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模块检测试卷(一)
[分值：100分]
一、选择题(本题包括18小题，每小题3分，共54分)
1．下列有关传统发酵技术的说法，不正确的是(　　)
A．制作果酒时瓶口需密闭，而制作果醋时中断通氧可能会引起醋酸菌死亡
B．腐乳制作时利用了酵母、曲霉和毛霉等微生物
C．制作泡菜时需要控制严格的有氧条件、发酵温度和发酵时间
D．在果酒、泡菜的自然发酵过程中，菌种可由原料本身提供
2．某研究小组用马铃薯琼脂培养基对新酿米酒中的酵母菌(适宜pH为3.8～6.0)进行初步分离，结果如图。下列叙述正确的是(　　)
A．图a中下一次划线总是从上一次划线的首端开始
B．配制好的马铃薯琼脂培养基灭菌后需要进行pH调节
C．浸泡在酒精中消毒的涂布器使用前需要在火焰上灼烧
D．图a、图b的方法都可以实现对酵母菌的分离和计数
3．聚羟基脂肪酸酯(PHA)是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图如图所示。下列说法正确的是(　　)
①取湖水→②接种在培养基上→③培养→④挑取单菌落，分别扩大培养→⑤检测菌的数目和PHA的产量→⑥获得目标菌株
A．步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上
B．扩大培养时，接种后需要将培养基放入恒温箱倒置培养，以防杂菌污染
C．④所用到的培养基应加入琼脂，以便挑取单菌落获得纯化菌株
D．挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量
4．(2025·珠海高二期中)从土壤中分离五种能分解纤维素的细菌菌株，培养基中出现了因分解纤维素而产生的透明圈，操作过程如图所示。下列叙述错误的是(　　)
A．分解纤维素能力最强的是E菌株，应对其扩大培养
B．配制培养基时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性
C．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触
D．若平板中平均菌落数为120个，则1 g土壤中含能分解纤维素的细菌1.2×107个
5．(2025·兰州高二质检)青枯病是一种严重危害马铃薯的病害，茄子对青枯病具有一定抗病性。研究者通过植物体细胞杂交技术培育抗青枯病的马铃薯新品种，在获得的90个杂种植株中，有6个具有明显的青枯病抗性。下列相关叙述错误的是(　　)
A．通过灭活病毒诱导马铃薯原生质体与茄子原生质体融合，进一步筛选出杂种细胞
B．杂种细胞中来自茄子的染色体随机丢失可能是部分杂种植株无明显抗病性的原因
C．利用PCR技术可以检测杂种植株中是否具有来自茄子的青枯病抗性基因
D．茄子和马铃薯之间存在生殖隔离，不能采用杂交育种的方法来培育抗病马铃薯
6．(2025·徐州高二期末)细胞产物的工厂化生产是植物细胞工程的重要应用之一，这些细胞产物主要是植物通过代谢产生的次生代谢物。下列叙述错误的是(　　)
A．次生代谢物是酚类、萜类和含氮化合物等一类小分子有机化合物
B．次生代谢物是植物细胞生存所必需的物质
C．可以通过植物细胞培养获得细胞产物
D．紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种次生代谢物
7．(2024·福建，7)中国水仙是一种三倍体观赏花卉。传统生产采用分球茎繁殖方式，不仅周期长、产率低、花色单调，还易积累病毒。下列措施无法达到改良目的的是(　　)
A．用水仙鳞片进行植物组织培养以提高产率
B．利用单倍体育种对中国水仙进行品种选育
C．选用水仙幼嫩组织作为外植体获得脱毒苗
D．通过基因工程技术引入外源基因改变花色
8．良种试管牛的繁殖过程是用激素促进甲牛多排卵，然后把卵子在体外与人工采集的乙牛的精子进行受精，在特定培养基中培育成胚胎，再把胚胎送入经过激素处理的丙牛的子宫内，孕育成试管牛。下列相关叙述错误的是(　　)
A．精、卵结合前都需要进行培养
B．“促进甲牛多排卵”的激素是孕激素
C．甲牛、乙牛对试管牛核遗传物质的贡献相同
D．该技术可应用于加快优良种畜的繁殖
9．将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞，其过程如图所示。下列有关叙述错误的是(　　)
A．①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同
B．经①过程形成的杂交细胞都能无限增殖并产生特定抗体
C．②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞
D．抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性
10．(2024·河北，13)下列相关实验操作正确的是(　　)
A．配制PCR反应体系时，加入等量的4种核糖核苷酸溶液作为扩增原料
B．利用添加核酸染料的凝胶对PCR产物进行电泳后，在紫外灯下观察结果
