资源简介

　微生物的培养技术及应用
课标要求 1．通过配制培养基、灭菌、接种和培养等实验操作获得纯化的酵母菌菌落。 2．分离土壤中分解尿素的细菌，并进行计数。
考情微观 1．微生物的基本培养技术：2024·贵州适应性测试T21，2025·贵州卷T15。 2．微生物的选择培养和计数：2024·贵州卷T13；2025·贵州卷T15。
考点1　微生物的基本培养技术
一、填空表述
1．培养基的化学成分包括______________________等。
2．(人教版选择性必修3 P10)获得纯净的微生物培养物的关键是____________。
3．无菌技术的选择：对于一些不耐高温的液体，如牛奶，可使用________法；用____消毒水源；培养基一般采用________法进行灭菌；培养皿可以采用________法灭菌；接种环可以采用________法灭菌。
4．(人教版选择性必修3 P10)在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加______；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至____；在培养细菌时，一般需要将培养基调至____________；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。
5．(人教版选择性必修3 P12)采用__________________________能将单个微生物分散在固体培养基上。
6．平板划线操作的第一步灼烧接种环是为了_____________________；每次划线前灼烧接种环是为了__________________________________________________
_________________________，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单菌落。划线结束后灼烧接种环，能________________________________________________________。
7．平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置的目的是___________________________________________________。
8．从豆科植物的根瘤中分离根瘤菌进行培养，可以获得纯培养物，此实验中的纯培养物是________________________。
9．若从植物根际土壤中筛选分解淀粉的固氮细菌，培养基的主要营养物质包括________________。
二、概念检测
1．培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊物质。 (　　)
2．某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。培养基pH需偏碱性。 (　　)
3．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免污染培养基溅到皿盖上。 (　　)
4．为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌。 (　　)
5．纯化菌种倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整。 (　　)
(人教版选择性必修3 P12～13探究·实践)微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节。微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，据图回答下列问题：
(1)图示①～⑧中不正确的操作及其原因分别是____________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________。
(2)在第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，其原因是___________________________________________________________________
_____________________________________________________________________。
(3)在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ __________________
_____________________________________________________________________。
无菌技术
1．(链接人教版选择性必修3 P9～10正文信息)食品发酵生产、医学手术治疗、生物技术实验等领域都要求进行消毒、灭菌的操作。下列叙述正确的是(　　)
A．生产奶制品时煮沸消毒不会破坏其营养成分，形成的废弃液可以直接排放
B．对手术人员的双手、衣着以及操作空间等，采用紫外线进行消毒
C．微生物、动物细胞培养基中，都需添加一定量的抗生素以防止污染
D．外植体只需要进行消毒，但实验中使用的培养基和所有器械都要灭菌
微生物的纯培养
2．(人教版选择性必修3 P14拓展应用T2改编)某生物兴趣小组将从葡萄皮上成功分离来的野生酵母菌分别接种于3个盛有等量同种液体培养基的锥形瓶中，并放置在摇床上培养，摇床转速分别为210 r/min、230 r/min和250 r/min。培养时间与酵母菌种群密度的关系如图所示。以下叙述正确的是(　　)
A．该实验的自变量是摇床的转速
B．若用稀释涂布平板法统计酵母菌活菌数量，得到的数据会比实际值偏大
C．培养8 h后，有2个锥形瓶中酵母菌的数量已达到了环境容纳量
D．根据图中数据可以得出，培养基中氧气含量越高，酵母菌种群密度越小
平板划线操作中几次灼烧接种环的目的
项目 第一次划线前灼烧 每次划线前灼烧 划线结束后灼烧
目的 避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 杀死上一次划线结束后接种环上残留的菌种，使每次划线的菌种均来自上一次划线的末端 杀死接种环上残留的菌种，避免菌种污染环境和感染操作者
考点2　微生物的选择培养和计数
一、填空表述
1．(人教版选择性必修3 P16)选择培养基是指__________________________________。
2．检测培养基中是否有杂菌污染的方法是____________________。判断选择培养基是否起到筛选作用的方法是________________________________________。
3．在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是____________________。
4．枯草芽孢杆菌为好氧微生物，液体培养时应采用________(填“静置”或“摇床振荡”)培养。培养过程中抽样检测活菌数量时，应采用______________(填“稀释涂布平板法”或“显微镜直接计数法”)，其原因是
