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安徽芜湖市第一中学2025—2026学年度第二学期高二期中考试生物
一、单选题
1．古人用枣制醋的流程大致如下：“作酢（醋）法，凡酢，无问大小，皆得收聚，以七月七日取枣，去皮核，蒸熟，摊令冷，下曲及盐，搅匀，内瓮中，密封泥头，勿令泄气，置日中曝之。后开瓮，至十月，当臭，乃熟。”下列有关叙述错误的是（ ）
A．“蒸熟，摊令冷”先煮熟再晾凉，前者是为了杀灭杂菌，后者是为了保持微生物的活性
B．“曲”中的醋酸菌能将糖类先转化为酒精，再转化为乙酸
C．“密封泥头”有利于创造无氧环境，有利于微生物酒精发酵
D．“置日中曝之”可提高发酵液的温度，满足醋酸菌代谢需要
2．某同学食用一款冰淇淋后腹泻，故决定检测该冰淇淋大肠杆菌是否超标。已知大肠杆菌菌落在EMB培养基（伊红—亚甲基蓝琼脂培养基）上呈深紫色。我国饮用水标准规定1mL自来水中的菌落总数不可以超过100个（37℃培养48h）。下列相关叙述正确的是（　　）
A．制备培养基的基本过程为：配制培养基→灭菌→调节pH→倒平板
B．待培养基冷却至50℃左右时将培养基倒入培养皿，随后盖上皿盖立即倒置
C．若接种冰淇淋原液的EMB培养基上出现了除深紫色菌落外的其他菌落，则说明该培养基被杂菌污染
D．利用菌落数来推测冰淇淋中大肠杆菌数量时无需对冰淇淋原液进行梯度稀释
3．我国科学家利用如下图所示的液态厌氧发酵工艺，实现了高效产出乙醇和乙醇梭菌（细菌）单细胞蛋白。下列叙述错误的是（ ）
A．乙醇梭菌以CO、CO2为主要碳源，具有较强的固碳潜力
B．乙醇梭菌在发酵罐中的厌氧发酵，是该发酵工程的中心环节
C．培养乙醇梭菌时应将pH调至中性或弱碱性
D．发酵完成后，可通过提取、分离和纯化等方法获得单细胞蛋白
4．转录因子Gh1和GhE1能调控棉花愈伤组织细胞的生长发育，参与体细胞胚胎发生过程中细胞命运的重塑，其机制如图所示。下列相关分析正确的是（　　）
A．提高培养基中生长素和细胞分裂素的比例可促进愈伤组织形成芽
B．Gh1基因发生甲基化可能会抑制愈伤组织细胞的增殖
C．促进GhE1基因的表达可促进愈伤组织再分化
D．Gh1与GhE1单独作用均能调控GhPs基因的表达
5．植物甲细胞核具有耐盐碱效应，植物乙细胞质基因具有高产效应。科研人员通过植物体细胞杂交技术培育出兼有甲、乙优良性状的植物丙，过程如下图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．过程①酶解时间不同可能是因为甲、乙两种植物细胞的细胞壁结构有差异
B．进行过程②之前需使甲原生质体的细胞质和乙原生质体的细胞核失活
C．过程③融合的原生质体需在低渗溶液中保存，以防止过度失水而死亡
D．过程④一般需避光处理，过程⑤需提供光照
6．细胞划痕实验(WHA)可用于研究癌细胞的迁移能力。在癌细胞长成单层状态时，人为制造一个空白区域(划痕)，然后观察、测量划痕边缘的细胞进入空白区域的速率，以此评估细胞的迁移能力。为探究姜黄素对癌细胞迁移的影响，研究人员进行了划痕实验，结果如图。下列叙述错误的是（　　）
A．细胞培养的气体环境为95%空气和5%
B．细胞贴壁生长时发生的接触抑制现象体现了细胞膜进行细胞间信息交流的功能
C．姜黄素可通过降低癌细胞之间的黏着性来提高其迁移能力
D．通过观察基因敲除或过表达癌细胞的迁移能力，可研究特定基因在细胞迁移中的作用
7．B细胞淋巴瘤是一种恶性肿瘤，对该肿瘤的治疗方案目前有双特异性抗体治疗、CAR-T细胞疗法（采集患者自身的T细胞进行基因改造后回输治疗的方法）等。生产用于治疗B细胞淋巴瘤的双特异性抗体过程及其作用机制如图所示。下列说法正确的是（ ）
注：CD20为癌细胞表面蛋白，CD3为T细胞表面蛋白
A．图中步骤①为细胞融合，经步骤①得到的融合细胞均具有无限增殖能力
B．图中抗原X应该为CD20，步骤①后的筛选均是使用选择培养基进行筛选
C．双特异性抗体既可以识别凝集癌细胞还可以令T细胞识别杀伤癌细胞
D．与CAR-T细胞疗法相比，双特异性抗体治疗更精准，且减少了排异反应
8．小型猪的心血管系统、消化系统及生理指标与人类高度近似，其被公认为异种器官移植的理想供体。我国科学家通过基因编辑技术将利用体细胞克隆技术（如图）获得的猪肝成功植入人体，实现异种器官移植新突破。下列说法正确的是（ ）
