资源简介

乌鲁木齐市第101中学2025-026 学年第二学期期中考试
高二生物（问卷）
（卷面分值：100分；考试时间：90分钟）
注意事项：
1.本试卷为问答分离式试卷，由问卷和答题卡两部分组成，答案务必写或涂在答题卡指定位置上。
2.答卷前，请考生务必将自己的学校、姓名、准考证号等信息填写在答题卡的相应位置上。
一、单选题（共40小题，每小题1.5分，共60分）
1．变酸的酒表面有一层膜、泡菜坛表面有一层白膜、腐乳外面有一层致密的皮，它们分别是（ ）
A．醋酸菌、乳酸菌、毛霉菌丝
B．醋酸菌、毛霉菌丝、毛霉菌丝
C．醋酸菌、酵母菌、毛霉菌丝
D．酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
2．果酒和果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要，下列相关措施正确的是（ ）
A．酵母菌和醋酸杆菌均以有丝分裂的方式进行增殖
B．葡萄酒发酵过程中，每隔12h左右打开瓶盖一次放出CO2
C．在果醋发酵过程中，要关闭充气口，有利于醋酸菌的代谢
D．果酒发酵过程温度控制在18～30℃，果醋发酵温度控制在30～35℃
3．腐乳制作中，卤汤中酒的含量一般控制在12%左右，其作用不包括（　　）
A．抑制微生物生长
B．使腐乳具有独特香味
C．加快腐乳成熟速度
D．防止腐乳腐败变质
4．发酵食品是中国传统食品中一个重要的类别，承载了中华民族悠久的历史和丰富的文化内涵。请结合所学发酵知识和生活经验，指出下列不属于经发酵得到的食品是（ ）
A．泡菜 B．奶酒 C．果汁 D．味精
5．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是（　　）
A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂
B．以尿素等含氮有机物为氮源的培养基中加入酚红指示剂
C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂
D．以尿素等含氮有机物为氮源的培养基中加入双缩脲试剂
6．下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。下列叙述错误的是（　　）
成分 蛋白胨 蔗糖 乳糖 指示剂 琼脂
含量/g 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到 1000 mL
A．根据物理性质划分，该培养基属于固体培养基
B．可将蛋白胨换成尿素，筛选出土壤中的尿素分解菌
C．在培养大肠杆菌的过程中，需要对培养基和培养皿进行灭菌
D．为防止杂菌污染，还可以向培养基中添加适量抗生素
7．获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提。下列叙述正确的是（ ）
A．允许特定微生物生长、繁殖的培养基就是选择培养基
B．稀释涂布平板法和平板划线法均可用于微生物的分离和计数
C．微生物的纯培养操作顺序为：配制培养基→调pH→灭菌→接种→分离和培养等
D．接种后需立即倒置培养以避免皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染
8．微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是（　　）
A．①④⑤⑥ B．③④⑥⑦ C．①②⑦⑧ D．①③④⑤
9．微生物计数时，若一个平板上菌落数为300，稀释倍数为106，则每克样品中的活菌数约为（　　）
A．3×108 B．3×107
C．3×109 D．3×106
10．稀释涂布平板法统计菌落数时，统计的菌落数往往比活菌的实际数目（　　）
A．相等 B．偏多
C．偏少 D．无法确定
11．下列关于发酵工程的相关叙述，不正确的是（ ）
A．发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵
B．发酵产品若是微生物细胞本身，可采用过滤、沉淀等方法分离菌体获得产品
C．发酵生产的废弃液必须进行二次清洁或灭菌处理
D．利用发酵工程生产抗菌物质青霉素时，发酵罐不需要严格灭菌
12．下列不属于发酵工程菌种选育方法的是（　　）
A．自然选育 B．诱变育种 C．杂交育种 D．基因工程育种
13．科研人员研究了马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的影响，结果如图。相关叙述错误的是（　　）
A．脱毒苗的形成是基因突变的结果
B．培养脱毒苗时茎尖大小为0.27 mm左右最适宜
C．茎尖越小脱毒率越高，成苗率越低
D．培育脱毒苗的过程涉及细胞分裂和分化
14．在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要的条件是（　　）
①无菌环境 ②一定浓度的植物激素 ③适宜的温度④充足的光照 ⑤充足的养料
A．①③④⑤ B．②④⑤ C．①②③ D．①②③⑤
