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海南东方市铁路中学2025-2026学年高二下学期6月阶段检测生物试题
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．荔枝A和荔枝B在口感、甜度、水分等方面各有优缺点，科研人员利用现代生物技术获得了兼备荔枝A和荔枝B优点的三倍体荔枝，育种流程如图所示。该育种流程未用到的物质、原理或技术是（ ）

A．染色体变异 B．秋水仙素 C．植物组织培养 D．纤维素酶
2．狼爪瓦松是一种具有观赏价值的野生花卉，其细胞中的黄酮类化合物可入药。某科研小组利用植物细胞工程等技术手段，进行狼爪瓦松的扩大培养，具体过程如图所示。下列有关分析正确的是（　　）

A．过程③先在生长素/细胞分裂素的值高的培养基中培养，再转移至其值低的培养基中
B．过程④常用射线或化学物质处理即可获得大量所需的突变体植株丙
C．制备培养基的正确顺序是：称量→熔化→定容→调pH值→分装→灭菌
D．过程⑥利用愈伤组织分裂能力强、全能性高的特点可大量获得黄酮类化合物
3．枯草杆菌蛋白酶能催化蛋白质水解为氨基酸，在有机溶剂中也能催化多肽的合成。这些碱性蛋白酶具有重要的应用价值，被广泛应用于洗涤剂、制革及丝绸工业。将枯草杆菌蛋白酶分子的天冬氨酸（99）和谷氨酸（156）改成赖氨酸，可使其在一定条件下的活力提高。下列说法错误的是（ ）
A．完成氨基酸的替换需要通过改造基因实现
B．蛋白质工程需要直接改造蛋白质
C．经蛋白质工程改造后的枯草杆菌蛋白酶活性提高这一性状可遗传
D．蛋白质工程最终要达到的目的是获取编码蛋白质的基因序列信息，并表达出蛋白质
4．下列关于DNA粗提取与鉴定、PCR技术及电泳的叙述，正确的是（ ）
A．DNA粗提取时，可用95%的冷酒精析出DNA
B．PCR反应中，需要加入解旋酶和四种脱氧核苷酸作为原料
C．琼脂糖凝胶电泳中，DNA分子的迁移速率与分子量大小呈正相关
D．鉴定DNA时，加入二苯胺试剂后即呈现蓝色
5．紫草宁是从紫草细胞中提取的一种药物和色素，具有抗菌、消炎和抗肿瘤等活性。研究人员欲利用植物细胞培养来生产紫草宁。下列相关叙述正确的是（　　）
A．植物细胞培养是将离体器官、组织或细胞等诱导形成完整植株的技术
B．与愈伤组织细胞相比，紫草细胞更有利于紫草宁的大量生产
C．在培养细胞的过程中要通入无菌空气以保证氧气的充足供应
D．利用植物细胞培养生产紫草宁的过程体现了植物细胞的全能性
6．由谷氨酸制成的谷氨酸钠是味精和鸡精的主要成分，也是酱油、蚝油等调味品的成分之一。谷氨酸是谷氨酸棒状杆菌（需氧型）产生的代谢产物，现代发酵工程生产谷氨酸的基本流程如下图所示。下列有关叙述正确的是（ ）

A．从自然界中分离到的谷氨酸棒状杆菌直接用于发酵生产
B．发酵过程中要保证充足的营养成分，且严禁搅拌发酵液
C．控制发酵液的pH为中性或弱碱性，有利于谷氨酸的积累
D．发酵结束后，可采用过滤、沉淀等方法分离和提纯谷氨酸
7．下列关于传统发酵技术的叙述错误的是（ ）
A．传统发酵以单一菌种的固体发酵或半固体发酵为主
B．传统发酵技术产物的品质可能低于工业化发酵产品的
C．传统发酵技术所用的菌种一般是原材料中天然存在的微生物
D．传统发酵技术实质上是微生物将大分子有机物分解为小分子物质的过程
8．中药藿香长期种植会出现种质退化、易感染病虫害等问题。为解决这些问题，研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述正确的是（ ）

A．组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生定向突变
B．过程①在接种前，外植体常用无水乙醇和次氯酸钠溶液消毒
C．②③④过程添加的植物激素种类、浓度和比例均不相同
D．筛选出目标突变株后可利用植物细胞培养技术生产药用成分
9．水生栖热菌是一种嗜热细菌，其栖息的热泉水温可达90℃左右，下列关于水生栖热菌的叙述错误的是 （ ）
A．该细菌 DNA 分子的碱基中C、G 的比例可能较高
B．该细菌 DNA 分子中的每个磷酸基团都与2个五碳糖相连
C．将其 DNA 聚合酶应用于 PCR 技术有明显优势
D．若该细菌DNA 分子中含有胞嘧啶脱氧核苷酸a 个，则第n 次复制时需要游离的胞嘧啶脱氧核苷酸 a×（2n-1） 个
10．厨余垃圾中淀粉含量较高，研究人员拟筛选出能高效降解淀粉的菌株，用以处理厨余垃圾，部分流程如下图。下列叙述错误的是（　　）

