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内蒙古自治区乌兰察布市集宁区内蒙古集宁一中2025-2026学年第二学期高二5月期中考试生物试题
一、单选题
1．从石油污染的土壤中筛选高效石油降解菌的流程包括：样品采集→富集培养→分离纯化等。图1、2为两种接种方法纯化培养的结果。下列叙述正确的是（　　）

A．富集培养需使用以石油为唯一碳源的液体培养基，以提高菌种浓度
B．图1接种时，每次灼烧接种环后立即从上一次划线末端继续划线
C．图1、图2的接种方法均可用于微生物纯化培养及其活菌计数
D．样品采集时取土样用的铁铲和取样纸袋在使用前都需消毒处理
2．甲烷氧化菌能利用强效温室气体甲烷进行繁殖，在发酵工程中可被用于生产单细胞蛋白。下列相关操作正确的是（　　）
A．筛选菌种时培养基中含有碳源、氮源、水、无机盐等
B．采用平板划线法计数以检测发酵过程中菌种数量变化
C．大规模发酵生产前，需对培养基和发酵设备严格消毒
D．发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法获得单细胞蛋白
3．高效生产酒精的优良酵母菌菌种需具备耐高糖和耐酸特性，酿酒酵母产酒精能力强，但没有合成淀粉酶的能力；糖化酵母能合成淀粉酶，但酒精发酵能力弱。科研人员进行了图甲所示的酵母菌种改良实验，并对获得的杂种酵母菌进行不同基质的发酵测试，检测结果图乙所示。
下列关于菌种改良过程的叙述，正确的是（ ）
A．可用纤维素酶除去细胞壁，获得两种酵母菌的原生质体
B．可在反应体系中加入过量的无菌水来终止PEG的作用
C．培养基X是以淀粉为唯一碳源的选择培养基，用来筛选出杂种酵母
D．若对目标酵母进行耐酒精的筛选，可在含较高酒精浓度的培养基中多次继代培养
4．花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果如图2所示。下列叙述正确的是（　　）
A．花椰菜和紫罗兰的原生质体能融合，说明两种植株间不存在生殖隔离
B．图1培育出的杂种植株减数分裂时的细胞中最多含有64条染色体
C．图1培育杂种植株所用的技术体现了细胞膜具有一定流动性原理、染色体变异和植物细胞具有全能性原理
D．可将病菌悬浮液均匀喷施于图2中的1和5植株叶片上，一段时间后，测定病斑面积占叶片总面积的百分比，筛选出抗病性强的杂种植株
5．基因工程中常用土壤农杆菌转化法将目的基因导入植物细胞。某科研团队拟将抗除草剂基因导入某双子叶植物，以培育抗除草剂植株。下列有关分析错误的是（　　）
A．PCR扩增的产物常通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定
B．要将抗除草剂基因插入农杆菌Ti质粒的T-DNA片段内
C．将抗除草剂基因导入植物时，常用受精卵作为受体细胞
D．可用抗原-抗体杂交法来检测抗除草剂基因是否表达出蛋白质
6．下图为某生物工程操作流程模式图，①、②为相应过程。下列叙述正确的是（　　）
A．若此图表示转基因抗虫棉的培育，则①为该技术的核心工作
B．若此图表示单克隆抗体的制备，则②过程用选择培养基筛选
C．若此图表示试管牛的培育，则①过程发生的场所是输卵管
D．若此图表示植物体细胞杂交，则②过程需要用物理或者化学的方法激活细胞壁再生
7．从小鼠胚胎中分离获取胚胎成纤维细胞进行贴壁培养，在传代后的不同时间点检测细胞数目，结果如图。下列叙述正确的是（ ）
A．传代培养时，培养皿需密封防止污染
B．选取①的细胞进行传代培养比②更合理
C．直接用离心法收集细胞进行传代培养
D．细胞增长进入平台期可能与细胞密度过大有关
8．制醋、制饴、制酒是我国传统发酵技术。醋酸菌属于好氧型原核生物，常用于食用醋的发酵。下列叙述错误的是（ ）
A．食用醋的酸味主要来源于乙酸 B．醋酸菌不适宜在无氧条件下生存
C．醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶 D．葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解发生在线粒体内
9．下列关于传统发酵食品制作的叙述，正确的是（　　）
A．制作葡萄酒时，需对葡萄汁和发酵装置进行高压蒸汽灭菌，以防止杂菌污染
B．制作腐乳时，发酵过程中有多种微生物参与，其中起主要作用的是毛霉
C．制作泡菜时，泡菜坛口的水封结构可营造有氧环境，满足乳酸菌的代谢需求
D．制作红枣醋时，酒精发酵完成后无须通气即可将酒精转化为醋酸