15．紫杉醇是存在于红豆杉体内的一种次生代谢物，具有高抗癌活性，被广泛用于乳腺癌等癌症的治疗。我国科学家经过多年研究，筛选出了高产紫杉醇的细胞。下列叙述正确的是（　　）
A．次生代谢物是植物生长所必需的一类小分子有机物
B．可从濒危植物红豆杉中直接提取紫杉醇，该方法会破坏植物资源但产量高
C．利用植物外植体获得高产紫杉醇细胞体现了植物细胞的全能性
D．细胞产物的工厂化生产不占用耕地，几乎不受季节和天气等的影响
16．驱蚊草散发的气味可在一定范围内驱除蚊子，驱蚊草是由天竺葵体细胞和香茅草体细胞杂交而得到的。下列关于驱蚊草培育的叙述，错误的是（　　）
A．培育方法属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍
B．培育手段是植物体细胞杂交，无愈伤组织和试管苗的形成
C．培育过程中要用纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或离心、电融合等方法
D．驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草的有性杂交而获得是因为它们之间存在生殖隔离
17．下列属于植物的快速繁殖技术的是（ ）
A．用兰花的芽尖组织培育兰花幼苗
B．水稻种子萌发并长成新个体
C．扦插的葡萄枝长成新个体
D．柳树芽发育成枝条
18．下列动物细胞培养过程中，属于原代培养的是（ ）
A．把组织分散成单个细胞的过程
B．哺乳动物细胞在培养液中的悬浮生长过程
C．组织分散成细胞后的初次培养过程
D．细胞分裂受阻后转入新培养液的培养过程
19．细胞复苏是动物细胞培养中的重要环节，CO2培养箱是不可或缺的关键设备。下列关于CO2培养箱为细胞生长提供条件的叙述，错误的是（　　）
A．适宜的温度
B．适宜的pH
C．5%CO2和95%O2的气体
D．无菌、无毒的空间
20．下列不属于胚胎干细胞特点的是（　　）
A．体积小、细胞核大、核仁明显
B．可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞
C．体外培养时可以增殖而不发生分化
D．不具有发育的全能性
21．植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是（　　）
A．动物细胞融合——生物膜的流动性
B．体细胞克隆猴的过程——动物细胞的全能性
C．胰蛋白酶处理动物组织——酶的专一性
D．紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞分裂
22．科学家利用尼帕病毒（NV）的结构蛋白X诱导小鼠并制作单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（　　）
A．制备单克隆抗体的过程中运用了细胞融合技术，融合后的杂交瘤细胞只需要经过1次克隆化培养和抗体检测
B．一个B淋巴细胞只能产生一种抗体，故体外培养任意单个B淋巴细胞即可获得针对NV的单克隆抗体
C．单克隆抗体可以准确识别抗原的细微差别且可以大量制备
D．将纯化的结构蛋白X注射到小鼠体内可直接获得纯的单克隆抗体
23．某夫妇中妻子患线粒体基因遗传病，丈夫正常。他们用正常女性捐献的卵母细胞，通过“三亲婴儿”的技术，生下了正常的孩子，其培育过程如下。据图分析，以下叙述错误的是（ ）

A．若这对夫妇正常生育，孩子患该病概率是100%
B．图中甲为患病妻子，乙为卵母细胞捐献者
C．培育过程运用了核移植技术和胚胎移植技术
D．三亲婴儿的染色体基因全部来自于这对夫妇
24．下列关于高等哺乳动物受精与胚胎发育的叙述，错误的是（ ）
A．原肠胚期有外、中、内三个胚层
B．精子和卵子的识别具有物种特异性
C．囊胚期的滋养层细胞具有发育的全能性
D．卵裂期细胞的体积随分裂次数增加而减小
25．下列关于体内受精过程的排序，正确的是（　　）
①受精卵卵裂开始 ②雄原核的形成 ③获能后的精子与卵子相遇并释放多种酶 ④精子穿越卵细胞膜外的结构 ⑤释放第二极体，雌原核的形成 ⑥两个原核靠近，核膜消失
A．③④②⑤⑥① B．③②④⑥①⑤
C．④⑤②③⑥① D．④⑤①②③⑥
26．下列生物工程技术中，不需要用到胚胎移植技术的是（　　）
A．利用成纤维细胞等培养出可供移植的皮肤
B．利用乳腺生物反应器生产珍贵的医用蛋白
C．利用本地黄牛快速大量繁殖引进的良种奶牛
D．利用试管婴儿技术帮助有生育困难的夫妇
27．我国科学家利用抗白叶病但易感稻瘟病和易感白叶病但抗稻瘟病的两个纯合水稻亲本杂交，选育出抗两种病的优良品种，为粮食安全做出了贡献。该育种方法的原理是（　　）
A．基因重组 B．基因突变
C．染色体结构变异 D．染色体数目变异
28．如图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是（　　）
A．DNA连接酶、限制性内切核酸酶、解旋酶
B．解旋酶、限制性内切核酸酶、DNA聚合酶
C．解旋酶、限制性内切核酸酶、DNA连接酶
D．限制性内切核酸酶、DNA连接酶、解旋酶
29．利用PCR方法克隆水通道蛋白基因P。基因P的部分序列如下图，请从①④中选择扩增P基因的合适引物组合是（　　）
①5′—GAAGTCCTCT—3′