A．厨余垃圾浸出液在接种到X培养基之前需进行等比稀释处理
B．用涂布器蘸取0．1mL稀释液在酒精灯火焰旁将菌液涂布均匀
C．X培养基以淀粉为唯一碳源，以筛选出能分解淀粉的目的菌株
D．应挑取单菌落④接种到Y培养基扩大培养，用于处理厨余垃圾
11．为解决器官移植供体短缺问题，研究人员尝试培育含有人源化肾脏组织的人—猪嵌合胚胎。研究中构建了肾脏发育缺陷的猪胚胎，将过量表达 MYCN 和BCL2 基因的人诱导多能干细胞（iPSCs）注入桑葚胚或囊胚后进行移植。实验流程如图所示。下列叙述正确的是（　　）
注：SIXI和SALLI基因缺失导致肾脏发育异常；MYCN基因具有促进细胞增殖等功能；BCL2基因能够抑制细胞凋亡。
A．使用电刺激、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
B．为获得去核卵母细胞，应该通过显微操作去除卵母细胞的细胞核
C．与囊胚相比，桑葚胚的分化程度更高，全能性更大
D．嵌合胚胎肾脏组织的形成完全依赖于注入的iPSCs，与猪胚胎自身细胞无关
12．下图为四种限制酶所识别的核苷酸序列及相应的切割位置（箭头所指），下列叙述正确的是（　　）
限制酶种类 序列及切点 限制酶种类 序列及切点
①：EcoRI ③：BglII
②：BamHI ④：NotI
A．不同的限制酶切割DNA分子形成的黏性末端一定不同
B．①②③④可催化磷酸二酯键和氢键断裂，形成黏性末端
C．②、③切出的末端连接后形成的片段，不能再被②或③识别切割
D．限制酶切割DNA分子一次可断开1个磷酸二酯键产生2个游离的磷酸基团
13．人们对转基因生物安全性的关注，随着转基因成果的不断涌现而与日俱增，下列不属于理性看待转基因技术的是（ ）
A．转基因农作物对于解决粮食、能源等问题起了积极作用，同时也存在一定风险
B．要看到经济、文化和伦理道德观念等的差异使人们对转基因技术有不同的看法
C．转基因技术是按照人们的意愿对生物进行的设计，不存在负面影响
D．要在清晰地了解转基因技术的原理和操作规程的基础上来讨论转基因技术的相关问题
14．花椰菜（2n=18）种植时容易遭受病菌侵害形成病斑，紫罗兰（2n=14）具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性蛋白，结果图2所示。下列有关叙述错误的是（　　）
A．图1过程①是在低渗溶液中进行，过程②是在固体培养基中进行
B．图1培育的杂种植株体细胞染色体数目最多可达到64条
C．图2中属于杂种植株的是4和5，1可能是花椰菜
D．特异性蛋白的检测并不能代表目标品种的成功培育，还需进行抗病性检测
15．现代生物技术在造福人类的同时，也可能引起一系列的安全性和伦理问题。下列说法正确的是（　　）
A．整合到油菜叶绿体基因组中的除草剂基因，会通过花粉传入环境，造成基因污染
B．转基因微生物制成的生物武器具有目前人类难以预防和治疗的特点
C．“设计试管婴儿”与“试管婴儿”相同之处在于都要进行胚胎选择，但前者属于“治疗性克隆”
D．生殖性克隆人能丰富人类基因的多样性，可在特定人群中进行相关实验
二、实验题
16．近年来，水环境中发现的不同程度的抗生素残留，不仅威胁水生生物的生存，还会损害微生物的生态平衡。氧氟沙星（OFL）（C18H20FN3O4）是一种人工合成的广谱抗菌的氟喹诺酮类药物，某实验小组成功地从废水环境样品中分离得到能降解OFL的菌株X。筛选分离的操作过程如图所示。回答下列问题：
(1)筛选能够降解OFL的菌株时，富集培养基中需要加入______作为唯一碳源或氮源。
(2)过程Ⅱ、Ⅲ所利用的接种方法是________。过程Ⅱ中的总稀释次数为8次，在过程Ⅲ中，可以每隔24h统计一次菌落的数目，选取______时的记录作为结果，三个培养基中长出的菌落数量分别是145、163、154，故推测A中细菌的数量为_______个·mL-1。
(3)该实验小组欲进一步探究初始OFL浓度对菌株X降解OFL能力的影响，请补充实验思路：______。
17．利用体细胞杂交来创造具有优良性状的农作物新品种，已在国内外取得了巨大的成功。下图为科学家将西红柿与马铃薯进行体细胞杂交，培育出马铃薯西红柿的杂交种，地上部分长西红柿，地下部分长马铃薯。回答下列问题。
(1)在a过程中需要用______________两种酶除去细胞壁，获得原生质体。
(2)愈伤组织的特点是______________，形成愈伤组织的过程中，需要经过______________过程。
(3)由愈伤组织形成c的过程中，需要添加植物激素______________和______________。
(4)运用该方法进行育种的意义是__________________________________________。
三、解答题
18．抗凝血酶Ⅲ是一种药用蛋白，对预防和治疗静脉血栓、心肌梗死、脑血管病变具有重要作用。为了提高抗凝血酶Ⅲ的产量，科研人员设计利用崂山奶山羊乳腺生物反应器制备抗凝血酶Ⅲ，并获得了成功。制作崂山奶山羊乳腺生物反应器的流程如图1所示。回答下列问题：
(1)获取了抗凝血酶Ⅲ基因后，需要通过PCR技术对该基因进行扩增，扩增的原理是______，扩增抗凝血酶Ⅲ基因的过程中一般不需要使用解旋酶，原因是______。
(2)构建基因表达载体时，需要将抗凝血酶Ⅲ基因插入到启动子与______之间，其中启动子的作用是______。
(3)获取重组质粒后，将重组质粒导入受精卵。从崂山奶山羊A的卵巢中获取卵子和从崂山奶山羊B的睾丸中获取精子，其中精子要进行______处理才具备受精的能力。图1中步骤④常用的方法是______。
(4)科研人员通过实验获得三只转基因奶山羊D（甲、乙、丙）。科研人员对甲、乙、丙三只奶山羊和非转基因奶山羊进行了基因检测。检测结果显示非转基因奶山羊体内无抗凝血酶Ⅲ基因，甲、乙、丙三只奶山羊体内均含有抗凝血酶Ⅲ基因。进一步检测抗凝血酶Ⅲ的表达情况，结果如图2所示。
注：图中黑色条带为抗原—抗体杂交带，表示相应蛋白质的存在。M泳道条带为相应标准蛋白所在位置。根据以上信息分析，该检测结果说明______。
19．为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法。请根据图示信息回答下面的问题：
(1)用来促进B牛多排卵的激素是____________激素。精子要具有受精能力，需对其进行__________处理；卵母细胞要发育到_________才能受精。
(2)为筛选出具有优良性状的母牛，胚胎移植前应取______________鉴定胚胎的性别，并在胚胎发育到_________期后进行胚胎移植。若要获得更多胚胎，可采用____________技术。
(3)根据图，产生试管牛E的生殖类型是___________。产生克隆F牛的原理是_______________。
20．幽门螺杆菌（Hp）与胃炎、消化性溃疡和胃癌等多种疾病有关。Hp的lpp20基因能指导合成其特有的lpp20蛋白，科研人员培育出转lpp20基因山羊（将lpp20基因导入山羊受精卵）利用乳腺生物反应器制备Hp疫苗。所用质粒和lpp20基因两端序列以及相关限制酶识别序列如图所示，已知lpp20基因内部不含Mfel酶切序列而外部两端含有，回答下列问题：
限制酶 EcoRI BamHI HindIII Mfel
识别序列和切割位点（5'-3'） G↓AATTC G↓GATCC A↓AGCTT C↓AATTG

