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高二生物期末试卷
一、单选题（每题2分）
1.细胞学说是19世纪自然科学的三大发现之一，下列说法正确的是（)
A.细胞学说拇示了生物体结构的统一性以及真核细胞、原核细胞的统一性
B、细胞是生物体结构的基本单位，都能独立完成生物体的各项生命活动
C、“胡萝卜韧皮部细胞在适宜条件下能发育成新的植株”支持细胞学说的观点
D.细胞学说使动植物结构统一于分子水平，有力地证明了生物之间存在亲缘关系
2.痘病毒是一类双链DNA包膜（脂质双层膜结构）病毒，对动物黏膜上皮细胞具有特殊的亲和力。与其他
大多数DNA病毒不同，痘病毒可完全在宿主细胞质中完成复制，对宿主细胞的DNA和RNA依赖程度很低，
下列叙述错误的是()
A.痘病毒的包膜可能来源于最后的宿主细胞
B.痘病毒基因组的复制与转录所需的酶全部来源于宿主细胞
C.在痘病毒感染过程中，宿主细胞核外可检测到大量病毒DNA
D.痘病毒的“亲和力”是病毒与宿主细胞长期协同进化的结果
3.家庭酿造米酒是由蒸熟的糯米加入酒曲发酵而成，主要是好氧霉菌（糖化），酵母菌（产酒主力），乳酸茵
(增香，调风味)等菌种的作用。下列叙述正确的是()
A.好氧霉菌是需氧型生物，整个发酵过程要不断通入O2
B.发酵前期，糖化率先启动，形成高糖环境，所以酒酿制作过程中一般是先见水，后出酒
C.应在蒸熟的糯米中尽快加入酒曲，以免杂菌污染
D.米酒发酵过程中会明显升温，前期温度较低，后期温度较高
4.为研究培养幽门螺杆菌所需的气体条件，某小组利用半固体培养基（琼脂含量3.5gL)对幽门螺杆菌进行
培养。下图代表微生物可能出现的四种生长状态。下列叙述错误的是()
空气
一微生物
生物
生物
微生物
③
④
A.配制该菌培养基时，应先调节pH,该操作在灭菌之前完成
B.微生物的纯培养的步骤是配制培养基、灭菌、接种、分离、培养
C.常用细菌计数板来对幽门螺杆菌进行计数
第1页共12而
D.若幽门螺杆菌的生长状态类似②号试管，则培养该菌的气体条件应为无氧环境
5.“筛选”是生物技术与工程中重要的环节。下列叙述正确的是()
A.诱导植物原生质体融合时，观察是否再生细胞壁可筛选异种融合细胞
B.用选择培养基筛选微生物，对照组不接种微生物，实验组接种做生物
C.在试管婴儿技术中，需取滋养层细胞进行性别鉴定来筛选所需的胚胎
D.制备单克隆抗体时，需从分子水平筛选能产生所需抗体的杂交瘤细胞
6.中国克隆牛“康康”的培育过程是将良种肉牛的体细胞直接注入去核卵母细胞中，经诱导融合形成重构胚：
对重构胚人工激活与体外培养后，筛选合格胚胎移植至代孕母牛子宫内，使其完成胚胎发有，下列说法正确
的是()
A.“康康的细胞质基因来源于受体细胞
B.利用梯度离心法无需穿透透明带即可去除纺锤体一染色体复合物
C.可用电刺激或Ca+载体激活重构胚，使其完成融合
D.将重构胚培养至囊胚期，取内细胞团细胞进行DNA分析后方可移植
7.雪豹是高原珍稀濒危物种，为恢复野生种群，科研人员利用体外受精、胚胎移植技术实现人工繁有，其流
程如下图所示。下列关于该过程的说法错误的是（)
动物园雪豹♀A
动物园雪豹♀B
超数排卵…
②
野生雪豹
去核卵母细胞体细胞
oC
①
3
受体雌性D+-Q⑧重构胚
388
i
妊娠分娩
妊娠分娩
后代E
后代Fg
A,受体雌性D必须和A、B进行同期发情处理
B.胚胎工程一般采用促性腺激素处理A使其超数排卵
C.胚胎移植后需要对受体雌性D进行免疫检测，防止胚胎发育异常
D.E后代遗传性状与A和C一致，F后代遗传性状与B不完全一致
8.利用胚胎干细胞法构建转基因动物的流程如图。下列叙述错误的是（)
足发绿色荧光的
心胚胎干细胞
显微
妊娠
注牙
发商
①代孕生
动物
透明带
之
后代嵌合体
动物
第2页共12页《2026 高二生物》参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 C B B D D B C B B C