C．将配制的酵母培养基煮沸并冷却后，在酒精灯火焰旁倒平板
D．将接种环烧红，迅速蘸取酵母菌液在培养基上划线培养，获得单菌落
11．如图是三种限制酶的脱氧核苷酸识别序列和切割位点示意图(↓表示切点)。下列相关分析错误的是(　　)
A．这三种限制酶切割出的DNA片段末端都是黏性末端
B．不同限制酶切割DNA所得的黏性末端可能相同
C．能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割
D．同一个DNA经限制酶1和限制酶3分别切割后所得片段数一定相等
12．(2023·北京，6)抗虫作物对害虫的生存产生压力，会使害虫种群抗性基因频率迅速提高，导致作物的抗虫效果逐渐减弱。为使转基因抗虫棉保持抗虫效果，农业生产上会采取一系列措施。以下措施不能实现上述目标的是(　　)
A．在转基因抗虫棉种子中混入少量常规种子
B．大面积种植转基因抗虫棉，并施用杀虫剂
C．转基因抗虫棉与小面积的常规棉间隔种植
D．转基因抗虫棉大田周围设置常规棉隔离带
13．如图是将目的基因导入大肠杆菌内制备“工程菌”的示意图，其中引物1～4在含有目的基因的DNA上的结合位置如图甲所示，限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ在质粒上的识别位点如图乙所示。下列说法错误的是(　　)
A．PCR过程完成4轮循环，理论上至少需加入引物30个
B．若已经合成了图甲所示4种引物，应选择引物2和3扩增目的基因
C．过程①中应使用限制酶BamHⅠ切割质粒
D．对于转化失败的大肠杆菌及其培养基应进行灭菌处理，以防其污染环境
14．应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效益。如图表示培育生物新品种的过程。请据图判断，下列叙述正确的是(　　)
A．图中①过程需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶和载体
B．图中⑤过程需要的培养基中只需加入无机营养和植物激素
C．将prG导入细胞Ⅰ，细胞Ⅰ是B淋巴细胞
D．要检测抗虫棉的抗虫特性，不需要做抗虫接种实验，检测毒蛋白即可
15．科研人员为选育出尿嘧啶缺陷型酵母菌，将诱变处理后的酵母菌先在完全培养基上进行点种，之后将完全培养基中的酵母菌菌落接种在尿嘧啶缺陷型极限培养基上，前后位置及编号对应，两培养基的菌落情况如图所示。下列相关叙述不正确的是(　　)
A．在接种酵母菌之前需要对培养基进行高压蒸汽灭菌
B．图示用稀释涂布平板法进行接种，可用于微生物的计数
C．从完全培养基中挑取菌落b、c进行纯化培养，以获得尿嘧啶缺陷型酵母菌
D．接种后的平板需要倒置，并放置在28 ℃左右的恒温箱中进行培养
16．(2025·晋城高二月考)一对夫妇都是O型血，通过“试管婴儿”技术却生下一个A型血的孩子。经检测，作为独生子的丈夫被确诊为“异源嵌合体”(指身体中存在来自不同受精卵的细胞群)，该孩子的血型与“异源嵌合体”有关。下列叙述正确的是(　　)
A．“试管婴儿”的培育过程涉及细胞核移植、体外受精等技术
B．“试管婴儿”与“克隆动物”的原理相同，不会面临伦理问题
C．该丈夫可能是在胚胎期“吸收”了异卵双生兄弟的早期胚胎
D．可将2个囊胚的内细胞团与滋养层交换重组，构建“异源嵌合体”
17．研究人员将OsG、EcC、EcG和TSR四种酶的基因分别与叶绿体转运肽基因连接，构建多基因表达载体(载体部分序列如图所示)，然后利用农杆菌转化法转化水稻，在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。下列叙述正确的是(　　)
A．四个基因都在水稻叶绿体内进行转录翻译
B．可选用含卡那霉素或潮霉素的培养基筛选被转化的水稻细胞
C．图中叶绿体转运肽基因转录时都以DNA的同一条单链为模板
D．可用抗原—抗体杂交技术检测叶绿体中是否含有四种酶
18．(2025·保定高二期中)病毒可以使人患病并危及生命安全，但合理利用病毒，也可以造福人类。下列有关病毒的应用实践，应当禁止的是(　　)
A．引入兔黏液瘤病毒控制野兔的数量以保护澳洲草原
B．在适当条件下用灭活的仙台病毒诱导动物细胞融合
C．将外源基因与T2噬菌体基因融合并使其表达以研究外源基因的功能
D．对流感病毒基因进行改造，使具有某种易感基因的人群感染这种病毒
二、非选择题(本题包括4小题，共46分)
19．(11分)(2024·江西，17)聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为获得高产磷脂酶的微生物，研究人员试验了2种方法。回答下列问题：
(1)(4分)方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇胺(一种磷脂类物质)为唯一碳源制备____________培养基，可提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有__________、__________、____________等营养物质。
