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内蒙古自治区赤峰市红山区赤峰第四中学2025-2026学年高二下学期5月期中生物试题
一、单选题
1．如图是泡菜制作过程中乳酸菌含量随着发酵时间的变化曲线。下列相关叙述错误的是（ ）
A．乳酸菌是一种原核生物，代谢类型是异养厌氧型
B．据图可推测在泡菜发酵中期乳酸含量达到最大
C．发酵初期和发酵后期造成乳酸菌数量较少的原因不同
D．制作泡菜时加入的盐水需要没过全部菜料，以提供无氧环境
2．酿酒技术早在千年前就已存在。如图是某同学制作果酒过程中酵母菌数量与酒精浓度随发酵时间的变化曲线。下列相关叙述错误的是（ ）
A．酵母菌数量在时刻增长最快，之前只进行有氧呼吸
B．发酵瓶等实验器具可用体积分数70%的酒精进行消毒
C．在酒精的发酵过程中需不断的放气，且放气频率加快
D．若增大酵母菌的接种量，该果酒的发酵时间可能会缩短
3．关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的叙述，错误的是（ ）
A．土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶
B．与稀释涂布平板法相比，平板划线法形成单菌落的效果不佳
C．培养基应以尿素为唯一氮源，该细菌与硝化细菌所利用的碳源是相同的
D．若将1mL土样稀释106倍后，取0.1mL该溶液进行重复的涂布实验，测得的菌落数分别18、234、276，则该1mL土样中分解尿素的细菌数2.55×109
4．实验室培养酵母菌、黑曲霉、白念珠菌（一种真菌）等常用沙氏BHI琼脂培养基，该培养基配方如下表。下列相关说法正确的是（ ）
脑心浸粉 10.0g/L
胰酪蛋白胨 2.5g/L
蛋白胨 7.0g/L
葡萄糖 21.0g/L
氯化钠 2.5g/L
磷酸氢二钠 1.25g/L
琼脂 15.0g/L
注：pH为7.0±0.2，温度为25℃
A．蛋白胨只用于提供氮源，葡萄糖只用于提供碳源
B．实验室里制备该培养基时，先灭菌，再调pH
C．在培养细菌时，一般需要将培养基调至酸性
D．也可用马铃薯琼脂培养基对酵母菌纯培养
5．野生黑芥（2n=16）具有黑腐病的抗性基因，花椰菜（2n=18）易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。某实验小组用黑芥苗的叶肉细胞与花椰菜的幼根细胞进行细胞融合，经筛选、培养获得抗黑腐病的花椰菜杂种植株。下列相关叙述正确的是（ ）
A．应在低渗溶液中获得两种原生质体
B．原生质体两两融合后形成的细胞中一定含有34条染色体
C．杂种植株形成过程中，需先在生长素浓度较高的培养基中诱导生根
D．对杂种植株进行黑腐病菌接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株
6．下列关于植物细胞工程应用的叙述，错误的是（ ）
A．微型繁殖为无性繁殖，能保持植物原有的遗传特性
B．选取茎尖细胞培育脱毒苗的过程体现了植物细胞的全能性
C．对愈伤组织进行诱变处理，从分化的植株中可筛选出突变品种
D．同一植株的不同细胞经植物组织培养获得的新个体一定是同一物种
7．已知某动物细胞培养过程中会发生细胞贴壁现象。下列相关叙述正确的是（ ）
A．对贴壁细胞进行收集时，可直接采用离心法
B．悬浮培养的细胞会因细胞密度大等因素使细胞分裂受阻
C．动物细胞培养一般采用固体培养基，并维持一定的气体环境
D．只有原代培养一传代培养过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理
8．哺乳动物在自然条件下受精和早期胚胎的发育规律是胚胎工程重要的理论基础。下列相关叙述错误的是（ ）
A．自然条件下哺乳动物的受精在输卵管内完成
B．受精卵细胞核中遗传物质一半来自父方一半来自母方
C．卵裂期受精卵不断进行有丝分裂，细胞数量不断增加，胚胎总体积并不增加
D．囊胚期内细胞团细胞沿透明带内壁扩展和排列，将来发育成胎儿的各种组织
9．下列关于获取目的基因的叙述错误的是（ ）
A．目的基因是编码蛋白质的基因
B．来自苏云金杆菌的Bt基因可作为转基因抗虫棉的目的基因
C．可通过BLAST（序列比对工具）了解基因的结构与功能
D．目的基因可以人工合成，也可以利用PCR快速获取或扩增