②3′—TGCTGCTTGG—5′
③3′—CTTCAGGAGA—5'
④5′—ACGACGAACC—3′
A．①③ B．①② C．②③ D．②④
30．质粒是基因工程中常用的载体，其本质是细菌体内独立于拟核DNA之外的环状双链DNA分子。某质粒的结构如图所示（简化），包含启动子、终止子等结构。作为基因工程的载体，该质粒还必须具备的结构是（　　）
A．核糖体结合位点
B．标记基因
C．起始密码子
D．终止密码子
31．我国科学家将含有人凝血因子基因的DNA片段注射到羊的受精卵中，由该受精卵发育而成的羊所分泌的乳汁中含有人的凝血因子，可用于治疗血友病。下列叙述错误的是（ ）
A．这项研究说明人和羊共用一套遗传密码
B．人的基因是有遗传效应的DNA片段
C．该羊的乳汁中含有人的凝血因子基因
D．该羊能分泌人凝血因子的特性可能遗传给子代
32．下列关于基因工程的叙述，错误的是（　　）
A．基因工程可以打破物种间的生殖隔离
B．基因工程的原理是基因重组
C．基因工程能定向改造生物的遗传特性
D．基因工程属于细胞水平的范畴
33．如图为蛋白质工程的基本操作过程。下列相关叙述错误的是（ ）
A．I表示预期蛋白质的功能，是蛋白质工程的起始步骤
B．步骤①②表示基因的表达，步骤⑤需要用逆转录酶
C．蛋白质复杂的高级结构导致蛋白质工程的难度较大
D．通过图示过程研发生产的速效胰岛素类似物产品已在临床上应用
34．科研人员利用蛋白质工程技术对植物体内的抗旱蛋白进行改造，使其能更有效地调节细胞内的渗透压，从而提高植物在干旱环境下的保水能力。该技术直接改造的对象是（ ）
A．组成抗旱蛋白的氨基酸 B．抗旱蛋白
C．抗旱蛋白的mRNA D．抗旱蛋白基因
35．将某马铃薯品种的花药进行离体培养获得幼苗，该幼苗为（ ）
A．单倍体 B．二倍体 C．三倍体 D．四倍体
36．PCR过程中需要加入的物质有
①耐高温的DNA聚合酶
②解旋酶
③四种核糖核苷酸
④四种脱氧核苷酸
⑤引物
⑥模板DNA分子
A．①④⑤⑥ B．①③⑥ C．①②④⑤ D．②③⑤⑥
37．在重组DNA技术中，以下哪项不能作为将外源基因送入受体细胞的载体（　　）
A．腺病毒 B．质粒 C．噬菌体 D．大肠杆菌
38．限制酶SpeI和EcoRV的识别序列和切割位点如图所示。据图分析，SpeI、EcoRV切割相应的DNA片段后所产生的DNA片段末端分别是（　　）
A．平末端、黏性末端 B．黏性末端、黏性末端
C．黏性末端、平末端 D．平末端、平末端
39．下列物质的鉴定实验中所用试剂与现象对应关系正确的是（ ）
A．蛋白质-甲紫染料-紫色 B．DNA一二苯胺试剂一蓝色
C．CO 一重铬酸钾 （酸性） 一灰绿色 D．脂肪一斐林试剂一橘黄色
40．下列不属于利用基因工程技术生产药物的是（　　）
A．从酵母菌体内获得干扰素 B．从毛霉菌体内获得蛋白酶和脂肪酶
C．从大肠杆菌体内获得白细胞介素 D．从奶牛乳腺分泌的牛奶中获得人胰岛素
二、非选择题（共4小题，共40分）
41．以鲜苹果汁为原料利用发酵瓶制作果酒和果醋的过程如图1所示，请分析回答：
(1)图1中甲过程利用的微生物是______，其代谢类型为异养______。甲过程发酵温度控制在18~30℃，经过10~12d，样液中是否含有酒精，可以用______来检验。
(2)若利用图2所示装置制作果醋，制作过程中充气口应______（填“打开”或“关闭”）。
(3)利用苹果酒制作苹果醋的反应简式是______。
42．科学家将番茄（2N）和马铃薯（4N）利用如图技术得到“番茄-马铃薯”植株，回答下列问题：
(1)获得a，b选用的酶为______、______。
(2)图示技术的名称是______；过程②是指______；由d能培育出完整的植株，其依据的原理是______。
(3)过程③成功的标志是______，与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为______。
(4)诱导f中植株生根的过程中，培养基中生长素与细胞分裂素的比值较过程④______（填“高”或“低”）；若番茄细胞内含m条染色体、马铃薯细胞内含 n条染色体，则“番茄-马铃薯”杂种植株的体细胞内含_______条染色体，最终获得的“番茄-马铃薯”属于______倍体植株。
43．2024年2月25日，世界首例克隆藏羊“青青”出生，这也是诞生在青藏高原的首只克隆动物。科研人员选择3只优良欧拉型良种公羊和1只母羊作为供体。克隆技术只需要将一个体细胞注入一个去核的卵母细胞内，通过电融合和化学激活等方法得到重构胚。体外培养重构胚发育出早期胚胎后，再将其移植到受体的体内，发育足月就获得了克隆动物。回答下列问题：
(1)克隆藏羊的获得属于______繁殖，该过程需要先获得卵母细胞，采集的卵母细胞在体外培养到______期，然后将卵母细胞去核，目前、动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是______。卵母细胞去“核”，其实是指去除______。
A.细胞核
B.纺锤体
C.中心体-染色体复合物
D.纺锤体-染色体复合物
(2)在进行胚胎移植前，需要对代孕母羊进行______处理，通过______等方法激活重构胚，使其完成______和发育进程。
