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四川宜宾市叙州区第二中学校2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题
一、单选题
1．人类利用微生物发酵制作果酒、果醋的历史源远流长。下图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述错误的是（ ）
A．制作果酒和果醋的过程中反应液中pH均会下降
B．在无氧条件下，酵母菌可以产生酒精，但醋酸菌不能产生乙酸
C．过程①和②都发生在细胞质基质，过程③和④都发生在线粒体中
D．制作果酒、果醋所涉及的两种主要微生物的正常繁殖都离不开氧气
2．酸笋是螺蛳粉的“灵魂”。腌制酸笋最好在春季。当竹子出笋后，长到一定高度时便可砍下，剥去笋壳，切成块或是切成笋丝、笋片，放于陶罐中，清水过面，撒上适量食盐，置于阴凉处一个月左右，酸味即出，便可随食随取。下列相关叙述错误的是（　　）
A．制作酸笋所需主要菌种的代谢类型是异养厌氧型
B．“清水过面”可以创造无氧环境，减少杂菌污染
C．在制作酸笋时若加入上一批次的发酵液可加快发酵进程
D．为保证发酵成功，需将鲜笋和陶罐用沸水泡烫
3．发酵工程中，培养基的配制与无菌操作是菌种培养的基础，下列相关叙述正确的是（ ）
A．倒好的平板要立即使用，以免表面干燥
B．制作培养基时，湿热灭菌后还需要调pH
C．灼烧灭菌的对象是金属器具，不可以是玻璃器具
D．对操作者的双手和操作台采用的消毒方法可以不同
4．发酵工程在食品工业、医药工业和农牧业等许多领域得到了广泛的应用，形成了规模庞大的发酵工业。下列叙述正确的是（ ）
A．黑曲霉可进行发酵生产谷氨酸，谷氨酸经过一系列处理能制成味精
B．利用发酵工程生产的微生物农药，可利用微生物或其代谢物防治病虫害
C．通过发酵工程从微生物细胞中提取出的单细胞蛋白，可制成微生物饲料
D．啤酒制作中，主发酵主要是酵母菌繁殖，后发酵侧重代谢产物的生成
5．下表是金黄色葡萄球菌对两种抗生素耐药性实验结果。相关叙述正确的是（ ）
抗生素种类 5mg/m 抑菌圈大小（cm）
对照组 第一代 第二代 第三代 第四代 第五代 第六代
四环素 4.00 3.53 3.07 3.03 2.97 3.06
恩诺沙星 2.70 2.33 1.63 1.93 1.77 1.90
A．实验中对照组①应用不含抗生素的滤纸片进行处理
B．四环素对金黄色葡萄球菌的抑菌效果要比恩诺沙星弱
C．实验中可使用平板划线法对金黄色葡萄球菌进行接种
D．据结果推测持续使用同种抗生素抑菌圈的大小保持不变
6．随着合成生物学的发展，利用植物细胞悬浮培养体系生产高价值次生代谢产物（如青蒿素、紫杉醇等）已成为一种新型的“细胞工厂”模式。该技术不依赖传统种植，在生物反应器中即可实现工业化生产，为缓解某些药物原料短缺问题提供了新路径。下列叙述正确的是（ ）
A．该技术利用了植物细胞的全能性，需经历脱分化和再分化过程才能获得产物
B．培养过程中生长素与细胞分裂素的比例，是决定细胞分裂与分化的关键因素
C．与传统农田种植相比，该模式完全不受环境因素影响，实现产物的稳定高产
D．该技术使药物生产可以完全不依赖农业生产，是保障供应安全的根本途径
7．将鼠胚胎干细胞（ES 细胞）种植于饲养层细胞上，添加干细胞因子、血小板生 成素及动物细胞培养液，培养六天后，检测发现 86%的细胞形态与结构特征呈现出造血干细胞样细胞（CD34细胞）的特点。下列有关叙述错误的是（ ）
A．从早期胚胎中分离出来的细胞就是 ES 细胞
B．有些分化诱导因子可促进 ES 细胞分化形成 CD34细胞
C．ES 细胞形成 CD34细胞的根本原因是基因的选择性表达
D．本实验结果尚不能支持“动物细胞具有全能性”的观点
8．新型冠状病毒可通过表面的棘突蛋白（S蛋白）与人呼吸道黏膜上皮细胞的ACE2受体结合，侵入人体，引起肺炎。制备抗s蛋白的单克隆抗体可阻断病毒的粘附或入侵，相关叙述正确的是（ ）
A．优先选择灭活的新冠病毒免疫小鼠以激活小鼠的免疫细胞
B．用灭活的仙台病毒诱导已激活的B细胞与骨髓瘤细胞融合
C．经过第一次筛选获得能产生抗S蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞
D．经体外培养得到的单克隆抗体可以与ACE2受体结合阻断病毒的入侵
9．北方白犀牛现已野外灭绝，目前世界上仅存两头雌性北方白犀牛，且只有一头雌性具有正常排卵功能。科研团队利用多头北方白犀牛冻存的体细胞和精子，通过以下三条技术路径开展拯救计划。