(2)(4分)方法2采用____________技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基因外，该技术还需要____________、____________、____________等“分子工具”。
(3)(1分)除了上述2种方法之外，还可以通过____________技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物。
(4)将以上获得的微生物接种到鉴别培养基(在牛肉膏蛋白胨液体培养基中添加2%的琼脂粉和适量的卵黄磷脂)平板上培养，可以通过观察卵黄磷脂水解圈的大小，初步判断微生物产磷脂酶的能力，但不能以水解圈大小作为判断微生物产磷脂酶能力的唯一依据。从平板制作的角度分析，其原因可能是_____________________________________________________
________________________________________________________________________。
20．(10分)甘蓝型油菜(异源四倍体)易感染黑胫病菌引起黑胫病，但黑芥能抗黑胫病，两者存在生殖隔离。科研人员采用如图所示的过程获得了抗黑胫病的甘蓝型油菜植株。回答下列问题：
(1)为了避免黑芥遗传物质对甘蓝型油菜产生影响，实验中利用X射线破坏黑芥染色体，可能会使染色体数目、结构发生变化。由于突变具有不定向性，参与融合的黑芥原生质体存在的问题有________________________________________________________________________
________________________________________________________________________(答出1点)，因此需要进行筛选。
(2)步骤①可用________________处理植物细胞来获得原生质体，处理的时间长短对原生质体的结构几乎没有影响，原因是_____________________________________________________
________________________________________________________________________。
诱导两种原生质体融合的化学方法有______________________________________(答出2种)。
(3)获得的部分具有黑胫病抗性的甘蓝型油菜不能产生正常配子，原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
21．(10分)如图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病(基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素)的过程设计图解。请据图回答下列问题：
(1)图中①所示的结构名称是____________。
(2)(2分)图中Ⅰ、Ⅲ所示的生物技术名称分别是__________________、____________。
(3)过程Ⅰ通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为___________________________________________________________。
(4)图中过程Ⅲ通常用②作为受体细胞的原因是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(5)图示治病的方法与一般的异体移植相比最大的优点是________________。
22．(15分)(2025·黄冈高二期末)气孔是指植物叶表皮组织上两个保卫细胞之间的孔隙。已知干旱胁迫下，相关基因表达量上升，会使脱落酸含量上升，从而调控气孔的开放。A、R基因的表达量均受脱落酸诱导显著上调，R基因编码的R蛋白是脱落酸信号通路中的一种调控因子，可与A基因编码的A蛋白(一种转录因子)结合。为研究A蛋白、R蛋白在P基因(编码的P蛋白是一种水通道蛋白)表达中的作用，研究者构建多种表达载体，最终导入棉花细胞中，检测结果如图所示。回答下列问题：
(1)(3分)构建表达载体2时，A基因作为目的基因需位于启动子之后，启动子的作用是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
为让A基因与载体正确连接，应用________种限制酶同时切割获取基因和载体。
(2)(2分)表达载体3中的R基因是经PCR扩增获得的，在扩增R基因的反应体系中，除游离的脱氧核苷酸外，还需加入______________________________________________
(答两点)和引物等；若该R基因循环扩增5次，则需引物________个。
(3)利用农杆菌转化法将表达载体1导入棉花细胞中时，必须将P基因及GUS蛋白基因插入到农杆菌的________中，为使农杆菌能高效吸收表达载体1，可先用________处理农杆菌。获得的含表达载体1的棉花植株，除用PCR等技术检测GUS蛋白基因外，还需用________法检测其相应的表达产物。