10．如图为某动物细胞核基因局部示意图，已知限制酶EcoRⅤ和BclⅠ的识别序列和切割位点分别为5'-GAT↓ATC-3'和5'-T↓GATCA-3'。下列相关叙述错误的是（ ）
A．限制酶EcoRⅤ和BclⅠ切割的都为磷酸二酯键
B．限制酶BclⅠ切割该基因后形成的是黏性末端
C．该基因转录过程中需要解旋酶打开④氢键
D．T4DNA连接酶能将BclⅠ切割后的两个片段连接起来
11．从目标生物提取分离DNA是进行基因工程操作的基础。下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（ ）
A．猪血可以作为“DNA的粗提取和鉴定”的实验材料
B．实验过程中加入预冷酒精溶液的作用是析出DNA
C．若以新鲜洋葱为实验材料，则研磨液过滤后保留沉淀
D．DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热，冷却后呈灰紫色
12．巢式PCR是一种使用两对引物扩增完整的片段的PCR。第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似。第二对为内部引物结合在第一次PCR产物内部，使得第二次PCR扩增片段短于第一次扩增，其过程如下图所示。下列说法错误的是（ ）
A．两轮扩增所需引物不同，原料和酶相同
B．巢式PCR可增强扩增的特异性
C．用内引物进行PCR时，扩增n次后理论上需要个引物
D．DNA的合成总是从子链的端向延伸与TaqDNA聚合酶的作用有关
13．PCR的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定。下列相关叙述错误的是（ ）
A．凝胶有一个加样孔加入指示分子大小的标准参照物
B．同一个凝胶中，DNA分子越大，迁移的速率越快
C．染色的DNA分子可在300nm紫外灯下被检测出来
D．移液器上的枪头在每吸取一种试剂后都必须进行更换
14．科学家通过体外诱导体细胞，获得了诱导多能干细胞（iPS细胞），iPS细胞在医药领域具有良好的应用前景。下列相关叙述错误的是（ ）
A．体外培养iPS细胞时，培养液中需添加血清，并定期更换培养液
B．由iPS细胞分化形成的神经细胞和肝细胞等重新具有了细胞周期
C．源自病人体细胞的iPS细胞，用于器官移植可避免免疫排斥反应
D．由iPS细胞产生的特定细胞，可用于药物安全性和有效性的检测
15．生物技术是一把双刃剑，为人类生活带来巨大便利的同时，也可能给人类带来灾害。下列相关叙述正确的是（ ）
A．生物武器具有致病能力强、攻击范围广等特点，应禁止生物武器
B．设计试管婴儿技术因存在社会学、伦理学等方面的争议而被禁止
C．生殖性克隆人有利于人类基因多样性的形成，但不利于人类的进化
D．生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力
二、多选题
16．关于实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作，下列说法不正确的是（ ）
A．配制培养基、倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行
B．倒平板时，打开培养皿将锥形瓶中的培养基倒入
C．倒入培养基后立即将平板倒置，防止培养基受污染
D．划线接种时，灼烧接种环，待其冷却后进行再次划线
17．体细胞与受精卵相比，细胞核中的DNA基本相同，但表观遗传修饰不同，因此基因表达也有所差异，于是体细胞细胞核转移人去核卵母细胞后，无法正常“指挥”生长发育过程。研究人员将组蛋白去甲基化酶的mRNA注入了图中M细胞，发现胚胎的发育率和妊娠率有所提高。下列相关叙述正确的是（　　）
A．过程a表示核移植，过程c可以通过电融合法获得重构胚M
B．猴B提供的卵母细胞不需要进行获能，但是需要培养到MⅡ期
C．图中克隆猴的大多性状与猴A相同，代孕猴不会将其遗传信息传递给克隆猴
D．胚胎发育率提高的原因是去甲基化酶的合成增加，胚胎发育相关基因的甲基化提高
18．某科研团队将人乳铁蛋白（hLF）基因转入到山羊体内，从山羊的乳汁中获得hLF，可以解决天然乳铁蛋白资源短缺的问题，下列有关叙述正确的是（ ）
A．可用PCR直接扩增人乳铁蛋白的基因转录产物
B．重组载体中人乳铁蛋白基因的启动子是山羊乳腺蛋白基因启动子
C．将目的基因导入山羊受精卵中一般应用的技术是显微注射法