下列叙述错误的是（ ）
A．路径①中需要对现存雌性北方白犀牛进行同期发情处理
B．路径②在增加后代遗传多样性方面最具潜力
C．路径③依据的原理是动物细胞核具有全能性
D．及早建立基因资源库可更好的保护濒危物种
10．限制酶、DNA连接酶等的发现为DNA分子的切割、连接及基因表达载体的构建创造了条件。下列关于重组DNA技术基本工具的叙述，正确的是（ ）
A．当限制酶在它识别序列的中心轴线处切开时，产生的是黏性末端
B．限制酶在原核细胞内的主要作用是切割自身的DNA
C．基因工程中常用的载体除质粒外，还有大肠杆菌和动植物病毒
D．天然质粒往往需要经过人工改造后才能作为基因工程载体
11．科学家将苏云金杆菌中的Bt抗虫蛋白基因（抗虫基因）导入棉花的愈伤组织细胞并进行组织培养获得棉花植株。经棉铃虫饲喂实验，发现棉花植株并无抗虫性状，科学家提取棉花叶片细胞中的有关成分进行了如下操作。下列有关分析错误的是（ ）
A．提取细胞中的蛋白质，采用抗原—抗体杂交技术进行检测，若检测到细胞中无Bt抗虫蛋白，则说明抗虫基因不能正常表达
B．若经A项检测确定细胞中无Bt抗虫蛋白，可采用PCR等技术检测细胞中的RNA，若测到Bt抗虫蛋白的mRNA，则说明抗虫基因能正常转录和翻译
C．若经B项检测确定细胞中无Bt抗虫蛋白的mRNA，可采用PCR等技术检测细胞中的DNA，若能检测到抗虫基因，则可能是抗虫基因反向插入载体中或抗虫基因不能正常转录
D．若经C项检测确定细胞中无抗虫基因，则可能是将没有目的基因的载体DNA分子导入了受体细胞
12．2025年3月，窦科峰院士团队在《自然》发文，报告了世界首例转基因技术猪肝到人体（脑死亡）肝移植的成功案例。下列关于转基因克隆猪肝的叙述，错误的是（　　）
A．选用猪做克隆器官供体是因为其内脏构造、大小与血管分布和人的类似
B．该操作的核心步骤是基因表达载体的构建，需用到限制酶、DNA连接酶
C．对该提供肝源的猪进行基因工程技术改造时，可直接对其体细胞进行操作
D．该技术成功的关键可能是敲除了猪基因中某些会引发免疫排斥反应的关键基因
13．聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）塑料难以降解，易造成严重的环境污染。科研人员从某种细菌中发现了一种能降解PET的酶（PETase），但其热稳定性和降解效率较低。通过分析PETase的三维结构，将其中第238位的甘氨酸替换为酪氨酸后，获得的新型酶（FAST-PETase）在40～50℃下的降解效率提高了数百倍，其在塑料回收中展现出应用前景。下列叙述错误的是（ ）
A．改造PETase从根本上是对其编码基因进行修饰
B．对PETase分子结构与功能的深入了解是成功改造的关键
C．获得FAST-PETase的基因后，可将其直接导入工程菌用于工业化生产
D．该改造体现了“从预期功能出发→设计蛋白质结构→改造基因”的蛋白质工程思路
14．科学家利用转基因生菜作为生物反应器生产人胰岛素时，依据植物偏好密码子（编码同种氨基酸的多个密码子中，生物优先高频使用的特定密码子）的原理对人胰岛素基因进行改造，提高胰岛素基因在植物细胞中的表达效率。对改造后的胰岛素基因进行一系列操作以构建基因表达载体（部分过程如图所示），再通过农杆菌转化法转入生菜细胞中表达人胰岛素。
下列说法正确的是（ ）
A．改造后的人胰岛素基因表达产物与天然胰岛素的氨基酸序列不完全相同
B．构建质粒3的过程中可使用HindⅢ和XbaⅠ两种酶切割质粒1和质粒2
C．使用含有卡那霉素或潮霉素的培养基筛选导入目的基因的生菜细胞
D．农杆菌T-DNA上添加复制原点才能使目的基因在生菜细胞中复制
15．现代生物技术既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜在的危害，下列关于生物技术的安全性与伦理问题的叙述，错误的是（ ）
A．转入叶绿体中的基因不会随花粉传递给子代，可避免基因污染
B．为了保护消费者知情权，我国对农业转基因生物实行了标识制度
C．生殖性克隆人能丰富人类基因多样性，但需对相关实验进行有效监控和严格审查
D．生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等，其致病能力强、攻击范围广
二、解答题
16．I、豆豉是以黄豆或黑豆为原料，经各种微生物发酵形成的具有特殊色、香、味的发酵食品。某食品研发小组以黄豆为主要原料研制豆豉酱，工艺设计流程如下。
回答下列问题：
(1)毛霉是一种腐生型_____（填“真菌”或“细菌”），可将黄豆种子中的蛋白质分解为_____。