CMAH基因：合成引起人急性体液性排斥猪抗原；hTBM基因：合成人凝血调节蛋白
A．该过程涉及基因工程、体细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植等技术
B．敲除猪的CMAH基因，能完全避免猪肝植入人体后的免疫排斥反应
C．可通过高Ca2+-高pH融合法使供体细胞和去核的卵母细胞融合形成重构胚
D．形成重构胚后直接将重构胚移入代孕母猪体内
9．下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述正确的是（　　）
A．通常采用雌性动物生殖道或获能液使精子获得能量后进行受精
B．将小鼠桑椹胚分割成2等份获得同卵双胎的过程属于无性生殖
C．体细胞核移植过程中需将采集的卵母细胞在体外培养至ＭⅡ期并将其完整的细胞核去除
D．体外受精获得的受精卵需培养至原肠胚期方可移植到受体动物的子宫内
10．基因工程会用到多种限制酶，下列为部分限制酶的识别序列和酶切位点及其在某质粒上的酶切位点。下列叙述错误的是（　　）
A．Sau3AⅠ可切割BamHⅠ和Bcl Ⅰ的识别序列，其具有专一性
B．质粒被BamHⅠ和Bcl Ⅰ切割后，并在DNA连接酶的作用下，会发生环化
C．构建重组质粒时，切割该质粒的限制酶只能是BamHⅠ
D．分别用Sau3AⅠ和BamHⅠ切割目的基因和质粒，形成的重组质粒能被Sau3A Ⅰ切成4个片段
11．利用PCR获取和扩增目的基因时，引物的选择非常关键，下列关于引物的说法错误的是（ ）
A．引物需要两种，分别与模板链的5’端和3’端结合
B．若a个目的基因经PCR过程n次循环，则需要的引物总个数为a（2n+1-2）
C．若采用的引物G、C含量较高，则可以用较高的温度复性
D．设计引物时，引物内部和引物之间不能形成双链结构
12．如图表示利用大肠杆菌生产干扰素的部分操作，质粒A中的lacZ基因的表达产物β-半乳糖苷酶可分解无色化合物X-gal而使菌落显蓝色，不含lacZ基因的菌落则呈白色。表格为不同限制酶的识别及切割位点。下列叙述错误的是（ ）
限制酶 BamH I Bcl I Sma I EcoR I
识别序列及切割位点（5’→3’） G↓GATCC T↓GATCA CCC↓GGG G↓AATTC
A．扩增干扰素基因时在一对引物的5'端分别添加BamH I及Sma I识别序列
B．构建重组质粒B时，需用到BamH I、Bcl I、Sma I、T4DNA连接酶
C．受体大肠杆菌需具备氨苄青霉素敏感和β-半乳糖苷酶合成缺陷等特征
D．转化后的菌液经稀释涂布后，挑取蓝色的单菌落作为目标工程菌
13．下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中TetR表示四环素抗性基因，AmpR表示氨苄青霉素抗性基因，BamH Ⅰ、Hind Ⅲ、Sma Ⅰ直线箭头所示为三种限制酶的酶切位点。下列相关叙述错误的是（ ）
A．要将人乳铁蛋白基因插入载体，需用Hind Ⅲ和BamH Ⅰ限制酶同时酶切载体和目的基因
B．图中能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是复制原点
C．为检测人乳铁蛋白基因是否成功表达，可采用抗原-抗体杂交技术
D．可利用显微注射法将重组载体导入供体牛受精卵中
14．天然胰岛素易形成二聚体，使得其治疗效果被降低。科研人员通过蛋白质工程使胰岛素第28位的脯氨酸替换为天冬氨酸，从而抑制了胰岛素的聚合。由此研发出的速效胰岛素类似物产品已经在临床上广泛应用。下列叙述错误的是（　　）
A．改造胰岛素从根本上讲就是改造胰岛素的相关基因
B．若要改变蛋白质的功能，可以对蛋白质的氨基酸序列进行改进
C．通过定点突变技术获得的新的胰岛素基因可直接导入大肠杆菌，用于发酵生产
D．通过蛋白质工程对胰岛素改造的过程中，对蛋白质分子结构的了解是非常关键的
15．生物技术在造福人类社会的同时也可能带来安全和伦理问题。下列叙述正确的是（ ）
A．应全面禁止试管婴儿技术
B．应在严格监控和审查条件下发展和生产生物武器
C．治疗性克隆不存在伦理道德方面的风险
D．我国不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验
二、解答题