(4)由图2可知，当只导入表达载体1时，GUS蛋白的表达量较多，当导入表达载体1和表达载体2时，GUS蛋白的表达量较少，可推测__________________________________
________________________________________________________________________；
当同时导入表达载体1、表达载体2、表达载体3时，GUS蛋白的表达量几乎为零，由此推测________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
模块检测试卷(一)
[分值：100分]
一、选择题(本题包括18小题，每小题3分，共54分)
1．下列有关传统发酵技术的说法，不正确的是(　　)
A．制作果酒时瓶口需密闭，而制作果醋时中断通氧可能会引起醋酸菌死亡
B．腐乳制作时利用了酵母、曲霉和毛霉等微生物
C．制作泡菜时需要控制严格的有氧条件、发酵温度和发酵时间
D．在果酒、泡菜的自然发酵过程中，菌种可由原料本身提供
答案　C
解析　酵母菌发酵产生酒精时需要无氧的环境，所以制作果酒时瓶口应密闭，而醋酸菌是好氧细菌，所以制作果醋时要适时通氧，中断通氧会引起醋酸菌死亡，A正确；利用传统发酵技术制作腐乳时利用的微生物有酵母、曲霉和毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，B正确；制作泡菜时需要控制严格的无氧条件、发酵温度和发酵时间等，C错误；果酒发酵的酵母菌可来自水果表面的野生酵母菌，泡菜发酵所需的乳酸菌可来自蔬菜表面，D正确。
题点　传统发酵技术的应用综合
2．某研究小组用马铃薯琼脂培养基对新酿米酒中的酵母菌(适宜pH为3.8～6.0)进行初步分离，结果如图。下列叙述正确的是(　　)
A．图a中下一次划线总是从上一次划线的首端开始
B．配制好的马铃薯琼脂培养基灭菌后需要进行pH调节
C．浸泡在酒精中消毒的涂布器使用前需要在火焰上灼烧
D．图a、图b的方法都可以实现对酵母菌的分离和计数
答案　C
解析　图a的接种方法为平板划线法，下一次划线总是从上一次划线的末端开始，达到逐级稀释菌种的目的，A错误；配制培养基时，应先调节pH再灭菌，B错误；图a(平板划线法)、图b(稀释涂布平板法)的方法都可以实现对酵母菌的分离，但平板划线法不能用于计数，D错误。
题点　微生物的基本培养技术综合
3．聚羟基脂肪酸酯(PHA)是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图如图所示。下列说法正确的是(　　)
①取湖水→②接种在培养基上→③培养→④挑取单菌落，分别扩大培养→⑤检测菌的数目和PHA的产量→⑥获得目标菌株
A．步骤②可用稀释涂布平板法接种到含合成塑料的选择培养基上
B．扩大培养时，接种后需要将培养基放入恒温箱倒置培养，以防杂菌污染
C．④所用到的培养基应加入琼脂，以便挑取单菌落获得纯化菌株
D．挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量
答案　D
解析　步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基上，A错误；扩大培养应选用液体培养基，且液体培养基中不应加入琼脂，B、C错误。
题点　目标微生物的筛选与鉴定
4．(2025·珠海高二期中)从土壤中分离五种能分解纤维素的细菌菌株，培养基中出现了因分解纤维素而产生的透明圈，操作过程如图所示。下列叙述错误的是(　　)
A．分解纤维素能力最强的是E菌株，应对其扩大培养
B．配制培养基时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性
C．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触
D．若平板中平均菌落数为120个，则1 g土壤中含能分解纤维素的细菌1.2×107个
答案　D
解析　由题图分析可知，E菌落的透明圈直径和菌落直径的比值最大，所以分解纤维素能力最强的是E菌株，应对其扩大培养，A正确；培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性，B正确；据图可知，若平板中平均菌落数为120个，则1 g土壤中含有能分解纤维素的细菌120×105÷0.1＝1.2×108(个)，D错误。
题点　其他微生物的分离与计数
5．(2025·兰州高二质检)青枯病是一种严重危害马铃薯的病害，茄子对青枯病具有一定抗病性。研究者通过植物体细胞杂交技术培育抗青枯病的马铃薯新品种，在获得的90个杂种植株中，有6个具有明显的青枯病抗性。下列相关叙述错误的是(　　)
A．通过灭活病毒诱导马铃薯原生质体与茄子原生质体融合，进一步筛选出杂种细胞
B．杂种细胞中来自茄子的染色体随机丢失可能是部分杂种植株无明显抗病性的原因
C．利用PCR技术可以检测杂种植株中是否具有来自茄子的青枯病抗性基因
D．茄子和马铃薯之间存在生殖隔离，不能采用杂交育种的方法来培育抗病马铃薯
答案　A
