资源简介

咸阳市实验中学2025—2026学年度第二学期期中质量检测
高二生物学
注意事项：
1．本试卷共8页，满分100分，时间75分钟。
2．答卷前，考生务必将自己的姓名、班级和准考证号填写在答题卡上。
3．回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。涂写在本试卷上无效。
4．作答非选择题时，将答案书写在答题卡上，书写在本试卷上无效。
5．考试结束后，监考员将答题卡按顺序收回，装袋整理；试卷不回收。
一、选择题：本题共20小题，每小题2分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。
1．千百年来，果酒、果醋、腐乳和泡菜等传统发酵食品不仅丰富了百姓餐桌，更成为中华饮食文明的重要符号。下列相关叙述正确的是（　　）
A．利用葡萄制作果酒时，先去除枝梗和腐烂的籽粒，再用清水冲洗1～2次，沥干
B．在果醋发酵时，发酵温度应控制在18～30℃，时间为7～8天
C．腐乳制作过程中，经过微生物的发酵，豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸
D．泡菜发酵时，亚硝酸盐含量先下降后上升，应在发酵早期食用
2．“千里归来不问酒，一碗浆水解乡愁”。浆水是我国西北地区的传统自然发酵食品，以芹菜、白菜等蔬菜为原料，经乳酸菌等微生物发酵制成，具体制作流程如下图所示。下列关于浆水发酵的叙述正确的是（　　）
A．蔬菜、器具“热烫处理”的目的是杀死表面所有的杂菌以降低腐败风险
B．“面汤”可以为乳酸菌发酵提供碳源，从而促进乳酸菌的无丝分裂
C．“盖上盖子”为发酵过程提供密封条件，主要目的是防止其他微生物的污染
D．“加浆水引子”可增加发酵菌种的含量，以缩短浆水制作时间
3．为高效检测抗菌剂的抗菌效果，研究人员构建了能够表达外源荧光素酶的重组菌Q，将其接种到有足量荧光素的液体培养基中，一段时间后添加待测抗菌剂，定时检测培养液的荧光强度。下列有关该实验的叙述，正确的是（　　）
A．培养基中只需要添加水、碳源、氮源和无机盐
B．实验过程中所用的培养基是一种选择培养基
C．在重组菌Q胞内的荧光素酶可催化荧光素水解
D．培养液的荧光强度变化可作为抗菌效果的判断依据
4．在酵母菌的纯培养实验中，平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确的是（　　）
A．②③④⑤⑧ B．①③④⑤⑧
C．①②⑤⑥⑦ D．①②③⑥⑦
5．下列有关无菌技术的说法，其中正确的有几项（　　）
①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物
②煮沸消毒法中100℃煮沸5～6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子
③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，所以不能在常温长期保存
④用紫外线消毒前，适量喷洒苯酚或煤酚皂溶液，可以加强消毒效果
⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌
⑥培养皿、玻璃吸管可用干热灭菌法灭菌
A．2项 B．3项 C．4项 D．5项
6．为筛选高效降解原油的细菌，科研小组从油田污泥中取样，按以下流程操作：①称取污泥10 g加入90 mL无菌水，振荡摇匀制成菌悬液；②将菌悬液进行10倍梯度稀释至10 6；③取10 4、10 5、10 6稀释液各0.1 mL，分别涂布于以原油为唯一碳源的培养基上；④在37℃条件下培养48小时后，统计10 5稀释组三个平板的菌落数为168、175、182.下列对实验操作的判断及原因分析，正确的是（　　）
A．步骤①中无菌水需添加原油——保证目的菌正常生长
B．步骤②每次稀释需更换移液管——仅避免杂菌污染
C．步骤③应增加10 3稀释组——10 5组菌落数符合计数要求
D．步骤④需对三个平板数据取平均值——减少实验偶然误差
7．某谷氨酸发酵工厂遭遇专性噬菌体污染，技术人员采用双层平板法测定该噬菌体浓度：先在无菌培养皿中倒入含2%琼脂的培养基凝固成底层平板，再将含1%琼脂的培养基与敏感指示菌、待测噬菌体稀释悬液混匀后铺成上层平板（见下图）。恒温培养后，可根据噬菌斑数目计算原液中噬菌体数量。下列叙述正确的是（　　）
A．该实验中选用的敏感指示菌为大肠杆菌
B．上下层培养基营养成分应保持一致
C．上层培养基琼脂浓度越低越利于计数
D．对生产空间的灭菌即可彻底杜绝噬菌体污染
8．与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量均明显提高，在食品工业、医药工业、农牧业等许多领域得到了广泛的应用。下列有关发酵工程和传统发酵技术的描述，错误的是（　　）
A．传统发酵制作食醋时，需将发酵容器置于通风处并定期搅拌，以促进醋酸菌发酵产生醋酸
B．传统发酵以混合菌种发酵为主，发酵工程中所用菌种大多是单一菌种
C．发酵工程的发酵环节中，发酵条件变化会影响微生物的生长繁殖，不会影响生物的代谢途径
D．利用发酵工程生产的微生物农药，可利用微生物或其代谢物防治病虫害，属于生物防治
9．沙棘汁富含维生素C和黄酮类物质，是天然抗氧化剂。桦树液中则含有桦木酸等成分，两者混合发酵制酒，不仅能延长保质期，还增强了保健功能。桦树液沙棘复合酒发酵工艺加工流程及优化结果如图所示，下列叙述正确的是（ ）