_____________________________________________________________________
_________________________________________。
5．若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产目标产物的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路： _______________________________
_____________________________________________________________________。
6．某课题组通过筛选高产纤维素酶菌株时，采用以羧甲基纤维素钠为唯一碳源的培养基筛选菌株X，能起到筛选作用的原因是_____________________________。高产纤维素酶菌株筛选时，刚果红培养基上的菌落周围透明圈大小反映了____________________________。
二、概念检测
1．利用稀释涂布平板法统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数。 (　　)
2．统计菌落数目时为保证结果准确，一般选择菌落数目最多的平板进行统计。 (　　)
3．利用稀释涂布平板法和平板划线法均可实现细菌的分离和计数。 (　　)
4．利用显微镜直接计数法统计的细菌数量就是活菌的数量。 (　　)
5．刚果红与纤维素形成红色复合物，可以通过是否产生透明圈来分离纤维素分解菌。 (　　)
(人教版选择性必修3 P20拓展应用T2)某兴趣小组从富含纤维素的土壤中取样，加入选择培养基中进行振荡培养，之后接种于鉴别培养基上进行培养，筛选出能够高效分解纤维素的微生物。请回答下列相关问题：
(1)从富含纤维素的土壤中取样的原因是__________________________________
_____________________________________________________________________。
(2)分离出分解纤维素的微生物，应该配制以________为唯一碳源的培养基，目的是___________________________________________________________________。
(3)已知刚果红与纤维素能形成红色复合物，当纤维素被分解后，复合物无法形成，平板上会出现以菌落为中心的透明圈(如图)，图中降解纤维素能力最强的菌株是________，理由是_________________________________________________
_____________________________________________________________________。
(4)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量，在对应稀释倍数为106的稀释液中各取0.1 mL涂平板，得到以下统计结果：
甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；
乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是209、240和250，取平均值233；
丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163。
在三位同学的统计中，________同学的统计是正确的，据此计算，每克土壤样品中含细菌________个。
微生物的选择培养
1．(2025·贵州卷)金龟子绿僵菌(Ma)是一种昆虫病原真菌，可以侵染某些农林害虫。Ma寄生时其孢子(单细胞后代)萌发后侵入昆虫体内大量增殖并产生毒素，导致寄主僵化、死亡。下列叙述错误的是(　　)
A．可利用Ma开发成微生物杀虫剂
B．为分离Ma可从研磨的僵虫组织中取样
C．稀释涂布平板法可用于分离样品中的Ma
D．接种培养Ma时使用的器具需消毒
2．(2025·山东青岛模拟)莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，可按下面程序选育能降解莠去津的细菌，已知含过量莠去津的固体培养基不透明。下列说法正确的是(　　)
A．A瓶到C瓶培养的目的是初步选择能降解莠去津的细菌菌落
B．使用涂布器蘸取菌液将菌种接种到固体培养基中
C．图中无透明圈的菌落生长所需氮源主要来源于氮气
D．图中透明圈越大的菌落降解莠去津能力越强
选择培养基四种常见制备方法或实例
(1)加入某些特定的物质(前提是培养基具备全部营养成分)
(2)改变培养基的营养成分
(3)利用培养基“特定化学成分”分离
(4)通过某些“特殊环境”分离
微生物的分离和计数
3．(链接人教版选择性必修3 P18探究·实践)土壤中有丰富的微生物，若要利用其中某种微生物，则需要进行菌种的分离和纯化，过程如图。下列相关叙述错误的是(　　)
A．若要筛选分解尿素[CO(NH2)2]的细菌，则尿素可以作为该菌的氮源
B．理论上每毫升菌液中2号试管的活菌数是4号试管的100倍
C．4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为1.1×109个
D．该种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少
4．(人教版选择性必修3 P20概念检测T1改编)石油对土壤的污染不仅给周边生态环境带来严重的损害，还严重影响居民的健康生活，且污染物含量越多，降解难度越大。为解决石油污染问题，某科研小组用了将近1年的时间，从长庆油田被石油污染最严重的土壤中分离出了高效分解石油的细菌，如图所示。小明用该法进行了过程④的操作，将1 mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接种0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为46、58和52。下列说法中错误的是(　　)
A．步骤③培养基中以石油为唯一碳源，使用高压蒸汽灭菌法灭菌
B．平板冷却后倒置可防止皿盖上的水珠落回污染培养基和防止培养基中的水分过快挥发
C．采用稀释涂布平板法对石油分解菌进行分离和计数
D．根据小明的实验结果，可得出每升该样品中的活菌数为5.2×106个
第47讲　微生物的培养技术及应用
考点1
落实·必备知识
一、1．水、无机盐、碳源、氮源　2．防止杂菌污染　3．巴氏消毒　氯气　湿热灭菌　干热灭菌　灼烧灭菌　4．维生素　酸性　中性或弱碱性　5．平板划线法和稀释涂布平板法　6．避免接种环上可能存在的微生物污染培养物　杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端　及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者　7．既可以避免培养基中的水分过快地蒸发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染　8．由根瘤菌繁殖形成的单菌落　9．水和无机盐、淀粉
二、1．√　2．×　3．×　4．×　5．×　
达成·关键能力
略
评价·迁移应用
1．D　2．C　
考点2
落实·必备知识
