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山东省德州市2025-2026学年高二下学期期中考试生物试卷
学校：___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．浆水是一种传统发酵食品，它是以芹菜、卷心菜等蔬菜为原料发酵制成，口感微酸，消暑解渴，营养丰富。下列说法错误的是( )
A.制作过程用开水将器皿烫干净，目的是防止杂菌污染
B.该过程应先通气培养后密封发酵
C.浆水微酸主要是因为乳酸菌发酵产生了乳酸
D.该过程需要保持适宜温度，有利于微生物的发酵
2．关于微生物的培养技术及应用，下列说法正确的是( )
A.平板划线法和稀释涂布平板法都可获得微生物的纯培养物
B.配制培养基时，先调节pH再煮沸灭菌
C.培养霉菌时，一般需将培养基调至中性或弱碱性
D.能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长的微生物就能产生脲酶
3．科研人员以甲醇为原料，利用毕赤酵母工厂化生产单细胞蛋白用于饲料生产，相关流程如图所示，①～⑤表示具体步骤。下列说法错误的是( )
A.通过①可定向获得耐高温和高甲醇耐受性的菌株
B.按功能划分，②中的培养基是选择培养基
C.③发酵罐内发酵是该过程的中心环节
D.④可以采用过滤、沉淀等方法将菌体分离，再经干燥处理即可得到产品
4．获取次生代谢产物的两种途径如图，①～④表示相关步骤。下列说法正确的是( )
A.两种途径均体现了植物细胞的全能性
B.愈伤组织细胞的全能性低于外植体
C.①②过程的培养基中都需添加生长素和细胞分裂素，但两者比例不同
D.④过程主要利用促进细胞生长的培养条件提高单个细胞中次生代谢物的含量
5．有关动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较，下列说法错误的是( )
A.二者的原理都涉及细胞膜的流动性
B.融合前都需用纤维素酶和果胶酶处理细胞
C.二者融合成功的杂交细胞都含有来自两个亲本细胞的遗传物质
D.前者主要是为了获得细胞产品，后者主要是为了获得杂种植株
6．研究人员将小鼠成纤维细胞通过体外诱导获得了多能干细胞(iPS细胞)。下列说法错误的是( )
A.体外培养小鼠成纤维细胞时，为创造无毒的环境，应定期更换培养液
B.可借助载体将特定基因导入成纤维细胞诱导其形成iPS细胞
C.iPS细胞只能分化成小鼠某些特定的组织细胞
D.若利用患者自身体细胞诱导形成iPS细胞来治疗疾病可避免免疫排斥
7．利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示。下列说法正确的是( )
A.该技术的难度明显低于胚胎细胞核移植
B.供体细胞培养过程添加CO2是为了刺激细胞呼吸
C.去核是指去除纺锤体—染色体复合物
D.重组胚胎培养到原肠胚阶段才能进行移植
8．单峰骆驼在野外几乎灭绝，科学家欲通过胚胎工程的方法拯救野化单峰骆驼，进行了如图所示研究。下列说法正确的是( )
A.为使A超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素
B.为提高胚胎利用率，可采用体外受精等无性繁殖技术
C.卵裂期胚胎的总体积不增加，但有机物总量减少
D.受体C应为遗传性状优良、生产能力强的雌性个体
9．下列关于基因工程的原理与操作说法错误的是( )
A.基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的
B.基因工程的核心原理是基因重组，可定向改造生物的遗传性状
C.基因工程中用作载体的质粒通常是经过人工改造的
D.基因工程需用的工具酶有限制酶、DNA连接酶和载体