解析　可以通过电融合法、聚乙二醇融合法等诱导马铃薯原生质体与茄子原生质体融合，灭活病毒诱导法只能诱导动物细胞融合，A错误。
题点　植物体细胞杂交技术的过程文字描述类
6．(2025·徐州高二期末)细胞产物的工厂化生产是植物细胞工程的重要应用之一，这些细胞产物主要是植物通过代谢产生的次生代谢物。下列叙述错误的是(　　)
A．次生代谢物是酚类、萜类和含氮化合物等一类小分子有机化合物
B．次生代谢物是植物细胞生存所必需的物质
C．可以通过植物细胞培养获得细胞产物
D．紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内的一种次生代谢物
答案　B
解析　次生代谢物不是植物生长所必需的物质，B错误。
题点　细胞产物的工厂化生产——次生代谢物
7．(2024·福建，7)中国水仙是一种三倍体观赏花卉。传统生产采用分球茎繁殖方式，不仅周期长、产率低、花色单调，还易积累病毒。下列措施无法达到改良目的的是(　　)
A．用水仙鳞片进行植物组织培养以提高产率
B．利用单倍体育种对中国水仙进行品种选育
C．选用水仙幼嫩组织作为外植体获得脱毒苗
D．通过基因工程技术引入外源基因改变花色
答案　B
解析　中国水仙是一种三倍体观赏花卉，其在形成配子时联会紊乱，不能形成正常的配子，不能进行单倍体育种，B符合题意。
题点　基因工程和植物细胞工程综合
8．良种试管牛的繁殖过程是用激素促进甲牛多排卵，然后把卵子在体外与人工采集的乙牛的精子进行受精，在特定培养基中培育成胚胎，再把胚胎送入经过激素处理的丙牛的子宫内，孕育成试管牛。下列相关叙述错误的是(　　)
A．精、卵结合前都需要进行培养
B．“促进甲牛多排卵”的激素是孕激素
C．甲牛、乙牛对试管牛核遗传物质的贡献相同
D．该技术可应用于加快优良种畜的繁殖
答案　B
解析　从大型动物体中采集的卵母细胞，要经体外人工培养至MⅡ期才具备受精能力，精子也需要进行获能培养，A正确；促进动物多排卵的激素是外源促性腺激素，B错误；试管牛的核遗传物质一半来自甲牛的卵子，一半来自乙牛的精子，C正确。
题点　试管动物流程
9．将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹”，能够用于杀死人类某些癌细胞，其过程如图所示。下列有关叙述错误的是(　　)
A．①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同
B．经①过程形成的杂交细胞都能无限增殖并产生特定抗体
C．②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞
D．抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性
答案　B
解析　经①过程形成的杂交细胞不一定都能无限增殖并产生特定抗体，需要经过克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，B错误。
题点　单克隆抗体的制备
10．(2024·河北，13)下列相关实验操作正确的是(　　)
A．配制PCR反应体系时，加入等量的4种核糖核苷酸溶液作为扩增原料
B．利用添加核酸染料的凝胶对PCR产物进行电泳后，在紫外灯下观察结果
C．将配制的酵母培养基煮沸并冷却后，在酒精灯火焰旁倒平板
D．将接种环烧红，迅速蘸取酵母菌液在培养基上划线培养，获得单菌落
答案　B
解析　配制PCR反应体系时，加入等量的4种脱氧核糖核苷酸溶液作为扩增原料，A错误；对PCR产物进行电泳时，通过在凝胶中添加核酸染料染色，电泳后可以在波长为300 nm的紫外灯下被检测出来，B正确；酵母菌培养基应该用湿热灭菌的方法进行灭菌处理，而不是煮沸消毒，C错误；为了避免高温杀死菌种，接种环烧红后需要在酒精灯火焰旁冷却，才能蘸取酵母菌液在培养基上划线培养，获得单菌落，D错误。
题点　DNA片段的扩增及电泳鉴定的原理
11．如图是三种限制酶的脱氧核苷酸识别序列和切割位点示意图(↓表示切点)。下列相关分析错误的是(　　)
A．这三种限制酶切割出的DNA片段末端都是黏性末端
B．不同限制酶切割DNA所得的黏性末端可能相同
C．能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割
D．同一个DNA经限制酶1和限制酶3分别切割后所得片段数一定相等
答案　D
解析　据题图可知，这三种限制酶的切割位点均位于中心轴线两侧，切割出的DNA片段末端都是黏性末端，A正确；限制酶1和限制酶3切割所得的黏性末端相同，B正确；能被限制酶3切割的DNA也能被限制酶1切割，但能被限制酶1切割的DNA不一定能被限制酶3切割，故同一个DNA经限制酶1和限制酶3分别切割后所得片段数不一定相等，C正确，D错误。
题点　限制酶的类型及识别序列
12．(2023·北京，6)抗虫作物对害虫的生存产生压力，会使害虫种群抗性基因频率迅速提高，导致作物的抗虫效果逐渐减弱。为使转基因抗虫棉保持抗虫效果，农业生产上会采取一系列措施。以下措施不能实现上述目标的是(　　)
A．在转基因抗虫棉种子中混入少量常规种子
B．大面积种植转基因抗虫棉，并施用杀虫剂