一、1．在微生物学中，允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基　2．同时培养灭菌后的未接种的培养基，观察是否有菌落产生　配制牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，观察选择培养基上的菌落数是否远少于牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目　3．菌T能够分泌纤维素酶　4．摇床振荡　稀释涂布平板法　用稀释涂布平板法在培养基上看到的每一个菌落都来自一个活细胞，而显微镜直接计数法会将死亡的枯草芽孢杆菌也计算在内　5．设计一系列不同浓度的制糖废液培养基分别培养实验菌株，测定不同浓度制糖废液中目标产物产量，寻找目标产物产量最大的培养基的对应碳源浓度，确定最适碳源浓度　6．只有能利用羧甲基纤维素钠的微生物才能生长繁殖　菌落产生的纤维素酶的活性和量
二、1．×　2．×　3．×　4．×　5．√
达成·关键能力
略
评价·迁移应用
1．D　2．C　3．C　4．D　(共78张PPT)
第47讲　微生物的培养技术及应用
选择性必修3　生物技术与工程
第九单元　生物技术与工程
课标要求 1．通过配制培养基、灭菌、接种和培养等实验操作获得纯化的酵母菌菌落。
2．分离土壤中分解尿素的细菌，并进行计数。
考情微观 1．微生物的基本培养技术：2024·贵州适应性测试T21，2025·贵州卷T15。
2．微生物的选择培养和计数：2024·贵州卷T13；2025·贵州卷T15。
考点1　微生物的基本培养技术
一、填空表述
1．培养基的化学成分包括______________________等。
2．(人教版选择性必修3 P10)获得纯净的微生物培养物的关键是____________。
水、无机盐、碳源、氮源
防止杂菌污染
3．无菌技术的选择：对于一些不耐高温的液体，如牛奶，可使用________法；用____消毒水源；培养基一般采用________法进行灭菌；培养皿可以采用________法灭菌；接种环可以采用________法灭菌。
4．(人教版选择性必修3 P10)在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加______；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至____；在培养细菌时，一般需要将培养基调至____________；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。
巴氏消毒
氯气
湿热灭菌
干热灭菌
灼烧灭菌
维生素
酸性
中性或弱碱性
5．(人教版选择性必修3 P12)采用__________________________能将单个微生物分散在固体培养基上。
6．平板划线操作的第一步灼烧接种环是为了_________________________________________；每次划线前灼烧接种环是为了________________________________________________________________________________________________，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到单菌落。划线结束后灼烧接种环，能_______________________________________________________________。
平板划线法和稀释涂布平板法
避免接种环上可能存在的微生物污染培养物
杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端
及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者
7．平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置的目的是___________________________________________________________________________________。
8．从豆科植物的根瘤中分离根瘤菌进行培养，可以获得纯培养物，此实验中的纯培养物是________________________。
9．若从植物根际土壤中筛选分解淀粉的固氮细菌，培养基的主要营养物质包括________________。
既可以避免培养基中的水分过快地蒸发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染
由根瘤菌繁殖形成的单菌落
水和无机盐、淀粉
二、概念检测
1．培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊物质。 (　　)
2．某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。培养基pH需偏碱性。 (　　)
提示：乳酸菌经过无氧呼吸产生乳酸，故其生活的环境是酸性，培养基pH需偏酸性。
√
×
3．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免污染培养基溅到皿盖上。 (　　)
提示：倒平板时，用拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，将锥形瓶中的培养基(10～20 mL)倒入培养皿，立即盖上培养皿的皿盖，不能打开皿盖。
×
4．为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌。 (　　)
提示：一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌。
5．纯化菌种倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整。 (　　)
提示：倒平板后应根据需要轻轻晃动，以保证表面平整。
×
×
(人教版选择性必修3 P12～13探究·实践)微生物的分离和培养是现代生物工程应用中的重要环节。微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，据图回答下列问题：
(1)图示①～⑧中不正确的操作及其原因分别是_____________________________________________________________________________
___________________________________________________________。
(2)在第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，其原因是________________________________________________________________________________________________________。
(3)在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ ___________________________________________________________。
提示：(1)②拔出棉塞后完全握住棉塞会造成杂菌污染，应握住棉塞上部；⑥划线时不能将培养皿完全打开，应在火焰附近将培养皿打开一条缝隙，用接种环在培养基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖；⑦划线时第5次的划线不能与第1次的划线相连；⑧平板应倒置培养
