化碳浓度，D正确。
13．D
A、授粉过程需要在雌蕊成熟后，因此，花粉管通道法也应该必须在雌蕊成熟时才能进行图中所示的处理方法，A正确；
B、农杆菌转化法需要将导入目的基因的受体细胞经过植物组织培养才能获得完整植株；而花粉管通道法中，外源DNA直接进入受精卵，受精卵会直接发育为种子，后续直接由种子发育为完整植株，省去了植物组织培养步骤，B正确；
C、花粉管通道法有多种操作方式，除图中涂抹柱头的方式，还可以用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入子房中，C正确；
D、要让目的基因进入受体细胞后能稳定存在并得到复制和表达，不管采用什么导入方法，都需要构建重组载体才能实现，外源DNA也需要构建基因表达载体，才能借助花粉管通道进入受体细胞并表达，D错误。
14．CD
1、获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技 术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。
2、稀释涂布平板法除可以用于分离微生物外，也常用来 统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养 基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活 菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含 有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数为30 300 的平板进行计数。
A、题干信息：某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，故在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从未感病植株上采集样品，A错误；
B、获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染；将采集的样品充分消毒后，用无菌水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测，B错误；
C、题图可知，样品研磨后进行了稀释涂布，可见将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落，C正确；
D、题图抗性检测可知，判断内生菌的抗性效果需设置对照组和实验组，对照组不接种内生菌得到病原菌菌斑，实验组接种内生菌得到病原菌菌斑，然后比较对照组和实验组的菌斑大小，实验组病原菌菌斑越小表明内生菌抗性效果越好，D正确。
故选CD。
15．AD
细胞分化的结果是形成形态、结构和生理功能不同的细胞，使细胞的种类增多，其实质是基因的选择性表达。
A、细胞分化的实质是基因的选择性表达，因此iPS细胞分化成的多种细胞中DNA相同，RNA和蛋白质不完全相同，A错误；
B、细胞分化的实质是基因的选择性表达细胞分化的结果是形成形态、结构和生理功能不同的细胞，使细胞的种类增多，B正确；
C、若控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换，则无法合成该毒蛋白，所以可以起到治疗该病的作用，C正确；
D、植入神经干细胞，诱导分化成前驱细胞，恢复受损的运动功能，没有体现细胞的全能性，D错误。
故选AD。
16．BC
1、农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物，而对大多数单子叶植物没有侵染能力。农杆菌细胞内含有Ti质粒，当它侵染植物细胞后，能将Ti质粒上的T-DNA（可转移的DNA）转移到被侵染的细胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上。根据农杆菌的这种特点，如果将目的基因插入Ti质粒的T-DNA中，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞。
2、目的基因进入受体细胞后，是否稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。