10．随着科技的发展，人们能够在受到严格控制的环境条件下大规模生产发酵产品，发酵工程逐步形成。下列相关叙述错误的是（ ）
A．发酵之前需要对菌种进行扩大培养
B．发酵工程的发酵产品为青霉素等代谢物
C．柠檬酸可通过黑曲霉的发酵制得
D．发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节
11．某科研团队在培育铁皮石斛新品种并提取石斛多糖时，分别采用了以下方法：①将铁皮石斛（2n=38）与抗寒的细茎石斛（2n=38）体细胞杂交获得杂种植株；②利用铁皮石斛愈伤组织进行液体悬浮培养规模化提取石斛多糖；③通过农杆菌转化法将冷响应基因导入铁皮石斛愈伤组织获得转基因植株。下列叙述正确的是（　　）
A．方法①获得的杂种植株是含有76条染色体的二倍体，可通过减数分裂产生正常配子
B．方法②需控制培养基中的激素比例，以利于愈伤组织增殖和石斛多糖合成
C．方法③需筛选含重组Ti质粒的愈伤组织，经再分化获得抗寒转基因植株
D．三种方法均依赖植物细胞的全能性，为铁皮石斛品种改良提供了新方案
12．科学家以水稻（2n=24）和稗草（2n=54）为材料，利用植物体细胞杂交技术获得了具有稗草抗逆性（如耐盐、抗除草剂）的水稻，流程如下图。下列叙述正确的是（　　）
A．植物体细胞杂交是将不同来源的植物体细胞融合成杂种细胞的技术
B．可以用离心法或灭活病毒诱导两种原生质体融合
C．两种细胞均需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
D．杂种细胞重新形成细胞壁与高尔基体的活动有关
13．某科研团队欲将抗虫基因（Bt基因）导入棉花细胞，培育抗虫棉。现有以下两种导入方案：①用农杆菌转化法将Bt基因导入棉花细胞；②在棉花授粉后，将含Bt基因的溶液注入花粉管通道。
下列叙述错误的是（　　）
A．方案①需要经过两次拼接才能将Bt基因整合到棉花细胞的染色体DNA上
B．方案①将Bt基因随机插入Ti质粒后，要先将重组质粒转入农杆菌
C．方案②中Bt基因需要构建基因表达载体，才能进入受体细胞并表达
D．相比方案①，方案②的优势是无需进行植物组织培养即可得到抗虫棉
14．科学家通过不同的方式将小鼠(2n=40)胚胎干细胞中的一条1号染色体(Chr1)和一条2号染色体(Chr2)连接，分别获得了Chrl+2和Chr2+1的胚胎干细胞，如图所示。最终，Chr2+1胚胎干细胞培养出的胚胎寿命不足12.5天，无法发育成小鼠，而Chrl+2胚胎干细胞培养出的胚胎则能够发育成成鼠。下列叙述错误的是（ ）
A．实现Chrl和Chr2的连接需要使用限制酶和DNA连接酶
B．Chrl+2小鼠的正常体细胞中有39条染色体
C．上述实验说明基因在染色体上的排列顺序会影响生物性状
D．图中Chr1+2和Chr2+1上的基因种类和数目完全相同，但遗传效应不同
15．治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A．核移植过程中需对卵母细胞去核，这里的核是指纺锤体—染色体复合物
B．将图中获得的组织器官移植给个体A，则基本不会发生免疫排斥反应
C．体细胞在体外培养时需要提供适量CO2，作为体液因子调节呼吸运动
D．治疗性克隆过程不产生独立生存的新个体，不存在任何伦理道德问题
16．科学家利用基因编辑技术，定向删除猪胚胎中控制特定器官发育的关键基因，使胚胎无法自主形成该器官。然后选取患者的体细胞通过诱导形成iPS细胞，并将人类iPS细胞注入已处理的猪的囊胚中形成人——动物嵌合体胚胎。将该嵌合胚胎导入受体猪的子宫中，通过控制发育进程可获得相应的器官。该项技术可为器官移植提供潜在供体。下列叙述或推测正确的是（　　）
A．嵌合胚胎的获得运用了核移植技术
B．应该将iPS细胞注入猪囊胚的滋养层中
C．通过该技术获得的器官可能含有人和猪的基因
D．该技术没有冲击现有的伦理道德，可大力推广
17．抗原表位是位于抗原表面决定抗原特异性的特殊化学基团，一种抗原表位只能与T细胞或B细胞表面一种受体结合，刺激机体产生一种抗体。如图为利用具有三种抗原表位的抗原制备单抗的过程，下列说法正确的是（ ）
A．培养分离出的B细胞时，需定期更换培养液以保证无菌环境
B．经选择培养基筛选所得的杂交瘤细胞能够产生的抗体有3种
C．对杂交瘤细胞克隆化培养的原理是细胞的全能性
D．抗体检测后，选出的每个杂交瘤细胞只能产生1种抗体
