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四川省内江市第一中学 2025-2026 学年高二下学期期中考试生物试题
一、单选题
1．下列关于传统发酵技术及应用的相关叙述正确的是（ ）
A．传统发酵以单一菌种的固体发酵及半固体发酵为主
B．果酒、果醋发酵过程中 PH均有先升高后明显下降的现象
C．多种微生物参与了豆腐的发酵，其中起主要作用的是曲霉
D．发酵期间，当泡菜中乳酸的质量分数为 0.4%～0.8%时，泡菜的口味、品质最佳
2．下列有关发酵技术在食品加工中应用的叙述，不正确的是（ ）
A．为了避免杂菌污染，乳酸菌发酵成酸奶时在牛奶中添加一定量的抗生素
B．为了提高果酒品质，挑选新鲜的葡萄榨汁前应先用清水冲洗 1至 2次，再去除枝梗
C．为了防止果酒变酸，果酒发酵排气时应避免空气进入及发酵引起的升温
D．泡菜坛边加水的目的是隔绝空气，创造无氧环境有利于发酵
3．某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平板、
培养、计数等步骤，实验操作过程如下，下列说法不正确的是（ ）
A．图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物一定能合成脲酶
B．若每支试管稀释 10倍，则图中 a的数值应为 2.7，5号试管共稀释了 106倍
C．图中左上角培养基菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的
D．若仅以 4号试管接种培养基计数，5 g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是 7×108个
4．野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完
全培养基上生长，如图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A、B、C
表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述错误的是（ ）
A．图中①②④为完全培养基，③为基本培养基
B．A操作的目的是提高突变率，增加突变株的数量
C．B操作是用涂布器将菌液均匀地涂布在②表面
D．经 C过程原位影印及培养后，可从④中挑取 E进行纯化培养
5．科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解石油成分“多环芳烃菲”的菌株 Q，步骤如下图所示，下
列相关的叙述中，错误的是（ ）
A．步骤①—③中，培养液中需加入多环芳烃菲作为唯一碳源
B．步骤①—③中，将锥形瓶放在摇床上充分振荡，使菌株与培养液充分接触
C．步骤④是利用平板划线法纯化菌株 Q，图中所示接种环最少灼烧 5次
D．步骤④中每一区域可重复画几次，但 1区和 5区不能出现交叉
6．发酵广泛应用于农业、食品工业、医药工业等工业生产。下列叙述正确的是（ ）
A．用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取
B．菌种的选育是发酵工程的中心环节，优良菌种可从自然界筛选出来
C．发酵产品包括微生物菌体本身或代谢产物，可通过过滤、离心、蒸馏等方法纯化
D．筛选出高产柠檬酸的黑曲霉菌种后可直接接种到发酵罐中进行发酵生产
7．组织培养可快速繁殖植物，得到的试管苗常先移至草炭土或蛭石中炼苗，苗健壮后可移栽定植。关于菊
花的组织培养及幼苗的移栽，下列说法错误的是（ ）
A．MS 培养基的碳源一般用蔗糖而不用葡萄糖，以减少微生物污染
B．用酒精对外植体进行消毒持续的时间不能太长，消毒后应立即用蒸馏水清洗 2～3次
C．接种时用镊子夹取菊花茎段，注意茎段的形态学上下端，避免倒插
D．对试管苗炼苗（驯化）的操作步骤之一是用流水除去根部培养基
8．如图是“番茄—马铃薯”杂种植株的培育过程，其中①～⑤表示过程，字母表示细胞、组织或植株。下列
相关叙述正确的是（ ）
A．过程①表示在低渗溶液中用酶解法处理植物细胞获得原生质体
B．c是正在融合的原生质体，诱导融合的方法可以是低 Ca+—低 pH融合法
C．可以根据是否发生质壁分离现象鉴别杂种细胞的细胞壁是否再生
D．植物有性杂交和体细胞杂交都能克服远缘杂交不亲和的障碍
9．Vero细胞是从非洲绿猴的肾脏上皮细胞中分离培养出来的，可无限增殖且能悬浮培养。因不能合成抗病
毒蛋白干扰素，因而广泛应用在病毒性疫苗生产上，下列叙述错误的是（ ）
A．培养 Vero细胞时需要提供 5%二氧化碳和 95%空气
B．培养液需要定期更换，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害
C．Vero细胞无需胰蛋白酶等处理可传代培养
