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参考答案
1-5：D D A B C 6-10：B C D D A 11-15：B C D B D
16-20：A D B D C 21-25：A C B B D 26-30：D B C C D
(除标注外，每空1分，共10分)
（1）3.8×106 （1分） 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（2分）
（2）溶磷圈直径与菌落直径比值较大（1分） 菌落（1分）
（3）接种等量土壤悬浮液的牛肉膏蛋白胨培养基或完全培养基（2分，等量土壤悬浮液1分，牛肉膏蛋白胨培养基或完全培养基1分）
（4）增加培养液中的溶氧量；使菌株与营养物质充分接触（2分，答对1点得1分） M-3-01（1分）
(除标注外，每空1分，共10分)
（1）CTLA-4蛋白 （或CTLA-4） 灭活病毒
（2）融合的具有同种核 既能迅速大量增殖，又能产生抗体 （2分） 抗体检测
（3）体外培养 需要 因为细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素会使分裂受阻。（2分，写出1点得1分，最多2分。写了因为接触抑制的扣1分）
(每空2分，共10分)
(1) 不能 原核细胞DNA中不存在限制酶的识别序列或能被识别的序列被修饰（答到任意一点即可得2分）
(2)5
能，二者切割后产生的黏性末端相同，可被DNA连接酶连接
(4) (写出任意一种均可)
34.(每空2分，共10分)
（1） 红眼 自由组合
（2）BbDd 4
（3） 5/6南充高中高 2024级高二下学期期中考试 C．牛肉膏、蛋白胨可以为微生物提供碳源、氮源、维生素
D．生物消毒法是指利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法
生物试题 5．下列关于微生物的纯培养的表述正确的是（ ）
总分 100分 考试时间 75分钟 A．微生物的纯培养物就是不含代谢废物的微生物培养物
B．微生物的纯培养的步骤依次是培养基的配制、灭菌、接种、培养、分离等
注意事项： C．在对酵母菌进行纯培养时，平板划线法和稀释涂布平板法都可以
1．答题前，务必将自己的姓名、班级、考号填写在答题卡规定的位置上。 D．我们常用MS培养基对酵母菌进行纯培养
2．答选择题时，必须使用 2B铅笔将答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦擦干净
6．如图为实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作步骤，下列说法
后，再选涂其它答案标号。
3．答非选择题时，将答案书写在答题卡相应位置上，写在本试卷上无效。 正确的是（ ）
4．考试结束后将答题卡交回。 A．步骤①后需将培养基调节 pH并进行灭菌处理
B．步骤①②③操作时需要在酒精灯火焰附近进行
一、单项选择题(30个小题，每题 2分，共 60分) C．上述操作过程中，接种环共灼烧处理了 5次
1．发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的 D．步骤①结束后需倒置平板，步骤④结束后不需要
过程。下列叙述正确的是（ ） 7．研究人员将结核杆菌分别接种在含有不同浓度抗生素 A与 B的培养基中（“+”代表含抗生素，“+”
A．腐乳味道鲜美，易于消化吸收，主要是因为酵母菌将豆腐中的蛋白质分解成小分子
的多少代表抗生素浓度，“-”代表不含抗生素），对两种抗生素的药性进行分析。在 37℃环境下培养 24
B．利用乳酸菌制作泡菜的过程中，先通气培养，后密封发酵
小时后，细菌生长情况如图。下列叙述正确的是（ ）
C．缺乏氧气和糖源时，醋酸菌可将乙醇氧化成乙醛，再将乙醛氧化成乙酸
D．发酵过程中发酵条件变化会影响微生物的生长繁殖和代谢途径
2．下列关于传统发酵技术的说法中，正确的是（ ）
A．图 1能表示在果酒的制作过程中酵母菌发酵产生酒
精速率（V1）随时间的变化情况
B．图 2能表示在果醋的制作过程中溶氧量对醋酸菌产 A．长期使用抗生素 A主要是诱导结核杆菌产生抗药性变异
生醋酸速率（V2）的影响 B．与单独使用抗生素 A相比，联合使用抗生素 B的抑菌作用更强
C．图 3能表示在利用乳酸菌制作泡菜的过程中乳酸含 C．该实验使用稀释涂布平板法接种结核杆菌，待菌液被吸收后方可倒置培养
