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高二 5 月生物
注意事项：
1．答卷前，考生务必将自己的姓名、考场号、座位号、准考证号填写在答题卡上。
2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改
动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在
本试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
考试时间为 75 分钟，满分 100 分
一、单项选择题：本题共 13 小题，每小题 2 分，共 26 分。在每小题给出的四个选项中，只
有一项是符合题目要求的。
1．《尚书·说命》中有“若作酒醴，尔惟曲蘖”的记载，其中的“曲”指含有酵母菌等菌种的谷物。下列
关于果酒制作的叙述，正确的是
A．酵母菌的酒精发酵过程中，需要不断通入无菌空气
B．温度一旦低于 18℃，酵母菌的呼吸作用就会停止
C．发酵时，应定时将发酵器皿的瓶盖拧松以排放 CO2
D．暴露于空气中的果酒会变酸，这可能与空气中的乳酸菌有关
2．消毒和灭菌是微生物培养的必要措施。下列关于培养基配制及接种室的叙述，错误的是
A．灭菌和消毒对微生物的杀伤程度是不同的
B．对操作者的衣着和手进行灭菌处理
C．培养基中营养物质浓度过高可能不利于微生物的生长
D．喷洒石炭酸（苯酚）的同时配合紫外线照射可提高对接种室的清毒效果
3．为了调查某河流的水质情况，学习小组利用两种不同方法对该河流水样中的细菌进行分离，结果如图甲、
乙所示。下列叙述错误的是
A．图甲对应平板划线法，连续划线操作将聚集的菌种稀释
B．图乙对应涂布平板法，若想要获得图乙所示结果，一般要对水样进行稀释
C．采用图乙对应方法对细菌进行计数，应选择菌落数为 30~300 的平板进行统计
D．图乙中的一个菌落由一个活菌生长发育而来，统计结果用活菌数表示
4．现有一培养基的配方如下：去皮马铃薯 200g，葡萄糖 20g，琼脂 15g，蒸馏水 1000 mL。下列有关该培
养基的叙述错误的是
A．该培养基属于固体培养基
B．该培养基中提供碳源的物质只有葡萄糖
C．为防止杂菌污染，培养基需先完成灭菌操作后再倒平板
D．若该培养基是用于培养毛霉，则需要将培养基调至酸性
5．植物细胞工程在新品种繁育、细胞工厂化生产等方面都有着广泛应用，并取得了显著的社会效益和经济
效益。如图表示植物细胞工程应用的相关操作，下列叙述正确的是
A．A 途径中发生的可遗传变异有基因突变和基因重组
B．经 B 途径得到的大多数植株的隐性性状容易显现
C．D 途径的理论依据是茎尖新生组织具有抗病毒的能力
D．上述应用得到的植株体细胞中的染色体数均相同
6．动物细胞培养是动物细胞工程的基础，下列关于动物细胞培养的叙述正确的是
A．动物细胞培养的原理是细胞的全能性，可培育成完整动物个体
B．培养基中需添加血清等天然成分，同时通入纯氧气保证细胞呼吸
C．传代培养的细胞若遗传物质发生改变，可能出现无限增殖的细胞
D．培养过程中细胞会出现贴壁生长和接触抑制，癌细胞培养时也存在接触抑制
7．2026 年，科研团队利用体细胞核移植技术成功克隆出黔东南黑香猪，进一步完善了地方珍稀猪种的保护
体系。下列关于该技术的叙述正确的是
A．供体细胞需选择处于有丝分裂后期的细胞，以保证细胞核的完整性
B．去核后的卵母细胞无需培养，可直接与供体细胞融合构建重构胚
C．重构胚需移植到代孕母体的子宫内，才能发育成完整个体
D．核移植形成的克隆动物，其遗传物质全部来自供体细胞的细胞核
8．下列有关干细胞的叙述，错误的是
A．人体内的干细胞有胚胎干细胞、成体干细胞和 iPS 细胞三类
B．造血干细胞不具有发育成完整个体的能力
C．干细胞是指动物或人体内具有分裂和分化能力的细胞
D．干细胞在再生医学、药物安全性检测等领域发挥重要作用
9．如图为 DNA 分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是
A．DNA 连接酶、限制酶、解旋酶 B．解旋酶、限制酶、DNA 连接酶
C．解旋酶、限制酶、RNA 连接酶 D．限制酶、DNA 连接酶、解旋酶
10．如图表示某种质粒的结构示意图，图中注明了两种限制酶的切割位点及质粒的部分特定结构，下列相
关叙述错误的是
