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河南省项城市第三高级中学2025-2026学年高二年级下学期期末考试生物试题
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．下列关于传统发酵食品制作的叙述，正确的是（　　）
A．腐乳发酵以毛霉为主，可分泌蛋白酶、脂肪酶
B．制作葡萄酒时，需对葡萄汁和发酵装置进行湿热灭菌，以防止杂菌污染
C．制作泡菜时，泡菜坛口盖上一层纱布，可营造有氧环境，满足乳酸菌的代谢需求
D．当缺少氧气和糖源时，醋酸菌可将乙醇依次转化为乙醛、乙酸
2．科研人员利用重组毕赤酵母发酵生产新型甜蛋白，发酵工艺流程如下：①菌种选育→②扩大培养→③接种→④发酵罐发酵→⑤分离、纯化得到成品甜蛋白。下列叙述正确的是（ ）
A．①可通过基因工程手段获得，菌种只要能高产甜蛋白即可
B．②可通过划线或涂布法将菌种接种到固体培养基扩大培养
C．④常采用单一纯种毕赤酵母发酵，其产量与温度、溶解氧等有关
D．⑤采用过滤、沉淀的方法，即可从发酵液中分离、提纯甜蛋白
3．我国科学家以一只雌性猕猴胎儿的成纤维细胞为核供体成功克隆出两只猕猴，成为全球首例体细胞克隆灵长类动物。下列叙述错误的是（ ）
A．培育出的两只雌性猕猴的基因组成几乎完全相同
B．可用灭活的病毒诱导去核卵母细胞和成纤维细胞融合
C．克隆猴的遗传物质全部来自猕猴的成纤维细胞
D．克隆猴的获得体现了动物体细胞的细胞核具有全能性
4．动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（ ）
A．培养过程中需定期更换培养液，目的是清除代谢废物和补充营养物质
B．添加95%的空气和5%的CO2可以为细胞提供呼吸条件的同时维持培养液的pH
C．进行动物细胞培养时需将培养液的pH调至7.2～7.4
D．动物细胞培养时，可以用胃蛋白酶将组织分散成单个细胞
5．肿瘤坏死因子α（TNF-α）是一种细胞因子，高浓度时可以引发疾病。研究者利用细胞工程技术制备了TNF-α的单克隆抗体，用于治疗由TNF-α引发的疾病，制备流程如下图。下列叙述正确的是（ ）
A．①是从小鼠的血液中获得的骨髓瘤细胞
B．②含未融合细胞、同种核及异种核融合细胞
C．③过程筛选出的杂交瘤细胞分泌的抗体即为TNF-α抗体
D．④需在体外或小鼠腹腔中进行抗体检测和克隆化培养
6．2018年，世界上最后一头雄性北方白犀牛死亡，该物种仅剩两头雌性。科学家计划利用之前保存的雄性北方白犀牛的精子，结合现代生物技术来繁育后代。下列关于该计划的叙述，合理的是（ ）
A．可将保存的精子直接用于体外受精
B．应将精子培养在人工配制的获能液中使其获能后，再注入雌性生殖道进行人工授精
C．应将桑椹胚的内细胞团均等分割，以利于后续胚胎的发育
D．可将北方白犀牛的体细胞核移植到去核的MⅡ期卵母细胞中，并将早期胚胎移植给代孕母体
7．活体采卵联合体外胚胎生产是动物良种扩繁的核心技术，褪黑素作为高效活性氧（ROS）清除剂，可调控卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育过程。我国科学家在研究绵羊体外受精时发现，向获能液、受精液中添加适量褪黑素可显著提升精子获能效率与囊胚发育率。下列叙述错误的是（ ）
A．体外受精时，精子需获能处理后，才能与减数第二次分裂中期的卵母细胞结合
B．受精液中添加的褪黑素不会影响透明带阻止多精入卵的功能
C．早期胚胎没有及时从滋养层内孵化是多数胚胎不能发育至囊胚的原因
D．受精液中添加褪黑素可为绵羊优良品种的繁育提供更多优质胚胎
8．关于基因工程的基本工具，下列叙述正确的是（　　）
A．用限制酶切割DNA分子中部获得一个目的基因时，需断开2个磷酸二酯键
B．用限制酶Spe Ⅰ（—A↓CTAGT—）和限制酶Xba Ⅰ（—T↓CTAGA—）切割产生的DNA片段可以相连接
C．E.coli DNA连接酶连接平末端的效率远高于T4 DNA连接酶
D．基因工程中常用的载体除质粒外，还有大肠杆菌和动植物病毒
9．关于“DNA粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”实验，下列叙述正确的是（ ）
A．提取到白色丝状物与二苯胺试剂充分混匀，沸水浴加热后变紫色
B．实验中如果将研磨液更换为蒸馏水，提取DNA的效率会提高
C．为避免外源DNA等因素污染，微量离心管和枪头在使用前必须消毒
D．指示剂与DNA样品混合后一同上样到加样孔中，待指示剂迁移接近凝胶前电泳
10．现有一长度为3000碱基对（bp）的线性DNA分子，用限制性内切核酸酶酶切后进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶H单独酶切，结果如下图1。用酶B单独酶切，结果如下图2。用酶H和酶B同时酶切，结果如下图3。下列相关叙述正确的是（ ）
A．酶H有2个识别位点和切割位点
B．酶B和酶H同时酶切时，有3个识别位点和切割位点
C．酶B和酶H同时酶切时，能产生完全相同的酶切片段