量的变化趋势 D．为排除杂菌的影响，倒平板前可对培养基采用煮沸灭菌或者高压蒸汽灭菌
D．图 4能表示在密闭锥形瓶中，加入含酵母菌的葡萄糖溶液，溶液的 pH随时间的变化 8．如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验示意图，据图分析下列叙述正确的是（ ）
3.蓝莓酒和蓝莓醋被称为“液体黄金”“口服化妆品”等。下图是以鲜蓝莓为原料天然发酵制作蓝莓酒和蓝
莓醋的过程简图。下列叙述错误的是（ ）
A．去除蓝莓枝梗应在冲洗之前，目的是防止杂菌污染
B A．在进行尿素分解菌的分离时，需要配制以尿素为唯一氮源的选择培养基，培养基中的尿素不仅提．过程③在氧气、糖源都充足条件下可直接发酵为蓝莓醋
C 供氮源，还可以提供碳源、能源．过程④中的主要发酵菌种在过程⑤中已经失去了发酵能力
D B．除了用该实验方法进行尿素分解菌的计数外，还可以用平板划线法、显微镜直接计数法．温度变化对发酵过程有影响，过程④所需的最适温度比过程⑤低
4 C．在进行涂布平板时，先将浸在酒精中的涂布器取出，再将涂布器放在酒精灯火焰上灼烧，然后直．在制备培养基时，不仅要满足基本的营养物质，又需要防止杂菌污染，下列说法错误的是（ ）
A 接用涂布器将滴加到培养基表面的菌液均匀地涂布在培养基表面．在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素
B D．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为 1.7×10
9个
．培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利
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9．苹果树腐烂病由真菌感染引起，欲从土壤中筛选具有抑制真菌作用的芽孢杆菌，科研人员进行相关 A．过程①需在无菌水中使用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞
实验如图所示。下列相关叙述错误的是（ ） B．利用聚乙二醇、高 Ca2+--高 PH等可诱导②和③过程的发生
C．③过程标志着细胞融合完成，细胞中的染色体数目加倍
D．②利用了细胞膜的流动性， ④⑤过程利用了植物细胞的全能性
14．甘薯是重要的农作物，为了改良甘薯品质，科学家利用甘薯（2N=90）与其近缘野生种（2N=30）
进行体细胞杂交，选育得到杂种植株M1。下列说法正确的是（ ）
A．体细胞杂交得到植株M1 证明这两种植物间不存在生殖隔离
B．在培育M1 时，配制的各种培养基常以MS培养基为基础
C．M1 具有两个物种的所有性状，且染色体数目为 2N=120
D．甘薯和近缘野生种的原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞
A．①过程将土样溶解到锥形瓶中，需在酒精灯火焰旁操作 15．珙桐有“植物活化石”之称，是国家一级重点保护植物。科研人员从珙桐叶中分离出了具有抗肿瘤
B．②过程在稀释时，可以取 1mL菌液加入 9mL无菌水中 功效的次生代谢物--槲皮素。野生珙桐资源有限，下图是通过植物细胞工程等技术手段进行珙桐的扩
C．③过程待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置培养 大培养，其中序号代表相应的处理过程。下列相关叙述正确的是（ ）
D．筛选目的菌时，A、B处应该分别接种芽孢杆菌和真菌
10．下列关于发酵工程的基本环节的叙述中，错误的是（ ）
A．从自然界中筛选、通过诱变育种等获得优良菌种是发酵工程的中心环节
B．如果发酵产品是微生物细胞本身，可采用过滤、沉淀等方法得到产品
C．发酵工程中所用的菌种大多是经选育的单一菌种
D A．通过过程①②③获得植株乙的过程属于有性生殖．培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌，以避免杂菌污染影响发酵过程
B．通过过程①②④可定向改变植株获得优良性状11．下列关于发酵工程的应用的叙述中，错误的是（ ）
C．只有植株乙和丙的获取采用了植物组织培养技术
A．柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂，它可以通过黑曲霉的发酵获得
D．过程⑥的实现有利于保护野生生物资源