C．转基因抗虫棉与小面积的常规棉间隔种植
D．转基因抗虫棉大田周围设置常规棉隔离带
答案　B
解析　在转基因抗虫棉种子中混入少量常规种子，非转基因作物的存在不会对害虫生存产生压力，A不符合题意；大面积种植转基因作物并施用杀虫剂会导致害虫大量死亡，抗性基因频率会越来越高，因为能生存的大多数都具有抗性基因，B符合题意；转基因抗虫棉与小面积的常规棉间隔种植会减少转基因作物的数量，减少对害虫的杀伤力，C不符合题意；转基因抗虫棉大田周围设置常规棉隔离带会使一部分害虫体内的非抗性基因保留下来，不至于抗性基因频率越来越高，D不符合题意。
题点　改良植物品种
13．如图是将目的基因导入大肠杆菌内制备“工程菌”的示意图，其中引物1～4在含有目的基因的DNA上的结合位置如图甲所示，限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ在质粒上的识别位点如图乙所示。下列说法错误的是(　　)
A．PCR过程完成4轮循环，理论上至少需加入引物30个
B．若已经合成了图甲所示4种引物，应选择引物2和3扩增目的基因
C．过程①中应使用限制酶BamHⅠ切割质粒
D．对于转化失败的大肠杆菌及其培养基应进行灭菌处理，以防其污染环境
答案　B
解析　PCR 技术大量扩增目的基因时，缓冲液中需要加入的引物个数计算公式为2n＋1－2(n为循环次数)，因此PCR过程完成4轮循环，理论上至少需加入引物24＋1－2＝30(个)，A正确；由于DNA聚合酶只能从5′端→3′端延伸子链，因此扩增目的基因时应选择引物1和4，B错误；①是基因表达载体的构建过程，若使用限制酶EcoRⅠ切割质粒会将目的基因插入启动子上游，目的基因不能正常表达，使用限制酶HindⅢ切割质粒将破坏标记基因，不利于目的基因的鉴定和筛选，因此该过程中应使用限制酶BamHⅠ切割质粒，C正确；为防止污染环境，对于转化失败的大肠杆菌及其培养基应进行灭菌处理，D正确。
题点　基因工程和发酵工程综合
14．应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效益。如图表示培育生物新品种的过程。请据图判断，下列叙述正确的是(　　)
A．图中①过程需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶和载体
B．图中⑤过程需要的培养基中只需加入无机营养和植物激素
C．将prG导入细胞Ⅰ，细胞Ⅰ是B淋巴细胞
D．要检测抗虫棉的抗虫特性，不需要做抗虫接种实验，检测毒蛋白即可
答案　C
解析　①过程用到的工具酶有限制酶、DNA连接酶，载体不是工具酶，A错误；⑤过程是植物组织培养，在脱分化阶段，由于细胞内没有叶绿体还不能进行光合作用，培养基中还需要加入有机营养，如蔗糖、氨基酸等，B错误；抗虫特性针对的是虫害，需要做抗虫接种实验，D错误。
题点　基因工程及应用综合
15．科研人员为选育出尿嘧啶缺陷型酵母菌，将诱变处理后的酵母菌先在完全培养基上进行点种，之后将完全培养基中的酵母菌菌落接种在尿嘧啶缺陷型极限培养基上，前后位置及编号对应，两培养基的菌落情况如图所示。下列相关叙述不正确的是(　　)
A．在接种酵母菌之前需要对培养基进行高压蒸汽灭菌
B．图示用稀释涂布平板法进行接种，可用于微生物的计数
C．从完全培养基中挑取菌落b、c进行纯化培养，以获得尿嘧啶缺陷型酵母菌
D．接种后的平板需要倒置，并放置在28 ℃左右的恒温箱中进行培养
答案　B
解析　图示采用点种的方法进行接种，B错误；菌落b和c不能在尿嘧啶缺陷型极限培养基上生长，说明菌落b和c是尿嘧啶缺陷型酵母菌，C正确；酵母菌的最适生长温度约为28 ℃，接种后的平板需要倒置，并放置在28 ℃左右的恒温箱中进行培养，D正确。
题点　目标微生物的筛选与鉴定
16．(2025·晋城高二月考)一对夫妇都是O型血，通过“试管婴儿”技术却生下一个A型血的孩子。经检测，作为独生子的丈夫被确诊为“异源嵌合体”(指身体中存在来自不同受精卵的细胞群)，该孩子的血型与“异源嵌合体”有关。下列叙述正确的是(　　)
A．“试管婴儿”的培育过程涉及细胞核移植、体外受精等技术
B．“试管婴儿”与“克隆动物”的原理相同，不会面临伦理问题
C．该丈夫可能是在胚胎期“吸收”了异卵双生兄弟的早期胚胎
D．可将2个囊胚的内细胞团与滋养层交换重组，构建“异源嵌合体”
答案　C
解析　“试管婴儿”技术不涉及细胞核移植技术，A错误；“试管婴儿”属于有性生殖，而“克隆动物”属于无性生殖，两者原理不同，且两者均会面临伦理问题，B错误；内细胞团将来发育为胎儿的各种组织，而滋养层细胞将来发育为胎膜和胎盘，将2个囊胚的内细胞团与滋养层交换重组，不能构建“异源嵌合体”，D错误。
题点　生物技术的伦理性问题综合
17．研究人员将OsG、EcC、EcG和TSR四种酶的基因分别与叶绿体转运肽基因连接，构建多基因表达载体(载体部分序列如图所示)，然后利用农杆菌转化法转化水稻，在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。下列叙述正确的是(　　)
A．四个基因都在水稻叶绿体内进行转录翻译
B．可选用含卡那霉素或潮霉素的培养基筛选被转化的水稻细胞