18．甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。有同学提出利用现代生物技术生产黄酮的两条技术路径，如图所示。下列叙述正确的是（　　）
A．图中B代表愈伤组织，两条技术路径均证明了植物细胞具有全能性
B．通过路径一获得脱毒苗时，应选择茎尖等病毒含量少的部位作为外植体
C．黄酮属于植物体产生的次生代谢物，在整个生命过程中一直通过代谢产生
D．植物组织培养过程中培养基中的植物激素的浓度、比例不会影响植物细胞的发育方向
19．关于“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验，下列叙述正确的是（ ）
A．PCR扩增DNA片段时DNA双链的解聚原理与细胞内相同
B．耐高温的DNA聚合酶可直接在模板链的3′端从头合成子链
C．电泳可鉴定不同长度的DNA分子是因为它们在凝胶中的迁移速率不同
D．染色后的凝胶条带的位置可以反映DNA分子碱基序列的组成
20．生物技术在农业、医学和环境保护等领域具有广泛应用，但同时也带来了一些伦理和安全问题。下列叙述正确的是（ ）
A．基因编辑技术可用于疾病预防领域研究和设计完美婴儿
B．若转基因植物的外源基因来源于自然界，则不会存在安全问题
C．只要有证据证明转基因产品不安全，就应禁止转基因技术的研究
D．可利用胚胎干细胞技术获取人体组织细胞或器官，作为器官移植供体
21．谷氨酸棒状杆菌生长的最适pH为7.0，通过以下代谢途径发酵生产L-谷氨酰胺。下列叙述正确的是（ ）
A．发酵工程的菌种只能直接来自自然界
B．发酵初期控制pH为7.0，后调为5.6，有利于提高L-谷氨酰胺产量
C．必须要借助显微镜观察才能初步判断发酵过程中是否发生球状细菌污染
D．发酵结束后，采用过滤、沉淀的方法将菌体分离和干燥即可获得产品
22．黄酮类物质具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等生物活性，传统方法将芒果粉碎后萃取和浓缩，生产效率低下，难以满足市场需求。可通过下列哪项技术迅速大量获取？（ ）
A．基因工程 B．植物细胞培养
C．植物体细胞杂交 D．发酵工程
23．下列关于现代生物技术及生物学实验的叙述，正确的是（　　）
A．琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的过程中，琼脂糖融化后应立即加入核酸染料，以免凝胶凝固导致染料分布不均
B．通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白
C．DNA粗提取实验中，研磨液中的EDTA（蛋白质变性剂）可抑制DNA酶活性，防止研磨过程中DNA被水解
D．凝胶载样缓冲液中指示剂的作用是指示DNA分子的具体位置
24．下列有关生物技术安全和伦理问题的观点合理的是（ ）
A．若转基因植物的外源基因来自自然界，则不会引发安全问题
B．将目的基因导入叶绿体基因组中能防止目的基因随花粉扩散
C．生殖性克隆的核心争议在于可能导致人类基因多样性降低
D．生殖性克隆涉及核移植技术，治疗性克隆不涉及核移植技术
25．在PCR扩增仪中对目的基因扩增完成后，常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定PCR 的产物。下列有关叙述错误的是（ ）
A．在PCR扩增仪中加入模板、原料、耐高温的DNA 聚合酶和缓冲液可完成对目的基因的扩增
B．PCR 时缓冲液的作用是提供合适的酸碱度和某些离子
C．核酸染料应添加在熔化并稍冷却后的琼脂糖中，可用来在紫外灯下观察DNA
D．指示剂应添加在载样缓冲液中，用于指示电泳的进程
二、多选题
26．某型白酒是以小麦、高粱等粮食为原料，以曲为发酵剂酿造而成的。曲中含有的微生物主要有需氧型的霉菌、兼性厌氧型的酵母菌，以及乳酸菌、醋酸菌等。主要原理是酵母菌在无氧条件下利用葡萄糖发酵产生酒精，其主要工艺流程如下图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．若发酵罐密封不严就会进行乳酸发酵使酒变酸
B．糖化主要是由曲中的霉菌将淀粉水解为葡萄糖
C．重铬酸钾溶液在酸性条件下可用于检测发酵液蒸馏产物中有无酒精
D．原料摊晾后加入酒糟立即密封，可高效进行酒精发酵
27．甲植物具有由核基因控制的多种优良性状，乙植物的细胞质中有抗除草剂基因，科研人员通过图示原生质体融合技术将乙的抗性基因引入甲，相关叙述错误的是（　　）
A．过程A常用酶解法去除细胞壁以获得原生质体
