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高二年级五月月考生物试题 B.目的菌的纯化和计数可以使用平板划线法或稀释涂布平板法
考试时间：75 分钟 C.可依据单菌落周围“水解圈直径/菌落直径”的值来筛选目的菌株
一、单选题(每题 2 分，共 36 分）
D.获得的几丁质酶可用于防治某些有害的甲壳类动物、昆虫等生物
1.为获得优良的发酵食品，实验室在三支试管中培养了酵母菌、醋酸菌、乳酸菌。图中甲、
5.某兴趣小组按如图方法对没有加工的鲜奶进行细菌检测。下列有关叙述正确的是( )
乙、丙三支试管的菌种(试管内深色区域表示菌种存在的位置)及其发酵食品对应正确的是
( )
A.鲜奶常采用湿热灭菌法进行灭菌
B.若培养基需要调节 pH，应该在灭菌后培养基凝固前立即进行
A.甲试管：醋酸菌——泡菜；乙试管：乳酸菌——果酒；丙试管：酵母菌——果醋
C.若 3个培养皿中菌落数为 35、33、34，则鲜奶中细菌数为 3.4×106个/mL
B.甲试管：醋酸菌——果醋；乙试管：乳酸菌——泡菜；丙试管：酵母菌——果酒
D.对鲜奶中细菌计数，常采用稀释涂布平板法，统计的结果往往比实际值偏高
C.甲试管：醋酸菌——果醋；乙试管：酵母菌——果酒；丙试管：乳酸菌——泡菜
6.下列关于植物组织培养中再分化的说法，错误的是( )
D.甲试管：酵母菌——果酒；乙试管：醋酸菌——果醋；丙试管：乳酸菌——泡菜 A.再分化过程中，不同细胞内合成了功能不同的特异性蛋白质
2．获得纯培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下列有关无菌技术的叙述，正确的是( ) B.脱分化与再分化使用的培养基主要是激素浓度及比例不同
A.操作者的双手清洁后，用无水乙醇擦拭消毒 C.再分化过程在实验室或植物组织培养车间进行，需要避光处理
B.巴氏消毒法处理的食品不含有微生物，可长期保存 D.再分化过程中，核遗传物质没有发生改变，但 mRNA有变化
C.平板划线接种微生物时须在酒精灯火焰旁操作 7.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理相符的是( )
D.培养基、培养皿等均须采用干热灭菌法灭菌 A.原生质体融合和动物细胞融合——生物膜选择透过性
3.下列有关微生物培养基的配制，叙述错误的是( ) B.动物细胞培养——细胞的全能性
A.培养硝化细菌的培养基中的铵盐可作为氮源和能源 C.纤维素酶、果胶酶处理——酶的高效性
B. KH PO pH D.紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞增殖尿素固体培养基中的 2 4能用于维持培养基的
C. 8.海拉细胞是从一位患宫颈癌的病人身上分离出来的宫颈癌细胞，该病人已经去世，但海培养光能自养型的蓝细菌的培养基中不需要提供有机物
拉细胞直到今天还被用于科学研究。下列说法正确的是( )
D.马铃薯蔗糖固体培养基中的琼脂能作为酵母菌的碳源
A.海拉细胞可在体外大量增殖，在细胞培养过程中会出现接触抑制现象
4.某些微生物能合成几丁质酶，使几丁质降解为 N－乙酰氨基葡萄糖后进一步转化利用。
B.将癌变的宫颈癌组织分散为单个的海拉细胞，可用胃蛋白酶处理
科研人员试图从土壤中筛选出能高效降解几丁质的菌株，通过微生物培养获得几丁质酶，
C.培养海拉细胞时，O2是细胞代谢所必需的，可将培养皿置于含有 95%的 O2和 5%的 CO2
用于生物防治。下列相关叙述错误的是( )
的混合气体的 CO2培养箱中进行培养
A.土壤样品应加到以几丁质为唯一碳源的选择培养基中培养 D.培养液需定期更换，以便清除代谢废物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害
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9.2021年 6月，我国首个原创性抗体—药物偶联物(ADC)获批上市。该药采用人源化抗 A.接受细胞核的卵母细胞处于减数第二次分裂中期
HER－2抗体，通过可切割的接头与高效毒性分子MMAE偶联。ADC被肿瘤细胞内吞后， B.获得图中去核的卵母细胞时，可通过显微操作去核
载荷MMAE被释放到细胞质中，可抑制细胞中微管蛋白聚合，进而影响纺锤体的形成。 C.图中形成的器官用于移植，理论上可以避免免疫排斥反应
下列叙述错误的是( ) D.治疗性克隆过程采用的技术有核移植技术和胚胎移植技术
A.传统鼠源性单抗可能会引起人体产生相应抗体进而影响 ADC的效果 12.羊奶的脂肪颗粒体积为牛奶的三分之一，更利于人体吸收，其维生素及微量元素含量明