(2)划线后，线条末端菌种的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使菌种的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个微生物繁殖而来的菌落
(3)划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免污染环境和感染操作者
考向1　无菌技术
1．(链接人教版选择性必修3 P9～10正文信息)食品发酵生产、医学手术治疗、生物技术实验等领域都要求进行消毒、灭菌的操作。下列叙述正确的是(　　)
A．生产奶制品时煮沸消毒不会破坏其营养成分，形成的废弃液可以直接排放
B．对手术人员的双手、衣着以及操作空间等，采用紫外线进行消毒
C．微生物、动物细胞培养基中，都需添加一定量的抗生素以防止污染
D．外植体只需要进行消毒，但实验中使用的培养基和所有器械都要灭菌
√
D　[煮沸可能破坏营养成分，如维生素等，废弃液需灭菌后排放处理，A错误；对操作者的双手采用酒精进行消毒， 紫外线会对人体造成伤害， 衣着和操作空间可采用紫外线进行消毒，B错误；抗生素可能会抑制目标微生物的生长，所以动物细胞培养基中一般添加抗生素，C错误；外植体通常用化学消毒剂消毒，培养基和器械必须灭菌(如高压蒸汽灭菌)，以确保无菌环境，D正确。]
考向2　微生物的纯培养
2．(人教版选择性必修3 P14拓展应用T2改编)某生物兴趣小组将从葡萄皮上成功分离来的野生酵母菌分别接种于3个盛有等量同种液体培养基的锥形瓶中，并放置在摇床上培养，摇床转
速分别为210 r/min、230 r/min和250 r/min。
培养时间与酵母菌种群密度的关系如图所示。
以下叙述正确的是(　　)
A．该实验的自变量是摇床的转速
B．若用稀释涂布平板法统计酵母菌活菌数量，得到的数据会比实际值偏大
C．培养8 h后，有2个锥形瓶中酵母菌的数量已达到了环境容纳量
D．根据图中数据可以得出，培养基中氧气含量越高，酵母菌种群密度越小
√
C　[据图可知，该实验的自变量是摇床的转速与培养时间，A错误；若用稀释涂布平板法统计酵母菌活菌数量，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的仅仅是一个菌落，所以得到的数据会比实际值偏小，B错误；培养8 h后，由于营养物质逐渐被消耗，酵母菌种群密度达到K值，培养液中的溶氧量和营养物质都有限，使种群密度达到稳定，其中250 r/min和230 r/min的两个锥形瓶已达到K值，C正确；在一定转速范围内，摇床转速越高，培养基中的O2越充足，酵母菌种群密度越大，D错误。]
归纳提升
平板划线操作中几次灼烧接种环的目的
项目 第一次划线前灼烧 每次划线前灼烧 划线结束后灼烧
目的 避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 杀死上一次划线结束后接种环上残留的菌种，使每次划线的菌种均来自上一次划线的末端 杀死接种环上残留的菌种，避免菌种污染环境和感染操作者
一、填空表述
1．(人教版选择性必修3 P16)选择培养基是指________________________________________________________________________________________________。
考点2　微生物的选择培养和计数
在微生物学中，允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基
2．检测培养基中是否有杂菌污染的方法是_____________________________________________________。判断选择培养基是否起到筛选作用的方法是_____________________________________________________________________________________________________。
3．在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是____________________。
同时培养灭菌后的未接种的培养基，观察是否有菌落产生
配制牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，观察选择培养基上的菌落数是否远少于牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目
菌T能够分泌纤维素酶
4．枯草芽孢杆菌为好氧微生物，液体培养时应采用________(填“静置”或“摇床振荡”)培养。培养过程中抽样检测活菌数量时，应采用______________(填“稀释涂布平板法”或“显微镜直接计数法”)，其原因是_______________________________________________________________________________________________________________________________。
摇床振荡
稀释涂布平板法
用稀释涂布平板法在培养基上看到的每一个菌落都来自一个活细胞，而显微镜直接计数法会将死亡的枯草芽孢杆菌也计算在内
5．若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产目标产物的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路：__________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
设计一系列不同浓度的制糖废液培养基分别培养实验菌株，测定不同浓度制糖废液中目标产物产量，寻找目标产物产量最大的培养基的对应碳源浓度，确定最适碳源浓度
6．某课题组通过筛选高产纤维素酶菌株时，采用以羧甲基纤维素钠为唯一碳源的培养基筛选菌株X，能起到筛选作用的原因是____________________________________________。高产纤维素酶菌株筛选时，刚果红培养基上的菌落周围透明圈大小反映了____________________________。
只有能利用羧甲基纤维素钠的微生物才能生长繁殖
菌落产生的纤维素酶的活性和量
二、概念检测
1．利用稀释涂布平板法统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数。 (　　)
提示：利用稀释涂布平板法统计菌落数低于活菌的实际数，因为两个细胞或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。
2．统计菌落数目时为保证结果准确，一般选择菌落数目最多的平板进行统计。 (　　)
提示：为了保证结果准确，一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数。
×
×
3．利用稀释涂布平板法和平板划线法均可实现细菌的分离和计数。 (　　)
提示：利用稀释涂布平板法和平板划线法均可实现细菌的分离，但平板划线法不能用于微生物的计数。
×
4．利用显微镜直接计数法统计的细菌数量就是活菌的数量。 (　　)
提示：利用显微镜直接计数法统计的细菌数量，统计结果一般是活菌数和死菌数的总和。
5．刚果红与纤维素形成红色复合物，可以通过是否产生透明圈来分离纤维素分解菌。 (　　)
×
√