(3)体外培养重构胚发育出早期胚胎后，再将其移植到受体母羊体内，胚胎移植的实质是______。
(4)若要对早期胚胎进行性别鉴定、应选取______细胞，理由是______。
44．普通大豆含铁量极低，研究人员通过改良相关基因，培育出了铁含量比普通大豆明显升高的转基因大豆。如图为改良基因及Ti质粒的示意图，该质粒含有氨苄青霉素抗性基因、LacZ基因及一些酶切位点。LacZ基因编码产生的酶能分解β—半乳糖苷，产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。回答下列问题：
(1)将改良基因和农杆菌的 Ti 质粒连接时，需用限制性内切核酸酶______对 Ti质粒进行切割，选用上述酶进行切割的理由是______。
(2)将重组 Ti质粒转入农杆菌时，可以用 Ca2+处理农杆菌，使细胞处于一种______的生理状态，从而易于重组 Ti质粒导入。
(3)在含氨苄青霉素的培养基中能够生长的农杆菌细胞中不一定含有改良基因，若含有改良基因重组质粒的农杆菌菌落呈______颜色。欲对转基因大豆个体水平检测，需要检测转基因大豆的______。
1．C
醋酸菌是好氧菌，在氧气、糖源充足时，醋酸菌能将糖分解成醋酸，糖源不足时可以将乙醇转化成乙醛再转化成醋酸。
在氧气充足的条件下，醋酸菌能将乙醇转化成醋酸，故变酸的酒表面的一层菌膜，主要与醋酸菌有关；在泡菜制作过程中，泡菜发酵液的营养丰富，其表面往往含有适量的氧气，适合酵母菌生长繁殖，会在泡菜坛液面的形成一层白膜；腐乳表面的一层致密的皮是由毛霉的匍匐菌丝形成的，它能形成腐乳的体，使腐乳成型，C正确。
故选C。
2．D
（1）酵母菌为真核生物，酒精发酵的细胞代谢方式为无氧呼吸，发酵的最适温度为18~30℃；
（2）醋酸杆菌为原核生物，果醋发酵的细胞代谢方式为有氧呼吸，发酵的最适温度为30~35℃。
A、酵母菌为真核生物，增殖方式有芽殖、裂殖、芽裂，醋酸杆菌为原核生物，增殖方式为二分裂，A错误；
B、葡萄酒发酵过程中每隔12小时左右需要拧松瓶盖一次放出二氧化碳，不能拧开，拧开瓶盖会使空气中的杂菌落入发酵瓶影响发酵，B错误；
C、果醋发酵过程中醋酸菌的代谢方式为有氧呼吸，应打开瓶盖并在瓶口盖上一层纱布，C错误；
D、果酒发酵过程温度控制在18～30℃，果醋发酵温度控制在30～35℃，D正确。
故选D。
3．C
A、酒精可使微生物的蛋白质发生变性，能抑制杂菌等微生物的生长，A正确；
B、酒精可与发酵过程中产生的有机酸发生酯化反应，生成具有芳香气味的酯类物质，使腐乳具有独特香味，B正确；
C、酒精会抑制参与腐乳发酵的微生物的活性，不仅不会加快腐乳成熟速度，若酒精含量过高还会延长腐乳的成熟时间，C错误；
D、酒精可抑制杂菌的生长繁殖，避免杂菌污染腐乳，从而防止腐乳腐败变质，D正确。
4．C
细菌、真菌等微生物能引起发酵现象。发酵食品是指人们利用有益微生物加工制造的一类食品。
A、泡菜制作的原理是利用乳酸菌无氧呼吸产生乳酸，A不符合题意；
B、奶酒是利用酵母菌发酵产生的，B不符合题意；
C、果汁是通过果肉破碎来的，均未经过微生物的发酵作用，C符合题意；
D、味精利用谷氨酸生产菌（棒状杆菌）发酵制成的，D不符合题意。
故选C。
5．A
在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高，酚红指示剂将变红，因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，即可初步鉴定所培养的细菌是否可以分解尿素。综上所述，A正确，BCD错误。
故选A。
6．D
A、培养基中添加琼脂作为凝固剂，物理性质为固体培养基，A正确；
B、将蛋白胨（氮源）换成尿素后，若其他成分不含氮源，则成为选择培养基，可筛选尿素分解菌，B正确；
C、培养基需高压蒸汽灭菌，培养皿需干热灭菌，避免杂菌污染，C正确；
D、普通大肠杆菌无抗生素抗性，添加抗生素会抑制其生长，无法达到培养目的，D错误。
故选D。
7．C
A、选择培养基是允许特定微生物生长，同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基，A错误；
B、稀释涂布平板法可用于微生物的分离和计数（通过菌落数计算活菌数），但平板划线法仅用于微生物的分离（纯化菌种），无法精确计数（因菌落重叠或未分散），B错误；
C、微生物纯培养的正确操作顺序应为：配制培养基→调pH→灭菌→接种→培养。若先灭菌后调pH，会破坏培养基的无菌状态（调pH需在灭菌前完成），C正确；
D、接种后待菌液被培养基吸收后，再将平板倒置，不是立即倒置，D错误。
故选C。
8．D
②不能完全握住棉塞，⑥接种时培养皿不能完全打开，只需打开一条缝即可，⑦接种环划线时首尾不能相连，⑧在恒温培养箱中培养时应将平板倒置，其余操作均正确，ABC错误，D正确。
故选D。
9．C
稀释涂布平板法计数活菌的公式为： 每克样品活菌数 =（平板菌落数 ÷ 涂布接种的稀释液体积）× 稀释倍数 。微生物计数实验中，涂布平板时所用稀释液的体积是0.1mL，代入数据计算：(300÷0.1)×106=3×109，C正确。