A．质粒可从原核细胞或真核细胞中分离，其上含有控制生物性状的基因
B．图中质粒 DNA 分子上的限制酶切割位点可供外源 DNA 片段插入其中
C．质粒结构简单，由 DNA 和蛋白质构成，是可自我复制的小型细胞器
D．图中的抗生素抗性基因属于标记基因，可用于重组 DNA 分子的筛选
11．2025 年 3 月，窦科峰院士团队在《自然》发文，报告了世界首例转基因技术猪肝到人体（脑死亡）肝
移植的成功案例。下列关于转基因克隆猪肝的叙述，错误的是
A．选用猪做克隆器官供体是因为其内脏构造、大小与血管分布和人的类似
B．该操作的核心步骤是基因表达载体的构建，需用到解旋酶、限制酶、DNA 连接酶
C．对该提供肝源的猪进行基因工程技术改造时，需要将目的基因导入受精卵
D．该技术成功的关键可能是敲除了猪基因中某些会引发免疫排斥反应的关键基因
12．下列关于生物技术与工程的叙述错误的是
A．蛋白质工程中，一般先设计核苷酸序列，再设计氨基酸序列
B．蛋白质工程中，可利用定点诱变技术改造基因，来改变表达的蛋白质结构
C．胚胎工程中，胚胎移植的受体需要进行同期发情处理
D．胚胎工程中，可利用胚胎分割技术得到同卵双生或同卵多生后代
13．当代生物技术迅速发展，安全性问题引发社会的广泛关注，下列叙述正确的有
①转基因栽培作物可能通过花粉发生基因漂移
②转基因食品存在引发过敏的风险
③治疗性克隆都不需要严格监管
④治疗性克隆的原理是细胞的全能性
⑤我国禁止进行任何生殖性克隆人实验
⑥治疗性克隆不会产生道德、伦理问题
⑦生物武器包括致病菌类、病毒类、生化毒剂等
⑧生物武器具有传染性强、危害范围广等特点，各国可根据需要研发储备
A．7 项 B．6 项 C．5 项 D．4 项
二、多项选择题：本题共 5 小题，每小题 3 分，共 15 分。在每小题给出的四个选项中，有两
个或两个以上选项符合题目要求，全部选对的得 3 分，选对但不全的得 1 分，有选错的得 0
分。
14．以大麦为原料酿造啤酒的流程如图所示。下列相关叙述正确的是
A．焙烤的主要目的是终止淀粉酶的分解作用
B．图中接种的菌种主要是酵母菌
C．主发酵阶段应该在发酵液中的糖分完全分解之后终止
D．包装前进行消毒可以杀死大多数微生物，从而保证啤酒的品质
15．豆科牧草沙打旺具有耐旱、耐贫瘠、抗风沙的特点，紫花苜蓿固氮能力较强。科研人员欲利用体细胞
杂交技术获得兼具两者优点的杂种植株，实验流程如图，下列有关说法正确
A．荧光染料的颜色可以作为初步筛选融合原生质体的依据
B．杂种细胞再生出细胞壁标志着植物体细胞融合完成
C．过程Ⅳ、V 需照光培养，诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用
D．该技术打破了沙打旺与紫花苜蓿之间的生殖隔离，实现了远缘杂交育种
16．2023 年 2 月 7 日，美国马里兰医学院进行了全球首例猪心脏移植进入人体的手术，如图为猪心脏移植
过程示意图，下列有关叙述正确的是
A．D 猪出生后不会完全呈现 A 猪的遗传性状
B．从免疫角度看移植到人体的猪心属于抗原
C．植入的基因是位于 DNA 上与遗传有关的片段
D．向 A 猪的体细胞中植入人类基因，采用了克隆技术
17．嵌合体动物是指由两种或两种以上具有不同遗传特性的细胞组成的聚合胚发育而成的个体，如图表示
采用注射法获得小鼠胚胎嵌合体（即黑白花仔鼠）的过程。下列叙述正确的是
A．卵裂期的细胞数目不断增加，但胚胎总体积并不随之增加
B．图中②不具有发育的全能性，将来发育成胎膜和胎盘的一部分
C．丁的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
D．黑白花仔鼠的任意一个细胞中同时含有黑鼠和白鼠的基因
18．黑麦草含有丰富的蛋白质和粗纤维，被誉为“冬季青饲料之王”。但其细胞壁中含有的木质素会降低
其作为饲料的品质。M 蛋白是催化木质素合成的关键酶，某研究团队通过将基因 M 反向插入载体，构建了
反义 M 基因载体，获得了低木质素含量的转基因黑麦草，实验部分流程如图所示。下列叙述正确的是
A．图中的质粒还应该有复制原点、抗生素基因等结构
B．扩增基因 M 所用的引物 1 的 5'端应添加限制酶 Hind Ⅲ的识别序列
C．反义 M 基因转录产生的 RNA 与内源 M 基因的 mRNA 互补结合，阻断其翻译过程
D．利用 PCR 技术，以引物 1 和引物 2 进行扩增，可检测基因 M 是否反向插入黑麦草染色体 DNA 中