B.ADC中接头稳定性偏低会导致药物分子脱落而对正常细胞造成损伤 显高于牛奶。欲利用胚胎工程技术加快高产奶的萨能山羊的繁殖，下列说法正确的是( )
C.连接抗体和MMAE的接头可能在肿瘤细胞溶酶体中被蛋白酶破坏 A.为使萨能母羊超数排卵，可在其饲料中添加适量的促性腺激素
D.MMAE可能抑制肿瘤细胞内着丝粒分裂从而使其停滞在分裂中期 B.卵裂期的细胞数量增加，但细胞的体积和细胞内有机物的种类会减少
10.下列关于哺乳动物受精的描述正确的是( ) C.为提高胚胎利用率，可采用胚胎分割移植等无性繁殖技术
①获能后的精子与卵子相遇，释放多种酶，以溶解卵细胞膜外的结构(如透明带等) D.生产上可选用原肠胚细胞进行性别鉴定
②精子的细胞膜与卵细胞膜融合，卵细胞膜发生反应，阻止后来的精子进入卵内 13.如图为利用逆转录方法和 PCR技术扩增目的基因片段的过程示意图。据图分析，下列
③精子入卵后，原有核膜破裂，最后形成一个比原来精子的核还大的雄原核 说法错误的是( )
④精子入卵后被激活的卵子完成减数分裂Ⅱ，排出第二极体后，形成雌原核
⑤合子中的遗传物质，一半来自父方，一半来自母方
A.①③④ B.③④⑤
C.②④⑤ D.①③⑤
11.如图所示为治疗性克隆的基本过程，首先取病人的体细胞核，移植到去核的卵母细胞中，
(ES ) ES A.在第 3轮 PCR结束后，两条链等长的 DNA占 14在早期胚胎形成后，从中分离获得胚胎干细胞 细胞 ，对 细胞进行基因修饰和定向
B.⑤过程使用 72℃左右的温度处理既可以防止 DNA变性，又可以促进子链的延伸
分化处理，将定向分化后的细胞移植给病人，从而达到治疗疾病的目的。下列相关叙述错
误的是( ) C.④过程两种引物通过碱基互补配对分别与 DNA两条单链结合
D.第 4轮④过程中消耗 15对引物
14.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验的叙述，错误
的是( )
A.将预冷酒精加入上清液后，出现的白色丝状物为粗提取的 DNA
B.鉴定 DNA时应将丝状物直接加到二苯胺试剂中进行水浴加热
C.将扩增得到的 PCR产物与不含指示剂的电泳缓冲液混合，注入加样孔
D.在凝胶中 DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小、构象等有关
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15.当目的基因和质粒都用 HindⅢ处理、连接后，目的基因可能正向插入载体，也可能反 基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中 THP9基因转录的方
向插入载体，为判断目的基因的插入方向，可使用限制酶处理，并进行电泳检测(如图)。
向为从左往右。下列相关叙述错误的是（ ）
下列选项中能判断目的基因插入方向的限制酶是( )
注：EcoRⅠ、BamHⅠ和 HindⅢ的识别序列、切割位点均不同，数字表示相邻两个限制酶 EcoRI BamHI KpnI MfeI HindIII
切点之间的碱基对数(bp)，质粒全长 20 000 bp。
5′ G↓AATTC 3 5′ G↓GTACC 3′ 5′ C↓AATTG 3′ 5′ A↓AGCTT 3′
A.HindⅢ B.EcoRⅠ 5′ G↓GATCC 3
3′ CTTAA↑G 5 3′ CCATG↑G 5 3′ GTTAA↑C 5 3′ TTCGA↑A 5
C.BamHⅠ D.EcoRⅠ和 HindⅢ 3′ CCTAG↑G 5′
′ ′ ′ ′
16.水杨酸羟化酶可催化水杨酸转化为龙胆酸，龙胆酸可被细胞利用。科研人员欲将水杨酸
A．THP9基因有 2个游离的磷酸基团，而且游离的磷酸基团在 5′端
羟化酶基因与红色荧光蛋白基因（mrfp）连接成融合基因，导入工程菌中，以实现对水杨
PCR B．构建基因表达载体时，用 KpnI、HindIII切割质粒酸的动态监测和清除，基因结构如图所示。现欲通过 判断融合基因的连接方向是否正 和目的基因
C．利用 PCR技术获取 THP9基因时应选择引物 2和引物 3确，应选用的引物组合是（ ）
D．为了检测转基因玉米新品种的培育是否成功，需要在个体水平上检测其蛋白质含量
18.最早的双脱氧测序法是 PCR反应体系中，分别再加入一种少量的双脱氧核苷三磷酸
(ddATP、ddCTP、ddGTP或 ddTTP)，子链延伸时，双脱氧核苷三磷酸也遵循碱基互补配对
原则，以加入 ddATP的体系为例：若配对的为 ddATP，延伸终止；若配对的为脱氧腺苷三
磷酸(dATP)，继续延伸；PCR产物变性后电泳检测。通过该方法测序某疾病患者及对照个