10．C
若两个或多个活菌相互粘连，平板上最终只能长出一个菌落，因此统计的菌落数通常低于活菌实际数目，C正确，ABD错误。
11．D
A、发酵工程的流程包括菌种选育、扩大培养、培养基配制与灭菌、接种、发酵罐内发酵、产物分离提纯，其中发酵罐内的发酵是微生物代谢合成目标产物的核心阶段，是发酵工程的中心环节，A正确；
B、若发酵产品为微生物细胞本身（如单细胞蛋白），可通过过滤、沉淀等物理方法将菌体从发酵液中分离得到产品，B正确；
C、发酵生产的废弃液中可能残留有害微生物、代谢废物等，直接排放会污染环境，因此必须进行二次清洁或灭菌处理后再排放，C正确；
D、利用发酵工程生产青霉素时，若发酵罐灭菌不严格混入杂菌，杂菌会与生产菌种青霉竞争营养，部分杂菌还可分泌青霉素酶分解青霉素，导致产量大幅下降，因此发酵罐需要严格灭菌，D错误。
12．C
A、自然选育是直接从自然界采集的菌种中筛选符合生产要求的菌株，是发酵工程菌种选育的常规基础方法，不符合题意，A错误；
B、诱变育种通过物理、化学诱变剂诱导菌种发生基因突变，筛选出高产、抗逆性强的优良突变株，是发酵工程常用的菌种选育方法，不符合题意，B错误；
C、杂交育种依赖有性生殖过程实现基因重组，而发酵工程所用菌种多为微生物，绝大多数微生物无法进行有性生殖，因此杂交育种不属于发酵工程菌种的选育方法，符合题意，C正确；
D、基因工程育种可定向改造菌种的遗传性状，获得能生产特定产物的工程菌，是现代发酵工程常用的菌种选育方法，不符合题意，D错误。
13．A
A、马铃薯茎尖病毒极少甚至无病毒，因此可利用马铃薯茎尖进行组织培养形成脱毒苗，所依据的原理是细胞的全能性，A错误；
B、在茎尖外植体大小为0.27 mm时，脱毒率和成苗率均较高，因此培养马铃薯脱毒苗时茎尖外植体的适宜大小为0.27 mm左右，B正确；
C、据图知茎尖越小脱毒率越高，成苗率越低，C正确；
D、培育脱毒苗的植物组织培养过程中，涉及细胞分裂（增加细胞数量）和细胞分化（形成不同组织、器官，发育为完整植株），D正确。
14．D
植物组织培养过程包括脱分化和再分化两个重要的步骤．植物组织培养需要一定的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。
①植物组织培养过程需要无菌操作，所以需要消毒灭菌，①正确；
②脱分化形成愈伤组织的培养基需要一定浓度的植物激素，主要是生长素和细胞分裂素，②正确；
③植物组织培养过程需要适宜的温度，③正确；
④脱分化形成愈伤组织时，需要避光，否则会形成维管组织，④错误；
⑤植物组织培养需要充足的养料，⑤正确。
故选D。
15．D
A、次生代谢物不是植物生长发育所必需的物质，初生代谢物才是植物生长必需的小分子有机物，A错误；
B、从濒危红豆杉中直接提取紫杉醇会破坏植物资源，且天然红豆杉中紫杉醇含量极低，产量很低，B错误；
C、细胞全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体或分化为各种细胞的潜能，利用外植体获得高产紫杉醇细胞并未体现上述过程，不能体现植物细胞的全能性，C错误；
D、细胞产物的工厂化生产是在室内可控的生物反应器中培养植物细胞，不占用耕地，几乎不受季节、天气等外界环境因素的影响，D正确。
16．B
植物体细胞杂交技术的意义：在克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破。
A、培育方法属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍，是培育作物新品种方面所取得的重大突破，A正确；
B、驱蚊草是通过天竺葵体细胞和香茅草体细胞杂交而得到的，在此技术中仍需要利用植物组织培养技术，有愈伤组织和试管苗的形成过程，B错误；
C、植物体细胞杂交培育过程中，要用纤维素酶、果胶酶去细胞壁，用PEG等试剂或离心、电融合等方法促进原生质融合，C正确；
D、天竺葵和香茅草是两种物种，具有生殖隔离，不能通过有性杂交而获得驱蚊草，D正确。
故选B。
17．A
人们形象的把用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术，叫做植物的微型繁殖技术，也叫快速繁殖技术。
A、茎尖不带病毒，故采用茎尖组织培养技术来脱毒苗，A正确；
B、水稻种子萌发并长成新个体属于自然生长过程，不需要植物组织培养技术，B错误；
C、扦插的葡萄枝长成新个体属于营养繁殖，不需要植物组织培养技术，C错误；
D、柳树芽发育成枝条，为芽的发育过程，不需要植物组织培养技术，D错误。
故选A。
18．C
动物细胞培养的过程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
动物细胞培养中，原代培养是指将组织分散为单个细胞后的初次培养阶段，直至细胞增殖到相互接触（接触抑制）为止，C正确，ABD错误。
故选C。
19．C
A、动物细胞生长需要适宜的温度，CO 培养箱可维持与动物体温相近的适宜温度，A正确；
B、CO 培养箱中的CO 可以与培养液中的缓冲物质作用，维持培养液适宜的pH，B正确；
