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江苏无锡市江阴市六校联考2025-2026学年第二学期期中联考试卷高二生物
一、单选题
1．灭菌与消毒的差异主要体现在（　　）
A．杀死杂菌程度 B．是否进行加热
C．处理时间长短 D．处理对象类型
2．与传统发酵技术相比，发酵工程的产品种类更加丰富，产量和质量明显提高。下列有关发酵工程表述正确的是（ ）
A．该工程的中心环节是菌种的选育
B．绝大多数酶制剂是由该技术生产
C．可从微生物细胞中提取单细胞蛋白
D．条件变化不影响微生物的代谢途径
3．科学家建立蛋白质数据集，基于该数据集训练的AI模型，能预测并设计蛋白质的功能。下列叙述错误的是（　　）
A．对蛋白质分子的设计和改造是通过蛋白质工程来实现的
B．蛋白质工程直接改造蛋白质的结构来满足人类的需求
C．用AI预测新型蛋白质的基因结构应依据中心法则原理
D．根据AI设计的蛋白质推导出的对应基因序列不是唯一的
4．为探究校内植物园土壤中的细菌种类，某兴趣小组采集园内土壤样本并开展相关实验。下列有关叙述错误的是（　　）
A．采样时应随机采集多个不同地点的土壤样本
B．培养基的配制全程都要在酒精灯火焰旁进行
C．一定范围内土壤溶液稀释倍数越高，越容易得到单菌落
D．可通过菌落特征、细菌形态学、生物化学等方法鉴定细菌种类
5．某同学利用无花果干制作果醋，图示为简易操作流程。下列相关叙述正确的是（ ）
A．无花果干为发酵所需的酵母菌和乳酸菌提供碳源、氮源
B．在过程①中添加适量的果胶酶，有利于提高果汁的产量
C．为排出过程②产生的CO2,需每隔一段时间将瓶盖打开一次
D．过程③的发酵温度需控制在18~30℃，发酵液pH逐渐下降
6．图是探究果酒果醋发酵的装置示意图。下列叙述错误的是（　　）
A．用于探究果醋发酵时，打开阀a，转动搅拌器有利于提高产量
B．打开阀b，经管口3可取样检测酒精和二氧化碳的产生情况
C．用于探究果酒发酵时，发酵前要对整个装置进行气密性检查
D．通过控制阀a，可以研究呼吸作用类型对发酵的影响
7．为研究细胞的生长和增殖特性，科研团队对多种动物细胞进行体外培养。下列叙述正确的是（　　）
A．进行贴壁培养时，所用的培养基中需添加一定量的凝固剂
B．需在含和的混合气体培养箱中进行培养
C．定期要更换培养液可防止细胞代谢产物积累对细胞造成危害
D．悬浮培养的细胞传代前需要用胰蛋白酶处理，再用离心法收集
8．东北马鹿（♀）和天山马鹿（♂）杂交后代的鹿茸产量明显提高。应用胚胎工程技术可提高杂交后代繁殖率。下列叙述正确的是（　　）
A．采集的精液无需稀释即可用血细胞计数板检测精子密度
B．体外受精前需要对采集到的卵细胞进行获能培养处理
C．胚胎移植前需要使用孕激素对供体进行超数排卵处理
D．胚胎移植中的供体和受体一般无需进行免疫检查
9．为培育具有市场竞争力的无子柑橘，研究者设计如下流程。下列相关叙述不正确的是（ ）

A．过程①需使用几丁质酶处理
B．实现过程②可采用高Ca2+—高pH融合法
C．过程③需应用植物组织培养技术
D．三倍体植株可结出无籽柑橘
10．苦参产生的次生代谢物苦参碱具有抗肿瘤、调节免疫等作用。科研人员利用苦参下胚轴培育幼苗和提取苦参碱的过程如图所示。下列叙述错误的是（　　）
A．苦参碱不是苦参生长和生存过程所必需的物质
B．过程①和过程②需要适宜的温度和一定的营养条件
C．过程③通过更换培养基一般先诱导生芽再诱导生根
D．工厂化细胞培养提取苦参碱体现了植物细胞的全能性
11．犏牛是以牦牛与黄牛杂交产生的后代，但雄性犏牛因染色体异常而无法产生精子。我国科学家利用体细胞核移植技术成功获得克隆犏牛，如下图。下列叙述正确的是（　　）
A．利用胃蛋白酶或胶原蛋白酶处理耳组织制备细胞悬液
B．卵母细胞需在体外培养至减数分裂Ⅰ期时再进行去核操作
C．卵母细胞质中可能含有能诱导体细胞核表达全能性的物质
D．核移植技术可修复雄性犏牛染色体异常使其恢复育性
12．下图表示某种酶切割目的基因的过程，相关叙述不正确的是（ ）

A．基因工程可以定向改变生物的性状
B．图示限制酶切割后形成的末端是黏性末端
C．该限制酶能识别的碱基序列是GAATTC，切点在G和A之间
D．基因工程中，直接利用天然质粒上的标记基因进行检测目的基因是否表达
13．如果要用PCR扩增以下DNA模板中的基因1，需要的一对引物序列是（　　）
5′CTTCGAAATTC﹣基因1﹣TCTCCCGATCGG﹣基因2﹣AAGATCAAATCCTTTGCTCT3′
