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广西玉林第十中学等校2026年春季期高二期中质量监测生物
一、单选题
1．酸鱼是一道侗族传统美食，具有悠久的历史。在发酵制作酸鱼的过程中，下列叙述正确的是（ ）
A．把鱼切成小块用高度白酒浸泡，可以有效防止杂菌污染
B．酸鱼的制作过程需要对原料和容器进行严格的灭菌操作
C．酸鱼坛内产生少量的气泡主要是乳酸菌发酵产生的CO2
D．为了加快酸鱼的发酵速度，发酵过程中需经常搅拌以改善通气状况
2．研究人员欲从土壤中筛选能高效降解石油污染物的假丝酵母菌，用于石油污染的生物修复，下列操作不合理的是（　　）
A．配制以石油为唯一碳源的选择培养基，抑制不能降解石油的微生物生长
B．对土壤样品进行梯度稀释，采用稀释涂布平板法分离纯化目的菌种
C．筛选得到的菌种可直接投入污染土壤，无需考虑温度、pH对其活性的影响
D．可通过透明圈法筛选高效降解菌，透明圈直径与菌落直径比值越大，降解能力越强
3．如图是果酒和果醋制作的实验流程图，下列叙述正确的是（　　）
A．在冲洗葡萄前应先去除葡萄的枝梗，再进行冲洗，这样洗得彻底
B．在制作葡萄醋的过程中，温度应严格控制在18～25 ℃
C．发酵用的发酵瓶需用体积分数为70%的酒精消毒或用洗洁精洗涤
D．本实验流程中所涉及到的菌种的繁殖方式都是有丝分裂
4．T4溶菌酶（AO）在温度较高时易失去活性。研究人员通过蛋白质工程对T4溶菌酶第3位上的异亮氨酸改成半胱氨酸，该处半胱氨酸可与第97位半胱氨酸之间形成一个二硫键，获得了热稳定性高的T4溶菌酶（A1）。下列说法正确的是（ ）
A．蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异
B．蛋白质工程与中心法则的流程方向一致，即DNA→mRNA→蛋白质
C．检测A1活性时可先将A1与底物混合，再置于高温环境中
D．AO和A1空间结构的差异是二者热稳定性不同的直接原因
5．幽门螺杆菌主要寄生在人体胃黏膜，可引起慢性胃炎、胃溃疡等疾病，在人体的胃中依靠其合成的脲酶分解尿素产生氨，在菌体周围形成弱碱性微环境，中和胃酸，保护细菌免受胃酸的侵蚀。欲提取某慢性胃炎患者的胃液并获得该菌的纯培养物，下列有关操作正确的是（ ）
A．为防止杂菌污染，配制培养基时必须在酒精灯火焰附近进行操作
B．可配制以尿素为唯一氮源的选择培养基用于幽门螺杆菌的分离与纯化
C．利用平板划线法不仅可以获得该菌单菌落还能对菌落计数以估计活菌数
D．因幽门螺杆菌可生活在胃中，故将培养基pH调节至酸性有利于其培养
6．某研究小组设计了一个利用作物秸秆生产乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆（清水淋洗时菌T不会流失），在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵。实验流程如图所示。下列说法正确的是（ ）
A．菌T能够吸收秸秆中的纤维素，并利用细胞内的纤维素酶将其分解
B．酵母菌纯培养时，可使用稀释涂布平板法或平板划线法进行接种
C．可分别使用干热灭菌法和湿热灭菌法对淋洗液和培养瓶进行灭菌
D．本实验与以粮食为原料发酵生产乙醇，所利用的发酵底物均主要为纤维素
7．如图是将四倍体兰花的叶片通过植物组织培养形成植株的流程示意图，下列相关叙述正确的是（　　）

A．②阶段会发生有丝分裂和减数分裂过程
B．①阶段不需要光照和激素，②阶段则需要适宜光照和激素
C．根据图中过程所得植株基因型应该与兰花叶片基因型相同
D．以此兰花的花药进行离体培养直接得到的植株含有两个染色体组，即为二倍体
8．我国研究人员经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①-⑧表示过程，该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型下列说法错误的是（　　）
A．过程①成纤维细胞培养时，若出现接触抑制现象，说明细胞已发生癌变
B．过程②表示的卵母细胞去核，实际去除的是纺锤体一染色体复合物
C．可用Ca2+载体或乙醇激活重构胚，使其完成分裂和发育进程
D．代孕母猴分娩的食蟹猴性状表现与提供成纤维细胞的个体基本一致，与代孕母猴无遗传关联
9．单克隆抗体在临床上应用较广泛，下图表示单克隆抗体的制备过程，相关叙述错误的是（　　）
A．制备过程可能需用胰蛋白酶和聚乙二醇等进行处理培养，所得单克隆抗体特异性强、灵敏度高
B．过程①注射特定抗原的目的是使小鼠产生能分泌特定抗体的B淋巴细胞
C．过程②诱导融合产生的融合细胞都能产生单克隆抗体，且能无限增殖