A．发酵工程的中心环节是灭菌，经过严格灭菌才能保证产品品质
B．若糖度过高会抑制酵母菌的生长，可通过添加适量纯净水调节
C．接种后的罐内发酵过程应保持严格的无氧环境，从而进行充分的酒精发酵
D．发酵结束后还可从酵母菌中提取单细胞蛋白作为食品添加剂
10．潘灯玉露是最具代表性的软叶类多肉植物，因其叶片晶莹剔透等特点，深受广大植物爱好者青睐。但因潘灯玉露生长速度缓慢、分生能力有限，难以在短时间内大量取得无性繁殖材料。为进一步满足市场对潘灯玉露的大量需求，某实验团队利用植物组织培养技术对其进行繁殖，下表为外源激素对脱分化的影响的相关数据。下列叙述正确的是（　　）
剂量：mg/L NAA＝0.10
6-BA＝0.00 6-BA＝0.05 6-BA＝0.10 6-BA＝0.50 6-BA＝1.00
诱导脱分化率/% 6.7 26.7 53.3 66.7 40.0
A．选取无病虫害的潘灯玉露叶片为外植体，对其和其他实验用具进行灭菌
B．再分化需给予适当光照并按需调整培养基中植物激素等物质的用量
C．配制0.10mg/LNAA＋0.10mg/L6-BA的MS培养基诱导脱分化的效果最好
D．该技术为植物细胞培养，其依据的原理是植物细胞的全能性
11．为实现多肉植物的规模化生产，科研人员开展了如下研究，下列叙述正确的是（　　）
A．过程①宜选择成熟叶片，分别用次氯酸钠和体积分数为70%的酒精浸泡30s
B．过程②应避光培养，以利于愈伤组织的形成与生长
C．过程③使用同一种培养基，就可以满足不同阶段试管苗对营养的需求
D．过程④炼苗时需要在无菌条件下进行，以提高幼苗成活率
12．植物体细胞杂交使远缘杂交不亲和的植物有可能实现遗传物质重组，创造和培养植物新品种。科研人员为改良猕猴桃品质特性，通过PEG融合，进行了中华猕猴桃与美味猕猴桃种间体细胞杂交并成功获得了杂种植株。下列叙述正确的是（　　）
A．过程a采用酶解法去除细胞壁，且处理时间相同
B．过程b除了使用物理法、化学法，还可以使用灭活病毒诱导原生质体融合
C．过程d、e的培养基中均需要添加生长素和细胞分裂素
D．过程f获得的杂种植株同时具有中华猕猴桃与美味猕猴桃的优良性状
13．花椰菜（2n＝18）易患黑腐病，造成减产，黑芥（2n＝16）对黑腐病有较好的抗性。研究者诱导花椰菜原生质体与紫外线处理的黑芥原生质体融合，得到染色体数分别为20、25和26的三个抗黑腐病新品种，这三个新品种中均含有花椰菜的两个完整染色体组。下列相关叙述中，合理的是（　　）
A．该育种过程所依据的原理有基因突变和植物细胞的全能性
B．染色体数为26的新品种一定是三倍体
C．三个新品种的抗病性状相关基因可能位于不同染色体上
D．三个新品种花椰菜均不能形成可育配子
14．铁皮石斛是我国名贵中药，生物碱是其有效成分之一。以铁皮石斛新生营养芽为材料，培养拟原球茎（简称PLBs，类似愈伤组织）生产生物碱的实验如图所示。下列说法正确的是（　　）
A．铁皮石斛产生的生物碱属于其初生代谢产物
B．过程①诱导新生营养芽变成PLBs的关键是适宜的植物激素和营养条件
C．过程②培养高产细胞系应选择细胞数量/生物碱产量比值大的PLBs
D．PLBs重量、光照等因素与生物碱的产量无关
15．白居易“花开花落二十日，一城之人皆若狂”描述了人们对牡丹的喜爱。除了观赏价值外，牡丹还有重要的药用价值，其含有的黄酮类化合物具有抗氧化和抗菌等作用。现对牡丹进行如图所示的相关处理，下列相关叙述正确的是（　　）
A．若过程①的A部位为茎尖，则获得的植株具有抗病毒特性
B．完成②③过程需更换3次培养基
C．过程⑤获得的原生质体培养成植株丁的过程不需要光，全程在黑暗条件下进行即可
D．过程⑥利用愈伤组织获得大量的黄酮类化合物是植物生长发育所必需的
16．角膜移植是目前临床治疗角膜内皮失代偿致盲的最有效途径，但可捐献的角膜数量有限，且仅有60%的角膜其内皮细胞达到标准。科研人员尝试利用动物细胞体外培养技术结合有限稀释法（通过梯度稀释实现单克隆分离的细胞克隆方法），重建可用于角膜移植的组织工程人角膜内皮，部分流程如图所示。下列分析正确的是（ ）
A．经有限稀释法操作后可获得细胞类型一致的人角膜内皮细胞株
B．选择高活性的角膜作为培养材料的主要原因是其细胞全能性高
C．对细胞进行原代培养时需提供少量的CO2保证正常的气体代谢
D．培养过程中酶解和稀释时分别添加一定量的胰蛋白酶和蒸馏水
17．动物细胞体外培养分为贴壁培养和悬浮培养两大类，图示悬浮培养生物反应器的基本构造。下列相关叙述正确的是（　　）
A．配制的培养液pH为7.2～7.4，通过①进入反应器
B．培养液中需加入葡萄糖、氨基酸和维生素等营养物质
C．贴壁培养时通常需要进行传代培养，悬浮培养时不需要
D．悬浮培养的细胞需要先分散成单个细胞，再用离心法收集
18．妊娠与子宫内膜基质细胞的功能密切相关。某研究小组通过如下图所示的实验流程获得了子宫内膜基质细胞，以期用于妊娠相关疾病的研究与治疗，下列叙述错误的是（　　）
A．手术获得的人皮肤组织须在低温下运至实验室以延长其存活时间
B．过程①诱导形成iPS细胞的过程中可能发生了基因重组
C．过程②形成体腔上皮细胞的过程不能体现iPS细胞的全能性
D．此过程获得的细胞若用于治疗妊娠相关疾病，一定会发生免疫排斥反应
19．模型是人们为了某种特定目的而对认识的对象所做的一种简化的概括性描述，模型构建是生物学教学、研究和学习的一种重要方法。对下列两个生物概念模型的理解或者分析正确的组合是（ ）