三、非选择题：共 5 小题，共 59 分。
19．（12 分）长期秸秆还田的农田土壤中，富集了可分泌纤维素酶的微生物类群，其中部分菌株可产生次
生代谢产物抑制小麦根腐病病原菌的繁殖。科研人员拟从该类农田土壤中分离筛选兼具高效纤维素降解能
力和病原菌拮抗活性的功能菌株，相关操作流程如图所示。回答下列问题：
（1）微生物培养基常用的灭菌方法为__________，为避免杂菌污染，接种相关的无菌操作均需在_________
附近进行。
（2）步骤②为富集培养，该过程配制的培养基需以_________为唯一碳源。从功能上说，该培养基属于
_________培养基，富集培养的目的是_________。
（3）梯度稀释后进行涂布培养时，为使实验结果更准确，每个梯度至少需要涂布_________个平板。步骤
③稀释涂布平板后，为鉴定单菌落的纤维素分解能力，可向培养基中加入_________染料，根据菌落周围
_________的大小，可初步判断菌株降解纤维素的能力强弱。
（4）步骤⑤为菌株的拮抗活性检测，需将牛津杯竖直立在已经凝固的不含营养物质的琼脂凝胶平板上，再
向牛津杯周围倒入混有_________的培养基，待培养基凝固后将牛津杯取出，再将待检菌株的无菌发酵液滴
加至 A、B、C、D 四个牛津杯制造的小孔中，适宜条件培养后，可通过观察_________的有无及大小，判断
菌株的抑菌活性强弱。
20．（12 分）马铃薯是重要的经济作物，植物细胞工程在马铃薯的脱毒及育种等方面有着重要应用。请回
答下列问题：
（1）培育脱毒马铃薯时，外植体宜选用_________（填“茎尖”或“叶片”），理由是
____________________________________。
（2）植物组织培养常用到愈伤组织培养基、生芽培养基和生根培养基。在愈伤组织培养基上，外植体经
_________形成愈伤组织，愈伤组织是一团_________。在再分化阶段，生长素和细胞分裂素参与了细胞分
化方向的调节，与生根培养基相比，一般情况下生芽培养基中这两种激素的比例特点是_________。
（3）马铃薯栽培种的抗病性和抗逆性较差，野生马铃薯种的抗病性和抗逆性较好，但二者存在杂交不亲合
性。利用野生马铃薯种通过细胞工程改进马铃薯栽培种品质的思路是_________________________________。
（4）避免微生物污染、优化培养条件可提高植物组织培养的成功率。在植物组织培养时，通过_________
（至少答出 2 点）等措施，减少污染；在培养室中培养时，注意优化培养环境，控制_________（至少答出
3 点）等培养条件。
21．（11 分）猪流行性腹泻是危害我国生猪养殖的高致病性肠道传染病，其致病原为猪流行性腹泻病毒
（PEDV）。科研人员拟制备针对 PEDV 的单克隆抗体，用于该病的现场快速检测与紧急被动免疫，相关制
备流程如图所示。回答下列问题：
（1）步骤①中，需向健康小鼠体内反复注射____________，目的是刺激小鼠发生体液免疫，获得能分泌抗
PEDV 特异性抗体的_________________细胞；步骤②所用的骨髓瘤细胞，需具备__________的核心特性，
以满足杂交瘤细胞体外大规模培养的需求。
（2）细胞融合过程中，常用的化学融合剂是____________；融合操作后经步骤④的选择培养基培养，仅
____________细胞可以存活；筛选得到的杂交瘤细胞具备的独特优势是____________。
（3）步骤⑤通过有限稀释法实现单个细胞的克隆化培养，再经过____________，经过多次筛选最终获得能
稳定分泌所需抗体的单克隆细胞株。
（4）与传统从免疫动物血清中提取的多克隆抗体相比，该方法制备的单克隆抗体能精准识别 PEDV 抗原的
细微差异，与____________结合，适配高特异性的病毒检测场景。
22．（12 分）干扰素具有抑制细胞增殖、调节免疫以及抗病毒等作用，但是干扰素在体外保存困难，若将
其分子中的一个半胱氨酸变成丝氨酸，则可在-70℃条件下保存半年。科学家通过重叠延伸 PCR 技术实现了
干扰素基因的定点突变，部分操作如图所示。请回答下列问题：
（1）PCR 过程中添加引物的作用是___________________________。PCR 扩增过程中，温度下降到 50℃左
右的目的是___________________________。