D．选择抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外大规模培养或注射到鼠腹腔内增殖
10．作为基因的运输工具-载体，必须具备的条件之一及理由是（　　）
A．能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因
B．具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达
C．具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合
D．对宿主细胞无伤害，以便于重组DNA的鉴定和选择
11．生物学相关技术在农牧业、医药卫生和食品工业方面应用广泛。下列相关说法错误的是（　　）
A．将药用蛋白基因导入奶牛乳腺细胞可构建乳腺生物反应器
B．植物组织培养、动物细胞培养和PCR实验中均需无菌操作
C．可用PCR等技术检测编码牛凝乳酶的基因是否导入受体细胞
D．可采用农杆菌转化法将抗某种除草剂的基因导入农作物细胞
12．用洋葱进行DNA的粗提取与鉴定时，取洋葱进行研磨得到研磨液，研磨液离心后获得上清液备用。下列有关叙述正确的是（ ）
A．猪血易于获取，常用作为提取DNA的材料
B．为使蛋白质等杂质析出，可在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液
C．将粗提取的DNA溶于2mol/L的NaCl溶液中，为DNA的鉴定做准备
D．向含有DNA粗提取物的试管中加入二苯胺试剂，即可观察到颜色变化
13．研究人员用质粒pBR322和目的基因构建基因表达载体，质粒pBR322和目的基因的结构与相关限制酶的识别位点如图所示。下列叙述错误的是（　　）
A．应选用酶B和酶C切割pBR322和目的基因
B．氨苄青霉素抗性基因的作用是便于重组DNA的筛选
C．图中质粒用限制酶A切割后，会产生4个游离的磷酸基团
D．导入重组质粒的受体菌应接种于含四环素的培养基中培养
14．水蛭是我国的传统中药材，主要药理成分水蛭素为水蛭蛋白中重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。科研人员拟通过蛋白质工程改造水蛭素结构，提高其抗凝血活性。将提取的水蛭蛋白经甲、乙两种蛋白酶水解后，分析水解产物中的肽含量及其抗凝血活性，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）
A．水蛭蛋白经两种酶处理后水解产物的抗凝血活性差异主要与其肽含量有关
B．酶甲处理使水蛭素抗凝血活性提高的可能原因是使其有活性的结构域部位暴露
C．要获得水蛭素的基因，可以从水蛭细胞中提取mRNA，经逆转录获得目的基因
D．上述实验目的是了解水蛭素蛋白中影响抗凝血活性的部分以设计蛋白质三维结构
15．应用生物工程技术培育人们需要的生物新品种或新产品，提高了经济效益。如图表示培育生物新品种的过程，请据图判断下列叙述中正确的是（ ）
A．图中①过程需要的工具酶是限制酶、DNA连接酶和载体
B．图中⑤过程需要的培养基中只需加入无机营养和植物激素
C．将prG导入细胞I，细胞I是B淋巴细胞
D．要检测抗虫棉的抗虫特性，不需要做抗虫的接种实验，检测毒蛋白即可
16．为了解转基因烟草对生态环境的影响，研究人员以TMV-cp烟草品种NC89为实验材料，对转基因烟草外源基因TMV-cp漂移到杂草上的可能性进行了研究。研究人员随机选取了5株NC89烟草，并在NC89烟草株系及周边随机选取各种杂草，提取DNA，根据TMV-cp基因设计引物进行PCR扩增，电泳结果如图。下列相关叙述错误的是（　　）
注：1为阳性对照，2为空白（阴性）对照，3-7为NC89烟草样品，8-18表示杂草样品。
A．设置空白对照是为排除实验操作等对结果的影响
B．电泳结果表明TMV-cp基因在NC89烟草细胞内稳定存在
C．电泳结果表明烟草中TMV-cp基因漂移至周边杂草
D．将TMV-cp基因转入其他植物时需要经过安全性评价
二、实验题
17．尿素[CO（NH2）2]含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用，某科研小组为了将土壤中分解尿素的细菌纯化培养，进行了如下操作，请回答相关问题：
成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂
含量（g） 1.4 2.1 0.2 10.0 1.0 15.0
操作将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000毫升