10．人体正常基因A、致病基因a中限制酶HindⅢ的切割位点如图所示。限制酶AluⅠ的识别序列及切割位点为。下列说法错误的是( )
A.基因A突变为a过程发生了碱基对的替换
B.用两种限制酶分别酶切A基因后，形成的末端类型不同
C.用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小相同
D.产前诊断时，该致病基因可选用HindⅢ进行酶切鉴定
11．关于DNA琼脂糖凝胶电泳及DNA粗提取与鉴定实验。下列说法正确的是( )
A.在相同浓度的凝胶中，DNA分子片段越长迁移速率越慢
B.电泳结束后，可通过电泳条带的亮度估算基因中的碱基对总数
C.DNA粗提取时，需使用预冷的酒精溶解DNA
D.将二苯胺试剂加入DNA溶液后即可呈现蓝色
12．基因工程和蛋白质工程的应用非常广泛。下列说法错误的是( )
A.可将抗除草剂基因导入玉米的叶绿体基因组中来防止基因污染
B.将编码牛凝乳酶的基因导入黑曲霉后，可批量生产牛凝乳酶
C.用乳腺生物反应器生产干扰素时，干扰素基因只在乳腺细胞中表达
D.蛋白质工程操作时是直接替换干扰素中的部分氨基酸，以延长其保存时间
13．研究者改造蓝细菌和酵母菌，使蓝细菌进入酵母菌细胞，二者形成内共生体。改造后的酵母菌在光照条件下能在无碳培养基中繁殖15～20代。下列说法正确的是( )
A.酵母菌的遗传物质主要是DNA
B.酵母菌生命活动所需的能量可由蓝细菌的线粒体提供
C.内共生体内蓝细菌完全依赖酵母菌的核糖体合成蛋白质
D.内共生体内蓝细菌可为酵母菌的生长提供碳源
14．水和无机盐对生物的生命活动影响非常大。下列说法错误的是( )
A.少数无机盐参与复杂化合物的组成
B.Fe是某些氨基酸R基上的成分，缺Fe会导致贫血
C.叶肉细胞吸收的氮元素可用于合成叶绿素、蛋白质
D.农作物对水和无机盐的吸收是两个相对独立的生理过程
15．细胞内的生物大分子种类繁多，结构与功能各异。下列说法错误的是( )
A.生物大分子的合成过程需要酶催化，水解过程不需要酶催化
B.蛋白质、核酸、多糖都是细胞生命活动所必需的生物大分子
C.人体中的某些蛋白质和RNA具有催化、运输、信息传递的功能
D.DNA分子的多样性主要由碱基排列顺序决定
二、多选题
16．用紫外线照射野生型大肠杆菌后，筛选精氨酸营养缺陷型菌株(缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶)的流程如图。其中过程①是接种，过程②是将培养基甲上的菌落影印到培养基乙上，继续培养一段时间。下列说法错误的是( )
A.紫外线照射可提高突变型菌株占总菌株的比例
B.①中菌液涂布均匀后应立即将培养基倒置放入培养箱培养
C.甲培养基中含有精氨酸，而乙培养基中不含有
D.培养基乙中菌落a即为精氨酸营养缺陷型菌株
17．图示是草莓植物组织培养周期，①～③表示相应过程。下列说法正确的是( )
A.进行①之前需对外植体进行灭菌以防止后续培养过程中的杂菌污染
B.过程①发生了细胞的脱分化，形成的愈伤组织是不定形的薄壁组织团块
C.过程②为再分化，愈伤组织再分化过程中可能发生基因突变
D.植物分生区附近的病毒极少甚至无病毒，可作为培育脱毒苗的外植体
18．早期胚胎可由多种方法获得，均需移植给受体才能获得后代。图中①～③表示动物。下列说法正确的是( )
A.获得②的过程中，需用MⅡ期的去核卵母细胞
B.胚胎移植前可取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定
C.经胚胎移植产生的后代遗传性状与受体保持一致
D.③可通过获得②的技术扩大生产，①②可通过获得③的技术实现性状改良
三、单选题
19．双向启动子可同时结合两个RNA聚合酶，同时驱动两个基因的转录。研究人员构建了含双向启动子的基因表达载体，以检测双向启动子的作用效果。LUC基因编码荧光素酶，可催化底物产生荧光。GUS基因编码β-葡萄糖苷酶，催化底物生成蓝色物质，且β-葡萄糖苷酶稳定性比荧光素酶高。下列说法错误的是( )