B．过程B常用灭活的病毒诱导原生质体融合
C．经过程C可筛选出有活性的甲-乙杂交细胞
D．过程D需要提供适宜的营养，激素及光照等条件
28．科研人员将抑制因子基因导入乌珠穆沁羊受精卵的基因组中，使BMP2基因和PPARG基因（两者调节脂肪细胞的分化）表达减弱，极大地降低了肉脂率，以便符合人们的低脂饮食要求，部分技术路线如图所示，①②③为相关过程。下列叙述正确的是（　　）
A．过程①一般需要用Ca2+对受精卵进行处理，以改变其生理状态便于质粒进入
B．细胞体外培养需要95%O2和5%CO2的气体环境，其中O2是为了满足细胞呼吸
C．将早期胚胎移入代孕母羊体内，实质上是胚胎在相同生理环境下空间位置的转移
D．相比于未处理的受精卵发育成的羊，上述代孕母羊的子代的遗传信息发生了改变
29．玉米中赖氨酸含量较低，原因是赖氨酸含量升高会抑制相关酶的活性，如图所示。科研人员将AK中第352位苏氨酸变成异亮氨酸，DHDPS中第104位天冬酰胺变成异亮氨酸，该变化影响了其与赖氨酸的结合，使玉米中游离的赖氨酸含量得以提高。下列叙述错误的是（ ）

A．基因工程能够实现对AK基因和DHDPS基因特定位置的定点突变
B．改造后的AK和DHDPS的氨基酸序列发生了改变，蛋白质结构没有改变
C．改造后的AK和DHDPS与赖氨酸结合的能力增强，导致反馈抑制作用更明显
D．该研究体现了蛋白质工程可以生产自然界没有的蛋白质
30．某些香蕉植株组织中存在的内生菌可防治香蕉枯萎病，其筛选流程及抗性检测如图。下列操作正确的是（ ）
A．在大量感染香蕉枯萎病的香蕉种植园内，从感病植株上采集样品
B．将采集的样品充分消毒后，用蒸馏水冲洗，收集冲洗液进行无菌检测
C．将无菌检测合格的样品研磨，经稀释涂布平板法分离得到内生菌的单菌落
D．判断内生菌的抗性效果需比较有无接种内生菌的平板上的病原菌菌斑大小
三、解答题
31．多环芳烃（PAHs）是一种不溶于水的有机物，在培养基中以微小的颗粒状存在，PAHs在土壤中的降解速率很慢，并具有致癌和致畸作用。科研人员欲从被PAHs污染的土壤中分离出高效降解PAHs的菌株，进行如图所示的实验
（培养基乙中PAHs被降解后会形成透明圈）。回答下列问题：
(1)从培养功能角度分析，培养基甲属于_________；培养基通常需要提前进行_________。
(2)筛选PAHs降解菌实验时，过程③所需要的实验工具有_________，该接种方法是_________。过程④挑选的单菌落应该是透明圈直径与菌落直径比值_________（填“最小”或“最大”）的。
(3)在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品0.1 mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为48、50、54、56、52，则每升原菌液样品中细菌数为_________个。该方法所统计的细菌数通常会比实际菌落数目偏_________（填“大”或“小”），原因是_________。
32．为降低人类乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体一药物偶联物(ADC)，过程如图1所示。
(1)动物细胞培养时，可以用___________酶处理动物组织，得到分散的组织细胞，培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。在培养瓶中动物细胞培养一段时间后停止增殖的原因是___________(至少回答两点)。
(2)为了刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞，每隔2周用取自___________的特定抗原注射小鼠1次，共注射3次。最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的生物诱导剂是___________。
(3)通过过程②得到的细胞还必须经过过程③克隆化培养和___________才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行体外培养的方式进行扩大培养。体外培养时，首先应保证其处于___________的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制气体条件是___________与5%CO2的混合气体，此外在使用合成培养基时通常还需加入血清。
