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第50讲　动物细胞工程
核心考点 考情分析
1.动物细胞培养 1.命题特点：结合动物细胞工程实例，重点考查单克隆抗体与克隆动物。
2.备考重点：掌握动物细胞培养、体细胞核移植及克隆动物流程；对比植物细胞工程；关注领域新进展，辨析干细胞应用的风险及伦理问题
2.动物细胞融合技术与单克隆抗体
3.动物体细胞核 移植技术
考点一　动物细胞培养
必备知识·夯基
1. 动物细胞培养
（1） 概念
从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适宜的培养条 件下，让这些细胞生长和增殖的技术。其原理是 。
（2）地位
动物细胞工程常用的技术有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融 合等。其中动物细胞培养是动物细胞工程的 。
细胞增殖　
基础　
（3）培养条件
（4）培养过程
特别提醒：①原代培养和传代培养：分瓶前的细胞培养是原代培养；分瓶 后为传代培养。
②分瓶方法：悬浮生长时，离心收集细胞加培养液制成细胞悬液后分瓶即 可，贴壁生长时需要先用胰蛋白酶等处理后再离心收集，然后分瓶。
2. 干细胞培养及其应用
种类 胚胎干细胞 成体干细胞 诱导多能干细胞
来源 骨髓、脐带血和外 周血 体细胞（如成纤维细 胞等）
特点 能分化为成年动 物体内的任何一 种类型的细胞 分化成 的 细胞或组织 类似 细胞
应用 分化成心肌细 胞、神经元和造 血干细胞等 用于治疗白血病、 帕金森病等 治疗镰状细胞贫血、 阿尔茨海默病、心血 管疾病等
早期胚胎　
特定　
胚胎干　
教材拾遗：〔选择性必修3 P46“相关信息”〕科学家已尝试采用多种方法 来制备iPS细胞，包括借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导 入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞。
1. 判断正误
提示：传代培养时通常采用培养皿或松盖培养瓶，并置于含有95％空气＋ 5％CO2的气体环境，而非密封。
提示：即使营养供应充足，传代培养的胚胎干细胞也会发生接触抑制。
×
×
提示：高温会使血清中含有的促进细胞生长和增殖所需要的营养物质 失活。
×
√
√
2. 规范表达
（1）〔选择性必修3 P44正文〕动物细胞悬浮培养时，分裂受阻的原因 有 。
细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等　
清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，同时
补充营养物质　
关键能力·提升
考向一　动物细胞培养及应用
1. （2025·广东高考5题）将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成 支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上 皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（　　）
A. 制备细胞悬液
B. 置于5％CO2等适宜条件下培养
C. 离心收集细胞
D. 用胰蛋白酶消化支架后分离片层
√
解析： 　动物细胞培养时，为增大细胞与培养液的接触面积，需要制备 细胞悬液，A正确；置于5％CO2等适宜条件下培养，其中5％的CO2可维持 培养液的pH，B正确；在成纤维细胞传代培养过程中需要通过离心收集细 胞，C正确；不用胰蛋白酶消化支架，避免将上皮细胞片层分离成单独细 胞，D错误。
2. （2025·湖北高考6题）利用犬肾细胞MDCK扩增流感病毒，生产流感 疫苗，具有标准化、产量高等优点。但MDCK细胞贴壁生长的特性不利于 生产规模的扩大，严重制约疫苗的生产效率。研究人员通过筛选，成功获 得一种无成瘤性的（多代培养不会癌变）、可悬浮培养的MDCK细胞—— XF06。下列叙述错误的是（　　）
A. XF06悬浮培养可提高细胞密度，进而提升生产效率
B. 细胞贴壁生长特性的改变是由于流感病毒感染
C. 可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感病毒
D. 采用无成瘤性细胞生产疫苗，是为了避免疫苗中有致瘤DNA的污染
√
解析： 　根据题意，与贴壁生长的细胞培养相比，XF06悬浮培养能更充 分利用空间，提高细胞密度，从而提升生产流感疫苗的效率，A正确；细 胞贴壁生长特性的改变可能是遗传物质发生改变导致的，不是流感病毒感 染导致的，B错误；细胞裂解液中，流感病毒和其他细胞裂解物的密度、 质量等性质不同，可采用离心技术从感染病毒的细胞裂解液中分离出流感 病毒，C正确；根据题意可知，无成瘤性MDCK细胞经多代培养不会发生 癌变，采用无成瘤性细胞生产疫苗，能避免疫苗中有致瘤DNA的污染，D 正确。
题后归纳：动物细胞培养和植物组织培养的比较