(2)家庭作坊制作豆豉与该研制豆豉相比，品质不稳定的原因是_____（答出一点即可）。
(3)研制豆豉时，黄豆宜放入高压蒸汽灭菌锅中进行灭菌处理，既起到灭菌的作用，又_____（答出一点即可）。
Ⅱ、某研究小组用玻璃发酵罐、充氧泵、回旋式单向阀等组装了一种果酒、果醋两用发酵装置，如下图 1 所示。图2是发酵过程中培养液pH 可能的变化情况。回答下列问题：
(4)图1发酵罐中并不装满发酵液，而是留出约1/3 的空间，是为了_____。
(5)利用图1中装置进行果酒发酵时，软管夹应_____（填“打开”或“关闭”），每隔一段时间打开单向阀排气，由果酒发酵转为果醋发酵时，有些方面需要做出调整，例如，需要_____（填“升高”或“降低”）发酵温度，还需要_____。
(6)图2中，能表示整个发酵过程中pH变化情况的是曲线_____。菌体代谢过程中的产物使发酵液pH改变至菌体耐受极限后，即使营养充足，菌体的生长也会受到抑制，此时可进行的处理是_____（答一点）。
17．淀粉酶在工业生产上应用最早，迄今仍是用途最广、产量最大的酶制剂产品之一、为了提高淀粉酶的生产水平，首先要从土壤中筛选出产淀粉酶的活性菌株。某研究人员对所取土样进行产淀粉酶的细菌的分离操作（A组）和计数操作（B组），过程如图Ⅰ。图Ⅱ是一种接种方法示意图。请回答下列问题：
(1)步骤④所用的培养基在营养成分上的特殊要求是_____。
(2)步骤④、⑤所用培养基的成分，最大的区别是固体培养基中添加了_____。步骤⑤、⑧接种时需设置未接种培养基做对照，目的是_____。
(3)步骤⑦中，将1 mL菌液分别稀释10倍和100倍，每种稀释度经过步骤⑧各在3个平板上接种（每个平板的接种量为0.1 mL），经适当培养后，2组平板上的菌落数分别为59、57、58和2、7、5．据此可得出每升菌液中的活菌数为_____个。
(4)图Ⅱ中接种方法_____（“能”或“不能”）用于菌种计数，其理由是_________。
(5)图Ⅱ中甲、乙、丙为划线的三个区域，为正确完成整个接种过程，接种环要进行4次灭菌，其中灭菌目的相同的是第_____次，其目的是________。
三、实验题
18．甲植物（2n＝18）具有由核基因控制的多种优良性状，远缘植物乙（4n＝32）的细胞质中存在抗除草剂基因，科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗除草剂性状的优良品种丙，途径如图所示。已知X射线处理会使细胞分裂功能丧失但不影响线粒体功能，丙烯酸异辛酯（IOA）处理会使线粒体失活，但不影响细胞分裂。回答下列问题：
(1)利用植物体细胞杂交技术获得新植物体，利用的生物学原理是_________。取植物的顶芽细胞进行培育，有利于获得脱毒苗，原因是____________。
(2)①需要用_________去除细胞壁，该操作_____（“能”或“不能”）在无菌水中进行，理由是______。
(3)经过①—④处理的细胞融合体系中，未融合的细胞不能形成愈伤组织，原因是______。
(4)过程⑤先将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽培养基上，通常应在培养基中加入两类植物激素，此时生长素与细胞分裂素的比值______（填“>1”“<1”或“=1”）。
(5)与其他育种方式相比，植物体细胞杂交的突出优点是_________。
四、解答题
19．双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合。癌症的免疫疗法可通过使用双特异性抗体重新激活抗肿瘤的免疫细胞，进而克服肿瘤的免疫逃逸。PSMA是某些种类癌细胞表面高表达蛋白，CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。科研人员尝试构建双特异性抗体PSMA×CD28的生产流程，如图甲所示；双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理，如图乙所示。
(1)动物细胞培养时，培养基除了添加葡萄糖、氨基酸等明确的营养成分外，往往还需加入一定量的_______，以满足动物细胞培养的营养需要，并将其置于_______的气体环境的培养箱中进行培养。