（2）4 次 PCR 对引物的使用不完全相同，PCR1 选择引物 A 和 B,PCR2 选择引物 C 和 D，PCR3_________
（填“需要”或“不需要”）引物，PCR4 选择引物_________。
（3）PCR3 过程中，选择杂交物_________（填“1”或“2”）作模板，理由是___________________________。
（4）与Ⅹ射线诱变相比，写出该突变技术的一条优点_________。
（5）将改造后的干扰素基因与乳腺中特异表达基因的启动子等调控元件重组在一起，导入牛的_________
中，获得转基因小牛，在其进入泌乳期即可获得改造后的干扰素。
23．（12 分）水蛭素是水蛭唾液腺分泌的一种蛋白质，具有良好的抗凝血作用。已知天然的水蛭素抗凝血
活性较低，产量和来源有限。研究发现，若将其第 47 位天冬酰胺替换成赖氨酸，可以提高其抗凝血活性。
某科研团队拟通过不同的生物技术获得活性高、产量大的重组水蛭素。回答下列问题：
（1）图 1 所示运用_________工程得到凝血活性更高的水蛭素，该技术的直接操作对象是_________，图中
的物质 a 是_________。
（2）基因工程中常利用 PCR 获取和扩增目的基因。PCR 扩增时，反应体系中需要加入模板、4 种脱氧核苷
酸、_________、_________及缓冲液等。
（3）利用基因工程生产水蛭素时，依据图 2 信息构建基因表达载体，为使水蛭素基因与质粒高效连接，应
选用的限制酶是_________。若采用大肠杆菌作为受体细胞，需要在培养基中加入_________以筛选转化成
功的工程菌，并选择颜色为_________的大肠杆菌菌落进一步培养。
注：neor 为新霉素抗性基因；malcZ 的表达产物会使菌落呈蓝色，否则菌落呈白色。
（4）工业生产中，还可利用制备乳腺生物反应器来生产高抗凝血活性的水蛭素，某研究小组大胆推测，用
类似方法制备膀胱生物反应器比乳腺生物反应器更有优势，因为它可以不受转基因动物的__________（答 1
点）的限制。高二 5 月生物
参考答案及评分意见
1．C 2．B 3．D 4．B 5．B 6．C 7．C 8．A 9．B 10．C
11．B 12．A 13．D 14．BD 15．ABD 16．ABC 17．AC 18．BC
19．（12 分，除标注外，每空 1 分）
（1）高压蒸汽灭菌法 酒精灯火焰
（2）纤维素 选择 增大目的菌的浓度（或数量）
（3）3 刚果红 透明圈（或水解圈）
（4）小麦根腐病病原菌菌液（2 分） 抑菌圈（2 分）
20．（12 分，除标注外，每空 1 分）
（1）茎尖 茎尖细胞中病毒极少，甚至无病毒
（2）脱分化 未分化的不定形薄壁组织 生长素/细胞分裂素的比例<1（或细胞分裂素/生长素的比例>1）
（3）将野生马铃薯种细胞与马铃薯栽培种细胞融合，经植物组织培养技术培养成植株（2 分）
（4）外植体消毒处理、培养基及器械灭菌处理、实验人员无菌操作（答出 2 点，2 分） 温度、光照、湿
度、气体环境（O2、CO2）等（答出 3 点，3 分）
21．（11 分，除标注外，每空 1 分）
（1）PEDV 抗原（或灭活的猪流行性腹泻病毒） B 淋巴（或浆） 能在体外培养条件下无限增殖（2 分）
（2）聚乙二醇（或 PEG） 杂交瘤 既能迅速大量增殖（1 分），又能产生所需的特异性抗体（1 分）
（3）抗体检测
（4）特定抗原（2 分）
22．（12 分，除标注外，每空 1 分）
（1）使 DNA 聚合酶能够从引物的 3'端开始连接脱氧核苷酸 使两种引物通过碱基互补配对与两条单链
DNA 结合（或使引物与单链的互补序列结合）
（2）不需要（2 分） A 和 D（2 分）
（3）1（2 分） 子链的延伸方向只能从 5'→3'，以杂交物 2 作模板时子链不能延伸（2 分）
（4）可以诱导定向变异，目的性强，突变概率高等（答出一点即可）
（5）受精卵
23．（12 分，除标注外，每空 1 分）
（1）蛋白质 基因（或 DNA） 多肽链（或肽链）
（2）引物 TaqDNA 聚合酶（或耐高温的 DNA 聚合酶、DNA 聚合酶）（两空可互换）
（3）Xma Ⅰ和 Bgl Ⅱ（2 分） 新霉素 白色（2 分）
（4）性别（或生理状态、年龄等）（2 分）

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