考向二　干细胞培养及其应用
3. ★图示科研人员利用多能干细胞（iPS细胞）培养多种细胞的相关流程。下列叙述正确的是（　　）
A. 重编辑过程提高了体细胞的分化程度和分裂能力
B. 过程①中需5％CO2促进iPS细胞的呼吸
C. 过程②中需导入不同的基因诱导分化形成不同的组织
D. 使用iPS细胞治疗可避免移植器官不足和伦理等问题
√
解析： 　重编辑过程是将分化体细胞重编程为iPS细胞，iPS细胞具有多 能性，该过程降低了体细胞的分化程度，使其具有更强的分裂和分化能 力，而不是提高了体细胞的分化程度，A错误；过程①培养iPS细胞时，5 ％CO2的作用是维持培养液的pH，而不是促进iPS细胞的呼吸，B错误；过 程②是iPS细胞分化形成不同的体细胞，由于不同组织细胞的形成是基因选 择性表达的结果，所以需导入不同的诱导分化因子诱导iPS细胞分化形成不 同的组织，C错误；iPS细胞可以分化形成各种组织和器官，使用iPS细胞治 疗可避免移植器官不足和伦理等问题，D正确。
4. （2025·江西高考3题）诱导多能干细胞（iPS细胞）在生物医药领域有 广阔的应用前景。研究人员利用多种小分子化合物协同诱导小鼠胎儿成纤 维细胞，成功获得iPS细胞。下列叙述错误的是（　　）
A. 小分子化合物改变了小鼠胎儿成纤维细胞的基因表达
B. 小鼠胎儿成纤维细胞形成iPS细胞的过程属于细胞分化
C. 利用胰蛋白酶处理小鼠胎儿某些组织可获得分散的成纤维细胞
D. 培养小鼠胎儿成纤维细胞和iPS细胞时需提供一定浓度的CO2
√
解析： 　小分子化合物通过调控基因表达使成纤维细胞重编程为iPS细 胞，改变了原有基因表达模式，A正确；成纤维细胞形成iPS细胞的过程是 逆分化（去分化），而非细胞分化，B错误；胰蛋白酶可分解细胞间质蛋 白，使组织分散为单个细胞，符合动物细胞培养操作，C正确；动物细胞 培养通常需要5％ CO2以维持培养液pH，成纤维细胞和iPS细胞培养均需此 条件，D正确。
5. （2025·八省联考晋陕青宁卷）我国科学家使用小分子化合物处理小鼠 体细胞，成功获得诱导多能干细胞（iPS细胞），降低了通过导入原癌基 因c-Myc等基因制备iPS细胞的潜在成瘤风险。下列叙述正确的是（　　）
A. iPS细胞的潜在成瘤风险来自c-Myc基因抑制了细胞的分裂分化
B. 单基因遗传病患者使用iPS细胞治疗后，体内不再携带致病基因
C. 人工制备的iPS细胞同时具备多向分化潜能和自我更新能力
D. 使用非亲缘iPS细胞能解决干细胞移植中HLA造成的免疫排斥
√
解析： 　原癌基因c-Myc等基因会促进细胞的分裂，A错误；单基因 遗传病患者使用iPS细胞治疗后，只是利用了iPS细胞分化出正常细胞 来替代病变细胞，但体内依旧携带致病基因，B错误；iPS细胞为诱导 多能干细胞，同时具备多向分化潜能和自我更新能力，C正确；非亲缘 iPS细胞HLA不同，使用非亲缘iPS细胞不能解决干细胞移植中HLA造 成的免疫排斥，D错误。
考点二　动物细胞融合技术与单克隆抗体
必备知识·夯基
1. 动物细胞融合技术
（1）制备原理
一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，但不能大量增殖；骨髓瘤细胞能 在体外大量增殖；二者融合成的杂交瘤细胞既能 ，又能产生 足够数量的 。
大量增殖　
特定抗体　
2. 单克隆抗体及其应用
（2）制备过程
特别提醒：两次筛选的目的
第一次是在诱导融合之后，利用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞。
第二次是利用96孔板培养，采用专一抗体检测的方法筛选出能产生所需特 定抗体的杂交瘤细胞。
（3）单克隆抗体的优点：特异性 、灵敏度 、可以大量制 备。
（4）单克隆抗体的应用
①被广泛用作诊断试剂，在多种疾病的诊断和病原体鉴定中发挥重要 的作用。
强　
高　
②运载药物，形成 （ADC），实现对肿瘤细胞的选 择性杀伤。
③用于治疗疾病。
抗体—药物偶联物　
1. 判断正误
提示：由于一个B细胞经分化后只能分泌一种抗体，故筛选出的单个杂交 瘤细胞也只能产生一种抗体。
√
×
提示：若仅考虑细胞两两融合的情况，将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合， 经诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨 髓瘤细胞自身融合的细胞等。
×
√
√
2. 规范表达
刺激机体发生免疫应
答，从而得到能产生特定抗体的B淋巴细胞　
单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结
合，并且可以大量制备　
关键能力·提升
考向　单克隆抗体的制备及应用
1. （2025·甘肃高考16题）肿瘤
坏死因子α（TNF-α）是一种细胞
因子，高浓度时可以引发疾病。
研究者利用细胞工程技术制备了
TNF-α的单克隆抗体，用于治疗由TNF-α引发的疾病，制备流程如图。下列叙述正确的是（　　）
A. ①是从小鼠的血液中获得的骨髓瘤细胞