C．图中叶绿体转运肽基因转录时都以DNA的同一条单链为模板
D．可用抗原—抗体杂交技术检测叶绿体中是否含有四种酶
答案　D
解析　四个基因在叶绿体外进行表达，由叶绿体转运肽引导合成的蛋白质进入叶绿体，A错误；卡那霉素抗性基因不在T－DNA上，应选用含潮霉素的培养基筛选被转化的水稻细胞，B错误；由题图可知，在同一个T－DNA中3个启动子启动转录的方向不同，叶绿体转运肽基因转录时不都以DNA的同一条单链为模板，C错误。
题点　改良植物品种
18．(2025·保定高二期中)病毒可以使人患病并危及生命安全，但合理利用病毒，也可以造福人类。下列有关病毒的应用实践，应当禁止的是(　　)
A．引入兔黏液瘤病毒控制野兔的数量以保护澳洲草原
B．在适当条件下用灭活的仙台病毒诱导动物细胞融合
C．将外源基因与T2噬菌体基因融合并使其表达以研究外源基因的功能
D．对流感病毒基因进行改造，使具有某种易感基因的人群感染这种病毒
答案　D
解析　对流感病毒基因进行改造，使具有某种易感基因的人群感染这种病毒，这种被改造的病毒属于生物武器，应当禁止，D符合题意。
题点　生物技术与工程综合
二、非选择题(本题包括4小题，共46分)
19．(11分)(2024·江西，17)聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为获得高产磷脂酶的微生物，研究人员试验了2种方法。回答下列问题：
(1)(4分)方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇胺(一种磷脂类物质)为唯一碳源制备____________培养基，可提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有__________、__________、____________等营养物质。
(2)(4分)方法2采用____________技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基因外，该技术还需要____________、____________、____________等“分子工具”。
(3)(1分)除了上述2种方法之外，还可以通过____________技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物。
(4)将以上获得的微生物接种到鉴别培养基(在牛肉膏蛋白胨液体培养基中添加2%的琼脂粉和适量的卵黄磷脂)平板上培养，可以通过观察卵黄磷脂水解圈的大小，初步判断微生物产磷脂酶的能力，但不能以水解圈大小作为判断微生物产磷脂酶能力的唯一依据。从平板制作的角度分析，其原因可能是_____________________________________________________
________________________________________________________________________。
答案　(1)选择　水　无机盐　氮源　(2)基因工程(或转基因)　限制酶　DNA连接酶　载体(或质粒)　(3)诱变育种　(4)不同平板中培养基量的差异以及平板内和不同平板间培养基厚度不均匀
解析　(3)除了(1)(2)2种方法之外，还可以通过诱变育种技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物，该技术的原理是基因突变，由于基因突变具有不定向性，因而该技术具有盲目性。(4)从平板制作的角度分析，倒平板过程中没有经过定量检测，且平板倒置也可能会影响平板中培养基的厚度，因此不同平板中培养基量的差异以及平板内和不同平板间培养基厚度不均匀都会影响实验结果的判断，故不能以水解圈大小作为判断微生物产磷脂酶能力的唯一依据。
题点　基因工程和发酵工程综合
20．(10分)甘蓝型油菜(异源四倍体)易感染黑胫病菌引起黑胫病，但黑芥能抗黑胫病，两者存在生殖隔离。科研人员采用如图所示的过程获得了抗黑胫病的甘蓝型油菜植株。回答下列问题：
(1)为了避免黑芥遗传物质对甘蓝型油菜产生影响，实验中利用X射线破坏黑芥染色体，可能会使染色体数目、结构发生变化。由于突变具有不定向性，参与融合的黑芥原生质体存在的问题有________________________________________________________________________
________________________________________________________________________(答出1点)，因此需要进行筛选。
(2)步骤①可用________________处理植物细胞来获得原生质体，处理的时间长短对原生质体的结构几乎没有影响，原因是_____________________________________________________
________________________________________________________________________。
诱导两种原生质体融合的化学方法有______________________________________(答出2种)。