(1)上述操作配制的培养基以__________作为唯一氮源，属于__________（固体/液体）培养基，培养基的灭菌方法为____________________。
(2)本实验中有两组对照，一组是未接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板和选择培养基平板，另一组是已接种的牛肉膏蛋白胨培养基平板和选择培养基平板。设置前一组的平板上如果____________________，说明培养基在使用前未被杂菌污染；后一组的平板上如果________________________________________，可以说明选择培养基具有选择作用。
(3)将5g土壤溶于45mL无菌水，再稀释105倍，按图[ ]__________（填数字及名称）接种方式将0.1mL样品接种到3个培养基上，统计菌落数目为134、131、137，据此可得出5克土壤中的尿素分解菌活菌数约为__________个。
(4)土壤中的某些固氮菌可以利用空气中的氮气作为氮源（如圆褐固氮菌能将大气中的氮气转化为NH3，请设计实验进一步确定平板上分离得到的细菌是否是固氮菌。（写出简要思路及预期结果）__________________________________________________________________________________________。
18．药用植物板蓝根（2n=14）具有抗病毒及抗菌等作用。油菜是重要的经济作物，但容易受病菌感染。某课题组将“华双3号”油菜（2n=38）与板蓝根进行体细胞融合，以期培育获得抗病菌的油菜杂交种。培育板蓝根油菜杂交种的主要流程如图1（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的功能）。
(1)抗病菌的油菜杂交种的培育过程主要利用的生物技术的原理是_______________________________，在实验前需通过预实验来探究R-6G使板蓝根原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，设计思路是：①将_________________的原生质体分别用具有一定浓度梯度的__________溶液处理后，置于相同的适宜条件下培养；②观察各组是否再生愈伤组织；③确定使原生质体不能再生愈伤组织的_________________（最低/最高）浓度，即为临界浓度。
(2)再生植株的体细胞内含__________条染色体，属于__________倍体植株。
(3)愈伤组织后续培养所用的培养基中，含有植物激素X和植物激素Y，逐渐改变培养基中这两种植物激素的浓度比，愈伤组织的变化情况如图2所示，植物激素X和Y分别是__________和__________。
(4)结合题干及图1信息，经R-6G处理后得到的板蓝根原生质体及同源融合体________（选填“能”、“不能”）进行有氧呼吸第一阶段，经IOA处理得到的油菜原生质体及同源融合体______（选填“能”、“不能”）进行有氧呼吸第二、三阶段；杂种细胞团是由两种植物原生质体融合形成，可以进行__________________________________，供能过程得以恢复，因此可以生长并获得再生能力。
19．单克隆抗体免疫疗法能够抑制恶性肿瘤的发展。卡妥索单抗是一种双特异性单克隆抗体，主要用于治疗由胃癌、卵巢癌等引起的恶性腹水，它通过靶向结合肿瘤细胞表面的EpCAM抗原和T细胞表面CD3受体，激活免疫系统杀伤肿瘤细胞，从而减少积液生成。如图是卡妥索单抗的制备过程及结构。
(1)在体外培养杂交瘤细胞时，培养基中除必要的营养物质外，通常需要加入__________等天然成分，需要提供的气体条件是________________________。
(2)制备卡妥索单抗的过程中，运用到的动物细胞工程技术是_________________________。
(3)结合图中信息分析，第二次筛选时，向培养基中加入______________________（物质）筛选能产生卡妥索单克隆抗体的杂交瘤细胞AB。在大规模悬浮培养时，杂交瘤细胞增殖减慢甚至停止，原因可能是____________________________________________（答出2点即可）。
(4)据图分析，利用卡妥索双特异性单克隆抗体治疗肿瘤的作用机理是________________________________________________。
20．卡拉胶是一类源于海洋红藻的大分子多糖，呈白色至淡黄色或黄褐色，可被某些细菌降解为具有多种应用前景的卡拉胶寡糖。某研究小组拟筛选具有高活性卡拉胶酶（CG）的菌种用于生产卡拉胶寡糖。回答下列问题：