D．酶B和酶H有相同的识别位点和切割位点
11．下列关于PCR技术相关叙述正确的是（　　）
A．PCR反应体系中需加入Taq DNA聚合酶，该酶主要在延伸过程起作用
B．反应的缓冲液中一般要添加Ca2+用于激活DNA聚合酶
C．DNA聚合酶可从引物的5’端开始连接脱氧核苷酸
D．PCR复性温度与引物的GC含量有关，一般后者含量越高则复性温度越低
12．人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得，生产流程如下图所示。下列有关叙述正确的是（ ）
A．构建重组表达载体时需要用DNA聚合酶和DNA连接酶
B．检测目的基因是否表达出htPA，可采用PCR等技术
C．将重组表达载体导入受精卵之前，用CaCl2处理受精卵，有利于提高转化效率
D．若在母羊的羊乳中检测到htPA，说明目的基因成功表达
13．研究人员利用基因工程技术实现人源干扰素基因在大肠杆菌中的高效表达，该技术中，含有β-半乳糖苷酶基因的质粒K的结构如图所示。已知β-半乳糖苷酶基因编码的酶可分解X-gal产生蓝色物质，使大肠杆菌形成蓝色菌落。下列叙述正确的是（ ）
A．转基因过程中常用Mg2+处理大肠杆菌，以利于获得基因工程菌
B．构建重组质粒时需将人源干扰素基因连接在质粒K启动子下游
C．欲获得蓝色菌落，可以用限制酶BamH Ⅰ和EcoRV切割质粒K
D．β-半乳糖苷酶基因通过控制蛋白质的结构直接控制生物性状
14．通过多种方法获得早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。图为经胚胎移植得到的后代，相关叙述错误的是（ ）
A．获得动物①、②和③的过程都属于无性繁殖，保持优良性状的延续
B．培育③需将人干扰素基因与羊乳腺中特异性表达的基因的启动子等调控元件组合在一起
C．胚胎移植前可取滋养层的细胞做DNA分析，鉴定性别
D．③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良
15．生物体合成的天然蛋白质由大约21种不同的氨基酸构成，科研人员开展了利用蛋白质工程向蛋白质中添加新的非天然氨基酸，为合成新型抗生素和抗肿瘤药物开辟新途径的研究。下列叙述错误的是（ ）
A．蛋白质工程可以直接改变蛋白质的氨基酸序列，无需考虑其空间结构
B．该研究属于蛋白质工程，可定向改造或制造自然界不存在的蛋白质
C．引入非天然氨基酸需要改造编码该蛋白质的基因，从根本上改变氨基酸序列
D．可借助基因工程将改造后的基因导入细菌，实现新型蛋白质的规模化生产
16．关于生物技术的安全性与伦理问题，下列叙述正确的是（ ）
A．因人们对转基因食品安全性存在争议，应禁止食用转基因食品
B．生殖性克隆会破坏人类基因多样性的天然属性，应禁止生殖性克隆
C．随着基因组编辑技术的发展，应支持通过“设计试管婴儿”生产完美婴儿
D．生物武器利用致病微生物、重组致病菌及微生物产生的毒素和干扰素等来形成杀伤力
二、解答题
17．发酵工程在日常生活中的应用已经广为常见，江小白白酒和涪陵榨菜利用相关技术已实现了工厂化生产。江小白是一种利用酒曲自然发酵并蒸馏的高粱酒，因其特有的口感成为了“重庆新名片”；涪陵榨菜选用涪陵特有的青菜头，经独特的加工工艺制成，与法国酸黄瓜、德国甜酸甘蓝并称世界三大泡菜。请回答下列有关酿酒及泡菜（榨菜）制作的相关问题：
(1)酒曲中含有的主要微生物是________，其代谢类型__________，目前发酵工程中常用的高产菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过________或基因工程育种获得。发酵工程的中心环节是__________。
(2)制作江小白的过程中，如果有杂菌污染，则会影响酒的产量和品质，原因是____________。酿制江小白过程中，夏天常因封口不严，导致酒中带有明显的酸味，造成此现象的微生物是________。
(3)制作泡菜的主要微生物是________，其代谢类型__________。为了缩短制作时间，有人会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是________________________。
18．研究人员从某咸水湖中分离能合成聚羟基脂肪酸酯（PHA）的嗜盐细菌，分离流程如图所示。回答下列问题：
(1)从咸水湖取样时，应在_____（填“表层”或“深层”）水体取样，因为嗜盐细菌多为需氧型；过程①的目的是_____，以获得适宜浓度的菌液用于后续接种。
(2)为筛选能合成PHA 的嗜盐细菌，培养基中需加入高浓度的_____以抑制不耐盐微生物的生长；该培养基从功能上划分属于_____培养基；培养时需将培养皿倒置，目的是_____。
(3)过程④采用的接种方法是_____，其通过连续划线逐步_____菌液浓度，最终获得单菌落；过程⑤需将单菌落接种到液体培养基中进行_____培养，以获得足够的菌体用于检测PHA 含量。
