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2026 北京陈经纶中学高二（下）期中
生 物
班级 姓名 学号
（时间：90分钟 满分：100分）
一、选择题：本大题共 15个小题，每小题 2 分，共 30 分.在每小题给出的四个选项中，有且只有一项是符
合题目要求的.
1. 为探究生长素和细胞分裂素在植物组织培养中的作用，研究者用烟草外植体进行实验，结果如图。下列
叙述合理的是（ ）
A. 需将外植体灭菌处理后接入培养基
B. 愈伤组织形成需经过基因的选择性表达
C. 诱导愈伤组织期间一般需要给予光照
D. 再分化生芽的两种激素浓度比为 1：1
2. 沙田柚味甜但籽多，研究者将其与雄性不育的温州蜜柑进行体细胞杂交，筛选出雄性不育无籽新品种“华
柚 3号”，新品种中仅线粒体基因来自温州蜜柑。下列叙述正确的是（ ）
A. 用胰蛋白酶去除两种细胞的细胞壁
B. 常用灭活病毒诱导原生质体的融合
C. 该方法可打破生殖隔离实现远缘杂交
D. 授粉后的华柚 3号不能结出有籽果实
3. 科学家将鼠的肾单位祖细胞（NPC）和输尿管祖细胞（UPC）共培养，构建出具有部分功能的类器官，
过程如下图。下列相关叙述错误的是（ ）
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A.①过程需 CO2培养箱中进行 B.①过程通常需在培养基中加入血清
C.①②过程有细胞分裂也有细胞分化 D. NPC和 UPC的子代细胞随机分布
4. 为在小鼠中实现目标基因表达的调控，研究者构建了两种载体：载体 1使用心脏特异性启动子驱动 tTA
基因表达；载体 2使用 tTA响应启动子驱动荧光素酶基因表达。已知四环素可抑制 tTA活性。下列叙述正
确的是（ ）
A. 用农杆菌转化法将两种载体导入小鼠细胞
B. 用核酸分子杂交检测小鼠是否合成 tTA蛋白
C. 可用四环素处理促进荧光素酶基因在心脏中的表达
D. 该系统实现了对荧光素酶基因表达的时空调控
5. 活性黑 5是一种低毒性、难褪色的含氮染料，常用于棉、麻等染色。现欲从染料废水堆积池的污泥中获
得能分解活性黑 5的假单胞杆菌菌株，流程如下图。下列说法不正确的是（ ）
A. 从染料废水堆积池污泥中取样的原因是此处目的菌存在的可能性大
B. 培养基Ⅰ、Ⅱ均以活性黑 5为唯一氮源，属于选择培养基
C. 在培养基Ⅰ、Ⅱ中都利用稀释涂布平板法进行接种，获得单菌落
D. 逐渐提高培养液中活性黑 5浓度有助于获得具高效分解能力的目的菌
6. 波尔山羊具有生长速度快、肉质细嫩等优点。生产中常采用胚胎移植技术快速繁殖波尔山羊。下列叙述
错误的是（ ）
A. 选择遗传性状优良的健康母羊进行超数排卵处理
B. 胚胎移植前可采集滋养层细胞进行遗传学检测
C. 生产中对提供精子的波尔公山羊无需进行筛选
D. 为确保受体与供体母羊生理状态一致，需同期发情处理
7. 将纤维素、半纤维素预处理和酶解后，利用某大肠杆菌菌株发酵产乳酸的过程如图。阻断该菌株产乙酸
（或乙醇）的代谢途径，构建了高产乳酸工程菌。相关叙述错误的是（ ）
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A. 需敲除乙酸（或乙醇）代谢途径中相关酶的基因
B. 可将纤维素酶基因等导入工程菌以简化生产环节
C. 葡萄糖可为大肠杆菌提供碳源
D. 发酵过程中需保证充足的氧气以代谢生产乳酸