A．引物Ⅰ是5′﹣CTTCGAAATTC﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣CCGATCGGGAGA﹣3′
B．引物Ⅰ是5′﹣CTTCGAAATTC﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣ TCTCCCGATCGG﹣3′
C．引物Ⅰ是5′﹣GAAGCTTTAAG﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣AGAGGGCTAGCC﹣3′
D．引物Ⅰ是5′﹣GAAGCTTTAAG﹣3′，引物Ⅱ是5′﹣CCGATCGGGAGA﹣3′
14．下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的分析，正确的是（　　）
A．可选择兔的成熟的红细胞作为提取细胞中DNA的材料
B．研磨液在4℃下静置，主要目的是降低DNA分子的溶解度
C．在上清液中加入预冷酒精后轻缓搅拌，可避免DNA分子的断裂
D．将DNA丝状物加入二苯胺试剂，沸水浴加热后出现蓝色
15．关于采用琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物的实验，下列相关叙述错误的是（　　）
A．电泳时，DNA分子的迁移速率与琼脂糖凝胶浓度有关
B．在同一电场作用下，DNA分子越长，迁移速率越快
C．待指示剂前沿迁移接近凝胶边缘时，停止电泳
D．琼脂糖凝胶中的DNA分子染色后，可在紫外灯下被检测出来
二、多选题
16．如图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列相关叙述错误的是（　　）
A．对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌处理
B．步骤①倒平板时，可完全打开培养皿盖方便操作
C．步骤③应多个方向划线，使接种物逐渐稀释
D．步骤③划线结束后应在培养皿盖上做好标注
17．研究小组利用某不孕女性的皮肤组织通过图示实验流程获得子宫内膜基质细胞，以期用于其不孕的治疗。下列分析正确的是（　　）
A．合成培养基加入天然血清后经湿热灭菌可用于成纤维细胞的培养
B．过程①形成人iPS细胞的过程类似于植物组培中再分化的过程
C．过程②形成体腔上皮细胞的过程的实质是发生基因的选择性表达
D．该方法获得子宫内膜基质细胞在伦理和免疫排斥问题上均取得突破
18．限制酶a和b的识别序列与切割位点如图所示。下列叙述错误的是（　　）
A．a酶、b酶均能切割氢键和磷酸二酯键
B．能被a酶识别并切割的序列也能被b酶切割
C．相同DNA分子被a酶切割的概率一般高于b酶
D．基因工程中用两种酶切割质粒就能防止其自身环化
19．研究人员利用PCR扩增转基因植物基因组中的某段外源基因片段，并通过琼脂糖凝胶电泳对产物进行鉴定。下列相关叙述正确的是（　　）
A．PCR反应体系中需加入模板DNA、引物、耐高温的DNA聚合酶和4种脱氧核苷酸等
B．PCR复性温度与引物的GC含量有关，一般引物中GC含量越高则复性温度越低
C．若将已知长度的DNA标准品加入同一凝胶中，可用于估算其他扩增产物的分子大小
D．3号泳道中的亮度较低，说明样本2植物不含有该基因或该植株为相关基因的杂合子
三、解答题
20．甜米酒是我国的传统酒种。某酿酒厂以无核黄皮果（富含维生素、有机酸及特殊的香味）为辅料研制出黄皮甜米酒，该酒具有消食、润肺和清热解毒等功效。制作黄皮甜米酒的工艺流程如下图所示。回答下列问题：
(1)糯米浸泡后蒸煮，其作用有________，推测图中甜酒曲的主要作用是________。
(2)与传统发酵相比，现代发酵工程具有很多的优势，如选用黄酒高活性干酵母，更快地将糖分转化为________；通过传感器实时监测________（至少写两点）等发酵条件。
(3)我国的酿酒技术历史悠久，古人在实际生产中积累了很多经验。《齐民要术》记载：“世人云：米过酒甜，此乃不解法候。酒冷沸止，米有不消者，便是曲势尽。”下列有关叙述正确的有________。
A．“米过酒甜”是因为米加过量了，发酵停止时糖类未被完全消耗
B．“此乃不解法候”说明发酵过程要懂得控制温度、时间、菌种量等条件
C．“酒冷沸止”说明微生物的代谢产热和产生O2气泡逐渐停止
D．“曲势尽”可能是米酒中pH升高或酒精含量升高导致菌种失活