D．检测人乳铁蛋白基因是否成功翻译常采用抗原—抗体杂交技术
19．限制酶MunⅠ和限制酶EcoRⅠ的识别序列及其切割位点分别为：—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如图表示某一目的基因片段与质粒拼接形成重组质粒的过程，下列相关叙述正确的是（ ）
A．标记基因一般是抗生素抗性基因或荧光标记基因
B．用限制酶EcoRⅠ切割目的基因，同时用限制酶MunⅠ切割质粒
C．构建重组质粒时，会形成5种脱氧核苷酸序列（最多考虑DNA片段两两连接）
D．将重组质粒同时用以上2种限制酶切割则会再形成1种长度的DNA片段
三、单选题
20．蛋白质工程取得的进展向人们展示出了诱人的前景，下列关于蛋白质工程应用的叙述，错误的是（ ）
A．经蛋白质工程改造后的抗体可以降低诱发免疫反应的强度
B．通过蛋白质工程改造的胰岛素类似物能抑制胰岛素的聚合
C．利用膀胱生物反应器生产人的生长激素不属于蛋白质工程
D．通过蛋白质工程制造出了一种能降解石油的“超级细菌”
四、实验题
21．土壤中大部分的磷难以被植物利用（无效磷），为筛选出能够将无效磷转化为植物易利用的磷（速效磷）的微生物，科研人员进行了如图1的实验，并分离出了两种解磷菌（B3-5-6、M-3-01）分别接种于含有相同磷矿粉的培养液中，测定培养液中速效磷含量变化如图2所示。回答下列问题：

(1)按照物理性质划分，培养基①为______________培养基，图1中接种方法是_____________，涂布器需要进行__________灭菌，以保证实验过程中不会被污染；若用该接种方法对微生物进行计数，一般结果会比实际的活菌数_________（填“多”或“少”）。
(2)若以无效磷作为培养基①中唯一的营养物质，______________ （填“能”或“不能”）筛选出解磷菌，原因是______________；培养基②的作用是______________。
(3)若想要在短时间内将土壤中的无效磷转化为有效磷，最好选用图2中解磷菌_______对土壤进行处理。
22．非洲狼尾草光合效率高，为培育高光效的水稻新品种，研究人员研究了不同浓度的聚乙二醇（PEG）对粳稻与非洲狼尾草的原生质体融合率的影响（已知PEG浓度较高时对细胞具有毒害作用），实验结果如图1所示（异源融合率是指不同种的原生质体发生融合的概率）。杂种细胞经植物组织培养获得几株杂种植株，在不同光照强度下测量了亲本及其中两株杂种植株的光合速率，结果如图2所示。回答下列问题：
(1)在进行原生质体融合前，需要用______（填具体的物质）去除植物体细胞的细胞壁。诱导粳稻与非洲狼尾草的原生质体融合的方法除PEG处理外，还有______（答两点）等具体方法。
(2)分析图1能够得出不同PEG浓度下同源融合率均______（填“大于”“小于”或“等于”）异源融合率。若想要进一步确定诱导粳稻与非洲狼尾草原生质体融合的最佳PEG浓度，实验思路是：______。
(3)分析图2可知与粳稻和非洲狼尾草相比，杂种植株的光合速率特点是______；若再培育一株杂种植株3，一定具有上述特点吗？请说明原因______。
五、解答题
23．癌症的免疫疗法是指重新激活抗肿瘤的免疫细胞，进而克服肿瘤的免疫逃逸。某些种类癌细胞表面有高表达的膜蛋白PSMA，CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于CD28在癌细胞与T细胞结合部位的聚集。图甲为科研人员尝试构建的双特异性抗体PSMA×CD28生产流程图；图乙为双特异性抗体PSMA×CD28的结构及作用机理图，请据图分析：
(1)图甲分析可知，制备双特异性抗体PSMA×CD28的过程中，用到的动物细胞工程技术主要有______（至少回答两点）。
(2)制备双特异性抗体PSMA×CD28时，应先分别将______（物质X）注射到小鼠体内再分离出B淋巴细胞，应用______（填生物方法）诱导细胞融合；将第一次筛选获得的细胞进行多倍稀释，借助多孔细胞培养板，利用______原理进行第二次筛选，选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体的优点是______。
(3)构建双特异性抗体过程中，杂交瘤细胞A×B会产生______（填“两种”或“多种”）抗体。双特异性抗体PSMA×CD28协助杀伤癌细胞的机理是______。