D．生产病毒性疫苗时，可将病毒接种到 Vero细胞，培养后提取病毒可直接成为疫苗
10．如图为 iPS细胞的获得及用其培育不同种细胞的示意图，相关叙述错误的是（ ）
A．在培养 iPS 细胞的过程中定期更换培养液的目的是清除细胞代谢物，防止对细胞自身造成伤害
B．过程③④分化得到的细胞不同，是因为 iPS 细胞在培养过程中发生了遗传物质的改变
C．若 iPS 细胞来源于病人自身体细胞，再将其分化出的细胞移入患者体内可以避免免疫排斥反应发生
D．若要了解这 4个关键基因在诱导产生 iPS 细胞时每个基因作用的相对大小，可以在各实验组中依次
去掉 1个基因来进行推测
11．甲型流感单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞在克隆化培养过程中来自 B淋巴细胞的染色体往往出
现随机丢失现象，不考虑基因互作和其他变异，相关叙述错误的是（ ）
A．可从多次间歇注射甲型流感疫苗的动物脾脏中筛选获得已免疫的 B淋巴细胞
B．在 HAT 选择培养基上，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均无法长期存活
C．用 96孔板培养和筛选杂交瘤细胞时每一个孔尽量只接种一个细胞
D．抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞即具有持续产生甲型流感抗体的能力
12．野生动物郊狼的物种数量近年不断减少、濒临灭绝，科研人员利用种间体细胞核移植技术（iSCNT）培
育小郊狼的流程如下图。下列叙述正确的是（ ）
A．图中①是第二极体，②是透明带
B．iSCNT技术比胚胎细胞核移植技术难度要小
C．图中“卵母细胞去核”中的“去核”指的是去除纺锤体-染色体复合物
D．结构③通常需要用电刺激、Ca2+载体等方法激活，使其完成减数分裂和发育进程
13．目前精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精子作为外源基因的载体，
使精子携带外源基因进入卵细胞受精。下图表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列说法错误的是
（ ）
A．①过程需将成熟的精子放入 ATP溶液中进行获能处理
B．将外源基因整合到精子的染色体上，可保证外源基因稳定遗传
C．②采用体外受精技术，受精完成的标志是雌雄原核融合
D．精子载体法与显微注射法相比，对受精卵中核的影响更小
14．研究者获得导入 S基因的基因编辑小鼠的过程如下图所示，下列相关叙述正确的是（ ）
A．过程①一般需要用促性腺激素处理
B．过程②是在雌鼠 a的输卵管内完成
C．过程③需将表达载体注射到子宫中
D．过程④需抑制雌鼠 b对植入胚胎的免疫排斥
15．下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法正确的是（ ）
A．通过过程①-⑤培育优质奶牛的过程与克隆牛的原理相同
B．在胚胎发育中，桑葚胚时期的胚胎会从透明带中伸展出来
C．③代表胚胎分割，需均等分割原肠胚的内细胞团，以免影响胚胎发育
D．⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关
16．某小组通过 PCR（假设引物长度为 8个碱基短于实际长度）获得了含有目的基因的 DNA片段，并用限
制酶进行酶切（下图），再用所得片段成功构建了基因表达载体。下列叙述错误的是（ ）
A．其中一个引物序列为 5＇TGCGCAGT-3＇
B．步骤①所用的酶是 SpeI和 CfoI
C．用步骤①的酶对载体进行酶切，至少获得了 2个片段
D．酶切片段和载体连接时，可使用 E．coli连接酶或 T4连接酶
17．下列关于 DNA粗提取与鉴定及 DNA片段的扩增与电泳鉴定的叙述，正确的是（ ）
A．用同样方法从等体积猪血和鸡血中提取的 DNA量相近
B．使用二苯胺试剂能有效测定不同提取液中 DNA的纯度差别
C．PCR扩增的 DNA片段在琼脂糖凝胶中迁移的速率与凝胶浓度、DNA分子大小等有关
D．PCR扩增 4次循环后，得到的含有两种引物的 DNA 片段所占比例为 1/8
18．为探究M基因的功能，科研人员利用基因工程技术将M基因导入拟南芥中，培育出转M基因拟南芥
植株，相关流程如图所示，其中 b过程利用了 PCR技术。下列相关叙述错误的是（ ）
A．a、b过程中所需要的酶分别是逆转录酶和耐高温的 DNA聚合酶
B．b过程中将温度降至 50℃左右的目的是将双链 DNA 解聚为单链
C．e过程中，Ti质粒的 T-DNA可携带着M基因转移到拟南芥细胞中
D．获得的转M基因拟南芥植株自交，子代可能会发生性状分离
19．改良二倍体水稻的株高和产量是实现袁隆平先生“禾下乘凉梦”的一种可能途径。研究人员克隆了可显著
增高和增产的 eui基因，并开展了相关探索，过程如图所示。下列相关分析正确的是（ ）