A.为排除载体干扰，对照组应设置不含双向启动子的空载质粒转化相同受体细胞
B.为连入GUS基因，需用AgeI和SalI酶切已整合双向启动子及LUC基因的质粒
C.若出现蓝色但未检测到荧光，说明双向启动子未发挥驱动双向转录的作用
D.GUS基因和LUC基因转录的模板链不是所在T-DNA的同一条链
四、多选题
20．氢键是一种弱的引力，存在于分子内部或分子之间。下列说法正确的是( )
A.水分子间由于氢键的存在，使水有较高的比热容
B.多肽链、部分核酸单链的内部均存在氢键
C.氢键的形成需要酶的催化，但氢键的断裂可无需酶催化
D.氢键易断裂易生成，所以蛋白质经高温变性后仍可恢复原来的结构
五、读图填空题
21．我国科技工作者发明的维生素C“二步发酵法”生产工艺是世界首创。一步发酵用醋酸杆菌菌种，二步发酵用氧化葡萄糖酸杆菌(“小菌”)和假单胞杆菌(“大菌”)混合菌种。如图为二步发酵法的生产流程。
(1)为筛选出醋酸杆菌，取适量一步发酵液用__________________________法接种在含有碳酸钙粉的选择培养基上，以__________(填字母)为最佳指标，分离保存菌种。
A.菌落直径大小
B.溶钙圈大小
C.溶钙圈直径与菌落直径比值
(2)对一步发酵培养液检测后发现几乎没有杂菌存在，推测可能的原因是__________________________。
(3)二步发酵过程中“大小菌”的菌种数比例会影响产酸率，菌液接入发酵罐前需对菌液中的“大小菌”计数。计数所用的培养基除含有与发酵液相同的成分外，还需添加__________________________。
(4)某检测员将菌液稀释104倍后接种了3个平板(涂布体积为0.1ml)，统计假单胞杆菌的菌落数分别是136、132和158，则每ml菌液中假单胞杆菌的数目为__________________________个。该方法统计的菌落数比实际活菌数偏小，原因是__________________________。
22．一种杂交瘤细胞只能产生一种抗体，将两株不同杂交瘤细胞融合形成的双杂交瘤细胞，可以产生双特异性抗体。PSMA是某些种类癌细胞表面高表达的膜蛋白；CD28是T细胞表面受体。PC双抗既能特异性结合某种癌细胞表面的PSMA，又能特异性地结合T细胞表面的CD28，从而激活T细胞，通过活化的T细胞来识别和杀灭目标癌细胞。PC双抗的生产流程如图1所示，PC双抗的结构及作用机理如图2所示。
(1)图1过程中涉及的动物细胞工程技术有__________________________。
(2)据图1分析，双特异性抗体生产过程中，应先将__________________________分别注射到小鼠体内，一段时间后从小鼠脾脏分离出B淋巴细胞并与小鼠的骨髓瘤细胞融合，常用的诱导融合的方法有_____________(答出两种)。经特定选择培养基筛选后的杂交瘤细胞还需要经过__________________________才能筛选出足够数量的能分泌特定抗体的杂交瘤细胞A和杂交瘤细胞B。然后诱导两种杂交瘤细胞融合，经多次筛选获得双杂交瘤细胞AB。
(3)双杂交瘤细胞AB能合成两种L链和两种H链，据图2分析，双杂交瘤细胞AB在理论上会产生多种抗体，原因是__________________________。
(4)传统化疗会广谱杀伤快速分裂的细胞，据此分析，利用PC双抗治疗癌症的优点是__________________________。
23．聚乙烯型塑料应用广泛，但其难降解的特性带来了诸多环境问题。聚酯酰胺(PEAs)的可降解性使其有望成为聚乙烯的替代品。某科研团队利用大肠杆菌构建能合成PEAs的工程菌。图1表示利用PCR技术扩增PEAs基因并在其两端添加酶切序列，其中①②为引物，图2为载体质粒示意图，大小为5000bp。