体的一段序列，结果如图所示。下列叙述不正确的是( )
A．引物 1和引物 2 B．引物 1和引物 3
C．引物 1和引物 4 D．引物 2和引物 4
17.THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9
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A．上述 PCR反应体系中只加入一种引物 ③图 2显示，醋酸菌在 1～3天繁殖最快。醋酸菌将乙醇转化为醋酸，反应简式为：
B．5′－CTACCCGTGAT－3′为对照个体的一段序列 _______________________________________________________________。
C．患者该段序列中某位点的碱基 C突变为 G 20.(20分)电影《我不是药神》中的格列宁是一种治疗癌症的靶向药物，此类靶向药物可称
D．电泳时产物的片段越小，迁移速率越快 为“生物导弹”。通常，我们采用动物细胞融合技术来制备单克隆抗体，利用单克隆抗体
来诊断和治疗癌症可能会成为攻克癌症的重要手段。
(1)若单克隆抗体与药物结合制成“生物导弹”治疗肠癌，则特定抗原通常是
二、非选择题(除标注外每空 2 分，共 64 分）
____________________。靶向药物比普通的化疗药物疗效高、毒副作用小是因为
19.(16分)食醋酿造是多种微生物共同作用的过程，主要微生物为霉菌、酵母菌、醋酸菌和
______________________________________________________________________。
乳酸菌。食醋发酵过程分为淀粉糖化、酒精发酵和醋酸发酵三个阶段，期间有不同种类的
(2)图中诱导细胞融合时需要采用_________________________ 或电融合法等方法诱导，杂
微生物生长繁殖并产生各种酶类，经过一系列复杂的生物化学变化最终形成食醋。
交瘤细胞的特点是________________________________。
(1)发酵原料中的淀粉为微生物提供________(营养物质)。参与发酵的多种微生物种间关系
(3)用特定的选择培养基筛选出融合的杂交瘤细胞进行____________和________，经多次筛
属于________。
选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。
(2)研究人员对食醋固态发酵过程中微生物的生长变化规律进行研究。下图为醋醅(食醋发
(4)近年来，科学家发现丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体有一定的影响，某科研小组进
酵的物料)不同层次的酵母菌和醋酸菌数量变化情况。
行了相关实验，结果如表所示：丁酸钠对杂交瘤细胞产生单克隆抗体的影响
丁酸钠的浓度 时间/h
/(mmol·L－1) 48 96 144
0 1∶320 1∶640 1∶1 200
0.25 1∶320 1∶1 280 1∶2 500
0.5 1∶160 1∶2 500 1∶2 500
①用________________法将接菌种种到添加了碳源、氮源、无机盐、水以及________的培 0.75 1∶320 1∶320 1∶640
养基中，培养一段时间，获得单菌落后，挑选菌落数符合要求的平板进行计数。 注：表中比值表示抗体效价，值越高表明越有利于抗体的产生。
②由图 1可知，整个发酵过程中酵母菌数量呈现________________________的趋势，且在 ①该实验过程中培养杂交瘤细胞的培养瓶放在了含 5%CO2的培养箱中培养，CO2的主要
不同层次上随着深度增加而减少。初期，由于________________，上层菌增殖速度高于中 作用是________________，该实验的自变量为_______________________。
层及下层菌。之后，随着发酵条件的变化，酵母菌基本停止繁殖而主要进行酒精发酵。在 ②根据表中数据，分析丁酸钠浓度与单克隆抗体产生量的关系：(4分)
第 7天以后随发酵时间延长，酵母菌的数量呈降低趋势，原因是 ______________________________________________________________________。