A．步骤 Ⅰ 花药离体培养得到愈伤组织的过程中细胞失去其特有的结构和功能
B．步骤 Ⅰ 在培养得到愈伤组织、丛芽和组培苗的过程中，不需要更换培养基
C．步骤 Ⅱ 在构建重组 Ti 质粒时使用的工具酶有 DNA 解旋酶和 DNA 连接酶
D．为筛选含重组 Ti 质粒的农杆菌菌株，需在培养基中添加抗生素的抗性基因
20．下列关于目的基因的检测和鉴定的叙述，正确的是（ ）
A．目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键是能否转录出 mRNA
B．可采用 PCR检测目的基因是否转录和翻译
C．可从转基因生物中提取蛋白质来检测目的基因是否翻译成相应蛋白质
D．抗虫、抗病检验用于确定转基因生物是否具备相关性状属于分子水平的检测
二、实验题
21．ε-聚赖氨酸（ε-PL）能抑制多种微生物的活性，且人体可将其分解为赖氨酸，是一种优良的天然食品防
腐剂。科研人员欲从土壤中分离能分泌ε-PL的微生物，做了如图所示的实验（1~V表示过程，①~③表示菌
落），已知ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。
(1)图中第 I步最常用的接种方法是_________。若经第Ⅱ步培养后发现菌落铺满了整个培养基、无法分辨出
单菌落，则应在第 I步之前_________，再进行接种。接种后的培养基应倒置放在 37℃的恒温箱中培养，倒
置的目的是_________。
(2)第Ⅲ步接种，应挑选_________（①/②/③）号菌落。一般来说，在相同培养条件下，用不同微生物表现
出的稳定的_________来判断微生物种类。
(3)本实验中用到了 4种培养基，其中乙、丁培养基的作用分别是_________、_________。
(4)为检测上述收集到的ε-PL对不同种类微生物的抑制能力，研究人员将大肠杆菌等菌种分别涂布于某培养
基表面，再将浸有不同浓度ε-PL的滤纸圆片置于平板培养基表面，培养后测量清晰区（单位：mm）的宽度，
得到了表所示的结果。
ε-PL浓度/mg·L-1微生物 20 30 40 50 60 70
大肠杆菌 + + 7.2 10.8 11.6 13.3
沙门氏菌 + + 6.5 9.2 10.9 13.0
酿酒酵母 7.2 9.1 12.6 13.4 14.8 -
红曲霉 + + + + 5.1 6.3
注：“+”表示无清晰区，“-”表示未进行实验。
下列关于上述抑菌实验的叙述，正确的是_________（多选）。
A．结果显示ε-PL 对酿酒酵母的抑制作用最强
B．ε-PL对四种微生物的抑制效果与浓度正相关
C．用于实验的培养基应该用液体的选择培养基
D．接种需在超净工作台上酒精灯火焰周围进行
22．不对称体细胞杂交是指利用射线破坏供体细胞的染色质，与未经射线照射的受体细胞融合，所得融合
细胞含受体全部遗传物质及供体部分遗传物质。研究人员尝试运用不对称体细胞杂交将红豆杉（2n=24）与
柴胡（2n=12）进行了融合，培育能产生紫杉醇的柴胡，过程如图所示。请回答下列问题：
（注：X射线处理能随机破坏染色体结构，使其发生断裂、易位或染色体消除，使细胞不再持续分裂；碘
乙酰胺处理能使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。）
(1)过程①中需将植物组织经_____后接种于MS培养基上诱导_____过程，产生愈伤组织。对原生质体进行
的 A处理为_____。
(2)采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。已知 FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分
解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此分析应选择
_____的原生质体用于融合。融合前对原生质体在显微镜下用血细胞计数板计数，以确定原生质体密度。
(3)获得的原生质体经诱导融合后，只有异源融合的原生质体可持续分裂形成再生细胞团，原因是_____。过
程④再分化阶段，芽的分化要求培养基中_____（激素）比例较高。
(4)科研人员对获得的部分植株细胞进行染色体观察、计数和 DNA分子标记鉴定，结果如表所示。后代植株
中_____类型一定不是所需植株。科研人员推测杂种植株的染色体主要来源于亲本柴胡的染色体，另一方亲
本的遗传物质可能不是以染色体的形式存在于杂种植株细胞中，而是以 DNA片段的方式整合进柴胡的基因
组，作出以上推测的依据有_____。
后代植株类型 染色体数目、形态 DNA分子标记鉴定
甲 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲 DNA片段
乙 12，形态与柴胡染色体相似 无红豆杉 DNA片段