(1)利用PCR技术扩增PEAs基因时，为保证PEAs基因能与质粒连接，应将XhoI限制酶切序列的_________(填“5′”或“3′”)端与引物①②连接，写出引物①序列：5′—______________—3′(写出8个碱基即可)。
(2)研究人员将扩增后的PEAs基因经酶切后插入图2质粒中构建基因表达载体。将基因表达载体导入大肠杆菌时，常用Ca2+处理大肠杆菌，目的是__________________________。
(3)为初步筛选出含有PEAs基因的大肠杆菌，应将大肠杆菌分别接种在含潮霉素的培养基和含四环素的培养基中培养，并选择__________________________的菌落。为了检测大肠杆菌的基因表达载体中PEAs基因是否正向连接，选择HpaⅠ和BamHⅠ对基因表达载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析。若电泳结果呈现一长一短2条条带，较短的条带长度近似为________bp，则一定为PEAs基因正向连接的基因表达载体。
(4)已知B物质可抑制A蛋白发挥作用。为了避免工程菌在使用后逃逸造成环境污染，在培养液中加入B物质后，可使大肠杆菌死亡，则Y基因应为_____________(填“毒蛋白基因”或“生长必需基因”)。
24．科研人员发现，野生千禧果中M基因的表达与其耐寒性调控有关，将该基因导入栽培千禧果中可显著增强其抗寒能力。图1表示M基因，①～④表示引物，图2表示载体。
(1)PCR扩增M基因时，需选用图1中引物________(填序号)，引物是根据__________________________设计的。PCR需经历多次循环，每一轮循环的第二步是__________________________，反应缓冲液中Mg2+的作用是__________________________。
(2)M基因转录时的模板链为_____________(填“甲链”或“乙链”)。为保证M基因正确插入载体，需在M基因的A端、B端分别添加__________________________酶的识别序列，再利用__________________________酶将M基因片段拼接到载体的切口处，形成重组DNA分子。
(3)若检测M基因是否成功转录出mRNA，先__________________________，再进行PCR扩增。
25．乳酸链球菌素(Nisin)是一种蛋白质类抗生素，对某些腐败菌和致病菌有强烈的抑制作用。目前获得Nisin的唯一途径是通过乳酸链球菌发酵生产。下图为乳酸链球菌素(Nisin)的结构示意图，三个字母表示氨基酸，数字表示相应氨基酸序号。
(1)与乳酸链球菌相比，噬菌体在结构上最主要的特点是__________________________。乳酸链球菌与酵母菌在结构上都有_____________(答两点即可)。
(2)若把10号甘氨酸换成缬氨酸，则乳酸链球菌素的抗菌能力受到影响。从氨基酸角度分析，说明蛋白质的功能与__________________________有关。
(3)Nisin含有的5个硫醚环是其活性部位的核心骨架，硫醚环的存在使Nisin的空间构象高度稳定，因此Nisin常被作为肉制品、罐头的抑菌剂。已知巯基乙醇可作用于Nisin所有的硫醚环，作用位点如图所示。分析高温不会使Nisin失活而巯基乙醇可使其失活的原因__________________________。
(4)Nisin的氮元素主要存在于__________________________中。据图分析，蛋白酶作用后的产物是________________________，这些产物的分子量比乳酸链球菌素增加了__________________________，这些产物________(填“能”或“不能”)与双缩脲试剂反应显紫色。
参考答案