8. 易错 PCR是通过改变反应条件和酶，在 DNA扩增中随机引入错误碱基，来获取突变基因的技术。对易
错 PCR的叙述错误的是（ ）
A. 使目标基因发生定向突变 B. 需加入脱氧核苷酸作为原料
C. 需根据目标基因碱基序列设计引物 D. 可用于蛋白质的优化改造
9. 为制备抗甲肝抗原的人源单克隆抗体，从病毒携带者的淋巴细胞获取抗体基因，通过基因工程使抗体展
示在噬菌体表面，从中筛选携带目标抗体的噬菌体克隆。此过程中不需要的步骤是（ ）
A．设计引物，通过 PCR获取抗体基因
B．将分离的 B细胞与骨髓瘤细胞融合并筛选
C．构建抗体基因—噬菌体表面蛋白基因融合基因
D．通过抗原—抗体杂交对噬菌体抗体库进行筛选
10. K562细胞系源自人慢性髓性白血病，在体外悬浮培养时不贴壁，也无接触抑制现象。但细胞密度过高时，
其增殖也会停止，即密度抑制。此时需将细胞接种至新鲜培养基中进行传代培养。下列相关说法正确的是
（ ）
A. 密度抑制可能与培养液中营养物质消耗及代谢废物积累有关
B. 传代时需先用胰蛋白酶处理，使细胞分散成单个后再接种
C. 培养液中需添加葡萄糖、胎牛血清和抗生素等营养成分
D. 细胞培养瓶应置于恒温且含 95%CO2的培养箱中
11. N蛋白特异性表达于胚胎干细胞（ES细胞），推测与 ES细胞未分化状态的维持有关。为验证推测，研
究者将与 N蛋白mRNA互补的三种 siRNA导入 ES细胞，检测结果如图 1、图 2。下列叙述错误的是（ ）
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A. ES细胞具自我更新能力和分化潜能 B. GAPDH检测结果排除取样量干扰
C. 推测图 2中实验组应为 siRNA-1组 D. N蛋白可抑制 ES细胞的有丝分裂
12. 天山雪莲的次生代谢物去氢木香内酯对 H2O2诱导的肝损伤有保护作用，利用植物细胞培养生产去氢木
香内酯的大致流程如下图。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 用纤维素酶和果胶酶处理雪莲茎尖外植体获得愈伤组织
B. 外植体形成愈伤组织的过程中，经历了脱分化和再分化
C. 用射线处理愈伤组织可能获得去氢木香内酯高产的细胞
D. 悬浮培养的培养液中通常含有蔗糖、氨基酸和动物血清
13. CY21基因在肺癌组织中高表达，研究者制备单克隆抗体用于早期肺癌诊断，有关制备过程的叙述错误
的是（ ）
A. 需要使用动物细胞培养的技术
B. 需制备用 CY21蛋白免疫的小鼠
C. 经抗原抗体杂交筛选特异性杂交瘤细胞
D. 筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞
14. 为获得抗白叶枯病的水稻品种，研究人员构建含抗病基因 D的重组 Ti质粒，如下图，将重组质粒导入
水稻愈伤组织，最终获得抗病植株。下列叙述正确的是（ ）
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A. 构建该重组质粒需要用限制酶和 RNA聚合酶
B. 将重组质粒用显微注射法转化入水稻愈伤组织
C. 用含潮霉素的培养基筛选成功转化的愈伤组织
D. 含 D基因的幼苗都能稳定表现抗白叶枯病性状
15. 在高中生物学基础实验中，需要在严格无菌条件下进行的是（ ）
A. 从新鲜菜花中粗提取 DNA B. 将外植体接种到培养基上
C. 使用 PCR仪扩增目的基因 D. 对酵母菌进行显微计数
二、非选择题：本大题共 6题，共 70分.