16．柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂，食品工业生产柠檬酸时，可以红薯粉为原料经黑曲霉发酵获得，如图为黑曲霉发酵工程生产柠檬酸的简要流程图。请回答下列问题：
(1)生产柠檬酸的优良菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过_____获得。（至少答出两种育种方法）
(2)据图分析，将菌种接种至A培养基的方法为_____，将该菌种由A培养基转接至B培养基的目的是_____。
(3)请从培养基营养成分的角度分析，加蛋白胨的作用是_____。
(4)在柠檬酸发酵过程中，操作人员会定时检测培养液中的黑曲霉浓度以了解发酵进程，若将稀释了100倍的培养液用血细胞计数板（1mm×1mm×0.1mm，25个中方格，每个中方格包含16个小格）通过显微镜观察计数，则理论上统计的中方格中黑曲霉平均数量应不少于_____个才能达到个/mL的预期浓度。
(5)若用发酵工程制作黄皮甜米酒，为确定黄酒高活性干酵母（YWBY）的添加量及发酵时间，研究人员进行了相关实验，实验结果如下图2所示。根据实验结果制作黄皮甜米酒时，YWBY的最佳接种量及主发酵时间分别是_____。据下图2分析，YWBY接种量为0.12%时，酒精含量最低的原因可能是_____。
17．植物组织培养技术和植物细胞培养技术在科学研究和生产实践中得到了广泛的应用。回答下列问题。
(1)植物微型繁殖是植物繁殖的一种途径。与常规的种子繁殖方法相比，这种微型繁殖技术的特点有_____（答出2点即可）。
(2)通过组织培养技术，可把植物组织细胞培养成胚状体，再通过人工种皮（人工薄膜）包装得到人工种子（如图所示），这种人工种子在适宜条件下可萌发生长。人工种皮具备透气性的作用是_____。人工胚乳能够为胚状体生长提供所需的物质，因此应含有植物激素、糖类、水和_____等几类物质。
(3)用脱毒苗进行繁殖，可以减少作物感染病毒。为了获得脱毒苗，可以选取植物的_____进行组织培养。
(4)植物细胞培养常用于植物_____代谢物的生产，在大规模培养高产细胞前，需了解植物细胞生长和产物合成的关系。培养细胞生产代谢产物的模型分为3种，如图所示。若X只在细胞生长停止后才能合成，则X的合成符合图_____（填“甲”“乙”“丙”），根据该图所示的关系，从培养阶段及其目标角度，提出获得大量X的方法：_____。
18．我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①~⑥表示相关过程。
(1)科学家已经培育出胚胎细胞核移植猴，获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是_____。
(2)进行图1过程①时，需要满足适宜的营养、温度、渗透压、pH、气体环境以及_____等基本条件；动物组织经处理后的初次培养称为_____，当细胞发生接触抑制时，需先用_____酶处理，再进行离心收集。
(3)胚胎移植的实质是_____。
(4)科研人员发现：对灵长类动物供体细胞核染色体组蛋白H3进行表观遗传修饰，激活重构胚分化潜能调控基因A的表达，是克隆成功的关键。如图2所示，为了激活基因A的表达，研究人员将组蛋白H3去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入重构胚，同时用组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA处理重构胚。据图2分析，TSA可以_____（填“提高”或“降低”）组蛋白的乙酰化水平，进而促进基因A的表达；给重构胚注入Kdm4d的mRNA来促进基因A表达的机理是：Kdm4d的mRNA可以表达组蛋白H3去甲基化酶，_____。
19．源于细菌的纤维素酶是一种复合酶，能降解纤维素。为了提高纤维素酶的降解效率，某课题组通过筛选高产纤维素酶菌株，克隆表达降解纤维素的三种酶（如下图），研究了三种酶混合的协同降解作用，以提高生物质资源的利用效率。回答下列问题。
(1)过程①②采用以羧甲基纤维素钠为唯一碳源的培养基筛选菌株X，能起到筛选作用的原因是_____。高产纤维素酶菌株筛选时，刚果红培养基上的菌落周围透明圈大小反映了_____。