1．答案：B
解析：A、制作浆水时用开水烫洗器皿，高温可杀灭器皿上的杂菌，防止杂菌与发酵菌种竞争营养、影响发酵进程，该操作是传统发酵技术中防止杂菌污染的常用方法，A正确；
B、浆水发酵主要依赖乳酸菌，乳酸菌是严格厌氧型微生物，发酵全程需密封营造无氧环境，不能先通气培养，通气会抑制乳酸菌的无氧呼吸，无法产生乳酸，B错误；
C、乳酸菌进行无氧呼吸将葡萄糖分解为乳酸，乳酸使浆水呈现微酸口感，这是浆水酸味的核心来源，C正确；
D、微生物发酵需要适宜的温度，温度会影响酶的活性，适宜温度能保证乳酸菌等发酵微生物的代谢正常进行，提升发酵效率，D错误。
故选B。
2．答案：A
解析：A、平板划线法通过连续划线逐步稀释获得单菌落，稀释涂布平板法通过梯度稀释涂布获得单菌落，两种方法都能实现微生物的纯培养，获得纯培养物，A正确；
B、配制培养基时，应先煮沸灭菌再调节pH，若先调pH后灭菌，灭菌过程中pH会发生变化，导致培养基酸碱度不符合要求，B错误；
C、培养霉菌时，需将培养基调至酸性，细菌培养才需调至中性或弱碱性，C错误；
D、能在以尿素为唯一氮源的培养基上生长的微生物，可能是自身能合成脲酶分解尿素，也可能是利用其他含氮物质或共生固氮，不一定都能产生脲酶，D错误。
故选A。
3．答案：B
解析：A、步骤①通过逐步提高甲醇浓度和培养温度，可定向筛选出耐高温、高甲醇耐受性的毕赤酵母菌株，实现菌种的定向选育，A正确；
B、步骤②的培养基含酵母菌提取物、胰蛋白胨、葡萄糖，属于通用培养基，无选择作用，选择培养基需添加特定选择物质抑制非目标菌生长，B错误；
C、发酵罐内发酵是工业化生产单细胞蛋白的核心环节，直接决定产物的产量与质量，C正确；
D、酵母菌是单细胞微生物，可通过过滤、沉淀等物理方法分离菌体，干燥处理后即可获得单细胞蛋白产品，D错误。
故选B。
4．答案：C
解析：A、植物细胞全能性是指细胞发育成完整植株的潜能，途径②仅获得细胞产物，未发育成完整植株，未体现全能性，A错误；
B、愈伤组织是脱分化形成的未分化细胞，全能性高于外植体，分化程度越低全能性越高，B错误；
C、①脱分化、②再分化的培养基均需添加生长素和细胞分裂素，二者比例不同：脱分化时比例适中，再分化时生长素比例高促进生根、细胞分裂素比例高促进生芽，C正确；
D、④过程是获取次生代谢产物，需促进细胞分裂增加细胞数量，而非促进细胞生长，以此提高产物总量，D错误。
故选C。
5．答案：B
解析：A、动物细胞融合与植物体细胞杂交的原理均包含细胞膜的流动性，这是细胞融合的结构基础，A正确；
B、植物体细胞杂交需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，动物细胞无细胞壁，无需该酶处理，B错误；
C、融合成功的杂交细胞整合了两个亲本的遗传物质，同时携带双亲的遗传信息，C正确；
D、动物细胞融合主要用于制备单克隆抗体等细胞产品，植物体细胞杂交目的是获得克服远缘杂交不亲和的杂种植株，D错误。
故选B。
6．答案：C
解析：A、体外培养动物细胞时，定期更换培养液可清除代谢废物，补充营养物质，创造无毒无菌的培养环境，A正确；
B、可借助载体将特定诱导基因导入成纤维细胞，通过基因表达诱导成纤维细胞转化为iPS细胞，B正确；
C、iPS细胞是多能干细胞，能分化成小鼠多种组织细胞，并非仅特定组织细胞，C错误；
D、利用患者自身体细胞诱导的iPS细胞，细胞表面抗原与患者自身一致，移植后可避免免疫排斥反应，D错误。
故选C。
7．答案：C
解析：A、体细胞核移植技术的难度高于胚胎细胞核移植，因为体细胞分化程度高，恢复全能性更困难，A错误；
B、动物细胞培养时添加CO2的作用是维持培养液的pH，而非刺激细胞呼吸，B错误；
C、核移植时去核是去除MⅡ期卵母细胞的纺锤体—染色体复合物，保证核移植的遗传物质仅来自供体细胞核，C正确；
D、重组胚胎培养至桑椹胚或囊胚阶段即可移植，原肠胚阶段胚胎分化程度高，移植成功率低，D错误。