B. ②含未融合细胞、同种核及异种核融合细胞
C. ③需用特定培养基筛选得到大量的杂交瘤细胞
D. ④需在体外或小鼠腹腔进行克隆化培养和抗体检测
√
解析： 　骨髓瘤细胞应该从骨髓中获取，A错误；B细胞和骨髓瘤细胞的 融合是随机的，可能有些细胞不发生融合，有些两两融合，有些多个融 合，有同种核融合细胞，也有异种核融合细胞，B正确；诱导B细胞和骨髓 瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，但不能得到大量的杂交 瘤细胞，C错误；④过程需在96孔培养板中进行克隆化培养和抗体检测，D 错误。
2. （2024·福建高考1题）我国科研团队研制出全球首个以尿液中的抗原 为靶标的戊肝诊断试剂盒，该成果属于单克隆抗体在临床上的应用。下列 叙述错误的是（　　）
A. 该试剂盒的研制过程应用了动物细胞融合技术
B. 该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特异性结合
C. 该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤
D. 该试剂盒还可用于其他类型病毒性肝炎的检测
√
解析： 　依据题干信息，戊肝诊断试剂盒属于单克隆抗体的研究成果， 单克隆抗体制备过程需要已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，所以 应用了动物细胞融合技术，A正确；该试剂盒的检测原理为抗原抗体的特 异性结合，B正确；依据题干信息，该试剂盒以尿液中的抗原为靶标，所 以该试剂盒检测前的采样不会对受检者造成创伤，C正确；抗体具有特异 性，所以戊肝诊断试剂盒只能用于戊肝的检测，不能用于其他类型病毒性 肝炎的检测，D错误。
考点三　动物体细胞核移植技术与克隆动物
必备知识·夯基
1. 动物细胞核移植技术
（1）概念
将动物一个细胞的细胞核移入去核的 中，使这个重新组合的 细胞发育成新胚胎，继而发育为动物个体的技术。
特别提醒：采用去核卵母细胞作为受体细胞的原因：①体积大、易操作； ②营养物质丰富；③具有激发细胞核全能性表达的物质。
卵母细胞　
（2）原理：动物 具有全能性。
（3）类型：哺乳动物核移植可分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，其 中 核移植较易成功。
体细胞核　
胚胎细胞　
2. 克隆动物（牛）的培育过程
教材拾遗：〔选择性必修3 P52“相关信息”〕减数分裂Ⅱ中期卵母细胞中的“核”其实是纺锤体—染色体复合物。
3. 体细胞核移植技术的应用前景及存在的问题
1. 判断正误
提示：克隆动物，是无性生殖的一种，不能大幅改良动物性状。
提示：重构胚是指人工重新构建的胚胎。
×
√
×
√
2. 规范表达
在没有穿透卵母细胞透明带的情况下去核或使其中的DNA变
性　
克隆动物细胞质中的遗传物质来自去核卵
母细胞；性状受环境的影响；在个体发育过程中有可能发生基因突变　
关键能力·提升
考向　动物体细胞核移植技术及克隆动物
1. （2025·黑吉辽蒙高考9题）研究显示，约70％的小鼠体细胞核移植胚 胎未能成功发育至囊胚期，且仅有约2％的胚胎移植到代孕母鼠后可正常 发育。下列叙述错误的是（　　）
A. 体细胞核进入去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚
B. 移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功 能状态
C. 胚胎移植到代孕母鼠后成活率低，可能是早期胚胎未能及时从滋养层内 孵化
D. 为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植
√
解析： 　移植前胚胎发育率低，一方面可能是植入的体细胞核不能完全 恢复分化前的功能状态，另一方面可能是对动物胚胎进行操作的技术尚不 完善，B正确；早期胚胎是在透明带内进行孵化的，C错误；动物胚胎细胞 分化程度低，胚胎细胞核全能性较体细胞核更高，为提高胚胎成活率，可 用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植，D正确。
2. （2026·浙江嘉兴阶段练）利用动物体细胞核移植技术培育克隆牛的过 程如图。下列叙述错误的是（　　）
A. 对乙牛注射促性腺激素可使其超数排卵
B. 将重组细胞培养成囊胚需配制一系列不同成分的培养液
C. 在低于大气CO2浓度的有氧环境中进行重组细胞的培养
D. 丁牛的性状主要由甲决定，与乙牛、丙牛也有关
√
解析： 　对乙牛注射促性腺激素可使其超数排卵，A正确；将重组细胞培 养成囊胚为早期胚胎培养，需提供95％空气和5％CO2的混合气体及一系列 营养成分不同的液体培养基，B正确，C错误；甲牛提供细胞核，乙牛的细 胞质基因会影响丁牛的性状，丙牛的生理环境也会影响其性状，丁牛的性 状主要由甲决定，与乙牛、丙牛也有关，D正确。
高考真题感悟
一、命题角度练
角度一 结合动物细胞工程的原理和流程，考查科学思维