(4)对酒曲微生物进行分离纯化时，配制培养基的成分为蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水，其中蛋白胨能为细菌提供的主要营养有________。
(5)在制作黄皮甜米酒的过程中，为确定黄酒高活性干酵母（YWBY）的添加量及发酵时间，研究人员进行了相关实验，实验结果如下图所示。根据实验结果制作黄皮甜米酒时，YWBY的最佳接种量及主发酵时间分别是________。YWBY接种量为0.12%时，酒精含量最低的原因可能是________。
四、实验题
21．人误食被金黄色葡萄球菌污染的食物后，可能出现腹泻、呕吐等症状。研究者尝试用蜻蜓肠道共生菌的代谢产物开发新型抑菌药物，部分实验步骤如下图1所示，图中数字编号代表实验步骤。
图1：
(1)步骤⑤培养肠道共生菌的培养基配方如下表所示：
药品 马铃薯 葡萄糖 X 水
用量 200.0g 20.0g 20.0g 1000mL
表格中的药品X最可能是________，其作用是________。
(2)步骤⑤中，稀释涂布了5个培养基，每个培养基上涂布0.1mL稀释液，5个培养基上生长的菌落数分别为25、65、75、85、95，则在步骤③的蜻蜓肠道提取液中，肠道共生菌的密度为________个/mL（假设所有共生菌都能在培养基上生长），实际值往往比这种方法统计的结果________。
(3)为了保证实验的顺利进行，下列操作错误的有________。
①研磨蜻蜓肠道时加入无菌水，且在无菌操作台进行
②解剖蜻蜓用的镊子等工具，事先要先进行灭菌
③进行稀释涂布操作时，将需要用到的接种环先进行灼烧灭菌
④实验结束后，将实验产生的废弃物可直接丢弃
(4)研究者分离出蜻蜓肠道菌株A，提取其代谢产物并用丙酮定容制成“药液A”。欲比较“药液A”与庆大霉素液（用无菌水配制的抗生素溶液）对金黄色葡萄球菌的抑菌效果，请根据图2在表格中填写简要的实验步骤，完成实验方案（所有实验均在无菌环境操作）。
步骤与目的 操作与要点
接种微生物 在中性或弱碱性培养基上均匀涂布①________
加入药物 用无菌镊子将分别浸过A、B、C液和无菌水的圆纸片沥干后均匀置于上述培养基表面。A、B、C液分别为“药液A”、②________、③________
培养微生物 将培养基在37℃下培养24小时
观测并分析结果 测量④________，记录、比较、得出结论
分析图2实验结果，浸过A液的圆纸片周围抑菌圈直径________浸过B液的圆纸片，由此得出实验结论：________。
22．HER2是一种定位于细胞膜上的表皮生长因子受体，其过度表达与恶性肿瘤的发生及发展密切相关。为开发用于治疗HER2过度表达的恶性肿瘤单克隆抗体偶联药物（抗HER2-ADC），科研人员开展了相关研究，实验流程如图1所示。请回答下列问题：
(1)制备抗HER2-ADC的过程中，需要用________对小鼠多次进行免疫，并从该小鼠的________中得到相应的B淋巴细胞。
(2)过程①的原理是________，跟植物体细胞杂交相比，动物细胞特有的诱导融合方法是________。
(3)过程②所用的HAT培养基从用途上看属于________培养基，能在其上生长的细胞特点为________。
(4)经过程②筛选的细胞还需进行过程③________和________，经多次筛选，就可以得到足够数量的、能分泌所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。
(5)过程④合成的抗HER2-ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，这依赖于________原理。
(6)为研究抗HER2-ADC对HER2过度表达的胃癌细胞代谢的影响，科研人员选取人乳腺癌细胞BT-474、裸鼠（先天性胸腺缺陷的突变小鼠）、多种化疗药物和试剂（磷酸缓冲液配制的抗HER2-ADC、曲妥珠单抗、曲妥珠单抗-美坦新联药物、磷酸缓冲液等）进行了相关实验。结果如图2所示：
①将乳腺癌细胞BT-474移植到裸鼠体内，待肿瘤体积达到200mm3时将裸鼠分为4组并分别给药处理，空白对照组的给药处理是注射________，一段时间后检测裸鼠体内肿瘤的体积，结果如图2所示。
②实验结果表明________。
五、解答题
23．某些细菌会释放酰基高丝氨酸内酯（AHL），AHL可自由进出细菌，其浓度达到一定阈值后会作用于细菌使其发生代谢变化，如图1.科学家试图利用细菌这一系统开发一种工程菌，来实现特定药物的合成和释放。回答下列问题：