24．如图所示，若向PCR反应体系中加入两侧分别带有荧光基团和淬灭基团（抑制荧光发出）的探针，荧光探针和引物一起与模板结合，当酶催化子链延伸至探针处时会水解探针，导致荧光基团和淬灭基团分离而发出荧光（每扩增1个DNA分子，就有1个荧光探针水解），图中①-③表示步骤。回答下列问题：
(1)PCR过程包括多次循环，每个循环分为3个步骤：变性、复性、______。复性的温度一般设定为______；若DNA中G+C的含量越多，要求变性的温度越高，其原因是______。
(2)PCR过程中引物的作用是______。PCR过程除需要模板和引物外，还需要______（写两点）。
(3)在相同PCR循环次数条件下，荧光强度与模板数量______（填”不相关”“呈正比”或“呈反比”）。若最初该反应体系中只有1个DNA分子模板，进行第3次循环时，需要消耗荧光探针______个。
(4)PCR技术还可以用于鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有某抗性基因。已知该抗性基因的部分序列如图：
根据上述序列应选择引物______（填字母）进行PCR。
A．引物： B．引物：
C．引物： D．引物：
25．科学家设想将HIV的壳体蛋白（CA）基因与Ti质粒连接构建重组载体转染到枸杞细胞内，利用愈伤组织作为反应器生产HIV的壳体蛋白作为疫苗，以研究CA疫苗对人体的免疫应答。建立愈伤组织反应器的主要过程如下图所示。回答下列问题：
(1)①过程所用的酶为______；步骤②______是基因工程的核心工作。切割CA-DNA和Ti质粒用限制酶______，不选用其他两种限制酶的原因是______。
(2)步骤③一般先用处理农杆菌目的是____________。选农杆菌Ti质粒作HIV的壳体蛋白（CA）基因的载体的优点____________。
(3)为了筛选出含重组载体的农杆菌，应在添加氨苄青霉素的选择培养基上培养农杆菌，培养一段时间后获得的菌落不一定含重组载体，原因是______。
(4)是否能成功培育出转基因植株需从分子水平检测，包括通过______技术检测染色体DNA上是否插入目的基因或检测______。
参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 B C C D D D B D A C
题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案 B C B B A ABC ABC BCD ABD D
21．(1) 固体 稀释涂布平板法 灼烧 少
(2) 能 在该培养基上只有能利用无效磷的微生物能生存 对菌种进行扩大培养
(3)M-3-01
22．(1) 纤维素酶和果胶酶 电融合、离心、高Ca2+-高pH等
(2) 大于 在PEG浓度为30%～40%范围内设置一系列浓度梯度，其中异源融合率最高对应的PEG浓度为最佳融合浓度
(3) 杂种植株的光合速率小于非洲狼尾草的光合速率，大于粳稻的光合速率 不一定，实验获得的杂种植株数量过少，不能得出准确结论
23．(1)动物细胞培养、动物细胞融合等
(2) PSMA、CD28 灭活的病毒 抗原与抗体特异性结合 准确识别抗原细微差异，与抗原特异性结合，并可大量制备
(3) 多种 双特异性抗体PSMA×CD28既能结合PSMA又能结合CD28，使CD28在癌细胞与T细胞结合部位聚集，有效激活T细胞杀伤癌细胞
24．(1) 延伸 50℃ G与C之间形成三个氢键，氢键越多DNA结构越稳定，变性的温度越高
(2) 引物与模板链结合，使TaqDNA聚合酶从端连脱氧核苷酸 TaqDNA聚合酶、dNTP、缓冲液等
(3) 呈正比 4
(4)CD
25．(1) 逆转录 基因表达载体的构建 PatⅠ和BamHⅠ EcoRⅠ会破坏目的基因，NotⅠ的切割位点不在T-DNA上
(2) 使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态 Ti质粒的T-DNA能将目的基因转移并整合到侵染植物细胞的染色体DNA上
(3)空载体和重组载体均含有氨苄青霉素抗性基因，含有空载体或重组载体的农杆菌均能在添加氨苄青霉素的选择培养基上生长繁殖并形成菌落
(4) PCR 目的基因是否转录出了mRNA

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