①若图1表示植物体细胞杂交过程，则A、B在融合前必须经过胰蛋白酶处理制备原生质体，形成的C称为杂种细胞，从C到D需要的技术是植物组织培养；
②若图1表示单克隆抗体的制备操作流程图，则C到D可表示筛选杂交瘤细胞的过程；
③若图2表示植物组织培养过程，获得B、C的生理过程分别是脱分化和再分化；
④若图2中B是核移植技术，C是胚胎移植技术，则形成d的过程体现了高度分化的动物也具有全能性
A．①② B．③④ C．②③ D．②④
20．2022年，世界首例克隆北极狼在北京诞生。提供细胞核的供体细胞来自一只野生雌性北极狼，去核的卵母细胞来自一只发情期比格犬，代孕母体则是另一只比格犬。下列相关叙述错误的是（　　）
A．重构胚是指人工构建的胚胎，具有发育成完整个体的能力
B．克隆北极狼是对提供细胞核的供体进行100%的复制
C．MⅡ期卵母细胞中含有促进体细胞核表现出全能性的物质条件
D．体细胞核移植技术是无性繁殖，有望用于增加濒危动物的种群数量
二、非选择题：本题共5小题，共60分。
21．蓝莓酸甜宜人、细腻多汁、气味清香，由蓝莓酿制的蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”和“口服化妆品”等。图1是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝莓醋的过程简图，图2为制作蓝莓酒、蓝莓醋的装置图。回答下列问题：
(1)传统发酵以混合菌种的固体或半固体发酵为主，一般利用原材料中_____的微生物，或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物，如腐乳制作起主要作用的微生物是_____。
(2)过程③和过程④所用微生物在细胞结构上的主要区别是后者_____，工业生产中为大量获得这两种菌种，常采用_____（填“固体”“半固体”或“液体”）培养基进行培养。
(3)过程④是在_____时，醋酸菌将蓝莓汁中的糖分解成醋酸，该过程依据的原理为_____（用反应式表达）；过程⑤当_____时，醋酸菌将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转变为醋酸，此时酒精为醋酸菌提供了_____。
(4)图2装置进行蓝莓酒发酵产生酒精时，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，目的是_____。在酒精发酵过程中，发酵的_____（至少答出2点）条件会抑制杂菌的生长。
(5)鉴定蓝莓醋的常用方法是检测发酵液前后的_____变化。
22．Ⅰ．奶酪是中国西北的蒙古族、哈萨克族等游牧民族的传统食品，在内蒙古称为奶豆腐，如图是天然奶酪的简要制作过程，其中凝乳是指凝固的牛奶，酸性物质一般都可以使牛奶变性凝固。某牛奶厂从自然发酵的凝乳中筛选具有优良发酵性能的微生物菌种。请据此回答问题：
(1)由奶酪制作过程可推测，儿童食用天然奶酪比牛奶更容易消化吸收，请分析原因_____。
(2)为了保证奶酪的品质和营养，牛奶在发酵之前应该进行消毒处理，请选择合理的处理方法_____。
A．100℃处理30min B．62～65℃处理30min C．80～85℃处理10s～15s
(3)这一株优良菌株分离纯化常采用的接种方法是_____法和_____法。
Ⅱ．磷是植物生长的重要元素，施入土中的磷大多数与Ca2+等离子结合形成难溶性磷酸盐。科研人员从贡柑果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程见下图，请回答下列问题：
(4)经步骤③最后一次稀释之后若在3个平板上分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，得到的结果是：39、38、37，则每克土样中的活菌数为_____个。运用这种方法统计的结果往往较实际值_____，原因是_____。
(5)步骤④中的培养基的成分是：葡萄糖、（NH4）2SO4、NaC1、MgSO4·7H2O、KCl、FeSO4·7H2O、MnSO4、Ca3（PO4）2、琼脂粉等，其中碳源的是_____。采用步骤⑤方法分离水样中的细菌时，为了将聚集的菌体分离，在第二次及以后的划线时，一定要从_____开始划线。
23．Ⅰ．培养胡萝卜根组织可获得试管苗，根据获得试管苗的过程，回答下列问题：
(1)切取的组织块中要带有形成层，原因是_____。
(2)从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基的原因是：i．诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同；ii．_____。
(3)⑥过程要进行照光培养，其作用是_____。
(4)病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物产量较低，品质变差。生产上，作物脱毒也用到了植物组织培养技术，选择茎尖为材料，原因是_____。
Ⅱ．科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示。据图回答下列问题：
(5)为获得原生质体，过程①需要利用_____处理两种植物细胞。两种植物细胞的原生质体融合成功的依据是_____。
(6)写出促进原生质体融合的方法_____（写出两个）。