1. （2025·北京高考14题）动物细胞培养基一般呈淡红色。某次实验时， 调控pH的CO2耗尽，培养基转为黄色。由此推断使培养基呈淡红色的是 （　　）
A. 必需氨基酸 B. 抗生素
C. 酸碱指示剂 D. 血清
√
解析： 　根据题中信息可知，调控pH的CO2耗尽，培养基转为黄色，说 明培养基颜色变化是由pH变化引起的，推断使培养基呈淡红色的是酸碱指 示剂，C符合题意。
2.（2025·黑吉辽蒙高考19题改编）如图是制备抗白细胞介素-6（IL-6）单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是（　　）
A.步骤①给小鼠注射IL-6后，应从脾中分离筛选T淋巴细胞
B.步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细胞悬液
C.步骤③加入灭活病毒或PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性
D.步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞
√
解析：本实验的目的为制备抗IL-6单克隆抗体。步骤①：用IL-6对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，A错误；步骤②：在脾组织中加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶，制成单细胞悬液；胃蛋白酶的适宜pH为1.5，而动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，在此环境下胃蛋白酶会失活，B错误；步骤③：诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合，可以用灭活病毒或PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性，C正确；步骤④：目的是筛选出杂交瘤细胞，应通过特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才会生长；步骤⑤：经过克隆化培养和抗体检测筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞，D错误。
3. （2025·贵州高考16题）如图为PML蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述正确的是（　　）
A. 应使用总蛋白进行多次免疫且
每次免疫间隔适宜时间
B. W细胞是先提取B淋巴细胞再用
PML蛋白免疫而获得
C. 步骤2的目的是去除不能产生特异性抗体的细胞
D. 应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体
√
解析： 　PML蛋白单克隆抗体的制备过程，应用PML蛋白作为抗原间隔 多次免疫小鼠，目的是获得更多的能产生PML蛋白抗体的B淋巴细胞，A错 误；W细胞是先用PML蛋白免疫而获得相应的B淋巴细胞，后通过筛选提 取能产生单一抗体的B淋巴细胞，B错误；根据题意可知步骤1是诱导W细 胞与骨髓瘤细胞融合，步骤2是利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，C错 误；根据电泳结果可知应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗 体，因为孔2中的细胞能特异性产生高密度PML蛋白，D正确。
角度二 结合动物细胞工程的应用，考查社会责任
4. （2023·北京高考12题）甲状旁腺激素（PTH）水平是人类多种疾病的 重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH，有关制备过程 的叙述不正确的是（　　）
A. 需要使用动物细胞培养技术
B. 需要制备用PTH免疫的小鼠
C. 利用抗原—抗体结合的原理筛选杂交瘤细胞
D. 筛选能分泌多种抗体的单个杂交瘤细胞
√
解析： 　单克隆抗体制备过程中需要对骨髓瘤细胞等进行培养，即需要 使用动物细胞培养技术，A正确；该操作的目的是制备单克隆抗体用于快 速检测PTH，故应用PTH刺激小鼠，使其产生相应的B细胞，B正确；抗原 与抗体的结合具有特异性，可利用抗原—抗体结合的原理筛选杂交瘤细 胞，C正确；由于一种B细胞经分化形成浆细胞后通常只能产生一种抗体， 故筛选出的单个杂交瘤细胞无法分泌多种抗体，D错误。
5. （2025·安徽高考14题）细胞工程技术已在生物制药和物种繁育等领域 得到了广泛应用。下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是（　　）
A. 从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为传代细胞
B. 将特定基因或特定蛋白导入已分化的T细胞，可将其诱导形成iPS细胞