B．在啤酒的工业化生产的主发酵阶段酵母菌会大量繁殖，主发酵结束后可得到澄清、成熟的啤酒
16．兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒
C．微生物肥料可以增进土壤肥力，改良土壤结构，有的还可以抑制土壤中病原微生物的生长
苗，操作流程如下图。下列叙述正确的是（ ）
D．发酵工程的产品很多，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身
12. 芦笋是雌雄异株植物，雄株性染色体为 XY，雌株为 XX；其幼茎可食用，雄株产量高。以下为两
种培育雄株的技术路线，有关说法错误的是（ ）
A．百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，因此可以获得脱毒苗
B．①为脱分化过程，1号培养基中的愈伤组织是定形的薄壁组织团块
C．3号培养基中的细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于 1
A．获取的顶芽需用流水充分冲洗后再分别用酒精和次氯酸钠溶液消毒 D．细胞产物的工厂化生产需要利用以上三种培养基培养植物细胞
B．经脱分化和再分化形成幼苗甲、乙和丙过程均有基因的选择性表达 17．培育肉是利用动物体内分离的成肌细胞或全能干细胞，采用动物细胞培养技术培养出类似于动物
C．常用秋水仙素诱导幼苗乙、丙，其直接作用于有丝分裂后期 肌肉的肉丝，同时添加了人体所需的元素如铁、钙等，使之营养更加丰富。下列相关叙述错误的是（ ）
D．乙、丙、丁的培育过程中发生了基因重组，丁和甲的基因型可能不同
13．植物细胞质中的叶绿体有相对独立的遗传体系，控制着许多优良性状。胞质杂交是植物体细胞杂
交应用的一个重要方面，下图是利用胞质杂交培育抗病植株的实验流程，下列叙述正确的是（ ）
A．用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理组织可获得分散的肌肉母细胞
B．往生物反应器中充入适量 CO2的主要作用是维持培养液的 pH
C．培养液中的支架提供了更大的细胞附着面积，有利于细胞贴壁生长
D．人造牛肉的培养有利于牛肉的工厂化生产，培养液不需要更换
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18．诱导多能干细胞(ips细胞)在生物医药领域有广阔的应用前景。研究人员利用多种小分子化合物协 B．在获能液中培养精子可使其获得能量后进行体外受精
同诱导小鼠胎儿成纤维细胞，成功获得 ips细胞。下列叙述错误的是（ ） C．常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精的标志
A．小分子化合物改变了小鼠胎儿成纤维细胞的基因表达 D．体外受精后的早期胚胎培养需要额外提供营养物质
B．小鼠胎儿成纤维细胞形成 ips细胞的过程属于细胞分化 24．如图为牛胚胎分割示意图,下列有关说法正确的是（ ）
C．由于 ips细胞诱导过程无须破坏胚胎等原因，其应用前景优于胚胎干细胞 A．图中胚胎处于原肠胚阶段，其中结构 a为原肠腔
D．造血干细胞是发现最早、研究最多、应用也最为成熟的一类成体干细胞 B．分割囊胚阶段的胚胎时要注意将内细胞团均等分割
19．大熊猫是我国珍稀濒危物种，部分个体存在繁殖障碍。科研人员为增加大熊猫种群数量，计划利 C．分割后的胚胎必须在体外培养后才能移植给受体
用核移植技术结合胚胎移植技术培育后代，过程如图所示。下列叙述错误的是（ ） D．进行胚胎性别鉴定要选择 d中细胞进行 DNA分析
25．羊在畜牧生产和生物医学模型方面都具有重要价值，因此与羊相关的基础生物学研究也格外受到
关注。科学家通过胚胎工程的方法繁育肉羊。下列相关叙述错误的是（ ）
A．通过任何一项技术获得的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代
B．收集羊的桑葚胚或囊胚，检查合格后移植到发情的受体母羊体内
C．通过胚胎分割技术，可以克隆得到更多遗传性状相同的肉羊后代
A．对供体细胞培养时，需保证其增殖能力与核的完整性，为核移植提供优质供体核 D．作为胚胎工程的最终技术环节，胚胎移植后无需对受体进行检查
B．过程②的卵母细胞需体外培养至减数第二次分裂中期时通过显微操作等方法去核 26．下图表示细胞工程操作中的某些过程，有关叙述错误的是（ ）