(人教版选择性必修3 P20拓展应用T2)某兴趣小组从富含纤维素的土壤中取样，加入选择培养基中进行振荡培养，之后接种于鉴别培养基上进行培养，筛选出能够高效分解纤维素的微生物。请回答下列相关问题：
(1)从富含纤维素的土壤中取样的原因是___________________________________________________________________________________。
(2)分离出分解纤维素的微生物，应该配制以________为唯一碳源的培养基，目的是________________________________________________________________________________________________________。
(3)已知刚果红与纤维素能形成红色复合物，当纤维素被分解后，复合物无法形成，平板上会出现以菌落为中心的透明圈(如图)，图中降解纤维素能力最强的菌株是________，理由是___________________________________________________________。
(4)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量，在对应稀释倍数为106的稀释液中各取0.1 mL涂平板，得到以下统计结果：
甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；
乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是209、240和250，取平均值233；
丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163。
在三位同学的统计中，________同学的统计是正确的，据此计算，每克土壤样品中含细菌________个。
提示：(1)纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中
(2)纤维素　促进纤维素分解菌生长，抑制其他微生物的生长
(3)菌2　菌2形成的透明圈与菌落直径的比值最大
(4)乙　2.33×109
考向1　微生物的选择培养
1．(2025·贵州卷)金龟子绿僵菌(Ma)是一种昆虫病原真菌，可以侵染某些农林害虫。Ma寄生时其孢子(单细胞后代)萌发后侵入昆虫体内大量增殖并产生毒素，导致寄主僵化、死亡。下列叙述错误的是(　　)
A．可利用Ma开发成微生物杀虫剂
B．为分离Ma可从研磨的僵虫组织中取样
C．稀释涂布平板法可用于分离样品中的Ma
D．接种培养Ma时使用的器具需消毒
√
D　[金龟子绿僵菌(Ma)作为昆虫病原真菌，可通过寄生导致害虫死亡，符合微生物杀虫剂的特点，可用于生物防治，A正确；僵化死亡的昆虫体内含有大量Ma菌体，因此从研磨的僵虫组织取样是分离Ma的合理方法，B正确；稀释涂布平板法可通过梯度稀释和菌落形成来分离纯化微生物，适用于分离样品中的Ma，C正确；微生物培养中，接种环等直接接触菌种的器具需严格灭菌(如灼烧灭菌)，而非仅消毒，消毒无法彻底杀灭微生物的芽孢或孢子，D错误。]
2．(2025·山东青岛模拟)莠去津是一种含氮农药，在土壤中不易降解，为修复被其污染的土壤，可按下面程序选育能降解莠去津的细菌，已知含过量莠去津的固体培养基不透明。下列说法正确的是(　　)
A．A瓶到C瓶培养的目的是初步选择能降解莠去津的细菌菌落
B．使用涂布器蘸取菌液将菌种接种到固体培养基中
C．图中无透明圈的菌落生长所需氮源主要来源于氮气
D．图中透明圈越大的菌落降解莠去津能力越强
√
C　[图中从A瓶到C瓶液体培养过程为选择培养，目的是初步选择能降解莠去津的细菌(目的菌)并增加其数量，菌落是在固体培养基上生长出来的子细胞群体，A错误；用移液枪取菌液接种到固体培养基上，而后待涂布器上的酒精燃尽后用涂布器将菌种均匀涂布在固体培养基中，B错误；含过量莠去津的固体培养基不透明，能够分解培养基中的莠去津的菌落周围会形成透明圈，所以选择的目的菌是有透明圈菌落中的细菌，而无透明圈的菌落生长所需氮源主要来源于氮气，C正确；图中透明圈和菌落直径比值越大的菌落降解莠去津能力越强，D错误。]
归纳提升
选择培养基四种常见制备方法或实例
(1)加入某些特定的物质(前提是培养基具备全部营养成分)
(2)改变培养基的营养成分
(3)利用培养基“特定化学成分”分离
(4)通过某些“特殊环境”分离
考向2　微生物的分离和计数
3．(链接人教版选择性必修3 P18探究·实践)土壤中有丰富的微生物，若要利用其中某种微生物，则需要进
行菌种的分离和纯化，过程如图。下
列相关叙述错误的是(　　)
A．若要筛选分解尿素[CO(NH2)2]的细菌，则尿素可以作为该菌的氮源
B．理论上每毫升菌液中2号试管的活菌数是4号试管的100倍
C．4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为1.1×109个
D．该种方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目少
√
C　[若目的是筛选分解尿素[CO(NH2)2]的细菌，则尿素可以作为该菌的氮源，A正确；由样品稀释示意图分析可知，2号试管的稀释倍数为103倍，4号试管的稀释倍数为105倍，2号试管活菌数应是4号试管的100倍，B正确；4号试管进行稀释涂布平板法计数的结果表明每克土壤中的菌株数为(113＋106＋111)÷3×10×105＝1.1×108个，C错误；稀释涂布平板得到的菌落可能存在两个或多个细菌细胞长成一个菌落，使该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要少，D正确。]
4．(人教版选择性必修3 P20概念检测T1改编)石油对土壤的污染不仅给周边生态环境带来严重的损害，还严重影响居民的健康生活，且污染物含量越多，降解难度越大。为解决石油污染问题，某科研小组用了将近1年的时间，从长庆油田被石油污染最严重的土壤中分离出了高效分解石油的细菌，如图所示。小明用该法进行了过程④的操作，将1 mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接种0.1 mL
稀释液；经适当培养后，3个平板上
的菌落数分别为46、58和52。下列说
法中错误的是(　　)
A．步骤③培养基中以石油为唯一碳源，使用高压蒸汽灭菌法灭菌
B．平板冷却后倒置可防止皿盖上的水珠落回污染培养基和防止培养基中的水分过快挥发
C．采用稀释涂布平板法对石油分解菌进行分离和计数
D．根据小明的实验结果，可得出每升该样品中的活菌数为5.2×106个
√
D　[配制好的培养基通常使用高压蒸汽灭菌法灭菌；该实验的目的是分离和纯化高效分解石油的细菌，故步骤③培养基为选择培养基，培养基成分与普通液体培养基相比，最大的区别是培养基中以石油为唯一碳源，A正确。平板冷却后需要倒置，目的有两个：一是防止皿盖上的水珠落回培养基造成污染；二是防止培养基中的水分过快挥发，B正确。稀释涂布平板法统计的是活菌数目，常采用稀释涂布平板法对石油分解菌进行分离和计数，C正确。将1 mL样品稀释100倍在3个平板上分别接种
0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为46、58和52，据此可得出每升样品中的活菌数为(46＋58＋52)÷3÷0.1×100×1 000＝5.2×107个，D错误。]
课后分层作业(四十七) 　微生物的培养技术及应用