16．枸杞是一味传统中药，野生黑果枸杞富含花青素，且抗逆性强，但比人工种植的宁夏枸杞个体小、产
量低。研究人员尝试利用不对称植物体细胞杂交技术将野生黑果枸杞的抗逆性状转移到宁夏枸杞中。
(1)愈伤组织细胞生长旺盛，是制备原生质体的良好材料。在特定的培养条件下，外植体经过_________转变
成愈伤组织，培养基中___________________________________是影响该过程中植物细胞发育方向的关键因
素。
(2)不对称植物体细胞杂交操作过程如下：
①对黑果枸杞原生质体进行辐射处理，使其细胞核中的_______________部分断裂，用药物处理宁夏枸杞原
生质体，使其细胞质中的某些酶失活，两种原生质体都失去分裂能力。
②用化学诱导剂____________诱导原生质体融合，培养体系中只有两种不同枸杞的融合原生质体可分裂形
成再生愈伤组织。
(3)研究人员对 3种愈伤组织的同工酶进行检测。同工酶是功能相同，但酶本身的分子结构、理化性质等方
面有所不同的一组酶。
①过氧化氢酶的功能是___________________________。将提取的愈伤组织蛋白质进行电泳，电泳后的凝胶
浸泡在淀粉、KI和 H2O2混合溶液中，已知 KI遇 O2生成 I2，一段时间后过氧化氢酶所在部位显色，如下图
所示。显色条带为_____色，显色深浅由酶的_______决定。
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②结果显示融合原生质体再生愈伤组织中缺乏来自____________的部分过氧化氢同工酶，原因可能是
_________________________________________。
(4)本研究中，获得多株杂种植株后下一阶段的研究方向是_________。
17. （14分）我国是全球第一柑橘种植和消费国，然而白地霉侵染引起的酸腐病在贮运过程中导致柑橘腐烂，造
成损失。研究者对酸腐病进行系列研究。
（1）白地霉从柑橘果实伤口处获得其生长繁殖所必需的无机盐、水以及 等营养物质，二者之间的种
间关系是 。
（2）将桔梅奇酵母与白地霉菌种用 法分别接种到不同的平板上进行培养，再用无菌水分
别制备菌种悬液，利用 在显微镜下计数，并稀释至实验所需浓度。
(3)探究桔梅奇酵母对酸腐病的生物防治作用。
①在柑橘果实中部等距离刺两个孔，其中一孔接种白地霉和桔梅奇酵母菌悬液。一段时间后统计果实发病率并测量
白地霉菌丝生长情况，如下图：
另一个孔作为对照组的处理是 。综合图 1、图 2结果，推
测 。
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②铁是真菌生长的必需元素，是胞内重要酶活性中心的组成部分。普切明酸是桔梅奇酵母产生的一种水溶性铁鳌
合剂，能快速在培养基中扩散并与其中的Fe3+形成稳定红色复合物。研究者配制含有不同浓度 FeCl3（单位:mg/L）
的培养基，实验处理及结果如图 3所示。
桔梅奇酵母菌落周围出现红色抑菌圈的原因是 ；随培养基中 FeCl3浓度的增加，红
色抑菌圈颜色加深但变窄的原因是 ；
③研 究 者 利 用 普 切 明 酸 合 成 基 因 敲 除 的 酵 母 突 变 体 ,参 照 ②的 方 法 进 行 实 验 ,观 察
到 ；从而证明普切明酸的产生是桔梅奇酵母具有生物防治效力的
重要原因。
(4) 基于上述研究，你是否支持桔梅奇酵母推广应用于柑橘防腐保鲜，并说明理由 。
18. 顺铂是一种抗肿瘤药，普遍用于肺癌等癌症的治疗，但长期使用会使癌细胞产生耐药性。科研人员研究
了 miRNA、糖酵解与乳腺癌细胞（MCF7）耐药性之间的关系。
(1)在氧气充足条件下，正常细胞主要通过有氧呼吸第_______阶段产生 ATP。但某些肿瘤细胞即使在有氧条
件下，也主要通过糖酵解产生 ATP，被称为有氧糖酵解。
(2)为获得耐药性较强的 MCF7细胞，可在 MCF7培养液中加入顺铂，当存活的细胞达到一定数量后，用