C. 将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合的细胞即为能分泌所需抗 体的细胞
D. 采用胚胎分割技术克隆动物常选用桑葚胚或囊胚，因这两个时期的细 胞未发生分化
√
解析： 　从动物体内取出组织，用胰蛋白酶处理后直接培养的细胞称为 原代细胞，A错误；将特定基因或将特定蛋白导入已分化的T细胞可诱导其 形成iPS细胞，B正确；将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后形 成的细胞不一定是能分泌所需抗体的细胞，如骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融 合形成的细胞，C错误；囊胚期的细胞已开始分化，D错误。
二、长句表达练
6. （2020·全国Ⅰ卷38题节选）为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小 鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。
回答下列问题：
诱导小鼠甲
产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞　
（2）为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛 选。图中筛选1所采用的培养基属于选择培养基，使用该培养基进行细胞 培养的结果是 。图中筛选2含多次筛选，筛 选所依据的基本原理是 。
只有杂交瘤细胞能够生存　
抗原与抗体的反应具有特异性　
课时跟踪检测
1. （2025·福建厦门期末）下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是 （　　）
A. 动物细胞培养在CO2培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸
B. 诱导多能干细胞（iPS细胞）通常是由胚胎干细胞诱导转化而来
C. 灭活病毒能使细胞膜上的蛋白质和脂质重新排布，诱导细胞融合
D. 动物细胞培养时，大多数种类的细胞能够悬浮在培养液中生长增殖
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解析： 　动物细胞培养在CO2培养箱中进行，CO2的作用是维持培养液的 pH，而不是刺激细胞呼吸，A错误；诱导多能干细胞（iPS细胞）通常是将 体细胞经过诱导因子处理后转化而来，并非由胚胎干细胞诱导转化，胚胎 干细胞本身就是一种多能干细胞，B错误；灭活病毒能使细胞膜上的蛋白 质和脂质重新排布，从而诱导细胞融合，C正确；动物细胞培养时，大多 数种类的细胞贴附在瓶壁上生长增殖，称为细胞贴壁，而不是悬浮在培养 液中生长增殖，D错误。
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2. （2024·黑吉辽高考14题）从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行 贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正 确的是（　　）
A. 传代培养时，培养皿需密封防止污染
B. 选取①的细胞进行传代培养比②更合理
C. 直接用离心法收集细胞进行传代培养
D. 细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关
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解析： 　动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需 的。传代培养时，培养皿不能密封，A错误。处于指数增长期的细胞形态 和生理特性相对稳定，适合进行传代培养，离体培养的细胞生命力比较脆 弱，需要适应培养基的环境，传代最好在细胞生长覆盖瓶底80％～90％时 进行，故选取②的细胞进行传代培养比①更合理，B错误。题干显示从小 鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，贴壁细胞需要重新用胰 蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集，C错误。悬 浮培养的细胞会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺 乏等因素而分裂受阻，因此，细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有 关，D正确。
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3. （2025·新疆乌鲁木齐一模）单克隆抗体在医学领域具有重要的应用价 值。下列叙述错误的是（　　）