(7)细胞融合完成后，融合细胞的细胞膜表面的荧光颜色可能是_____，细胞融合过程是否受温度的影响？_____（填“是”或“否”）。
(8)已知番茄细胞内有12对同源染色体，马铃薯细胞内共48条染色体，则在“番茄—马铃薯”细胞分裂过程中最多可以观察到_____条染色体。
24．纳米酶是一类蕴含酶学特性的纳米材料，具有催化活性高、稳定、低成本和易于大规模生产等特点，在生化检测、环境管理、疾病诊断等许多领域显示出了巨大的应用潜力。研究人员人工制备了能催化H2O2分解的纳米酶，对其作用特性展开一系列实验，下图1、2表示相关实验结果，图中“△DO”表示加入H2O25min后反应体系中溶氧量的变化。请回答下列问题：

(1)与无机催化剂相比，纳米酶的催化效率更高，原因是_____。实验测得的△DO值反映了_____。
(2)图1为探究_____的实验结果，实验中需控制的无关变量有_____（写出三个），由此图可得出的结论是_____。
(3)图2为探究草甘膦（GLY）对纳米酶作用的影响的实验结果，由此图可知GLY_____（填“促进”或“抑制”或“不影响”） 纳米酶的作用。使用该实验体系测得某土壤样品△DO比值为0．2，则该土壤样品的草甘膦浓度约为_____，该探究结果可应用于环境中草甘膦浓度的定量测定。
(4)纳米酶试纸条可用于食品中病原体（如金黄色葡萄球菌的生物标志物蛋白A）的快速检出，图3为试纸层析技术检测原理示意图。
①制备检测试纸上的单克隆抗体时，需将_____注入小鼠体内进行免疫并分离出_____细胞，将其与骨髓瘤细胞诱导融合，获得的细胞至少需经过两轮筛选，两轮筛选的目的分别是_____、_____。
②检测结束后，T线不显色，C线显色，说明检测结果为_____（填“阳性”“阴性”或“无效”）。
25．我国科学家首次在猪胚胎内成功培养出了含有人体细胞的中期肾脏(中肾)，为器官移植开辟了新途径。该成果利用胚胎与干细胞的互补产生嵌合体，嵌合体将发育成胚胎的缺陷器官。用DsRed(一种红色荧光蛋白)标记不同的iPS细胞，将已标记iPS细胞注射到猪囊胚中进行培养，各种细胞的嵌合能力如图1所示。敲除猪成纤维细胞中的肾脏发育关键基因，然后按照图2的操作流程获得重构胚。再将改造后的人源iPS细胞注射到重构胚中，形成嵌合胚胎。进而在代孕母猪体内，可形成含人源化中肾的猪胚胎，过程如图2所示。
(1)据图1分析，最终应选择_________细胞进行图2中步骤⑤的实验。选择iPS 细胞进行实验，而非成体干细胞是因为____________________。
(2)图2中步骤①可以采用显微操作法或_______等方法对卵母细胞去核，步骤③可用_______(填两种具体方法)激活重构胚。
(3)研究发现，人源化中肾随着嵌合体胚胎的发育无法继续存活或者无法发育成可做供体器官的成熟肾脏，推测原因可能是(写出两点原因)____________________。
1．C
A、制作果酒时应先用水冲洗葡萄1～2次，再去除枝梗，若先去除枝梗易导致葡萄果皮破损，增加杂菌污染的风险，A错误；
B、果醋发酵的菌种为醋酸菌，其最适生长温度为30～35℃，18～30℃是果酒发酵的适宜温度，B错误；
C、腐乳制作过程中，毛霉等微生物产生的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，C正确；
D、泡菜发酵时亚硝酸盐含量先上升后下降，发酵早期亚硝酸盐含量较高，不适宜食用，应待亚硝酸盐含量降低后食用，D错误。
2．D
A、蔬菜、器具的 “热烫处理” 目的是杀灭大部分杂菌，而非“所有”杂菌，A错误；
B、面汤的主要成分是淀粉，可为乳酸菌提供碳源，但乳酸菌属于原核生物，繁殖方式为二分裂，无丝分裂是真核细胞的分裂方式，B错误；
C、“盖上盖子”主要是为乳酸菌发酵提供无氧环境（乳酸菌是厌氧菌），C错误；
D、“浆水引子”中含有大量发酵所需的乳酸菌等菌种，加入后可提高发酵菌种初始浓度，加快发酵进程，缩短制作时间，D正确。
3．D
A、微生物培养基的基本成分除水、碳源、氮源、无机盐外，通常还需要添加生长因子等特殊营养物质，且本实验培养基还需额外添加荧光素，A错误；
B、重组菌Q已构建成功，实验目的是检测抗菌效果，所用培养基含足量荧光素，属于鉴定培养基，B错误；
C、荧光素位于胞外，荧光素酶在胞内，两者无法直接接触反应。只有当菌体裂解后酶释放至胞外，才能催化荧光素与氧气发生化学反应，C错误；
D、抗菌剂有效时，菌体死亡裂解，荧光素酶释放催化荧光素，荧光强度显著增加；无效时，菌体存活，酶滞留胞内，荧光强度变化小。因此，荧光强度变化可直接反映抗菌效果，D正确。
4．B
由图可知，②中拔出棉塞后应握住棉塞上部，不能放在操作台上；⑥中划线时不能将培养皿的皿盖完全拿开，应只打开一条缝隙；⑦中划线时第5次的划线不能与第1次的划线相连，故②⑥⑦操作错误，其余操作正确，B符合题意。
5．C
①无菌技术的关键是防止外来杂菌污染培养物，同时避免操作者被感染、防止污染环境，并非要杀灭实验室中所有微生物，①错误；
②煮沸消毒法中100℃煮沸5~6分钟只能杀死微生物的营养细胞，无法杀灭全部芽孢和孢子，②错误；
③巴氏消毒法为低温消毒，仅能杀灭绝大多数有害微生物，仍有部分耐热微生物或芽孢残留，因此处理后的食品不能在常温下长期保存，③正确；
④紫外线穿透力较弱，消毒前适量喷洒苯酚或煤酚皂溶液，既可以促进空气中带菌颗粒物沉降，也能协同紫外线提升消毒效果，④正确；
⑤酒精灯火焰的充分燃烧层（外焰）温度最高，将接种环直接在此处灼烧，可以快速彻底实现灭菌，⑤正确；