1．(2025·江苏镇江模拟)关于培养基的配制和使用，下列叙述正确的是(　　)
A．固体培养基配制后需采用干热灭菌法以便杀灭所有微生物
B．倒平板时需将培养皿盖完全打开以便将培养基快速倒入培养皿
C．平板划线时需将菌种埋入培养基内以便其充分吸收营养物质
D．涂布平板后需待菌液被培养基吸收后再倒置培养以防止菌液滴落
√
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
D　[常采用高压蒸汽灭菌法对配制的固体培养基进行灭菌，以便杀灭所有微生物，A错误；倒平板时，不能将灭过菌的培养皿盖完全打开，而是将培养皿盖打开一条缝隙，待倒入培养基后将培养皿盖盖上，B错误；平板划线时，通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，不能将菌种埋入培养基内，C错误；涂布平板后，待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置培养以防止菌液滴落，D正确。]
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
2．(2025·陕西渭南模拟)无菌技术是微生物培养获得纯净培养物的关键。为避免杂菌污染，常采用高压蒸汽灭菌法等对培养基进行灭菌。接种、倒平板等环节也都要防止杂菌的污染。下列相关叙述正确的是(　　)
A．某些微生物能以无机物作为碳源，也能以无机物作为能源
B．消毒和灭菌都是指用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物
C．将要培养的微生物接种至培养基后，应立即放入高压蒸汽灭菌锅中
D．为保证超净工作台无菌，接种操作时应打开紫外灯
√
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
A　[硝化细菌可以利用氨或铵盐作为合成有机物的能量，也可以以CO2为碳源，A正确；消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)，B错误；培养基要先进行高压蒸汽灭菌再接种，C错误；紫外线对人体有伤害，接种操作时不能打开紫外灯，D错误。]
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
3．(2025·贵州贵阳模拟)获得纯净的微生物培养物是发酵工程的基础。下列关于微生物培养技术叙述正确的是(　　)
A．在接种前对培养基进行湿热灭菌或干热灭菌，可以有效杀死其中的杂菌
B．使用平板划线法或稀释涂布平板法接种，可以将微生物分散并形成单个菌落
C．血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定，也可用于细菌的数量测定
D．分离细菌和真菌时，选择性地添加抗生素到培养基中，可确保获得特定种类的细菌
√
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
B　[湿热灭菌是实验室中常用的灭菌方法，能有效杀死培养基中的各种微生物，培养基不可以采用干热灭菌法，A错误；平板划线法和稀释涂布平板法是分离纯化微生物的常用技术，可以将混合的微生物分散并形成由单个细胞繁殖而成的单个菌落，B正确；血细胞计数板适用于相对较大的酵母菌的计数，较小的细菌的数量测定常用细菌计数板，C错误；抗生素的选择性作用通常针对细菌而非真菌，D错误。]
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
4．(2025·贵州遵义市模拟)某课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细菌，培养结果如下图所示。下列叙述错误的是(　　)
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
A．运用图1所示的接种方法统计的活菌数比实际值偏低
B．运用图2所示的接种方法可以对细菌进行分离和计数
C．分离尿素分解菌需用以尿素为唯一氮源的选择培养基
D．人工配制的选择培养基需要在其分装灭菌前调节pH
√
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
B　[图1菌落均匀分布，可知所示接种方法为稀释涂布平板法，由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上显示的只是一个菌落，故统计的活菌数比实际值偏低，A正确。图2所示接种方法为平板划线法，其核心作用是分离单菌落，但无法用于活菌计数，B错误。对尿素分解菌进行分离时，需要在选择培养基中加入尿素作为唯一的氮源，此时，不能分解尿素的细菌因无法利用尿素作为氮源而不能生长，只有能产生脲酶、分解尿素的细菌可正常繁殖，从而实现分离，C正确。人工配制培养基时，pH调节需在分装灭菌前进行；若先分装再调节pH，会导致不同分装容器内的培养基 pH不一致；若灭菌后调节pH，会引入杂菌污染培养基，D正确。]
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
5．(2025·贵州铜仁模拟)研究人员用特定选择培养基从土壤中筛选出了一种石油降解菌，过程如图所示。下列叙述错误的是(　　)
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
A．上述富集培养基中需要加入牛肉膏、蛋白胨等有机物
B．在固体培养基上进行纯培养时可用平板划线法进行接种
C．富集培养的目的是逐渐筛选出能够高效分解石油的降解菌
D．研究人员筛选出的石油降解菌可用于修复被石油污染的土壤
√
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
A　[上述培养基是选择培养基，应添加石油为唯一的碳源，A错误；平板划线法可对微生物进行分离纯化，B正确；富集培养的目的是逐渐筛选出能够高效分解石油的降解菌，进一步增大目的菌的浓度，C正确；利用这种石油降解菌可以降解石油，减少土壤污染，从而修复土壤，D正确。]
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
6．(2025·贵州普通高中模拟)为调查某水库的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，统计出3个平板上的菌落数分别为39、38和37。下列叙述正确的是(　　)
A．接种前可用紫外线对接种室和操作台灭菌
B．接种时可用涂布器蘸取菌液在平板上进行涂布
C．根据结果计算出每升水样中的活菌数为3.8×107
D．实验后的培养基应该进行消毒处理后才能倒掉
√
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
C　[接种前可用紫外线对接种室和操作台进行消毒，A错误。接种时应用移液器将菌液滴加到平板上，然后用涂布器将菌液均匀地涂布在平板上，B错误。将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为(39＋38＋37)÷3÷0.1×100×1 000＝3.8×107，C正确。实验后的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，以防止杂菌污染环境，D错误。]
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