故选C。
8．答案：C
解析：A、促性腺激素的化学本质是蛋白质，口服会被消化道内的蛋白酶水解失效，需注射而非添加到饲料中，A错误；
B、体外受精属于有性生殖，不属于无性繁殖技术，胚胎分割才是无性繁殖技术，B错误；
C、卵裂期胚胎细胞不断分裂，但总体积基本不变，细胞呼吸消耗有机物，导致有机物总量减少，C正确；
D、胚胎移植的受体需体质健康、具有正常繁殖能力，无需遗传性状优良、生产能力强，供体才需该条件，D错误。
故选C。
9．答案：D
解析：A、基因工程是对DNA分子进行剪切、拼接、导入等操作，属于DNA分子水平的生物技术，A正确；
B、基因工程的核心原理是基因重组，可按照人类意愿定向改造生物的遗传性状，B正确；
C、天然质粒需经人工改造，添加启动子、终止子、标记基因等元件，才能作为基因工程的载体，C正确；
D、基因工程的工具酶是限制酶和DNA连接酶，载体不属于工具酶，是运输工具，D错误。
故选D。
10．答案：C
解析：A、基因A突变为a时，仅一个碱基对发生改变，属于碱基对的替换，未发生增添或缺失，A正确；
B、HindⅢ切割产生黏性末端，AluⅠ切割产生平末端，两种限制酶酶切A基因形成的末端类型不同，B正确；
C、a基因缺失一个HindⅢ酶切位点，用两种限制酶分别酶切后，产生的片段大小、数量均不同，C错误；
D、A与a基因的HindⅢ酶切位点数量不同，酶切后片段长度不同，可通过HindⅢ酶切进行产前诊断，D错误。
故选C。
11．答案：A
解析：A、DNA琼脂糖凝胶电泳中，凝胶浓度相同时，DNA分子片段越长，阻力越大，迁移速率越慢，片段越短迁移速率越快，A正确；
B、电泳条带的亮度反映DNA的含量，无法估算碱基对总数，碱基对总数需通过条带位置与标准条带对比判断，B错误；
C、DNA不溶于酒精，预冷的酒精作用是析出DNA，而非溶解，C错误；
D、二苯胺试剂鉴定DNA时，需沸水浴加热才能呈现蓝色，直接加入无颜色反应，D错误。
故选A。
12．答案：D
解析：A、叶绿体基因组属于细胞质遗传，将抗除草剂基因导入叶绿体，可避免花粉传播造成的基因污染，A正确；
B、将牛凝乳酶基因导入黑曲霉，利用微生物发酵可批量生产牛凝乳酶，降低生产成本，B正确；
C、乳腺生物反应器中，目的基因与乳腺蛋白基因的启动子连接，仅在乳腺细胞中特异性表达，C正确；
D、蛋白质工程是通过改造基因间接替换氨基酸，而非直接替换蛋白质中的氨基酸，D错误。
故选D。
13．答案：D
解析：A、酵母菌是细胞生物，遗传物质就是DNA，不存在“主要是DNA”的表述，细胞生物的遗传物质均为DNA，A错误；
B、蓝细菌是原核生物，无线粒体，其生命活动的能量由细胞质基质中的呼吸作用提供，B错误；
C、蓝细菌自身含有核糖体，可独立合成蛋白质，不依赖酵母菌的核糖体，C错误；
D、蓝细菌能进行光合作用制造有机物，可为酵母菌提供碳源，使酵母菌在无碳培养基中繁殖，D正确。
故选D。
14．答案：B
解析：A、少数无机盐参与复杂化合物组成，如Mg2+参与叶绿素组成，Fe2+参与血红蛋白组成，A正确；
B、Fe是血红蛋白的组成成分，并非氨基酸R基的成分，缺Fe会导致血红蛋白合成不足，引发贫血，B错误；
C、叶绿素、蛋白质都含有N元素，叶肉细胞吸收的氮元素可用于二者的合成，C正确；
D、农作物吸收水是自由扩散，吸收无机盐是主动运输，二者是相对独立的生理过程，D错误。
故选B。
15．答案：A
解析：A、生物大分子的合成与水解过程都需要酶催化，如蛋白质合成需要蛋白酶、水解需要肽酶，DNA合成需要DNA聚合酶、水解需要DNA酶，A错误；
B、蛋白质是生命活动的主要承担者，核酸是遗传信息的携带者，多糖是能源物质或结构物质，都是细胞必需的生物大分子，B正确；
C、人体中的酶（蛋白质或RNA）有催化功能，载体蛋白、tRNA有运输功能，激素、信号分子有信息传递功能，C正确；