A. 制备单克隆抗体需运用动物细胞培养技术，培养过程需要O2和CO2
B. 制备单克隆抗体需运用动物细胞融合技术，并用选择培养基进行筛选
C. 单克隆抗体能够准确地识别抗原的细微差异，可用作诊断试剂
D. 单克隆抗体能精准地运载药物，但自身不能用于治疗疾病
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解析： 制备单克隆抗体过程中，无论是骨髓瘤细胞的培养，还是杂交 瘤细胞的培养，都需运用动物细胞培养技术，动物细胞培养过程中，需要 O2进行细胞呼吸，为细胞代谢提供能量，CO2用于维持培养液的pH稳定， A正确；制备单克隆抗体需将骨髓瘤细胞与经过免疫的B淋巴细胞进行融 合，运用动物细胞融合技术，融合后会形成多种细胞类型，如未融合细 胞、同种细胞融合体等，所以要用选择培养基进行筛选，筛选出杂交瘤细 胞，B正确；单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，能够准确地识 别抗原的细微差异，所以可用作诊断试剂，C正确；单克隆抗体不仅能精 准地运载药物，其自身也可用于治疗疾病，D错误。
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4. （2025·湖北名校联考）诱导多能干细胞（iPSC）可分化成类似间充质 干细胞（iMSC）。iMSC能合成和分泌V蛋白，用于治疗骨关节炎等疾 病。下列叙述错误的是（　　）
A. 可用病毒作为载体将某些基因转入小鼠成纤维细胞以诱导产生iPSC
B. iPSC在适宜条件下培养，需添加特定的物质才能使其转化为iMSC
C. 利用96孔板筛选转化成功的iMSC，需稀释至每孔至多1个细胞，并添加 V蛋白
D. iMSC培养液需定期更换，并维持适宜温度、pH、渗透压和气体环境等 条件
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解析： 　科学家已尝试采用多种方法来制备iPSC，包括借助载体将特定 基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱 导形成iPSC，因此可用病毒作为载体将某些基因转入小鼠成纤维细胞以诱 导产生iPSC，A正确；诱导细胞分化需要培养过程中加入添加特定的物质 （分化诱导因子）才能使其发生分化，因此iPSC在适宜条件下培养，需添 加特定的物质才能使其转化为iMSC，B正确；利用96孔板筛选转化成功的 iMSC，需稀释至每孔至多1个细胞，通过抗原—抗体杂交法检测，但是不 需要添加V蛋白，C错误；根据动物细胞培养的条件，iMSC培养液需定期 更换，以便清除代谢物，防止代谢物的积累对细胞造成危害，并维持适宜 温度、pH、渗透压和气体环境等条件，以维持细胞正常的生存和代谢，D 正确。
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5. （2025·河南安阳一模）阿尔茨海默病（AD）是一种复杂的神经退行 性疾病，β-淀粉样蛋白在大脑中的积累和沉积是AD发病和发展的主要因 素。科研人员将蛋白酶与单克隆抗体结合制备了催化性抗体，同时它还具 有免疫活性，微量使用对AD就有一定的治疗效果。下列相关叙述正确的是 （　　）
A. 杂交瘤细胞制备时可使用灭活病毒、高Ca2＋－高pH诱导细胞融合
B. 杂交瘤细胞产生的单克隆抗体只能从生物体的腹腔中大量提取
C. 催化性抗体效果显著的原因为单克隆抗体特异性强、酶有高效性
D. 杂交瘤细胞传代培养过程中会发生细胞贴壁现象及接触抑制现象
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解析： 　杂交瘤细胞制备时可使用灭活病毒诱导细胞融合，高Ca2＋－高 pH属于诱导植物原生质体融合的方法，A错误；杂交瘤细胞产生的单克隆 抗体也可在体外培养，从培养液中提取，B错误；单克隆抗体能与抗原特 异性结合，特异性强，而酶的催化作用具有高效性，故催化性抗体效果显 著的原因为单克隆抗体特异性强、酶有高效性，C正确；杂交瘤细胞在培 养过程中悬浮生长，无细胞贴壁现象及接触抑制现象，D错误。
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6. （2026·云南德宏开学考试）由于大熊猫的繁殖能力及幼仔成活率均较 低，故其数量非常少。有科学家尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊 猫。下列叙述正确的是（　　 ）
A. 在体细胞核移植过程中，普遍使用的去核方法是显微操作法
B. 与体细胞核移植技术相比，胚胎细胞核移植技术的难度更大
C. 体细胞核移植需直接将取自新鲜卵巢的卵母细胞用作受体细胞
D. 体细胞核移植技术成功克隆大熊猫，体现了动物细胞的全能性