(1)为构建携带cg（CG的编码基因）的大肠杆菌表达载体（图1），该载体中的启动子是______________________________识别和结合位点，启动子的作用是______________________________。为保证连接准确性和效率，对cg的PCR扩增产物和质粒进行双酶切，限制酶的识别序列和切割位点如图2，酶切后要产生粘性末端，cg转录模板链的5＇端最好含有______________________________酶切位点。双酶切的优点是可以防止_________________________________________________。
限制酶的识别序列和切割位点如下：
(2)用PCR技术从具有高活性卡拉胶酶菌种的基因组中扩增cg目的基因时，应选用图3中___________引物。
注：F1、F2、F3和F4为与相应位置的DNA配对的单链引物，“→”指引物5＇-3＇方向
(3)为将构建好的表达载体转入大肠杆菌，需要先用Ca2+处理大肠杆菌细胞，目的是______________________________，随后在含_________________和_________________的培养基中培养一段时间后，根据菌落周围有无水解透明圈筛选目的菌株。
三、解答题
21．食物中生物胺过量会引起头痛、胃肠道不适和过敏等不良反应，严重时甚至危及生命，因此必须对食品中生物胺的含量进行监控。来自微生物的多铜氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，我国科研人员将发酵乳杆菌的MCO基因转入大肠杆菌中，实现了多铜氧化酶的规模化生产。回答下列问题：
(1)上述生物工程的基本步骤包括：①从发酵乳杆菌中获取目的基因→②__________→③将目的基因导入大肠杆菌细胞→④筛选和鉴定含目的基因的受体细胞→⑤借助__________工程规模化生产目标蛋白
(2)在使用PCR技术扩增获取的MCO基因时，引物的功能是______________。
(3)在常规PCR的每一轮扩增反应中，温度随时间的高低变化顺序是__________。
A． B． C． D．
(4)若目的基因MCO经限制酶切开后呈如图所示的末端，那么载体质粒pCLY15需用__________和__________切开，才能与MCO片段高效连接。
(5)为了鉴别载体质粒pCLY15空载还是“满载”，某同学在选择培养基中添加X—gal试剂，以培养微生物后菌落的颜色进行鉴别，他能达到目的吗？__________________，原因是_______？
参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 A C C D B B C A C A
题号 11 12 13 14 15 16
答案 A C D A C C
17．(1) 尿素 固体 湿热灭菌（或高压蒸汽灭菌）
(2) 没有菌落生长 牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数显著多于选择培养基
(3) 1 稀释涂布平板法 1.34×109
(4)将平板上分离得到的细菌接种到无氮源的培养基上培养一段时间后，观察是否有出现菌落。若能长出菌落，说明该菌为固氮菌，否则不是固氮菌
18．(1) 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 等量（或相同数量）的板蓝根 R-6G 最低
(2) 52 （异源）四
(3) 细胞分裂素 生长素
(4) 能 不能 有氧呼吸三个阶段（完整的有氧呼吸过程）
19．(1) 血清 5%的二氧化碳和95%的空气
(2)动物细胞培养、动物细胞融合
(3) EpCAM和CD3 细胞密度过大、有毒代谢物积累、培养液中营养物质缺乏（两点即可）
(4)双特异性抗体可以同时结合EpCAM和CD3，实现癌细胞与T细胞的聚集，从而有效激活免疫系统杀伤癌细胞
20．(1) RNA聚合酶 驱动基因转录出mRNA BamHⅠ 质粒和目的基因自身环化以及目的基因和质粒反向连接
(2)F2和F4
(3) 使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态 卡拉胶 四环素
21．(1) 构建基因表达载体 发酵
(2)使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸
(3)C
(4) KpnI XmaI
(5) 可以 构建表达成功的重组质粒中β—lacZ基因被破坏所以不显色，而没有构建成功的质粒β—lacZ基因未破坏，所以会显色

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