____________处理并传代培养。每次传代时，增加培养液中顺铂的剂量。
(3)检测MCF7耐药株与非耐药株在顺铂处理后的乳酸产量，结果如下图 1。由图 1可知，耐药株的有氧糖
酵解强度_______非耐药株。
(4)耐药株中 miR-485-5p（一种 miRNA，可与靶基因的 mRNA结合）的表达量明显低于非耐药株。为研究
miR-485-5p与M基因的关系，在MCF7细胞中过表达或敲低 miR-485-5p后，电泳分离细胞裂解物，用抗
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M蛋白抗体检测，结果如图 2。
图 2结果表明 miR-485-5p___________________________________________，得出此结论的依据是
_______________________________________________________________________。
(5)在MCF7细胞中过表达或敲低M基因，检测乳酸产量，结果如
下图 3。过表达M基因时非耐药株对顺铂的抗性增强，敲低M基
因时耐药株对顺铂的抗性减弱。
综 合 上 述 研 究 ， 说 明 MCF7产 生 耐 药 性 的 机 制
_______________________________________。
19．（12分）葡萄糖二酸（GA）可作为原料应用于食品、能源和
医药等领域，科研人员通过改造工程菌以实现 GA的大量生产。
（1）M酶和 U酶是 GA合成途径中的两个关键酶，科研人员将图 1所示质粒 1导入_____________处理的
大肠杆菌，改造后的大肠杆菌可合成 GA。
（2）为实现对工程菌合成 GA的实时监测，科研人员设计了质粒 2，并进行下表所示两种检测方案。
质粒 1和 2共同导入大肠杆菌菌株
方案一 菌液分为 5组
E中 在液体培养 每组上清液加入适
基中培养一 将 E菌液与 S菌液混合，混 量 GA，检测荧光
质粒 1和 2分别导入大肠杆菌菌株
方案二 段时间 合菌液培养一段时间后分为 强度。
E和菌株 S中
5组
①据图 1分析检测方案的原理为____________。
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②检测结果如图 2，据图对比两种方案，并结合两种质粒适用范围，选择其中一种更优方案并说明理由：
______________。
（3）进一步发现由于产物 GA呈酸性影响了大肠杆菌合成 GA的能力，因而科研人员尝试以酵母菌为受体
细胞导入质粒 1，改造后的酵母菌以葡萄糖为原料合成并分泌 GA的途径如图 3。但 M酶的活性远小于 U
酶，限制了 GA产量。为改进M酶的催化效率，将含不同突变的M酶基因分别导入酵母菌，利用上述所选
方案菌株监测不同酵母菌的GA产量，操作为：______________，取等量培养液，测定其荧光值和吸光度（反
应菌体浑浊程度），挑选______________高的菌株即为 GA高产菌株。
（2）据图 3分析还可以通过______________等方法改造酵母菌以提高 GA的产量。
20. 学习以下材料，回答(1)~(4)题。
内含肽的工程学应用
内含肽是一些蛋白质中具有的特殊多肽序列。内含肽可催化其两端自剪切反应，并将内含肽上游和下
游两段多肽切口处的氨基和羧基连接，形成新的蛋白质，即外显肽。
自然状态下内含肽催化的反应是自发的。为实现对该过程的控制，研究者提出了两种改造方案，如下图。
方案一将内含肽和外显肽分别拆分为两段多肽，将内含肽和外显肽的 N段（含原蛋白质末端氨基的肽段）
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连接，将内含肽和外显肽的 C段（含原蛋白质末端羧基的肽段）连接，分别构建两种融合蛋白。IN与 IC
距离足够近时，可结合形成完整内含肽，催化 EN和 EC连接成外显肽。方案二的 IN和 IC分别连接 C1和
C2肽段，C1和 C2“屏蔽”IN和 IC的结合，在特殊诱导物的作用下可解除屏蔽。研究者基于方案二设计了蛋