A、农杆菌能在自然条件下侵染双子叶植物和裸子植物，可利用农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞获得转基因植物，A正确；
B、基因瞬时表达技术导人的外源 DNA未整合到宿主细胞的染色体DNA上，该技术中外源基因一般不能稳定遗传，B错误；
C、因基因表达载体构建成功率不是百分百，目的基因导入受体细胞的成功率不是百分百，因此载体进入宿主细胞后需要利用标记基因的特性进行选择培养，筛选成功导入目的基因的细胞，C错误；
D、染色体高活性位点基因表达量更高，将目的基因定点整合到这些位点可以实现目的基因的高水平表达，D正确。
故选BC。
17．ABC
A、由分析可知，本实验的自变量是卡铂、DNA复制抑制剂的有无，A错误；
B、由题意可知，溶液中的Cl-会促进卡铂分解，而生理盐水中的含Cl-，会促进卡铂的分解，失去疗效，因此不可用生理盐水代替5%葡萄糖溶液来配制卡铂试剂，B错误；
C、①组不会抑制DNA的复制，④组会抑制DNA的复制，所以预期实验结果不相近，C错误；
D、正常动物细胞培养存在接触抑制，癌细胞失去接触抑制，因此宫颈癌细胞培养时可形成多层细胞，D正确。
18．BD
A、结合图示可知，操作Ⅱ共划线五次，第一次划线前灼烧灭菌一次，每一次划线后灼烧灭菌一次，因此共灼烧灭菌6次，A错误；
B、培养基上形成的两种菌落中的细菌所利用的氮源不同，有透明圈的，是能够利用除草剂中的氮源，没有透明圈的，不能利用除草剂中的氮源，B正确；
C、平板划线法无法进行细菌计数，稀释涂布平板法可对细菌进行计数，C错误；
D、某除草剂为含氮有机物，为筛选能降解该除草剂的微生物，培养基中应该以该除草剂为唯一的氮源，能降解除草剂的微生物形成的菌落会有透明圈，D正确。
19．(1)果酒和腐乳
(2) 红葡萄皮的色素进入发酵液 通入无菌空气 将温度提高到30~35℃
(3) 乳酸菌 酵母菌
(4) 毛霉 小分子的肽和氨基酸
（1）制作果酒的酵母菌和制作腐乳的毛霉均是真菌，制作果醋的醋酸菌和制作泡菜的乳酸菌都属于细菌，即利用真菌进行发酵的是果酒和腐乳。
（2）葡萄酒呈现深红色是因为红葡萄皮细胞的细胞液含有色素，这些色素在发酵过程中进入发酵液进而使葡萄酒呈现深红色；将葡萄酒制作成果醋时，需要将条件控制为醋酸菌（需氧菌，所需温度较高）的最适生长条件，因此需要改变的环境条件是通入充足无菌空气和将温度提高到30～35℃。
（3）做酸菜鱼的“酸汤’是通过天然发酵而成的，该过程产生了乳酸，参与该发酵过程的主要微生物是乳酸菌；出坛后的酸汤，若不及时食用，一段时间后会在其表面出现一层白膜，这是酵母菌大量繁殖形成的。
（4）腐乳是经微生物发酵后制成的食品，多种微生物参与了该发酵过程，制作腐乳时，主要利用了毛霉等微生物生产的蛋白酶和脂肪酶，将大分子物质分解为易吸收的小分子物质，其中蛋白酶可以使腐乳的蛋白质被分解为小分子肽和氨基酸。
20．(1) 纤维素酶和果胶酶 生长素和细胞分裂素 植物（M）耐盐碱的基因位于细胞质中，而细胞质基因在细胞分裂过程中是随机分配的
(2) 3 过量培养液可以达到稀释的目的，进而可降低PEG浓度，使其失去融合作用
(3)高浓度盐溶液
1、植物组织培养过程：离体的植物组织经过脱分化形成愈伤组织，经过再分化愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。
2、植物体细胞杂交可以克服植物有性杂交不亲和性、打破物种之间的生殖隔离，操作过程包括:原生质体制备、原生质体融合、杂种细胞筛选、杂种细胞培养、杂种植株再生以及杂种植株鉴定等步骤。
（1）图中①过程的操作是为了获得原生质体，由于细胞壁的成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性可推知，为了获得原生质体常用酶解法获得，即用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁。甲细胞通过④过程，即脱分化得到愈伤组织，该过程所用培养基除了加入基本的营养物质外，还需添加一定比例的生长素和细胞分裂素。通过PCR技术发现，甲细胞含有耐盐碱基因，而部分愈伤组织细胞中没有检测到耐盐碱基因，题意显示，植物（M）耐盐碱的基因位于细胞质中，而细胞质基因在细胞分裂过程中是随机分配的，因此就可能出现有的愈伤组织细胞中含有耐盐基因，有的愈伤组织细胞中不含有耐盐基因。