D、DNA分子的多样性主要由碱基的排列顺序决定，碱基排列顺序千变万化，DNA具有多样性，D错误。
故选A。
16．答案：BD
解析：A、紫外线属于物理诱变因素，可提高基因突变的频率，从而提高突变型菌株占总菌株的比例，A正确；
B、菌液涂布均匀后，需待菌液被培养基吸收后再倒置培养，立即倒置会导致菌液流淌，菌落分布不均，B错误；
C、精氨酸营养缺陷型菌株无法合成精氨酸，甲培养基含精氨酸，所有菌株均可生长，乙培养基不含精氨酸，仅野生型生长，C正确；
D、培养基乙中菌落a不能生长，无法合成精氨酸，才是营养缺陷型菌株，D错误。
故选BD。
17．答案：BCD
解析：A、外植体只能进行消毒，不能灭菌，灭菌会杀死外植体细胞，导致培养失败，A错误；
B、过程①是脱分化，已分化的细胞恢复分裂能力，形成不定形的薄壁愈伤组织团块，B正确；
C、过程②是再分化，细胞分裂过程中DNA复制时可能发生基因突变，C正确；
D、植物分生区细胞分裂快，病毒极少甚至无病毒，可作为培育脱毒苗的外植体，D正确。
故选BCD。
18．答案：ABD
解析：A、克隆动物培育需用MⅡ期的去核卵母细胞作为受体细胞，该细胞细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质，A正确；
B、囊胚的滋养层细胞不参与胚胎发育，可取其进行性别鉴定，不会损伤内细胞团，B正确；
C、胚胎移植后代的遗传性状由供体胚胎决定，与受体无关，受体仅提供发育环境，C错误；
D、②克隆动物可通过胚胎工程扩大生产，①试管动物、②克隆动物可通过转基因技术实现性状改良，D正确。
故选ABD。
19．答案：C
解析：A、设置不含双向启动子的空载质粒转化受体细胞，可排除载体自身对实验结果的干扰，保证实验的单一变量，A正确；
B、结合质粒酶切位点，用AgeⅠ和SalⅠ酶切可保证GUS基因正确插入，与双向启动子、LUC基因匹配，B正确；
C、GUS基因表达产物稳定性高，出现蓝色说明GUS基因转录，未检测到荧光可能是LUC基因表达产物易降解，不能说明双向启动子未发挥作用，C错误；
D、双向启动子驱动双向转录，GUS和LUC基因的模板链为T-DNA的不同链，D错误。
故选C。
20．答案：AB
解析：A、水分子间的氢键使水的比热容较高，能吸收较多热量，温度不易变化，A正确；
B、多肽链的空间结构、DNA单链的局部区域、RNA的二级结构内部均存在氢键，B正确；
C、氢键的形成与断裂均不需要酶催化，是物理变化，C错误；
D、蛋白质高温变性后空间结构被破坏，无法恢复，属于不可逆变性，D错误。
故选AB。
21．答案：(1)稀释涂布平板；C
(2)培养液呈酸性，抑制大多数杂菌的生长
(3)琼脂
(4)1.42×107；当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
解析：(1)筛选微生物并计数需用稀释涂布平板法；醋酸杆菌发酵产生醋酸，醋酸能溶解培养基中的碳酸钙形成溶钙圈，溶钙圈直径与菌落直径比值越大，说明醋酸杆菌产酸能力越强，是最佳筛选指标，故选C。
(2)一步发酵培养液pH=4~5，呈强酸性，酸性环境会抑制大多数杂菌的生长繁殖，因此培养液中几乎无杂菌。
(3)微生物计数需用固体培养基，液体发酵液无凝固剂，因此计数培养基需添加琼脂作为凝固剂。
(4)计算公式：每ml活菌数=（菌落数平均值÷涂布体积）×稀释倍数；菌落平均值=(136+132+158)÷3=142，每ml数目=(142÷0.1)×104=1.42×107个；稀释涂布平板法统计偏小的原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上只观察到一个菌落。
22．答案：(1)动物细胞培养技术、动物细胞融合技术
(2)PSMA、CD28PEG；融合法、电融合法、灭活病毒诱导法克隆化培养和抗体检测
(3)L链和H链随机组合