_____________________________________________________________________________ 21.(14分)由于猪的器官在生理形态上和人的器官非常接近，近年来应用猪的体细胞核移植
___________________________________。 技术研制人类基因疾病的动物模型，以及生产基因敲除猪用于人异种器官移植成为猪核移
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植相关研究的热点方向。下图为猪的体细胞核移植流程示意图，请回答下列问题。
(1)研究人员在用合成培养基对猪耳部成纤维细胞进行培养时，通常需加入________等一些
天然成分。 (1)PCR技术扩增时起关键作用的酶是________，其作用是___________________。
(2)从卵巢中采集的卵母细胞需在体外培养至________期才能用于体细胞核移植。除该方法 (2)扩增出T－DNA插入位置两侧的未知序列时，需要先根据____________________设计两
外，采集卵母细胞还可采用超数排卵法，其具体做法是给卵母细胞供体注射 种特异性引物序列，利用图中的引物________组合可扩增出 T－DNA两侧的未知序列。
_________________，使其排出更多的卵子。 (3)若只使用一种引物，通过 PCR技术制备与 T－DNA的 b链相同的单链作为某些检测的
(3)重构胚通常需培养至________________期，然后通过________技术送入代孕母猪体内。 探针，则所选择引物由 5′→3′的前 5个碱基序列为________。
为提高胚胎的利用率，还可采用________技术对胚胎进行处理。 (4)对 PCR产物测序，经分析得到了图 1中的未知序列。下列 DNA单链序列中(虚线处省
(4)就猪的体细胞移植技术本身来讲，虽然已经有多例体细胞克隆猪诞生，但总体的效率还 略了部分核苷酸序列)，可能正确的是________。
是较低的，克隆猪的存活率只有 1%或更低。研究表明，用组蛋白去乙酰化酶抑制剂丙戊 A.5′—GTCGACCAC……ATGTCGA—3′
酸(VPA)处理重构胚能显著提高其发育能力。从而大大提高克隆效率。若想探究 VPA处理 B.5′—AATTCCATG……CTGAATT—3′
重构胚的最适浓度，其实验思路是 C.5′—GCAATGCGT……TCGGGAA—3′
______________________________________________________________________ D.5′—TTGATACGC……CGAGTAC—3′
______________________________________________________________________。 (5)PCR技术扩增出T－DNA插入位置两侧的未知序列后，扩增产物可用________________
22.(14分)农杆菌 Ti质粒上的 T－DNA(序列已知)可以转移并随机插入被侵染植物的染色体 技术进行鉴定。
DNA中。研究者将图 1中被侵染植物的 DNA片段连接成环，并以此环为模板，利用 PCR
技术扩增出 T－DNA插入位置两侧的未知序列，进一步分析可确定 T－DNA插入的具体
位置。T－DNA的序列如图 2所示，虚线处略了部分核苷酸序列。已知 SalⅠ酶的识别序
列为 5′—G↓TCGAC—3′。回答下列问题：
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22.答案 (1)Taq DNA聚合酶(或耐高温的 DNA聚合酶) 将游离的脱氧核苷酸连到引物的
3′端 (2)T－DNA两端已知的碱基序列 ①④ (3)5′—CTGTC—3′ (4)A (5)琼脂糖凝
胶电泳
高二年级五月月考生物试题答案
选择题：
BCDBC CDDDA DCDBB BBC
19.答案 (1)碳源 种间竞争 (2)①稀释涂布平板法 琼脂 ②先快速升高后缓慢降低
溶解氧的存在 酒精的增多以及酸的产生不适宜酵母的生长繁殖(营养物质减少及有害
酶
代谢产物的积累) ③ C2H5OH＋O2 CH3COOH＋H2O＋能量
20.答案 (1)肠癌细胞(膜)表面的蛋白质 单克隆抗体可特异性的结合癌细胞，不损伤正常
细胞
(2)灭活病毒诱导法或聚乙二醇(PEG)融合法 既能迅速大量增殖，又能产生抗体
(3)克隆化培养 抗体检测
(4)①维持培养液的 pH 丁酸钠的浓度和培养时间 ②在一定浓度范围内，丁酸钠浓度越
高，单克隆抗体产生越多，超过一定浓度，丁酸钠会抑制抗体的产生
21.答案 (1)血清(或动物血清) (2)MⅡ 促性腺激素， (3)桑葚胚或囊胚 胚胎移植
胚胎分割 (4)设置一系列浓度梯度的 VPA溶液分别处理重构胚，一段时间后观察统计胚
胎的发育情况
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