⑥干热灭菌法适用于耐高温、需保持干燥的物品，培养皿、玻璃吸管等玻璃器皿可使用该方法灭菌，⑥正确。
综上共有4项说法正确，ABD错误，C正确。
6．D
A、步骤①为制备菌悬液，仅需无菌水将污泥中的菌体分散即可，无需添加原油，目的菌的筛选依靠后续以原油为唯一碳源的选择培养基实现，A错误；
B、步骤②每次稀释更换移液管，除避免杂菌污染外，更重要的是防止上一次稀释的高浓度菌液残留，保证稀释倍数的准确性，并非仅为避免杂菌污染，B错误；
C、涂布平板计数要求平板菌落数处于30~300区间即符合计数要求，本实验10 组菌落数均在该范围内，无需额外增加10 稀释组，10 稀释倍数更低，菌浓度更高，菌落数会远超300无法计数，C错误；
D、对同一稀释度下多个平板的菌落数取平均值，可有效减少单次计数的偶然误差，提升结果准确性，D正确。
7．B
A、该实验中选用的敏感指示菌为谷氨酸棒状杆菌，A错误；
B、上层培养基需要支持指示菌生长，同时让噬菌体侵染、裂解细菌形成噬菌斑；底层培养基作为支撑层，也需要提供相同的营养，保证指示菌在整个平板上正常生长，才能形成清晰的噬菌斑。因此上下层营养成分必须一致，这样才能保证敏感指示菌在上下层培养基中都能正常生长，B正确；
C、上层培养基琼脂浓度过低会导致上层平板不能凝固，无法形成稳定的平板用于计数，并非浓度越低越利于计数，C错误；
D、对生产空间灭菌不能彻底杜绝噬菌体污染，因为噬菌体分布广泛，且可能存在于空气、设备等多种环境中，灭菌后仍可能有噬菌体残留，D错误。
8．C
A、醋酸菌是好氧型微生物，醋酸发酵过程需要充足的氧气，将发酵容器置于通风处并定期搅拌可提高溶氧量，促进醋酸菌代谢产生醋酸，A正确；
B、传统发酵依托自然环境中的天然微生物进行发酵，以混合菌种发酵为主；发酵工程所用菌种大多是经过人工选育和纯化的单一菌种，可保障发酵产品的质量稳定性，B正确；
C、发酵过程中温度、pH、溶氧量等发酵条件的变化，不仅会影响微生物的生长繁殖，也会改变微生物的代谢途径，比如氧气含量变化会改变酵母菌的呼吸方式（有氧呼吸/无氧呼吸），对应代谢途径存在明显差异，C错误；
D、微生物农药是利用微生物或其代谢产物来杀灭、抑制病虫害，属于无化学污染的生物防治手段，D正确。
9．B
A、发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵过程，灭菌只是发酵前的准备操作，不是中心环节，A错误；
B、糖度过高会使发酵液渗透压过大，导致酵母菌细胞失水，抑制酵母菌的生长繁殖；添加适量纯净水可以稀释发酵液，降低糖度和渗透压，缓解抑制作用，B正确；
C、接种后的酒精发酵过程，初期需要通气，让酵母菌进行有氧呼吸大量增殖，之后才转为无氧环境进行酒精发酵，不需要全程保持严格无氧，C错误；
D、单细胞蛋白本质就是微生物菌体，发酵结束后可以收集酵母菌菌体得到单细胞蛋白，可作为食品添加剂，D错误。
10．B
A、外植体只能进行消毒处理，若对外植体灭菌会杀死其活细胞，导致组织培养失败，仅实验用具需要灭菌，A错误；
B、再分化需光照以促进叶绿体形成，且需调整生长素/细胞分裂素比例以诱导器官形成，B正确；
C、由表格数据可知，NAA浓度固定为0.10mg/L时，6-BA浓度为0.50mg/L时诱导脱分化率最高，因此0.10mg/L NAA+0.50mg/L 6-BA的MS培养基诱导脱分化效果最好，C错误；
D、该技术为植物组织培养，原理是植物细胞的全能性，D错误。
11．B
A、过程①选取幼嫩叶片，应该在70%的酒精浸泡30s后，立即取出，用无菌水清洗2~3次，再用次氯酸钠溶液处理30min 后，立即用无菌水清洗2~3次，A错误；
B、愈伤组织是高度液泡化，不定形的薄壁组织团块，过程②诱导愈伤组织期间一般不需要光照，为了防止愈伤组织分化成筛管、维管等，应避光培养，B正确；
C、过程③应配制2种培养基，其主要目的是满足不同阶段试管苗对特定激素的需求，生长素/细胞分裂素比值高有利于根的分化、抑制芽的形成，生长素/细胞分裂素比值低有利于芽的分化、抑制根的形成，C错误；
D、过程④将试管苗移植到消过毒的珍珠岩基质中，是为了试管苗适应外界环境，再移栽到土壤中。炼苗的目的就是让幼苗适应自然有菌环境，不需要严格无菌，D错误。
12．C
A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，过程a（原生质体制备）需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得有活性的原生质体，但是不同品种的细胞壁成分和结构略有差异，处理时间不一定相同，A错误；
B、过程b（原生质体融合）的诱导方法包括PEG融合法、电融合法、高Ca2+-高pH法等，但是灭活病毒只能诱导动物细胞融合，B错误；
C、过程d（脱分化）和过程e（再分化）均需植物激素（生长素和细胞分裂素）调控，C正确；
D、再生小猕猴桃植株具有中华猕猴桃与美味猕猴桃的基因，但是所有基因不一定都能表达。所以不一定具有中华猕猴桃与美味猕猴桃的全部优良性状，D错误。
13．C
A、该育种为植物体细胞杂交育种，以及紫外线处理时诱导黑芥染色体片段丢失，其原理是细胞膜的流动性、植物细胞的全能性和染色体数目变异，未涉及基因突变，A错误；
B、花椰菜（2n=18）含两个染色体组（每组9条），新品种含其两个完整染色体组（18条），染色体数为26的新品种中黑芥来源染色体为8条（26-18=8）。黑芥（2n=16）含两个染色体组（每组8条），但8条染色体不一定是完整的一个染色体组，故不一定是三倍体，B错误；