(4)单克隆抗体的优点是___________。单克隆抗体是ADC中的___________(填“a”或“b”)部分。
33．BMP15蛋白由卵母细胞分泌，在哺乳动物卵巢、卵泡的生长发育、成熟以及排卵过程中起着不可或缺的作用。科研人员克隆出新西兰白兔BMP15基因后，构建该基因的真核表达载体，并对产生的BMP15蛋白进行分析。相关实验过程如图所示。请回答下列问题。
注：基因插入后形成融合基因不影响Myc-tag序列的表达
(1)选取幼龄健康的新西兰白兔雌兔，采集______组织的RNA，经①～③过程可获得大量的BMP15基因，通常采用______来鉴定PCR产物。
(2)③过程中，添加的一种引物序列为5'—CGGAATTCGGATGGCCCTCTCAGCATCCT—3'，则下列序列中最有可能是另一种引物序列的是______。
A．5'—GGTGGTTGGTTGGGCTTTTCAATTCCCGCG—3'
B．5'—TCAGGACGTGTACAGCCACTCCATGGGGC—3'
C．5'—CGGGGTACCTCACCGACATGTGCAGGACT—3'
D．5'—AGGTACCTGAGGAGGGCCATCCGAATTCCG—3'
(3)图示重组载体pCMV-Myc-BMP15中，未标明的结构有______,CMV启动子的作用是______。
(4)④过程中将转化好的菌涂在含有______的培养基上，筛选获取菌落。通过______技术来检测融合Myc-tag标签的BMP15蛋白是否表达成功。
(5)如果想利用哺乳动物乳腺批量生产BMP15蛋白，可以将BMP15基因与______调控元件重组在一起，通过显微注射的方法导入哺乳动物______中，构建乳腺生物反应器。
34．如图为A、B不同物种间体细胞杂交示意图，请回答下列问题。
(1)去除细胞壁而不损伤细胞可用______________、________处理。在用促融剂处理时，使用的促融剂主要有________________。
(2)融合细胞中可能包括________种类型，其中杂种细胞的遗传物质组成是_________________________________________________。
(3)由杂种细胞经人工诱导培养，经__________分裂增加细胞数目并不断分化，逐渐发育成C植株。该植株的性状与D亲本植物的性状区别是______________________________________________________。
(4)整个培养过程应用了细胞工程的__________和_____________两大技术，这种培育杂种植株的意义是________________________。
参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 A D D C C A D D B B
题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案 B D B D A C D B C D
题号 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30
答案 B B C B A BC BD CD BC CD
31．(1) 选择培养基 高压蒸汽灭菌
(2) 微量移液器、涂布器 稀释涂布平板法 最大
(3) 5.2×108 小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落
32．(1) 胰蛋白(或胶原蛋白)(或胰蛋白酶、胶原蛋白) 细胞密度过大、培养液中营养物质缺乏、有害代谢产物积累
(2) 人的乳腺癌细胞 灭活的病毒
(3) 抗体检测 无菌、无毒 95%空气
(4) 能准确地识别抗原的细微差异，与特定的抗原发生特异性结合，并且可以大量制备(或特异性强、灵敏度高、可大量制备) a
33．(1) 卵巢 琼脂糖凝胶电泳
(2)C
(3) 复制原点、终止子 RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA
(4) 氨苄青霉素 抗原 - 抗体杂交
(5) 乳腺中特异表达的基因的启动子 受精卵
34． 纤维素酶 果胶酶 PEG(或聚乙二醇) 3 A和B植物的遗传物质之和 有丝 具有A和B两种植物的性状 体细胞杂交 植物组织培养 克服生物远缘杂交不亲和的障碍

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