C、动物细胞培养的气体环境为5%CO 和95%的空气，而非95%O ，C错误；
D、动物细胞培养需要无菌、无毒的环境避免杂菌污染，CO 培养箱可提供该环境，D正确。
20．D
胚胎干细胞（1）哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞，来源于早期胚胎或从原始性腺中分离出来。（2）特点：具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外，在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存，也可进行遗传改造。
A、胚胎干细胞具有胚胎细胞的特性，在形态上表现为体积小，细胞核大，核仁明显，A正确；
B、胚胎干细胞分化程度低，可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞，B正确；
C、在体外培养的条件下，可以增殖而不发生分化，可进行冷冻保存和遗传改造，C正确；
D、在功能上，具有发育的全能性，D错误。
故选D。
本题考查胚胎干细胞的相关知识，要求考生识记胚胎干细胞的来源、特点及相关应用，能结合所学的知识做出准确的判断，属于考纲识记层次的考查。
21．B
1、植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。2、植物体细胞杂交的原理是植物细胞具有全能性和植物细胞膜具有一定的流动性。3、动物细胞培养的原理是细胞增殖。4、动物细胞融合的原理是细胞膜具有一定的流动性。
A、动物细胞融合技术依赖于细胞膜的流动性，A正确；
B、体细胞克隆猴通过核移植技术实现，其原理是动物细胞核的全能性，而非整个细胞的全能性，B错误；
C、胰蛋白酶分解细胞间质的蛋白质（如胶原蛋白），利用酶的专一性原理，C正确；
D、紫草细胞培养（植物细胞培养）和杂交瘤细胞培养均需细胞分裂实现增殖，D正确。
故选B。
22．C
A、制备单克隆抗体时，融合得到的杂交瘤细胞需要经过多次克隆化培养和抗体检测，才能筛选出能分泌所需特异性抗体的杂交瘤细胞，并非仅1次筛选，A错误；
B、只有经过NV抗原免疫的B淋巴细胞才能产生针对NV的抗体，且B淋巴细胞高度分化，体外培养时不能无限增殖，无法通过培养单个B淋巴细胞大量获得单克隆抗体，B错误；
C、单克隆抗体具有特异性强的特点，可准确识别抗原的细微差别，同时可通过体外培养杂交瘤细胞实现大量制备，C正确；
D、将纯化的结构蛋白X注射到小鼠体内，小鼠会产生多种免疫过的B淋巴细胞，分泌多种针对X的抗体，获得的是多克隆抗体，并非纯的单克隆抗体，D错误。
23．B
由题干信息：夫妇中妻子患线粒体基因遗传病，丈夫正常，他们用正常女性捐献的卵母细胞，通过“三亲婴儿”的技术生下了正常的孩子可知，志愿者提供去核的卵母细胞、妻子提供丽母细胞的细胞核，丈夫提供正常的精子。
A、夫妇中妻子患线粒体基因遗传病，属于细胞质遗传，若这对夫妇正常生育，孩子患该病概率是100%，A正确；
B、由图示可知，图中乙提供细胞核，为患病妻子，甲提供去核的卵母细胞，为卵母细胞捐献者，B错误；
C、由图示可知，培育过程运用了核移植技术和胚胎移植技术，C正确；
D、三亲婴儿的染色体基因是由精子和卵细胞的细胞核融合而来，全部来自于这对夫妇，D正确。
故选B。
24．C
精卵受精过程首先需经精、卵细胞相互识别，之后才能发生顶体反应、透明带反应和卵黄膜封闭作用。动物受精卵在卵裂过程中，卵裂球体积不增加，所以卵裂球细胞的体积随分裂次数的增加而减小。囊胚的滋养层细胞已经发生分化，将来只能发育成胎盘和胎膜细胞，而囊胚中的内细胞团具有发育的全能性。
A、原肠胚期通过细胞分化形成外胚层、中胚层和内胚层，A正确；
B、精子和卵子细胞膜表面的糖蛋白实现特异性识别，保证同种物种结合，B正确；
C、滋养层细胞将发育为胎膜和胎盘，而内细胞团才具有发育全能性，C错误；
D、卵裂期细胞分裂使数目增多，但胚胎总体积不变，单个细胞体积减小，D正确。
故选C。
25．A
受精过程为：③获能后的精子与卵子相遇并释放多种酶→④精子穿越卵细胞膜外的结构→②雄原核的形成→⑤卵子完成减数第二次分裂并释放第二极体，雌原核的形成→⑥两个原核靠近，核膜消失→①受精卵卵裂开始，故过程为③④②⑤⑥①，A正确，BCD错误。
26．A
A、利用成纤维细胞培养可供移植的皮肤，仅涉及动物细胞培养技术，只需获得皮肤组织，无需发育为完整动物个体，不需要胚胎移植，A符合题意；
B、构建乳腺生物反应器需要先获得导入药用蛋白基因的早期胚胎，再通过胚胎移植将胚胎移入代孕母体内发育为转基因动物，需要用到胚胎移植，B不符合题意；
C、快速大量繁殖良种奶牛，需要将良种奶牛的早期胚胎移植到本地代孕黄牛体内发育，需要用到胚胎移植，C不符合题意；
D、试管婴儿技术需要将体外受精得到的早期胚胎，移植到母体子宫内继续发育，需要用到胚胎移植，D不符合题意。
27．A
利用抗白叶病但易感稻瘟病和易感白叶病但抗稻瘟病的两个纯合水稻亲本杂交，选育出抗两种病的优良品种，所应用的育种方法为杂交育种，其原理为基因重组，A符合题意。
故选A。
28．C
①处为氢键，是解旋酶的作用部位；②处为磷酸二酯键，是限制性内切核酸酶的作用部位；③处为两个DNA片段的缺口，是DNA连接酶的作用部位，C正确，ABD错误。