(1)质粒的本质是________，基因工程中用于基因进入受体细胞的________。研究人员将构建的质粒①和质粒②导入大肠杆菌前，通常需先用________处理大肠杆菌细胞，使细胞处于________生理状态。
(2)据图1分析，当工程菌密度升高时，________积累达到阈值，才能与________蛋白结合形成复合物，该复合物与启动子结合，启动下游D基因的________（选填“转录”、“翻译”）。
(3)为实现工程菌的自动裂解，研究人员利用基因E构建了质粒③，如图2.基因E编码的蛋白E可诱导大肠杆菌裂解。在相同培养条件下，测定一段时间内含质粒①、③的工程菌和野生型大肠杆菌的种群密度变化如图3.在培养后期工程菌种群密度相对较低，原因是________。
(4)已知细菌裂解才能实现其所合成药物的释放。综合上述研究，研究人员将质粒________导入大肠杆菌可构建特定药物合成和释放的工程菌。结合图3曲线可知，该工程菌合成和释放药物具有________性。
24．组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）是一种广泛用于溶解血栓的蛋白质类药物，但t-PA在血液中的半衰期很短（3~5分钟）。研究团队借助PCR技术改造t-PA基因，并通过图1所示流程制备乳腺生物反应器，最终获得突变型t-PA．回答下列问题：
(1)研究人员首先根据突变型t-PA的________设计其空间结构，进而推测其________，再根据“中心法则”逆推t-PA基因的核苷酸序列。
(2)上述的①过程使用的“t-PA基因L”，实际上是由图2所示两个元件构建的融合基因（图3），其中BLGSP序列决定的乳球蛋白（BLG）信号肽由16个已知的氨基酸序列组成，而将正常t-PA的第117位天冬酰胺替换为谷氨酰胺即可得到突变型t-PA。
为确定两元件是否正确连接，需进行PCR检测，若仅用一对引物，则应选择图3中的引物________。最后，将融合基因与表达载体（图4）经________酶处理构建形成重组载体。
(3)重组载体经筛选后常用________法导入山羊受精卵，经________等技术获得转基因山羊。在泌乳期收集转基因山羊的乳汁，分离提纯后可以获得突变型t-PA．
(4)t-PA突变基因只在山羊乳腺上皮细胞中表达，而不在其他组织细胞内表达，这种现象称为基因的________表达，结合图4推测其机制是________。
(5)研究团队计划继续培养一种转基因羊，其膀胱上皮细胞可以合成突变型t-PA并分泌到尿液中，与上述乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器具有哪些优点？________（答2点）
参考答案
1．A
2．B
3．B
4．B
5．B
6．B
7．C
8．D
9．A
10．D
11．C
12．D
13．A
14．C
15．B
16．ABD
17．CD
18．ABD
19．AC
20．(1) 有利于糯米中淀粉分解（糖化）；减少杂菌污染 产生淀粉酶，将糯米中淀粉分解
(2) 酒精 pH、溶氧、温度（至少写到两点）
(3)AB
(4)碳源、氮源、维生素等
(5) 0.10%、8天 酵母菌大量繁殖消耗了过多糖类（写到一点，合理即可）
21．(1) 琼脂 作为凝固剂
(2) 8×105 小
(3)③④
(4) 金黄色葡萄球菌菌液 庆大霉素液 丙酮 圆纸片周围抑菌圈的直径 大于 药液A对金黄色葡萄球菌的抑菌效果优于庆大霉素液
22．(1) HER2 脾/脾脏
(2) 细胞膜具有流动性 灭活的病毒
(3) 选择 既能产生抗体，又能大量增殖
(4) 克隆化培养 抗体检测
(5)抗原-抗体特异性结合
(6) 等量的磷酸缓冲液 抗HER2-ADC对BT-474细胞的凋亡具有促进作用，且效果较其他药物更好
23．(1) 环状DNA 载体 Ca2+ 能吸收周围环境中DNA分子的
(2) AHL LuxR 转录
(3)AHL浓度较高，基因E表达，部分细菌裂解
(4) ①②③ 周期
24．(1) 预期功能 氨基酸序列
(2) F1、R2 KpnⅠ、XhoⅠ和DNA连接
(3) 显微注射 早期胚胎培养、胚胎移植
(4) 选择性 BLG启动子只有在乳腺细胞中发挥作用
(5)不受性别限制；不受年龄限制

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