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解析： 　在体细胞核移植过程中，去除卵母细胞细胞核的常用方法是显 微操作法，该方法能精准去除细胞核，保证核移植的效率，A正确；体细 胞的分化程度高于胚胎细胞，其细胞核的全能性表达更困难，因此体细胞 核移植的技术难度更大，而非胚胎细胞核移植，B错误；体细胞核移植 中，卵母细胞需培养至减数分裂Ⅱ中期（MⅡ期）才具备作为受体细胞的条 件，不能直接用 “取自新鲜卵巢的卵母细胞”，C错误；体细胞核移植技 术克隆大熊猫，体现的是动物细胞核的全能性，而非动物细胞的全能性， D错误。
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7. 图示多克隆抗体的制备流程。下列有关多克隆抗体与单克隆抗体的比较，错误的是（　　）
A. 多克隆抗体是从动物血清中获得的抗体混合物，单抗只有一种抗体
B. 多克隆抗体可以识别同一抗原的不同结合位点，单抗只识别抗原的一个 结合位点
C. 多克隆抗体的获得无需筛选，单抗制备的过程中至少经历两次筛选
D. 与单抗药物的制备相比，制备多克隆抗体药物的生产周期短，生产成 本低
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解析： 　多克隆抗体是通过向动物体内注射特定抗原，然后从动物血清 中收集得到的抗体混合物，其中包含多种针对该抗原不同结合位点的抗 体；而单克隆抗体是由单个B淋巴细胞克隆形成的细胞群所产生的，只作 用于某一特定抗原的一个结合位点，只有一种抗体，A、B正确。多克隆抗 体的获得是直接从注射特定抗原后的动物血清中收集纯化得到，需要特定 抗原筛选；单克隆抗体的制备过程中至少经历了两次筛选，一次是筛选出 杂交瘤细胞，另一次是筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，C错误。 多克隆抗体药物的制备相对简单，生产周期短，生产成本低；而单克隆抗 体药物的制备过程复杂，生产周期长，成本高，D正确。
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8. （2025·山东枣庄阶段考）下列关于细胞工程的说法正确的是（　　）
A. 体外培养的动物细胞形态相比体内正常细胞可能会发生改变
B. 作物脱毒苗培养时先诱导愈伤组织生根，再诱导生芽
C. iPS细胞都是通过将外源基因导入体细胞获得的
D. 离心法收集细胞只能用于传代培养细胞的收集
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解析： 　体外培养的动物细胞由于缺少体内环境稳定的生理和生化条 件，可能形态、功能发生改变，如变扁平或失去特异性等，比体内正常细 胞可能会发生改变，A正确。作物脱毒苗培养过程中，通常是先诱导愈伤 组织形成芽，然后再诱导生根，这是因为在植物组织培养过程中，愈伤组 织的再分化通常是先进行芽的诱导，再进行生根的诱导，两者的顺序不能 颠倒。因此，题干中的说法是错误的，B错误。iPS细胞（诱导多能干细 胞）并不一定都需要通过外源基因导入体细胞获得。除了通过引入特定外源基因来诱导体细胞去分化外，还有一些非基因导入的方法，如使用小分子化合物或通过蛋白质转染等手段，同样可以将体细胞诱导为多能干细胞，C错误。在传代培养时可用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离，悬浮培养的细胞也可直接用离心法收集，离心法收集细胞不是只能用于传代培养细胞的收集，也可用于收集药物处理过的细胞等，D错误。
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9. （2025·江西上饶一模）抗体
—细胞毒素药物偶联物（T-DM1）
由曲妥珠抗体、细胞毒素药物DM1
偶联形成，是治疗乳腺癌的靶向药
物，被纳入2023年医保目录名单，
其作用机制如图。下列相关叙述错误的是（　　）
A. 为了获得曲妥珠抗体，可选择HER2作为抗原刺激小鼠
B. T-DM1的连接物应在内环境和细胞内都保持稳定
C. 曲妥珠抗体与HER2受体结合后，通过胞吞方式进入癌细胞
D. 利用荧光标记的曲妥珠抗体可用于定位肿瘤的位置
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解析： 　分析图可知，曲妥珠抗体靶向作用的原理是其可与HER2受体特 异性结合，因此要获得曲妥珠抗体，应选择HER2受体作为抗原刺激小 鼠，A正确；结合图示可知，连接物在内环境中要保持稳定，但在乳腺癌 细胞内要能被断开，从而使T-DM1发挥作用，而不伤害其他细胞，B错 误；曲妥珠抗体与HER2受体结合后，以胞吞的方式进入癌细胞，C正确； 曲妥珠抗体可与乳腺癌细胞表面的HER2受体特异性结合，所以利用荧光 标记的曲妥珠抗体后，可用于定位肿瘤的位置，D正确。
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10.微载体悬浮培养是将动物细胞黏附在微载体表面，在培养液中进行悬浮培养的技术。下列有关说法正确的是（　　）
A.在进行细胞培养时，应提供适合的气体条件
B.进行微载体悬浮培养时不会出现接触抑制