(3)获得的部分具有黑胫病抗性的甘蓝型油菜不能产生正常配子，原因是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
答案　(1)不能确定是否还存在抗黑胫病基因(抗黑胫病基因可能已被X射线破坏)　(2)纤维素酶和果胶酶　植物细胞膜的成分主要是蛋白质和磷脂，纤维素酶和果胶酶不能水解细胞膜　聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2＋—高pH融合法　(3)X射线处理黑芥破坏细胞中的染色体，导致获得的部分具有黑胫病抗性的甘蓝型油菜减数分裂时联会紊乱
题点　植物体细胞杂交技术的过程流程图类
21．(10分)如图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病(基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素)的过程设计图解。请据图回答下列问题：
(1)图中①所示的结构名称是____________。
(2)(2分)图中Ⅰ、Ⅲ所示的生物技术名称分别是__________________、____________。
(3)过程Ⅰ通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为___________________________________________________________。
(4)图中过程Ⅲ通常用②作为受体细胞的原因是
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(5)图示治病的方法与一般的异体移植相比最大的优点是________________。
答案　(1)细胞核　(2)动物细胞核移植技术　基因工程(或重组DNA技术)　(3)其细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质　(4)②为胚胎干细胞，这类细胞分化程度很低，具有发育全能性，可以定向诱导分化成各类细胞、组织、器官　(5)没有排斥反应
题点　基因工程和动物细胞工程综合
22．(15分)(2025·黄冈高二期末)气孔是指植物叶表皮组织上两个保卫细胞之间的孔隙。已知干旱胁迫下，相关基因表达量上升，会使脱落酸含量上升，从而调控气孔的开放。A、R基因的表达量均受脱落酸诱导显著上调，R基因编码的R蛋白是脱落酸信号通路中的一种调控因子，可与A基因编码的A蛋白(一种转录因子)结合。为研究A蛋白、R蛋白在P基因(编码的P蛋白是一种水通道蛋白)表达中的作用，研究者构建多种表达载体，最终导入棉花细胞中，检测结果如图所示。回答下列问题：
(1)(3分)构建表达载体2时，A基因作为目的基因需位于启动子之后，启动子的作用是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
为让A基因与载体正确连接，应用________种限制酶同时切割获取基因和载体。
(2)(2分)表达载体3中的R基因是经PCR扩增获得的，在扩增R基因的反应体系中，除游离的脱氧核苷酸外，还需加入______________________________________________
(答两点)和引物等；若该R基因循环扩增5次，则需引物________个。
(3)利用农杆菌转化法将表达载体1导入棉花细胞中时，必须将P基因及GUS蛋白基因插入到农杆菌的________中，为使农杆菌能高效吸收表达载体1，可先用________处理农杆菌。获得的含表达载体1的棉花植株，除用PCR等技术检测GUS蛋白基因外，还需用________法检测其相应的表达产物。
(4)由图2可知，当只导入表达载体1时，GUS蛋白的表达量较多，当导入表达载体1和表达载体2时，GUS蛋白的表达量较少，可推测__________________________________
________________________________________________________________________；
当同时导入表达载体1、表达载体2、表达载体3时，GUS蛋白的表达量几乎为零，由此推测________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
答案　(1)作为RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA　2　(2)模板、耐高温的DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)、Mg2＋(任答两点，其他合理答案也可)　62　(3)T－DNA　Ca2＋　抗原—抗体杂交　(4)A蛋白会抑制P基因启动子的活性　R蛋白可加强A蛋白对P基因启动子活性的抑制作用(或R蛋白和A蛋白对P基因启动子活性的抑制具有协同作用)
题点　改良植物品种

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