7．(2025·黑吉辽蒙卷)科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素(C22H23ClN2O8)能力强的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是(　　)
A．以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基
B．逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株
C．配制选择培养基时，需确保pH满足实验要求
D．用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面
√
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
D　[该研究的目的是筛选出高耐受且降解金霉素能力强的菌株，可以以金霉素为唯一碳源制备选择培养基进行筛选，且逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株，A、B正确；微生物培养需要适宜的pH等，C正确；稀释涂布平板法不需要接种环，而是需要涂布器，D错误。]
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
8．(2025·四川绵阳模拟)聚乙烯醇(PVA，一种难以降解的大分子有机物)能与碘作用产生蓝绿色复合物，复合物被降解后呈白色，PVA分解菌能够产生PVA酶降解PVA。某实验小组从土壤样品中分离具有降解PVA功能的菌株，大致过程是：①称量土样→②依次等比稀释→③涂布平板→④滴加碘液，挑取需要的单菌落转移至培养液中培养→⑤检测菌株降解PVA的能力→⑥选取优良菌株扩大培养。叙述正确的是(　　)
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
A．制备以PVA为唯一碳源的培养基时应先灭菌再调pH
B．步骤③中涂布时需打开培养皿盖，以方便操作
C．步骤④中应挑取透明圈直径与菌落直径之比大的菌落进行培养
D．步骤⑥中若要准确计数某一时刻菌液中的活菌，应采用显微镜直接计数法
√
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
C　[制备培养基时应先调节pH后灭菌，A错误；步骤③中涂布时需打开培养皿盖，但不能完全打开，还需要在火焰旁进行等，B错误；步骤④中，培养基中的PVA被可降解PVA的分解菌降解后，不能与碘作用产生蓝绿色复合物，出现透明圈，故透明圈直径与菌落直径之比越大说明菌株降解PVA的能力越强，C正确；显微镜直接计数不能区分菌体的死活，无法得到准确的活菌数目，D错误。]
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
9．(2025·四川内江模拟)腐乳是中国传统发酵食品，其独特风味与微生物代谢产生的蛋白酶密切相关。某研究团队从腐乳中筛选高产蛋白酶菌株，部分实验流程如下：
①初筛：用干酪素培养基(含干酪素、NaCl、磷酸盐、琼脂，干酪素是一种大分子蛋白质，无法直接被微生物吸收利用)分离菌株，测定水解圈直径与菌落直径比值(D/d)；
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
②复筛：测定菌株在不同pH下的蛋白酶活力；
③安全性评价：通过溶血试验(用接种环挑取菌液分区接种在羊血培养基上，若菌株产生毒素会在菌落周围形成透明圈或溶血圈)、药敏试验评估菌株安全性，部分菌株对抗生素的反应如下表。
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
表　部分菌株对抗生素的反应情况
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
菌株 编号 氨苄西林 四环素 卡那霉素 环丙沙星 磷霉素 链霉素 庆大霉素 复方新诺明
AF5-4 — R — S I I S S
AF5-5 S S S S S S S S
AF5-10 — R I S I S S S
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
菌株编号 氨苄西林 四环素 卡那霉素 环丙沙星 磷霉素 链霉素 庆大霉素 复方新诺明
AF10-5 — R R S R R S S
AF15-5 S S S S S S S S
AF20-5 — R I S I R S S
注：S代表敏感，R代表耐药，I代表中介(处于敏感和耐药之间)，—代表未检测。
回答下列问题：
(1)初筛时，培养基中添加干酪素的作用是______________________________________________，应选择________________________________________________的菌株进行复筛。
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
提供碳源和氮源，筛选能分解干酪素的微生物
D/d值较大(水解圈直径与菌落
直径比值较大)
(2)复筛时，可通过检测____________________________________来判断菌株在不同pH下的蛋白酶活力大小。若发现某菌株在中性(pH＝7.0)条件下蛋白酶活力最高，则将该菌株用于腐乳发酵时，需要控制发酵的pH为________。
(3)溶血试验采取的接种方法是_____________，可通过观察菌落周围是否出现_________________来判断菌株是否产生溶血毒素。
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
相同时间后干酪素(蛋白质)的剩余量
7.0
平板划线法
透明圈或溶血圈
(4)研究表明，部分微生物含有潜在的耐药基因，在人体内富集会给治疗增加一定的难度。根据药敏试验结果，你认为菌株_________________对人体的安全性更高，理由是_________________________________________________________________________________________________。
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
AF5-5、AF15-5
二者对多种抗生素敏感，含有潜在的耐药基因可能性小，人体产生耐药性风险较低
[解析]　(1)干酪素是一种大分子蛋白质，无法直接被微生物吸收利用，而高产蛋白酶菌株能分泌蛋白酶将干酪素分解，从而在培养基上形成水解圈。所以培养基中添加干酪素的作用是提供碳源和氮源，筛选能分解干酪素的微生物。水解圈直径与菌落直径比值(D/d)越大，说明该菌株分泌蛋白酶的能力越强，因此应选择D/d值大的菌株进行复筛。(2)蛋白酶能将蛋白质分解成小分子肽或氨基酸，可通过检测相同时间后干酪素(蛋白质)的剩余量来判断菌株在不同pH下的蛋白酶活力大小。若某菌株在中性(pH＝7.0)条件下蛋白酶活力最高，
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