(4)PC双抗可协助T细胞特异性杀灭癌细胞，对正常细胞损伤小
解析：(1)流程中涉及杂交瘤细胞的制备，包含动物细胞培养技术（细胞增殖）和动物细胞融合技术（B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合、杂交瘤细胞融合）。
(2)需制备针对PSMA和CD28的抗体，因此先将PSMA、CD28作为抗原注射小鼠；动物细胞融合常用诱导方法：PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法；杂交瘤细胞筛选后需经克隆化培养和抗体检测，获得能分泌特异性抗体的纯系杂交瘤细胞。
(3)双杂交瘤细胞AB能合成两种L链和两种H链，抗体由两条L链和两条H链组成，L链和H链随机组合，因此理论上会产生多种抗体。
(4)PC双抗能特异性结合癌细胞和T细胞，激活T细胞精准杀灭癌细胞，对正常细胞损伤小，避免传统化疗广谱杀伤的副作用。
23．答案：(1)3′；CTCGAGGG
(2)使大肠杆菌处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态
(3)在含四环素的培养基上能生长，在含潮霉素的培养基上不能生长；1000
(4)生长必需基因
解析：(1)PCR扩增时，限制酶切序列需连接在引物的5′端，保证酶切后目的基因两端产生黏性末端；XhoⅠ识别序列为5′-CTCGAG-3′，引物①8碱基序列可写CTCGAGGG。
(2)Ca2+处理大肠杆菌，可使大肠杆菌处于能吸收周围环境中DNA分子的生理状态（感受态），便于重组质粒导入。
(3)质粒中潮霉素抗性基因被破坏，四环素抗性基因完整，因此选择在含四环素培养基上生长、含潮霉素培养基上不能生长的菌落；质粒5000bp，PEAs基因正向连接后，HpaⅠ和BamHⅠ双酶切，短片段长度约1000bp。
(4)加入B物质后大肠杆菌死亡，说明Y基因表达产物使大肠杆菌存活，因此Y基因为生长必需基因，B物质抑制其表达导致大肠杆菌死亡。
24．答案：(1)②③；M基因(目的基因)两端的一段已知的核苷酸序列；复性；激活耐高温的DNA聚合酶
(2)乙链；BglⅡ、EcoRI；DNA连接酶
(3)提取转基因植株的总RNA，通过逆转录(反转录)合成cDNA
解析：(1)PCR扩增需一对引物分别结合模板链两端，选引物②③；引物根据M基因两端的已知核苷酸序列设计；PCR循环第二步是复性（退火），引物与模板结合；Mg2+的作用是激活耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）。
(2)M基因转录方向从A到B，模板链为乙链；结合酶切位点，A端、B端分别添加BglⅡ、EcoRⅠ识别序列；用DNA连接酶连接目的基因和载体。
(3)检测mRNA需先提取转基因植株总RNA，逆转录合成cDNA，再进行PCR扩增，通过扩增结果判断转录是否成功。
25．答案：(1)噬菌体没有细胞结构；细胞壁、细胞膜、核糖体、细胞质
(2)氨基酸种类
(3)高温不能破坏硫醚环，巯基乙醇会破坏硫醚环
(4)肽键；多肽；54；能
解析：(1)噬菌体是病毒，无细胞结构；乳酸链球菌（原核）和酵母菌（真核）共有的结构：细胞壁、细胞膜、核糖体、细胞质。
(2)10号甘氨酸替换为缬氨酸，氨基酸种类改变，蛋白质功能受影响，说明蛋白质功能与氨基酸种类有关。
(3)Nisin的硫醚环维持空间构象稳定，高温不能破坏硫醚环，因此不失活；巯基乙醇会破坏硫醚环，导致空间结构改变而失活。
(4)蛋白质中N元素主要存在于肽键中；蛋白酶水解Nisin产生多肽；蛋白酶作用断裂肽键，每断裂1个肽键增加1分子H2O，共断裂6个肽键，分子量增加6×18=54；多肽含肽键，能与双缩脲试剂反应显紫色。

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