C、抗病基因来自黑芥，三个新品种染色体组成不同（20、25、26条），说明融合后黑芥染色体分配存在差异，抗病基因可能位于不同染色体上，C正确；
D、三个新品种中均含有花椰菜的两个完整染色体组，在减数分裂过程中能联会，来自黑芥的染色体随机移向两极，可能产生可育配子，D错误。
14．B
A、铁皮石斛产生的生物碱属于其次生代谢产物，A错误；
B、过程①表示脱分化，过程①诱导新生营养芽变成PLBs的关键是适宜的植物激素和营养条件，B正确；
C、培养高产细胞系时，应该选择生物碱产量/细胞数量比值大的PLBs，因为生物碱产量/细胞数量比值大意味着单位细胞数量产生的生物碱多，符合生产要求，C错误；
D、PLBs重量、光照等因素均会影响生物碱的产量，D错误。
15．B
A、植物的顶端分生区附近病毒极少，甚至无病毒。若过程①的A部位为茎尖，通过植物组织培养获得的植株，仅为脱毒苗，而不是抗病毒植株，A错误；
B、过程②③是植物组织培养，②脱分化和③再分化阶段的培养基成分（如激素比例）不同，通常需要更换培养基，结合培养流程，诱导形成愈伤组织、诱导生根和生芽均需更换培养基，故完成②③过程需更换3次培养基，B正确；
C、过程⑤获得的原生质体经PEG处理后培养成植株丁，该过程包含脱分化和再分化阶段。再分化阶段（形成芽、根）需要光照，以利于叶绿素的合成和光合作用的进行，不能全程在黑暗条件下培养，C错误；
D、过程⑥是利用愈伤组织生产黄酮类化合物，黄酮类化合物并非植物生长发育所必需的物质，仅在特定条件下合成，属于植物细胞的次生代谢产物，D错误。
16．A
A、有限稀释法通过梯度稀释获得单个细胞的克隆，能得到细胞类型一致的人角膜内皮细胞株，A正确；
B、选择高活性的角膜作为培养材料的主要原因是其细胞活力高、增殖能力强，而非细胞全能性高（角膜内皮细胞已高度分化，全能性较低），B错误；
C、对细胞进行原代培养时需提供少量的CO2，其作用是维持培养液的pH，而非保证气体代谢（气体代谢主要通过O2和CO2的交换，但CO2的主要功能是调节pH），C错误；
D、培养过程中酶解时添加胰蛋白酶用于分散细胞，但稀释时一般添加培养液或缓冲液而非蒸馏水，因为蒸馏水会导致细胞渗透压失衡而破裂，D错误。
17．B
A、配制的培养液pH为7.2~7.4，图中①是排气的，②是通气的，③是加入培养液的，即培养液通过③进入反应器，A错误；
B、动物细胞体外培养时，培养液中需要加入葡萄糖、氨基酸和维生素等营养物质，为细胞的代谢和生长提供物质基础，B正确；
C、无论是贴壁培养还是悬浮培养，当细胞密度过大时，都通常需要进行传代培养，并非悬浮培养时不需要，C错误；
D、悬浮培养的细胞不需要用胰蛋白酶处理使之分散成单个细胞，只需要通过离心法收集，D错误。
18．D
A、手术获得皮肤组织需在低温下运至实验室目的是低温可以抑制酶的活性，防止蛋白质变性，使细胞中的蛋白质维持正常的生理功能，以延长其存活时间，A正确；
B、诱导iPS细胞的过程中，可以采用多种方法来制备iPS细胞，包括借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞，所以当导入特定基因时就涉及了基因重组，B正确；
C、细胞的全能性是指细胞可以分化为机体的各种细胞或发育成一个完整个体，但是仅凭借分化为体腔上皮细胞这一例子不能充分说明其具有全能性，C正确；
D、由于移植的细胞是患者自身的细胞，此过程获得的细胞用于治疗妊娠相关疾病可以避免免疫排斥反应，D错误。
故选D。
19．C
①若图1表示植物体细胞杂交过程，A、B在融合前必须经过纤维素酶和果胶酶处理来制备原生质体，而不是胰蛋白酶，胰蛋白酶用于动物细胞培养中分散细胞，①错误；
②若图1表示单克隆抗体的制备操作流程图，C是融合后的细胞，包括杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞-骨髓瘤细胞融合细胞、B淋巴细胞-B淋巴细胞融合细胞等，C到D可表示筛选杂交瘤细胞的过程，②正确；
③若图2表示植物组织培养过程，获得B（愈伤组织）的生理过程是脱分化，获得C（胚状体等）的生理过程是再分化，③正确；
④若图2中B是核移植技术，C是胚胎移植技术，形成d的过程体现了高度分化的动物体细胞核具有全能性，④错误。
②③正确，C正确。
20．B
A、重构胚是将供体细胞核移入去核卵母细胞后人工构建得到的胚胎，具备发育成完整个体的全能性，A正确；
B、克隆北极狼的核遗传物质来自细胞核供体北极狼，但细胞质遗传物质来自提供卵母细胞的比格犬，同时生物性状还会受环境因素影响，因此不是对供体100%的复制，B错误；
C、MⅡ期（减数第二次分裂中期）卵母细胞的细胞质中含有促进体细胞核全能性表达的物质，是核移植常用的受体细胞，C正确；
D．体细胞核移植未经过两性生殖细胞的结合，属于无性繁殖技术，可通过克隆濒危动物个体增加其种群数量、D正确。
21．(1) 天然存在 毛霉
(2) 无核膜包被的细胞核 液体
(3) 氧气、糖源都充足 C6H12O6＋2O22CH3COOH（乙酸）＋2H2O＋2CO2＋能量 缺少糖源 碳源和能源
(4) 避免空气中其他微生物进入发酵装置（防止空气中的微生物污染） 无氧、呈酸性、含酒精
(5)pH
（1）传统发酵以混合菌种的固体或半固体发酵为主，一般利用原材料中天然存在的野生微生物，或利用前一次发酵保存下来的面团、卤汁等发酵物中的微生物，如腐乳制作起主要作用的微生物是毛霉。