29．B
利用PCR技术扩增目的基因的原理是DNA复制，PCR过程需要两种引物，能分别与目的基因两条链的3＇端通过碱基互补配对结合。
在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端向3'端延伸的， PCR过程需要两种引物，能分别与目的基因两条链的3'端通过碱基互补配对结合，故引物分别为①②，不是③④，B正确，ACD错误。
故选B。
30．B
质粒含启动子和终止子，还需具备标记基因，以方便筛选；核糖体结合位点、起始密码子、终止密码子均位于mRNA上，不属于质粒载体的必备结构，B正确，ACD错误。
故选B。
31．C
A、遗传密码在生物界具有通用性，这是外源基因能在不同物种中表达的基础，A正确；
B、基因是具有遗传效应的DNA片段，这是基因的本质，B正确；
C、乳汁中的凝血因子是基因表达的产物（蛋白质），而基因位于羊的体细胞核DNA中，不会直接分泌到乳汁中，C错误；
D、若外源基因成功整合到羊的生殖细胞中，该性状可通过生殖细胞遗传给子代，D正确；
故选C。
32．D
A、基因工程可将一种生物的特定基因转入另一种生物体内实现表达，克服了远缘杂交不亲和的障碍，打破了物种间的生殖隔离，A正确；
B、基因工程的本质是将不同来源的基因进行拼接重组，导入受体细胞后稳定表达，原理是基因重组，B正确；
C、基因工程可按照人类的意愿定向选择目的基因，定向改造生物的遗传特性，获得人类需要的性状，C正确；
D、基因工程的操作对象是DNA分子，属于分子水平的操作范畴，不属于细胞水平，D错误。
33．B
A、I表示预期蛋白质的功能，是蛋白质工程的起始步骤，A正确；
B、步骤①②表示基因的表达，步骤⑤是直接通过相应的脱氧核苷酸序列改造或合成基因，不需要逆转录酶，B错误；
C、蛋白质复杂的高级结构导致蛋白质工程的难度较大，C正确；
D、通过图示过程研发生产的速效胰岛素类似物产品已在临床上应用，D正确。
故选B。
34．D
蛋白质工程的基本思路：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变对应的脱氧核苷酸序列或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。
A、组成抗旱蛋白的氨基酸是蛋白质的组成单位，但蛋白质工程并非直接改变氨基酸，而是通过基因修饰间接改变氨基酸序列，A不符合题意；
B、抗旱蛋白是最终产物，但直接改造蛋白质无法遗传且无法持续合成，B不符合题意；
C、mRNA是翻译的模板，但修改mRNA仅影响单次翻译，无法稳定遗传，C不符合题意；
D、抗旱蛋白基因是蛋白质工程的直接改造对象，通过修改基因结构可指导合成改造后的蛋白质，D符合题意。
故选D。
35．A
单倍体概念：体细胞染色体组数等于本物种配子染色体组数的个体。
将某马铃薯品种的花药进行离体培养获得幼苗，该幼苗体细胞内只含有本物种配子染色体组数，为单倍体，A正确，BCD错误。
故选A。
36．A
①PCR反应需要耐高温的DNA聚合酶催化延伸过程，①正确；
②PCR反应过程中通过高温变性，不需要DNA解旋酶，②错误；
③④PCR反应需要以四种脱氧核苷酸为原料，③错误，④正确；
⑤PCR反应需一对引物，⑤正确； ⑥PCR反应需要模板DNA，⑥正确。
故选A。
37．D
为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选；③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。
常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒等，基因工程中所用的运载体是在天然载体的基础上改造的，D不符合题意，ABC符合题意。
故选D。
38．C
限制酶在识别序列中轴线两侧将DNA分子的两条单链切开时，形成的是黏性末端；限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的平整的切口，形成平末端。
限制酶在识别序列中轴线两侧将DNA分子的两条单链切开时，形成的是黏性末端；限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的平整的切口，形成平末端。分析题图可知，SpeI切割后形成黏性末端，EcoRV切割后形成平末端，C正确，ABD错误。
故选C。
39．B
甲紫用于将染色体染色，斐林试剂用于鉴定还原糖。
A、蛋白质用双缩脲试剂检测出现紫色反应，A错误；
B、DNA与二苯胺试剂在沸水浴加热的情况下出现蓝色反应，B正确；
C、酒精与酸性重铬酸钾反应出现灰绿色，C错误；
D、脂肪可被苏丹 III染成橘黄色，D错误。
故选B。
40．B
基因工程药物（从化学成分上分析都应该是蛋白质）：（1）来源：转基因工程菌。工程菌是指采用基因工程的方法，使外源基因得到高效率表达的菌株类细胞系。（2）成果：人胰岛素、细胞因子、抗体、疫苗、生长激素、干扰素等。
ACD、利用基因工程技术可制取药物，如使外源干扰素基因在酵母菌体内表达获得干扰素，从从大肠杆菌体内获得白细胞介素和奶牛乳腺分泌的牛奶中获得人胰岛素，ACD不符合题意；