(2)图甲中②表示用一定的方法促进细胞融合，动物细胞特有的融合方法是_______，③过程通常用HAT培养基，其中含有次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷3种关键成分，哺乳动物正常细胞的DNA合成有D和S两条途径，淋巴细胞中虽有D途径和S途径，但不能无限分裂增殖；骨髓瘤细胞只有D途径，但能不断分裂增殖；氨基蝶呤可阻断D途径。据此分析，HAT培养基上只有_______细胞能分裂增殖，该类细胞能分裂增殖的原因是_______。
(3)为选出能产生专一抗体的细胞，要将从HAT选择培养基上筛选出的细胞稀释到710个细胞·mL-1，将细胞稀释液滴入多孔培养板中，使多孔培养板每孔中最多有_______个细胞，然后筛选出专一抗体检测呈_______（选填“阳性”或“阴性”）的细胞进行克隆化培养，该克隆化培养细胞具有的特点是_______。
(4)结合题干，据图乙分析，双特异性抗体PSMA×CD28协助杀伤癌细胞的机理是_______。
20．利用基因工程技术生产人胰岛素的两种途径，其中途径1利用转基因牛作为乳腺生物反应器，途径2利用转基因大肠杆菌进行发酵生产。
回答下列问题：
(1)在将目的基因导入受体细胞前，通常需要构建基因表达载体（上述途径中的Px重组质粒），其目的是_______，为了构建Px重组质粒，最好选用的限制酶是______。
(2)上述途径1将重组质粒导入受体细胞的常用方法是_______。
(3)某同学设计引物用PCR方法验证重组质粒构建成功（引物1～4结合位置如图所示，→表示引物5'→3'方向）。该同学进行PCR实验时，所用模板与引物见下表。无扩增产物的实验是________；扩增产物只有目的基因的实验是________；扩增产物同时含目的基因和部分质粒序列的实验是________。
实验 ① ② ③ ④ ⑤ ⑥
模板 无 P0 Px 无 P0 Px
引物对 引物1和引物2 引物3和引物4
产物
(4)途径1中为使目的基因能在乳腺细胞中表达，应将该基因与_______的基因的启动子重组在一起；途径2筛选含目的基因大肠杆菌菌株时，若在培养基中加入________（“四环素”或“青霉素”或“四环素和青霉素”），培养基表面无菌落。
(5)利用途径1培育出转基因奶牛后，采用分子杂交技术检测胰岛素基因在转基因奶牛中是否转录出mRNA的大致思路为_______。
参考答案
1．C
2．D
3．D
4．B
5．A
6．B
7．A
8．B
9．A
10．D
11．B
12．C
13．C
14．B
15．C
16．(1) 真菌 氨基酸和小分子肽
(2)菌种差异、杂菌情况不明、发酵过程的控制标准不一等
(3)保留了水分、高温使蛋白质结构变得松散，易被分解
(4)使酵母菌在初期进行有氧呼吸而大量繁殖；同时防止发酵液溢出
(5) 关闭 升高 打开软管夹和充氧泵（保持通氧）
(6) ② 调节培养液pH、及时排出代谢产物等
17．(1)以淀粉作为唯一碳源
(2) 琼脂 检测培养基是否被污染
(3)5.8×106
(4) 不能 图Ⅱ是平板划线法，划线时细胞并没有完全分散开来，许多菌落并不是由单个细胞繁殖而来的
(5) 第二、三次 杀死上次划线残留在接种环上的菌种，保证本次划线菌种全部来自上次划线的末端
18．(1) 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 顶端分生区附近的病毒极少，甚至无病毒
(2) 纤维素酶和果胶酶 不能 原生质体在无菌水中吸水膨胀甚至破裂
(3)甲细胞用IOA处理后线粒体失活，细胞生命活动受限；乙细胞经X射线处理后失去分裂能力
(4)<1
(5)克服远缘杂交不亲和的障碍，打破生殖隔离，实现远缘杂交育种
19．(1) 动物血清 95%的空气和 5%CO2
(2) 灭活病毒诱导融合法 杂交瘤细胞 杂交瘤细胞能利用正常细胞的S途径进行DNA的复制
(3) 一/1 阳性 既能无限增殖，又能产生特异性抗体
(4)双特异性抗体PSMA×CD28既能结合PSMA，又能结合CD28，使CD28在癌细胞与T细胞结合部位聚集， 从而有效激活T细胞杀伤癌细胞
20．(1) 让胰岛素基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代；同时使胰岛素基因能够表达和发挥作用 EcoRⅠ和BamHⅠ
(2)显微注射法
(3) ①②④ ③ ⑥
(4) 乳腺中特异性表达 青霉素
(5)用放射性同位素标记的胰岛素基因片段作探针，与从转基因个体的乳腺细胞中提取的mRNA杂交，观察是否出现杂交带，若出现杂交带，则说明胰岛素基因在转基因奶牛中转录出了mRNA

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