C．重构胚激活时可通过电刺激等物理方法，使其完成细胞分裂和发育进程
D．丁熊猫的遗传物质完全来自甲熊猫，代孕丙熊猫为胚胎发育提供营养和场所
20．线粒体疾病严重危害患者健康。科研人员按如图所示流
程进行操作，可以使患线粒体疾病的母亲生育出线粒体正常
的子代。据图分析，下列叙述错误的是（ ）
A．甲为 MⅠ期产生的第一极体，其内含有的细胞质较少 A．若 A、B是两种原生质体，则 C需再生出细胞壁再进行植物组织培养发育成植株
B．丙为重组细胞，在精子入卵后被激活完成减数分裂 II B．若 A、B是动物细胞，在体外培养 C时通常需要在培养基中加入血清等天然成分
C．丁植入子宫前必须对受体进行免疫检查避免发生排斥反应 C．若 A是卵母细胞，在体细胞核移植中需去核，实质上是去除纺锤体-染色体复合物
D．丁中的 B为滋养层细胞，将来发育成胎膜和胎盘的一部分 D．若 A是卵母细胞，为获得数量较多的 A，可以给优良雌性供体注射一定量雌激素
21．下列关于动物体细胞核移植技术及其应用的叙述，错误的是（ ） 27．某同学将质粒 DNA 进行限制酶酶切时，发现 DNA完全没有被酶切，分析可能的原因并提出解决
A．利用体细胞核移植技术克隆动物依据的原理是动物体细胞的全能性 方法。下列叙述错误的是（ ）
B．核移植技术与干细胞诱导技术结合，可用于修补人体损伤的器官 A．限制酶失活，更换新的限制酶
C．克隆遗传背景相同的动物，可以通过它们之间的对比来分析致病基因 B．酶切条件不合适，调整反应条件如温度和酶的用量等
D．利用体细胞核移植技术可以加速家畜遗传改良进程、促进优良畜群繁育 C．质粒 DNA突变导致酶识别位点缺失，更换正常质粒 DNA
22．为保护濒危哺乳动物甲，科研工作者将甲的近亲物种乙（种群数量多）进行了如图所示的研究， D．酶切位点被甲基化修饰，换用对 DNA甲基化不敏感的限制酶
下列叙述错误的是（ ） 28．某同学拟用限制酶(酶 1、酶 2、酶 3和酶 4)、DNA连接酶为工具，将目的基因(两端含相应限制
酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接，以构建基因表达载体。限制酶的切割位点如图所示。
A．动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植
B．防止多精入卵的屏障有透明带反应和卵细胞膜反应
C 下列重组表达载体构建方案合理且效率高的是（ ）．囊胚①的内细胞团具有全能性，该时期无细胞分化
D A．质粒和目的基因都用酶 3切割，用 E.coli DNA连接酶连接．该项研究证明了滋养层可明显影响内细胞团的发育
23 B．质粒用酶 3切割、目的基因用酶 1切割，用 T4 DNA连接酶连接．全球首批机器人成功“孕育”婴儿引起了大家的关注，这是利用西班牙某公司研发的机器人完成的，这个
C．质粒和目的基因都用酶 1和酶 2切割，用 E.coli DNA 连接酶连接
机器人可代替专业人员完成试管婴儿的体外受精过程。下列有关试管婴儿的叙述，错误的是（ ）
A D．质粒和目的基因都用酶 2和酶 4切割，用 E.coli DNA 连接酶连接．试管婴儿和克隆动物的培育原理、操作步骤等不太一致
高 2024级 生物试题 第5页 共8页 高 2024级 生物试题 第6页 共8页
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29．BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ三种限制酶的识别序列和切割位点依次为 5′－G↓GATCC－3′、5′－↓GATC－ 胞毒性 T细胞增殖。科研人员通过动物细胞融合技术制备抗 CTLA-4单克隆抗体的过程如图所示。回
3′、5′－CCC↓GGG－3′。如图表示某 DNA片段的部分碱基序列，已知其余序列不含这三种限制酶的识 答下列问题：
别序列。下列叙述正确的是（ ）
A．若用 SmaⅠ完全切割该 DNA，则其产物的长度为 634 bp、896 bp、758 bp
B．若虚线方框内的碱基对被 T—A替换，则用 SmaⅠ完全切
割该 DNA可产生 3种片段
C．若用 MboⅠ和 BamHⅠ切割该 DNA，可形成相同的黏性末端
D．用 SmaⅠ切割该 DNA 产生的片段，用 E.coli DNA连接酶
（1）为了在小鼠体内获得能产生特定抗体的 B淋巴细胞，需要先给小鼠注射的抗原是________。图
重新将其连接效率较高