（2）对处理后的M、N两种原生质体分别制成适宜浓度的细胞悬液，进行密度检测并等比例混合后，用PEG诱导融合。如果融合时只考虑两个原生质体的融合，一定时间后混合细胞悬液中的原生质体最多有3种，分别为两种细胞自融和互融的类型，可表示为MM、NN、MN类型。当原生质体融合到一定程度时，在混合悬液中加入过量的培养液可以阻止原生质体融合，因为过量培养液可以达到稀释的目的，进而可降低PEG浓度，使其失去融合作用。
（3）丙需要移栽到高浓度盐溶液的环境中才可以筛选出目的植株，因为目的植株需要具有耐盐碱的特征。
21．(1) DNA的半保留复制 耐高温的DNA聚合酶（或Taq酶） 引物
(2) 蛋白质空间结构较为复杂，改造困难 能生产出自然界不存在的蛋白质 蛋白质工程
(3) 农杆菌转化法 植物细胞的全能性
（1）PCR过程所依据的原理是DNA的半保留复制，该过程需要加入的酶是耐高温的DNA聚合酶（或Taq酶）。利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。
（2）该技术不直接改造Rubisco酶，而通过Rubisco酶基因进行改造，从而实现对Rubisco酶的改造，其原因是蛋白质空间结构较为复杂，改造困难。和传统基因工程技术相比较，定点突变最突出的优点是获得的产物一般是自然界中不存在的，PCR定点突变技术属于蛋白质工程的范畴。
（3）可利用定点突变的DNA构建基因表达载体，常用农杆菌转化法将基因表达载体导入植物细胞，将该细胞经植物组织培养技术培育成幼苗，从细胞水平分析所依据的原理是植物细胞的全能性。
22．(1)原代培养
(2) 早期胚胎 任何一种类型 所有组织和器官 个体
(3)补充细胞所需的未知的营养物质
(4) 破坏胚胎 免疫排斥反应
（1）从小鼠体内获得成纤维细胞后，对其进行的初次培养称为原代培养，对原代培养的细胞进行处理获得单细胞悬液后进行的再次培养称为传代培养。
（2）胚胎干细胞存在于早期胚胎中，如桑葚胚和囊胚期的内细胞团的细胞均具有发育的全能性，即具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官，甚至完整个体的潜能。
（3）配制培养液时，通常需要在合成培养基的基础上添加动物血清等一些天然成分，目的是补充细胞所需的未知的营养物质，保证动物细胞对营养的需求。
（4）iPS细胞的诱导成功具有重要的医学价值，又因为诱导过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应，所以科学家普遍认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞，即表现为利用价值很高。
23．(1) RNA聚合酶 限制酶切割位点、标记基因、复制原点等
(2) F2和R1或F1与R2
a链
(3) J-V5融合蛋白 不是
基因工程的关键步骤是构建基因表达载体，基因表达载体主要由启动子、目的基因、标记基因和终止子组成，其中标记基因用于筛选重组DNA分子，可以是四环素、氨苄青霉素等抗性基因，也可以是荧光蛋白基因或产物能显色的基因。
（1）基因表达载体的构建启动子是为了启动下游基因的“表达”，表达首先需要转录，因此RNA聚合酶识别和结合的部位才是转录的起始。作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点；②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来，图中甲有启动子和终止子等，因此质粒还需具备的结构有限制酶的切割位点、标记基因、复制原点等。
（2）据图甲可知，引物F2与R1或F1与R2结合部位包含J基因的碱基序列，因此推测为了确定J基因连接到质粒中且插入方向正确，进行PCR检测时，若仅用一对引物，应选择图甲中的引物F2和R1或F1与R2。b是模板链，而根据图上启动子和终止子的位置可知转录方向是图上从左向右，对应的模板链方向应该是3’-5'，非模板链（也就是a链）是5'-3'；考虑到DNA复制的方向是子链的5’-3'，引物基础上延伸的方向肯定是5'-3'，所以引物结合的单链其方向是3'-5'；图中F1是前引物，在左侧，所以其配对的单链是3’-5'的b链，故其序列应该与a链相应部分的序列相同。
（3）据图乙可知，用抗J蛋白抗体和抗V5抗体分别检测，均出现条带1，说明条带1是J-V5融合蛋白。抗J蛋白抗体检测出现条带2，抗V5抗体检测不出现条带2，说明条带2所检出的蛋白不是由重组质粒上的融合的J基因表达的。

展开更多......

收起↑