19．科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄——马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示。据图回答下列问题：
(1)为获得原生质体，过程①需要利用________酶处理两种植物细胞，促进原生质体融合的方法有________、________（写出两个），两种植物细胞的原生质体融合成功的依据是________。
(2)过程③和④利用的植物细胞工程技术是______。该技术依据的生物学原理是______。该技术需要光照的是过程____。（填“③”或“④”），光照的作用______。
(3)已知番茄细胞内有24条染色体，马铃薯细胞内共48条染色体，则在“番茄—马铃薯”杂种细胞中有_____条染色体。
20．Ⅰ.科研人员为获得可用于生产基因工程的疫苗，将病毒外壳蛋白基因导入猪体细胞中，然后通过核移植技术培育转基因猪，具体操作过程如图所示。回答下列问题：
(1)在收集A细胞时需要用_________处理1号猪，在体外培养到_________时期。为了使胚胎能够成功移植到2号猪子宫内，需要对2号猪进行_________处理。
(2)该转基因猪的培育过程运用了动物细胞培养、_______和__________等技术。
(3)若想要对移植的胚胎进行分割，应选择_______期进行操作。
(4)随着试管婴儿技术的发展，世界各地诞生的试管婴儿数量迅速增长，试管婴儿技术中有时需要对胚胎的性别进行鉴定。目前最有效、准确的方法是SRY—PCR法，操作的基本程序是：从被测的囊胚中取出几个_________（填“滋养层”或“内细胞团”）细胞，提取DNA进行扩增，用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）制成的探针进行检测，与SRY特异性探针出现阳性反应者，胚胎性别为_________。
21．紫色西红柿经基因编辑后可产生比普通西红柿多9倍的花青素（紫色），紫色花青素能降低人类患心脏病、糖尿病的风险。如图是花青素合成酶基因（S）的cDNA（由某种生物发育某个时期的mRNA经逆转录产生的互补DNA）和Ti质粒的结构示意图。请结合基因工程相关知识，回答下列问题。
(1)构建基因表达载体时，需用限制酶切割花青素合成酶基因的cDNA和Ti质粒。若要保证目的基因完整插入Ti质粒的T-DNA区域，且后续能正常表达，应选择的限制酶组合是___________，选择依据是___________。
(2)将花青素合成酶基因的cDNA导入Ti质粒时，需借助___________酶连接，该酶的作用是___________。
(3)基因表达载体中，启动子的作用是___________；标记基因（某抗生素抗性基因）的作用是___________。
(4)若要检测花青素合成酶基因是否成功导入受体细胞，常用的技术是___________；若要检测花青素合成酶基因是否在受体细胞中成功表达，可采用的方法有___________（答出1种即可）。
试卷第1页，共3页
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参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 A C C D B D C B D B
题号 11 12 13 14 15 16
答案 A D B A A B
17．(1) 酵母菌 异养兼性厌氧 诱变育种 发酵罐内发酵
(2) 杂菌会分解葡萄糖，并产生代谢产物 醋酸菌
(3) 乳酸菌 异养厌氧型 增加乳酸菌的数量
18．(1) 表层 梯度稀释菌液
(2) NaCl（或氯化钠） 选择 防止冷凝水滴落污染培养基
(3) 平板划线法 稀释 扩大
19．(1) 纤维素酶和果胶酶 离心法、电融合法、聚乙二醇（PEG）融合法 高Ca2+﹣高pH融合法 杂种细胞再生出新的细胞壁
(2) 植物组织培养 植物细胞具有全能性 ④ 诱导叶绿素的形成，使试管苗能够进行光合作用
(3)72
20．(1)
促性腺激素
减数第二次分裂中（MⅡ中）
同期发情
(2)
（动物）体细胞核移植技术
胚胎移植技术
(3)
桑椹胚或囊胚
(4)
滋养层
男性（雄性）
21．(1) EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ 既能完整切割下花青素合成酶基因的cDNA，又能在Ti质粒的T-DNA区域打开相同末端，且不破坏T-DNA的启动子、终止子等关键结构，保证目的基因正常表达
(2) DNA连接 催化两个DNA片段的黏性末端（或平末端）形成磷酸二酯键，将目的基因和载体连接
(3) RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动目的基因转录 筛选出含有目的基因的受体细胞
(4) PCR技术、DNA分子杂交技术 抗原-抗体杂交（或观察受体细胞表现出紫色性状）
答案第1页，共2页
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