（2）过程③为酒精发酵，需要的菌种为酵母菌，为真核生物，过程④为果醋发酵，需要的菌种为醋酸菌，为原核生物，真核生物和原核生物最主要的区别是有无核膜包被的细胞核，前者有核膜包被的细胞核，后者无核膜包被的细胞核，扩大培养微生物应该用液体培养基。
（3）醋酸菌是异养需氧菌，因此过程④，是在氧气、糖源都充足时，醋酸菌将蓝莓汁中的糖分直接分解成醋酸，反应式为C6H12O6＋2O22CH3COOH（乙酸）＋2H2O＋2CO2＋能量；⑤过程，当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，此时酒精为醋酸菌提供了碳源和能源
（4）图2装置进行蓝莓酒发酵产生酒精时，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，目的是避免空气中其他微生物进入发酵装置（防止空气中的微生物污染）。酵母菌生存的最适温度是20℃左右，因此在发酵过程中，一般将温度控制在18-30℃，发酵的无氧、呈酸性、含酒精条件会抑制杂菌的生长。
（5）蓝莓醋生产过程中产生的醋酸会使培养液的pH降低，因此鉴定蓝莓醋的常用方法是检测发酵液前后的pH的变化。
22．(1)由制作过程可知，奶酪制作过程中经过了微生物发酵，将牛奶中蛋白质分解或变性处理，都有利于蛋白质的消化和吸收
(2)BC
(3) 平板划线法 稀释涂布平板法
(4) 3.8×106 偏小 一个菌落可能来自两个或多个细胞
(5) 葡萄糖 从上一次划线的末端
（1）牛奶中含有丰富的蛋白质，由制作过程可知，奶酪制作过程中经过了微生物发酵，将牛奶中蛋白质分解或变性处理，都有利于蛋白质的消化和吸收，故儿童食用天然奶酪比牛奶更容易消化吸收。
（2）为了保证奶酪的品质和营养，进行无菌处理时温度不宜过高，故可以采用62~65℃处理30min或80~85℃处理10s~15s。故选BC。
（3）分离纯化微生物常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。
（4）步骤③将土壤悬浮液0.5mL放入4.5mL无菌水中，相当于稀释了10倍，再取0.5mL移至4.5mL中，相当于稀释了100倍，再取0.5mL移至4.5mL中，相当于稀释了1000倍；0.1mL中有（39+38+37）÷3=38个，1mL中含有380个，而1mL是稀释了1000倍后的土壤悬浮液，因此原1mL土壤悬浮液中含有380×1000个=3.8×105个，100mL土壤悬浮液中含有3.8×107个，100mL土壤悬浮液是10g土壤所得，因此1g土壤中含有的活菌数为3.8×107÷10=3.8×106个。平板上两个或两个以上细菌距离过近时，统计时易被视作一个菌落，因此稀释涂布平板法所获得的数据比实际值一般要偏小。
（5）碳源是用于构成微生物细胞和代谢产物中碳素来源的营养物质，葡萄糖是该培养基中的碳源。采用平板划线法分离菌种时，为了将聚集的菌体分离，在第二次及以后的划线时，一定要从从上一次划线的末端开始划线，因为上一次划线的末端的细菌数最小。
23．(1)形成层容易诱导形成愈伤组织
(2)随培养时间的增加，培养基中营养物质不断减少，有害代谢产物逐渐积累，会抑制植物的生长
(3)诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用
(4)茎尖（顶端分生区）的病毒极少，甚至无病毒，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植物就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗
(5) 纤维素酶和果胶酶 杂种细胞再生出新的细胞壁
(6)离心法、电融合法、聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法
(7) 红色荧光和绿色荧光、红色荧光、绿色荧光 是
(8)144
（1）形成层细胞分化程度低、分裂能力强、全能性高，更容易诱导脱分化形成愈伤组织，因此切取组织块时要带有形成层；
（2）从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基的原因是：i．诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同；ii．随培养时间延长，培养基中营养物质不断减少，同时细胞代谢产生的有害代谢产物逐渐积累，会抑制植物的生长，因此需要更换新培养基；
（3）光照可以诱导叶绿素的合成，让试管苗能够进行光合作用，自主合成有机物，保障幼苗正常生长发育；
（4）植物茎尖（顶端分生区）的细胞病毒极少，甚至无病毒，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就可能不带病毒，从而获得脱毒苗；
（5）植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此过程①需要用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体；原生质体融合成功的标志是杂种细胞再生出新的细胞壁（细胞壁的形成是植物细胞融合完成的标志）；
（6）促进原生质体融合的常用的方法，分为物理法和化学法，物理法：离心法、电融合法，化学法：聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法；