那么将该菌株用于腐乳发酵时，为了使蛋白酶发挥最佳活性，需要控制发酵的pH为7.0。(3)根据题干“用接种环挑取菌液分区接种在羊血培养基上”可知，溶血试验采取的接种方法是平板划线法。若菌株产生毒素会在菌落周围形成透明圈或溶血圈，所以可通过观察菌落周围是否出现透明圈或溶血圈来判断菌株是否产生溶血毒素。(4)根据药敏试验结果，菌株AF5-5和AF15-5对人体的安全性更高。理由是二者对多种抗生素敏感，含有潜在的耐药基因可能性小，人体产生耐药性风险较低。
题号
1
3
5
2
4
6
8
7
9
谢 谢 ！　微生物的培养技术及应用
1．(2025·江苏镇江模拟)关于培养基的配制和使用，下列叙述正确的是(　　)
A．固体培养基配制后需采用干热灭菌法以便杀灭所有微生物
B．倒平板时需将培养皿盖完全打开以便将培养基快速倒入培养皿
C．平板划线时需将菌种埋入培养基内以便其充分吸收营养物质
D．涂布平板后需待菌液被培养基吸收后再倒置培养以防止菌液滴落
2．(2025·陕西渭南模拟)无菌技术是微生物培养获得纯净培养物的关键。为避免杂菌污染，常采用高压蒸汽灭菌法等对培养基进行灭菌。接种、倒平板等环节也都要防止杂菌的污染。下列相关叙述正确的是(　　)
A．某些微生物能以无机物作为碳源，也能以无机物作为能源
B．消毒和灭菌都是指用强烈的理化方法杀死物体内外所有微生物
C．将要培养的微生物接种至培养基后，应立即放入高压蒸汽灭菌锅中
D．为保证超净工作台无菌，接种操作时应打开紫外灯
3．(2025·贵州贵阳模拟)获得纯净的微生物培养物是发酵工程的基础。下列关于微生物培养技术叙述正确的是(　　)
A．在接种前对培养基进行湿热灭菌或干热灭菌，可以有效杀死其中的杂菌
B．使用平板划线法或稀释涂布平板法接种，可以将微生物分散并形成单个菌落
C．血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定，也可用于细菌的数量测定
D．分离细菌和真菌时，选择性地添加抗生素到培养基中，可确保获得特定种类的细菌
4．(2025·贵州遵义市模拟)某课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细菌，培养结果如下图所示。下列叙述错误的是(　　)
A．运用图1所示的接种方法统计的活菌数比实际值偏低
B．运用图2所示的接种方法可以对细菌进行分离和计数
C．分离尿素分解菌需用以尿素为唯一氮源的选择培养基
D．人工配制的选择培养基需要在其分装灭菌前调节pH
5．(2025·贵州铜仁模拟)研究人员用特定选择培养基从土壤中筛选出了一种石油降解菌，过程如图所示。下列叙述错误的是(　　)
A．上述富集培养基中需要加入牛肉膏、蛋白胨等有机物
B．在固体培养基上进行纯培养时可用平板划线法进行接种
C．富集培养的目的是逐渐筛选出能够高效分解石油的降解菌
D．研究人员筛选出的石油降解菌可用于修复被石油污染的土壤
6．(2025·贵州普通高中模拟)为调查某水库的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用稀释涂布平板法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，统计出3个平板上的菌落数分别为39、38和37。下列叙述正确的是(　　)
A．接种前可用紫外线对接种室和操作台灭菌
B．接种时可用涂布器蘸取菌液在平板上进行涂布
C．根据结果计算出每升水样中的活菌数为3.8×107
D．实验后的培养基应该进行消毒处理后才能倒掉
7．(2025·黑吉辽蒙卷)科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素(C22H23ClN2O8)能力强的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是(　　)
A．以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基
B．逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株
C．配制选择培养基时，需确保pH满足实验要求
D．用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面
8．(2025·四川绵阳模拟)聚乙烯醇(PVA，一种难以降解的大分子有机物)能与碘作用产生蓝绿色复合物，复合物被降解后呈白色，PVA分解菌能够产生PVA酶降解PVA。某实验小组从土壤样品中分离具有降解PVA功能的菌株，大致过程是：①称量土样→②依次等比稀释→③涂布平板→④滴加碘液，挑取需要的单菌落转移至培养液中培养→⑤检测菌株降解PVA的能力→⑥选取优良菌株扩大培养。叙述正确的是(　　)
A．制备以PVA为唯一碳源的培养基时应先灭菌再调pH
B．步骤③中涂布时需打开培养皿盖，以方便操作
C．步骤④中应挑取透明圈直径与菌落直径之比大的菌落进行培养
D．步骤⑥中若要准确计数某一时刻菌液中的活菌，应采用显微镜直接计数法
9．(2025·四川内江模拟)腐乳是中国传统发酵食品，其独特风味与微生物代谢产生的蛋白酶密切相关。某研究团队从腐乳中筛选高产蛋白酶菌株，部分实验流程如下：
①初筛：用干酪素培养基(含干酪素、NaCl、磷酸盐、琼脂，干酪素是一种大分子蛋白质，无法直接被微生物吸收利用)分离菌株，测定水解圈直径与菌落直径比值(D/d)；
②复筛：测定菌株在不同pH下的蛋白酶活力；
③安全性评价：通过溶血试验(用接种环挑取菌液分区接种在羊血培养基上，若菌株产生毒素会在菌落周围形成透明圈或溶血圈)、药敏试验评估菌株安全性，部分菌株对抗生素的反应如下表。
表　部分菌株对抗生素的反应情况
菌株编号 氨苄西林 四环素 卡那霉素 环丙沙星 磷霉素 链霉素 庆大霉素 复方新诺明
AF5-4 — R — S I I S S
AF5-5 S S S S S S S S
AF5-10 — R I S I S S S
AF10-5 — R R S R R S S
AF15-5 S S S S S S S S
AF20-5 — R I S I R S S
注：S代表敏感，R代表耐药，I代表中介(处于敏感和耐药之间)，—代表未检测。
回答下列问题：
(1)初筛时，培养基中添加干酪素的作用是_____________________，应选择________________________________________的菌株进行复筛。
(2)复筛时，可通过检测____________________________________来判断菌株在不同pH下的蛋白酶活力大小。若发现某菌株在中性(pH＝7.0)条件下蛋白酶活力最高，则将该菌株用于腐乳发酵时，需要控制发酵的pH为________。
(3)溶血试验采取的接种方法是_____________，可通过观察菌落周围是否出现_______________________来判断菌株是否产生溶血毒素。
(4)研究表明，部分微生物含有潜在的耐药基因，在人体内富集会给治疗增加一定的难度。根据药敏试验结果，你认为菌株_________________对人体的安全性更高，理由是_____________________________________。
课后分层作业(四十七)
1．D　2．A　3．B　4．B　5．A　6．C　7．D　8．C
9．(1)提供碳源和氮源，筛选能分解干酪素的微生物　D/d值较大(水解圈直径与菌落直径比值较大)　(2)相同时间后干酪素(蛋白质)的剩余量　7.0　(3)平板划线法　透明圈或溶血圈　(4)AF55、AF155　二者对多种抗生素敏感，含有潜在的耐药基因可能性小，人体产生耐药性风险较低

展开更多......

收起↑