白编辑系统。
肿瘤细胞表面具有某些特异性蛋白质，可作为肿瘤细胞的标志。某肿瘤细胞表面含有丰富的标志蛋白
——H和 E。细胞膜具有流动性，使H和 E存在相互靠近的可能。研究者利用肿瘤细胞的标志蛋白以及 IL-1β
（一种激活免疫细胞的细胞因子）构建蛋白编辑系统，以靶向治疗该肿瘤。
该系统应用前景广阔，可根据实际需求，通过选用不同的肽段，实现不同的作用效果。
（1）为获得融合蛋白，需先合成融合基因，再构建______________________，导入大肠杆菌，培养并分离
纯化。
（2）与方案一相比，方案二的优势是______________________________________________。
（3）综合材料信息，研究人员设计了利用蛋白编辑系统靶向治疗该肿瘤的方案。
①在下列 a～d中选择适当的元件，填入Ⅰ～Ⅳ中，完善设计方案。
a．IL-1β的 C段 b．IL-1β的 N段 c．抗 H抗体 d．抗 E抗体
②在上述设计方案中，交换 IN和 C1、IC和 C2的位置是否会影响治疗效果？请说明理由。
（4）为了将含有 H、E蛋白但不含 G蛋白的肿瘤细胞与同时含有 H、E和 G蛋白的肿瘤细胞区分开，研究
者利用荧光蛋白 S标记肿瘤细胞，请参考（3）①中的格式写出所需融合蛋白的类型，以根据荧光强度差异
区分两种肿瘤细胞____________。
21. 炎症性肠病是一种常见的肠道疾病，目前诊断主要依赖侵入性的肠镜检查。研究者利用大肠杆菌尼氏菌
株（EcN），构建可响应肠道炎症标志物硫代硫酸盐的益生菌传感器，以实现该疾病的无创超声成像检查。
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（ 1） 大 肠 杆 菌 是 一 种 常 见 的 微 生 物 ， 常 被 改 造 为 基 因 工 程 菌 ， 其 原 因 包 括
__________________________________________________________（写出 2点）。
（2）为实现超声成像，研究者将声学报告基因（ARG）导入 EcN。ARG编码的蛋白组装成气囊能产生超
声信号。图 1为硫代硫酸盐感应及 ARG表达调控的示意图。
注： 为终止子； 为启动子，箭头表示方向
S和 R基因的启动子是____________________（填“组成型”或“硫代硫酸盐诱导型”）。硫代硫酸盐作为
____________与膜传感器激酶 S结合，进而磷酸化响应调节蛋白R，磷酸化的R蛋白形成________________
后结合 P启动子激活 ARG基因表达。
（3）为进一步提高传感器的灵敏度，研究者引入了 Bxb1重组酶系统（如图 2）。该系统在感应硫代硫酸盐
后，表达 Bxb1重组酶，催化 attB与 attP位点之间的不可逆重组。
注： 为终止子； 为启动子，箭头表示方向
①与图 1相比， Bxb1重组酶系统的引入使传感器的信号强度 “不可逆放大 ”，其机制是
_____________________________________________________________________________。
②温度响应型终止子 TR在 37℃（体温）条件下失活。Bxb1上游加入 TR的作用是________。
（4）将优化后的传感器应用于肠道炎症诊断，采用“先定植-后检测”的模式（先口服工程益生菌，24小时
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后超声检查），检测效果显著优于“口服后立即检查”。推测“先定植-后检查”模式效果好的原因
___________________________________________________________。
（5）在 ARG基因后添加 attB-P7-attP-抗炎蛋白基因模块可实现_______________________。
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