（7）番茄原生质体标记红色荧光，马铃薯原生质体标记绿色荧光，番茄-番茄融合细胞只有红色荧光，马铃薯-马铃薯融合细胞只有绿色荧光，番茄-马铃薯杂种细胞同时有红色荧光和绿色荧光，因此融合细胞的细胞膜表面荧光颜色可能是红色荧光和绿色荧光、红色荧光、绿色荧光；细胞融合依赖细胞膜的流动性，温度会影响膜的流动性，因此细胞融合过程受温度的影响；
（8）番茄细胞有12对同源染色体（2n=24条），马铃薯细胞有48条染色体（2n=48），因此杂种细胞的染色体数为24+48=72条，细胞有丝分裂后期，着丝粒分裂，染色体数目加倍，因此最多可观察到72×2=144条染色体。
24．(1) 纳米酶降低反应活化能的作用更显著 纳米酶活性（大小）
(2) 纳米酶在不同pH下的活性（pH对纳米酶活性的影响） H2O2溶液的浓度和用量、纳米酶的用量、温度 纳米酶在pH偏碱性条件下活性高
(3) 抑制 10μmol/L
(4) 蛋白A B 筛选出杂交瘤细胞 筛选出能分泌针对蛋白A的特异性抗体的杂交瘤细胞 阳性
酶
（1）概念：酶是活细胞(来源)所产生的具有催化作用(作用机理：降低化学反应活化能，提高化学反应速率)的有机物。
（2）本质：大多数酶的化学本质是蛋白质，也有少数是RNA。
（3）特性：高效性、专一性、酶需要较温和的作用条件
（1）与无机催化剂相比，纳米酶的催化效率更高，原因是纳米酶降低反应活化能的作用更显著；△DO”表示加入H2O25min后反应体系中溶氧量的变化，即生成物的量变化，与酶活性相关，所以可以实验测得的△DO值反映了纳米酶活性（大小）。
（2）由图1可知，图1为探究纳米酶在不同pH下的活性（pH对纳米酶活性的影响），由图可以看出，实验的自变量为不同的PH，因变量是△DO值，实验需要控制的无关变量有H2O2溶液的浓度和用量、纳米酶的用量、温度，看图可以得出，随着PH的升高，△DO值越大，酶活性越高，由此图可得出的结论是纳米酶在pH偏碱性条件下活性高；
（3）根据图二结果可知，随着除草剂草甘膦（GLY）的浓度增大，添加草甘膦的△DO(△DO(GLY) ) 与不添加草甘膦的△DO(△DO(0) ) 的比值减小，说明草甘膦对纳米酶活性具有抑制作用。分析图中数据可知，△DO比值为0.2时，草甘膦浓度约为10μmol/L。
（4）纳米酶试纸条可用于食品中病原体（如金黄色葡萄球菌的生物标志物蛋白A）的快速检出,所以蛋白A可以作为抗原，制备检测试纸上的单克隆抗体时，需将蛋白A注入小鼠体内进行免疫并分离出B细胞，将其与骨髓瘤细胞诱导融合，获得的细胞至少需经过两轮筛选，两轮筛选的目的分别是筛选出杂交瘤细胞；筛选出能分泌针对蛋白A的特异性抗体的杂交瘤细胞；
纳米酶垫上包被的纳米酶标记抗体和待测物与T线处包被的抗原进行竞争性结合。当待测物为阳性样本时，待测物中的抗原与T线包被的抗原可竞争性结合纳米酶标记抗体，导至T线上包被的抗原无法和纳米酶标记抗原结合，则T线无法显色。T线和C线均显色为阴性，T线不显色C线显色为阳性，T线和C线均不显色为无效结果。
25．(1) 4CL iPS细胞全能性更高，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能；而成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力
(2) 梯度离心、紫外线短时间照射、化学物质处理 电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂（任选两个）
(3)
由于含有人的细胞，出现排斥反应，因此可能出现人源化中肾在猪体内无法存活；由于敲除了猪成纤维细胞中的肾脏发育关键基因，因此猪体内肾脏的发育不完整
诱导多能干细胞简称iPS细胞，其功能类似胚胎干细胞，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能。因为诱导iPS细胞的过程无须破坏胚胎，而且iPS细胞可以来源于病人自身的体细胞，将它移植回病人体内后，理论上可以避免免疫排斥反应，所以科学家普遍认为iPS细胞的应用前景优于胚胎干细胞。
（1）据图1分析，几种iPS细胞中，4CL的DsRed面积/囊胚面积（%）值最大，说明4CL细胞的嵌合能力最强，故进行图2中步骤⑤的实验可以选择4CL细胞。选择iPS 细胞进行实验，而非成体干细胞是因为iPS 细胞全能性更高，具有分化为成年动物体内的任何一种类型的细胞，并进一步形成机体的所有组织和器官甚至个体的潜能；而成体干细胞具有组织特异性，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成完整个体的能力。
（2）图2中步骤①的目的是对卵母细胞去核，普遍使用的去核方法是显微操作法，也可以采用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法。步骤③激活重构胚可以采用物理或化学方法，如电刺激、Ca2+ 载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等， 使其完成细胞分裂和发育进程。
（3）研究发现，人源化中肾随着嵌合体胚胎的发育无法继续存活或者无法发育成可做供体器官的成熟肾脏，推测原因可能是：由于含有人的细胞，出现排斥反应，因此可能出现人源化中肾在猪体内无法存活；由于敲除了猪成纤维细胞中的肾脏发育关键基因，因此猪体内肾脏的发育不完整，等。

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