(2)过程④扩增不同目的基因片段需要的关键酶是_____。
(3)过程⑥大肠杆菌作为受体细胞的优点有_____。（至少答两点）该过程用_____处理细胞，使其处于一种_____的生理状态。
(4)课题组用三种酶及酶混合物对不同生物质原料进行降解处理，结果如下表。表中协同系数存在差异的原因是_____（答出一点）。
生物质原料 降解率（%） 协同系数
酶A 酶B 酶C 混1 混2 混1 混2
小麦秸秆 7.08 6.03 8.19 8.61 26.98 74.33 114.64
玉米秸秆 2.62 1.48 3.76 3.92 9.88 24.98 77.02
玉米芯 0.62 0.48 0.86 0.98 6.79 1.82 11.34
注：混1和混2表示三种酶的混合物
20．双孢蘑菇中的多酚氧化酶（PPO）基因表达出的PPO能催化酚类物质氧化成醌，使双孢蘑菇在采摘后发生褐变。为了减少褐变，增加双孢蘑菇贮藏加工性能，研究人员构建了反义PPO基因表达载体（将PPO基因与载体反向连接），获得了抗褐变双孢蘑菇新品种，具体过程如图所示。回答下列问题：
相关限制酶的识别序列及切割位点：
(1)构建反义PPO基因表达载体时，若科研人员需将PPO基因反向连接整合到图2中质粒上，应使用限制酶_____切割图中质粒，使用限制酶_____切割图中含PPO基因的DNA片段，以获得能反义表达PPO基因的重组质粒，再将重组质粒导入农杆菌。之后将处理过的农杆菌接种在含_____的培养基上，待长出菌落后再影印接种到含_____的培养基上，即可筛选出导入重组质粒的农杆菌。
(2)为确定反义PPO基因进入受体细胞后是否成功转录出mRNA，研究人员拟采用分子杂交技术，利用DNA探针进行检测。不对称PCR常用于制备DNA探针，其原理是利用不等量的一对引物来产生大量单链DNA（ssDNA）用作探针，加入的一对引物中含量较少的被称为限制性引物，含量较多的被称为非限制性引物。PCR的最初的若干次循环中，其扩增产物主要是双链DNA（dsDNA），但当限制性引物消耗完后，就会产生大量的ssDNA．非限制性引物应选用上图1中的引物_____。为精确控制产物生成量，研究人员尝试设计了较长的非限制性引物与较短的限制性引物，在进行一定的循环次数后，适当提高复性温度以避免残留限制性引物与模板结合。高复性温度条件下限制性引物不能结合模板链的原因是_____。
(3)抗褐变双孢蘑菇新品种褐变现象明显减少，试推测机理：_____。
参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 B B D B C C C A B D
题号 11 12 13 14 15
答案 A D B C D
16．(1)诱变育种、基因工程
(2) 平板划线法 扩大培养（或增加黑曲霉菌种数量）
(3)提供碳源、氮源、维生素
(4)30
(5) 0.1%、8天 接种量较大，菌种数量增长过快导致葡萄糖消耗过多，用于酵母菌无氧呼吸产生酒精的葡萄糖减少
17．(1)能保持植物原有的遗传特性，繁殖速度快
(2) 有利于胚状体进行呼吸作用 矿质元素
(3)茎尖
(4) 次生 丙 先培养大量细胞，改变条件使细胞停止生长，大量产生X
18．(1)体细胞分化程度高，恢复细胞核全能性较难
(2) 无菌、无毒的环境 原代培养 胰蛋白酶/胶原蛋白酶
(3)早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
(4) 提高 组蛋白H3的甲基化水平降低，对基因A表达的抑制作用减弱
19．(1) 只有能利用羧甲基纤维素钠的微生物才能生长繁殖 菌落产生的纤维素酶的活性和量
(2)耐高温的DNA聚合酶
(3) 繁殖能力强、生理结构和遗传物质简单、对环境因素敏感、容易进行遗传操作等 Ca2+ 能吸收周围环境中的DNA分子
(4)生物质原料不同、混合物中不同酶的含量不同
20．(1) KpnⅠ和MfeI KpnⅠ和EcoRI 卡那霉素 潮霉素
(2) ① 引物越短，复性时可与模板链形成的氢键数越少，越容易被高温破坏
(3)反义PPO基因转录的mRNA可与PPO基因转录的mRNA发生碱基互补配对，从而抑制翻译过程，导致PPO合成减少或无法合成

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