B、从毛霉菌体内获得蛋白酶和脂肪酶不属于基因工程获得生产药物，B符合题意。
故选B。
41．(1) 酵母菌 兼性厌氧型 （酸性）重铬酸钾溶液
(2)打开
(3)C2H5OH+O2CH3COOH+H2O
（1）参与果酒制作的微生物是酵母菌，所以图1中甲过程利用的微生物是酵母菌，酵母菌的代谢类型为异养兼性厌氧型。检验样液中是否含有酒精，可用（酸性）重铬酸钾溶液，在酸性条件下，酒精与重铬酸钾反应会呈现灰绿色。
（2）参与果醋制作的微生物是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，所以利用图2所示装置制作果醋时，制作过程中充气口应打开，以保证氧气供应。
（3）利用苹果酒制作苹果醋的反应简式是C2H5OH+O2CH3COOH+H2O。
42．(1) 纤维素酶 果胶酶
(2) 植物体细胞杂交技术 原生质体融合 植物细胞的全能性
(3) 杂种细胞再生出细胞壁 高尔基体
(4) 高 m+n 六
（1）a和b为原生质体，获得a、b需要去除细胞壁，植物细胞壁的组成成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性原理，应该选用的酶为纤维素酶和果胶酶。
（2）图示过程是将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术，该技术名称是植物体细胞杂交技术；过程②是指原生质体融合；由d（杂种细胞）培育成完整的植株，其依据的原理是植物细胞具有全能性。
（3）③过程成功的标志是杂种细胞再生出细胞壁，与过程③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为高尔基体。
（4）植物组织培养时，培养基中生长素/细胞分裂素＞1，有利于诱导生根；生长素/细胞分裂素＜1，有利于诱导生芽；生长素/细胞分裂素≈1，有利于诱导产生愈伤组织。④过程是脱分化产生愈伤组织的过程，诱导f中植株生根的过程中，培养基中生长素与细胞分裂素的比值较④过程高。通过植物体细胞杂交技术获得的“番茄-马铃薯”杂种植株中既含有番茄的染色体，也含有马铃薯的染色体，即含有（m+n）条染色体。番茄是二倍体生物，马铃薯是四倍体生物，所以“番茄-马铃薯”中含有六个染色体组，属于六倍体植物。
43．(1) 无性 减数第二次分裂中##MII中 显微操作去核法 D（纺锤体-染色体复合物）
(2) 同期发情 电脉冲##钙离子载体 细胞分裂
(3)早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
(4) 滋养层 不会影响胚胎的遗传物质和后续发育
（1）克隆技术只需要将一个体细胞注入一个去核的卵母细胞内，属于无性生殖，采集的卵母细胞需要培养到减数第二次分裂中（MII中）期才能进行核移植。目前动物细胞核移植技术中普遍使用的去核方法是显微操作去核法，采集的卵母细胞在体外培养到MⅡ期，对该时期的卵母细胞去“核”其实是指去除纺锤体-染色体复合物，D正确，ABC错误。
（2）获得重构胚后，在进行胚胎移植前，需要对代孕母羊进行同期发情处理，给胚胎发育提供相同的生理条件。通过电脉冲（或钙离子载体等）等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程。
（3）胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。
（4）若要对早期胚胎进行性别鉴定，应取样滋养层细胞，因为滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，不会影响胚胎的遗传物质和后续发育。
44．(1) Xma Ⅰ和Bgl Ⅱ 使用这两种酶切割质粒可产生与改良基因两端相同的黏性末端
(2)能吸收周围环境中DNA分子
(3) 白色 含铁量
（1）根据改良基因两侧的黏性末端可知，将改良基因和农杆菌的Ti质粒连接时，需用限制性内切核酸酶Xma Ⅰ和Bgl Ⅱ对农杆菌的Ti质粒进行切割，选用上述酶进行切割质粒可产生与改良基因两端相同的黏性末端。
（2）将重组Ti质粒转入农杆菌时，可以用Ca2+处理农杆菌，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，从而易于重组Ti质粒导入。
（3）在含氨苄青霉素的培养基中能够生长的农杆菌细胞中不一定含有改良基因，原因是若农杆菌细胞中导入的是未携带改良基因的质粒，其只要含氨苄青霉素抗性基因，也能在含氨苄青霉素的培养基中生长。由题意可知，LacZ基因编码产生的酶能分解β-半乳糖苷，产生蓝色物质，使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。重组质粒上的LacZ基因被破坏，不能产生相关酶，因此菌落为白色。转基因大豆为铁含量比普通大豆明显升高的大豆，因此欲对转基因大豆个体水平检测，需要检测转基因大豆的含铁量。

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