(1)获取lpp20基因的常用方法是PCR技术，PCR反应缓冲溶液中添加Mg2+的作用是______。
(2)构建基因表达载体时，如果选择Mfel一种酶对目的基因和质粒进行切割，缺点是______
(3)转lpp20基因山羊利用乳腺生物反应器制备Hp疫苗，构建基因表达载体时需要选择______基因的启动子，通过______的方法导入山羊的受精卵中。
(4)重组质粒导入山羊受精卵内，对受精卵______（填“有”或“无”）性别要求？理由是______。
试卷第1页，共3页
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《海南东方市铁路中学2025-2026学年高二下学期6月阶段检测生物试题》参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 B C B A C C A D D B
题号 11 12 13 14 15
答案 A C C A B
1．B
2．C
3．B
4．A
5．C
6．C
7．A
8．D
9．D
10．B
11．A
12．C
13．C
14．A
15．B
16．(1)OFL
(2) 稀释涂布平板法 菌落数目稳定 1.54×1011
(3)配制等量的含“一系列浓度梯度”的OFL的“液体培养基”；将“培养基灭菌”后，在培养基中“接种等量的菌株X”；检测OFL的降解程度，计算出OFL去除率
17．(1)纤维素酶和果胶酶
(2) 细胞排列疏松，无定形态，高度液泡化 脱分化
(3) 细胞分裂素 生长素
(4)克服了远源杂交不亲和的障碍
18．(1) DNA双链复制 PCR扩增过程中，当温度为90＞95℃时，DNA解链
(2) 终止子 作为RNA聚合酶识别和结合的位点，驱动基因转录出mRNA
(3) 获能 显微注射技术
(4)乙、丙奶山羊体内的抗凝血酶Ⅲ基因能够表达，而甲奶山羊体内的抗凝血酶Ⅲ基因不能表达
19．(1) 促性腺 获能 MⅡ
(2) 滋养层细胞 桑葚胚或囊胚 胚胎分割
(3) 有性生殖 动物细胞的细胞核具有全能性
20．(1)激活耐高温的DNA聚合酶
(2)目的基因和载体可能自身环化以及反向连接
(3) 山羊乳腺中特异表达的（乳腺蛋白） 显微注射
(4) 有 转基因山羊必须是雌性，才能分泌乳汁获得Ipp20蛋白（或只有雌性才能分泌乳汁）
答案第1页，共2页
答案第1页，共2页

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