中过程①诱导细胞融合常用的方法有 PEG融合法、电融合法和 诱导法等。
30．下列关于“DNA的粗提取和鉴定实验”叙述正确的是（ ）
（2）单克隆抗体制备过程中，需要用特定的选择培养基进行第一次筛选，在该培养基上，未融合的细
A．根据 DNA易溶于酒精，而某些蛋白质不溶于酒精可以粗提取 DNA
胞和________的细胞都会死亡，筛选得到的细胞具有的特点是________（2分）。将第一次筛选获得的
B．如果选用新鲜的猪血液作为提取材料，可用吸水胀破法辅助释放 DNA
细胞进行克隆化培养和________，经过多次筛选，就可以获得产生单克隆抗体的细胞。
C．实验中的两次离心，第一次需要的是沉淀物，第二次需要的是上清液
（3）能产生所需抗体的杂交瘤细胞可注射到小鼠腹腔内增殖或进行 ，后者在培养过程中______
D．只加 NaCl溶液和二苯胺的试管在沸水后未变色，是为了排除 NaCl对实验现象的干扰
（填“需要”或“不需要”）分瓶培养，原因是________________________（至少答出两点）（2分）。
二、非选择题（4个大题，共 40分） 33．（每空 2分，共 10分）BamHⅠ和 BclⅠ是两种限制酶，其识别序列及切割位点如表所示。探究下列
31．（除标注外，每空 1分，共 10分）磷是植物生长的重要元素，施入土壤中的磷，大多数会与 Ca2+ 问题：
等阳离子结合形成难溶性磷酸盐。高效解磷菌可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷形成溶磷圈， 限制酶 BamH Ⅰ Bcl Ⅰ
下图为科研人员从贡柑果园土壤中筛选出高效解磷菌的主要流程。回答下列问题：
识别序列及切割位点
（1）限制酶_________（填“能”或“不能”）切割原核细胞自身的 DNA，推测其理由是______。
（2）若环状 DNA分子中含有两个 BamHⅠ的识别序列，三个 BclⅠ的识别序列，该 DNA分子将被切成
________个片段。
（1）步骤③在最后一次稀释后，在 3个平板上分别滴入 0.1mL稀释液，经适当培养后，得到的结果 （3）BclⅠ和 BamHⅠ切割后产生的黏性末端能不能被 DNA连接酶连接，作出判断并说明理由_________。
分别是 39、38、37，据此计算每克土样中的活菌数为 个。运用这种方法统计的菌落数 （4）请画出图中经 BclⅠ和 BamHⅠ切割后的两种片段重新拼接成的 DNA序列___________。
往往比活菌实际数目少，原因是 （2分）。 34．（每空 2分，共 10分）某种昆虫的正常翅与裂翅、红眼与紫红眼分别由基因 B（b）、D（d）控制。
（2）步骤④中待菌落长好后，应以 为标准来挑选菌落，再进行下一步平板划线操作。通 为研究其遗传机制，选取裂翅紫红眼雌、雄个体随机交配，得到的 F1表现型及数目见下表。
常情况下，对获得的纯菌种可以依据 的特征(如形状、大小、颜色等)对细菌进行初步的鉴
定和分类。 裂翅紫红眼 裂翅红眼 正常翅紫红眼 正常翅红眼
（3）实验中欲判断选择培养基是否起到了选择作用，对照组应如何设置： （2分）。 雌性个体（只） 102 48 52 25
（4）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究
雄性个体（只） 98 52 48 25
人员将它们接种到特定的培养基中，并在 37℃、200r·min－1摇床培
养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到如图的曲线。 （1）该昆虫的红眼与紫红眼中，隐性性状是 _______，B（b）、D（d）这两对等位基因的遗传符合
实验中用摇床进行培养的优点是 （答 2点,2分）。 ____________定律。
本实验结果表明在 168小时以内最优良的解磷菌株是 。 （2）亲本裂翅紫红眼雌性个体的基因型为____________。F1的基因型共有_________种。
32．（除标注外，每空 1分，共 10分） CTLA-4是存在于 T细胞 （3）若从 F1中选取裂翅紫红眼雌性个体和裂翅红眼雄性个体交配。理论上，其子代中杂合子的比例
表面的受体蛋白。CTLA-4可阻断 T细胞的抗原呈递，从而抑制细 为_____________。
高 2024级 生物试题 第7页 共8页 高 2024级 生物试题 第8页 共8页
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