丙 12，形态与柴胡染色体相似 含双亲DNA片段和新的DNA片段
三、解答题
23．自 1994年科学家首次将精原细胞移植到不育的受体睾丸中并恢复其生殖能力以来，对啮齿动物睾丸中
精原干细胞（SSCs）的体内、体外研究和操作一直处于火热状态。对于家畜动物来说，SSCs的培养和移植
有可能提高动物的生产效率，为转基因动物的制备提供新的途径。由于 SSCs在睾丸中数量稀少，因此体外
培养系统的建立是研究和操作这一稀有细胞群体的重要前提。下图为体外精子发生的策略（精子发生过程
主要包括精原细胞自我更新与分化、精母细胞减数分裂和精子形成）。回答相关问题：
(1)精原干细胞是位于睾丸组织曲细精管基底膜上能稳定进行自我更新并分化为成熟精子的一类_________
干细胞，是精子发生的基础。一般认为，其具有_________，只能分化成特定的细胞或组织，不具有发育成
完整个体的能力。
(2)据图推测，用_________将睾丸分散成单个细胞，再制成细胞悬液，在培养睾丸细胞过程中这类细胞往往
会出现细胞贴壁现象，当贴壁细胞在生长增殖时，会受到细胞密度过大、有害代谢物积累、_________以及
_________等因素而分裂受阻。
(3)将获得的精子在体外进行受精，首先要进行精子获能，获能液的有效成分为_________。待受精的细胞为
_________（写出细胞名称和所处时期），将体外受精获得的小鼠桑葚胚移植到代孕母鼠子宫，此阶段胚胎
_________（填“是”或“否”）已经开始分化。
(4)“三亲婴儿”是“三合一”胚胎人工授精技术诞生的婴儿，含有“一父两母”三人的遗传物质，可有效防止某些
遗传病的发生。据图回答下列问题：
a．诞生“三亲婴儿”的过程中，用到的胚胎工程技术有_________（至少写两种）。
b．“三亲婴儿”的培育技术_________（填“能”或“不能”）避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，而
_________（填“能”或“不能”）避免母亲的红绿色盲基因传递给后代。
24．玉米营养价值高，是优良的粮食作物，但普通玉米缺乏动物生长发育所必需的赖氨酸。科研人员利用
转基因技术将马铃薯中已知序列的高赖氨酸蛋白基因（G基因）转入玉米细胞获得高赖氨酸玉米新品种。
请回答下列问题：
(1)利用 PCR技术以图 1中的 DNA片段为模板扩增 G基因，需要的引物有_______（从 A、B、C、D四种
单链 DNA片段中选择）。
(2)为了提高玉米中赖氨酸蛋白的含量，研究者将 G基因与能够驱动基因持续转录的强启动子连接起来，如
图 2所示。强启动子是一段特殊序列的 DNA 片段，位于基因的______（填“上游”或“下游”），能被_______
识别并结合。在转录过程中，模板链的 5'端位于_____（填“M”或“N”）端。
(3)可用 PCR技术在目的基因的两端添加限制酶识别序列，使目的基因能定向插入 T-DNA中。将目的基因
插入 T-DNA的原因是______，M、N端应分别添加限制酶______的识别序列。
(4)可分别用________技术对转基因玉米植株中的 DNA和蛋白质进行检测，结果发现有些植株虽有 R基因，
但几乎没有高赖氨酸蛋白，原因可能是______。
参考答案
1．D
2．A
3．A
4．D
5．C
6．C
7．B
8．C
9．D
10．B
11．D
12．C
13．A
14．A
15．D
16．B
17．C
18．B
19．A
20．C
21．(1) 稀释涂布平板法 （无菌水）稀释 避免培养基中的水分过分挥发或防止皿盖上水珠落
入培养基造成污染
(2) ① 菌落特征（菌落的形状、大小和颜色等）
(3) 选择产ε-PL的菌种 增加目的菌数量和生产ε-PL
(4)ABD
22．(1) 消毒 脱分化 X射线
(2)有荧光
(3) 杂种细胞由于融合后在细胞核和细胞质的功能上实现互补，使细胞恢复正常分裂 细胞分裂素
(4) 乙 甲、丙类型植株细胞的染色体与柴胡细胞中的染色体数目、形态相似，且含有双亲的 DNA
片段
23．(1) 成体 组织特异性
(2) 机械法（胰蛋白酶、胶原蛋白酶） 培养液中营养物质缺乏 接触抑制现象
(3) 肝素（钙离子载体） MⅡ期的次级卵母细胞 否
(4) 体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等 能 不能
24．(1)BC
(2) 上游 RNA聚合酶 M
(3) Ti质粒上的 T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞染色体的 DNA上 NotI、SacI
(4) PCR/DNA 分子杂交、抗原-抗体杂交 基因转化过程中强启动子可能丢失或断裂（不能正常转
录或翻译）

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