C.微载体悬浮培养的细胞进行传代培养时直接用离心法收集
D.为保证无毒的环境，应在培养液中加入干扰素
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解析：动物细胞培养时，需要适宜的气体条件，如5％的二氧化碳和95％的空气，二氧化碳用于维持培养液的pH，空气为细胞呼吸提供氧气，A正确；进行微载体悬浮培养时，若细胞之间接触的话，也会出现接触抑制，B错误；先用酶将细胞从微载体表面脱落下来，再离心收集细胞，C错误；干扰素主要是抗病毒、调节免疫等作用，不是用于保证无毒环境的，为了保证细胞培养的无毒条件，需对培养液和所有培养用具进行灭菌处理；保证在无菌环境下进行操作；定期更换培养液，以便清除代谢废物，D错误。
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11.（2025·江西萍乡模拟）如图表示双抗体夹心法检测抗原的过程，该方法是医学上常用的定量检测抗原的方法，利用细胞工程技术制备的单克隆抗体能增强该过程的有效性。下列叙述错误的是（　　）
A.图示两种抗体与样品中待测抗原的结合位点不同
B.温度、pH等会影响双抗体夹心法检测抗原的结果
C.用双抗体夹心法检测抗原需要制备两种能与抗原结合的单克隆抗体
D.双抗体夹心法与只使用单克隆抗体相比，能增加可识别抗原的种类
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解析： 　据图可知，用双抗体夹心法检测抗原时需要用到与抗原不同位点结合的两种抗体，因此用双抗体夹心法检测抗原需要制备两种能与抗原结合的单克隆抗体，A、C正确；据图可知，双抗体夹心法利用酶标抗体中的酶水解相应物质，通过检测水解产物的量来反映样品中抗原的含量，由于酶活性受温度、pH等因素的影响，因此温度、pH等会影响双抗体夹心法检测抗原的结果，B正确；抗原与抗体的结合具有特异性，双抗体夹心法与只使用单克隆抗体相比，未增加识别抗原的种类，D错误。
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12. （2025·甘肃兰州一模）2018年《细胞》期刊报道，中国科学家率先 成功应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆小猴——“中 中”和“华华”。如图是该项技术的流程图，据图下列问题。
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（1）科学家曾成功培育出胚胎细胞克隆猴，但“中中”和“华华”的出 生仍然轰动世界，这是因为体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移 植，其原因是 。
解析： 体细胞分化程度高，表现全能性困难，而胚胎细胞分化程度 低，表现全能性容易，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核 移植。
体细胞分化程度高，全能性表现困难
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（2）体细胞核移植需借助去核的 细胞，因其细胞质中含有促进 核基因 的物质。
解析： 体细胞核移植需借助去核的卵（母）细胞。卵（母）细胞的 细胞质中含有促进核基因重新表达的物质，能激发细胞核的全能性，使重 组细胞能发育成完整的个体。
卵母
重新表达
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解析： 在体外培养细胞时，细胞会进行新陈代谢，产生一些代谢废 物，如二氧化碳等。定期更换培养液可以清除代谢废物，补充营养物质， 维持细胞正常代谢，为细胞提供一个相对稳定的生存环境，有利于细胞的 生长和增殖。
清除代谢废
物，补充营养物质，维持细胞正常代谢
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解析： 我国科学家将组蛋白去甲基化酶（Kdm4d）的mRNA注入 重构胚，注入Kdm4d的mRNA可表达出Kdm4d，降低组蛋白的甲基化 水平，调节相关基因的表达，使其完成细胞分裂和发育进程，提高了 胚胎的发育率。
该mRNA能够使细胞表达组蛋白去甲基化酶
Kdm4d，进而促进组蛋白去甲基化，使相关基因表达，从而提高胚胎的发
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（5）若获得的克隆动物与核供体动物性状不完全相同，分析其原因可能 是 （答出 一点即可）。
解析： 若获得的克隆动物与核供体动物性状不完全相同，这可能是 因为卵母细胞的细胞质中的遗传物质会对克隆动物的性状产生影响（或克 隆动物有部分遗传物质来自卵母细胞），也可能是环境会对克隆小猴的性 状产生影响。
卵母细胞质中的遗传物质影响性状；环境因素导致表型差异
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