题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案 B C A B D B B D A D
题号 21 22 23 24 25
答案 B D C A A
1．C
【详解】A、细胞学说揭示了动植物结构的统一性、生物界的统一性，但细胞学说提出时还
未划分真核细胞和原核细胞，A错误；
B、细胞是生物体结构和功能的基本单位，多细胞生物需要依赖分化的细胞密切合作，共同
完成各项生命活动，单个细胞无法独立完成生物体的全部生命活动，B错误；
C、细胞学说认为细胞是生物体结构和功能的基本单位，新细胞由老细胞产生，胡萝卜韧皮
部细胞能发育为完整植株，证明了分化的细胞仍具有发育为完整个体的潜能，支持细胞学说
的观点，C正确；
D、细胞学说使动植物结构统一于细胞水平，D错误。
2．B
【详解】A、有包膜的病毒通常以出芽方式释放，释放过程中会包裹宿主细胞的细胞膜（脂
质双层结构）形成自身包膜，因此痘病毒的包膜可能来源于最后的宿主细胞，A正确；
B、题干明确说明痘病毒对宿主细胞的 DNA和 RNA依赖程度很低，且可完全在细胞质中完
成复制和转录，说明其基因组复制与转录所需的酶并非全部来源于宿主细胞，部分由病毒自
身携带或编码合成，B错误；
C、痘病毒的复制过程完全在宿主细胞质中进行，不需要进入宿主细胞核，因此感染过程中
宿主细胞核外（细胞质中）可检测到大量病毒 DNA，C正确；
D、病毒对特定宿主细胞的特异性亲和力，是病毒与宿主细胞长期相互选择、协同进化的结
果，D正确。
3．B
【详解】A、好氧霉菌是需氧型生物，但酵母菌发酵产酒精的过程需要无氧环境，如果整个
发酵过程不断通入氧气，酵母菌会进行有氧呼吸，不产生酒精，还会抑制无氧发酵，A错误；
B、发酵前期好氧霉菌起主导作用，糖化率先启动，形成高糖环境，酵母菌的早期有氧呼吸
能产生少量代谢水，所以酒酿制作过程中一般是先见水，后出酒，B正确；
答案第 1页，共 2页
C、蒸熟糯米的高温可以起到杀菌作用，但应冷却后再加入菌种，以免菌种死亡，C错误；
D、米酒发酵整个过程是放热反应，过程中会明显升温，前期温度较高（有氧呼吸放热量大），
后期温度较低（无氧呼吸也放热，但放热量比有氧呼吸少），D错误。
4．D
【详解】A、培养基配制时，调节 pH需要在灭菌之前完成，避免灭菌后再调节污染环境，
A正确；
B、由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，获得纯培养物的过程就是纯培养；
微生物的纯培养的步骤是配制培养基、灭菌、接种、分离、培养，B正确；
C、幽门螺杆菌是细菌，用细菌计数板可对细菌等较小细胞进行观察和计算，C正确；
D、②号试管中微生物集中在培养基的中上层，说明该菌需要微需氧环境，D错误。
5．D
【详解】A、活的未融合原生质体、同种融合原生质体、异种融合原生质体都可以再生出细
胞壁，仅观察细胞壁再生无法区分异种融合细胞，A错误；
B、验证选择培养基的筛选作用时，对照组需要将微生物接种到完全培养基中，和选择培养
基的菌落数做对比，不接种微生物的空白对照仅用于检验培养基是否被杂菌污染，B错误；
C、仅当需要规避伴性遗传病等有性别筛选需求时，才会在试管婴儿操作中取滋养层细胞做
性别鉴定，性别鉴定不是试管婴儿的必需步骤，C错误；
D、制备单克隆抗体时，通过抗原-抗体杂交技术筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，该技
术属于分子水平的检测方法，D正确。
6．B
【详解】A、培育过程中将完整的供体体细胞注入去核卵母细胞，供体体细胞的细胞质、去
核卵母细胞的细胞质共同参与重构胚组成，因此“康康”的细胞质基因来源于供体细胞和受体
卵母细胞，A错误；
B、卵母细胞去核的方法包括显微操作法、梯度离心法、紫外光短时间照射法等，其中梯度
离心法无需穿透透明带即可去除纺锤体—染色体复合物，B正确；
C、电刺激、Ca2+载体处理、乙醇处理等均是常用的重构胚的激活方法，重构胚经过人工激
活才能启动发育进程，而不是使其完成融合，C错误；
D、囊胚的内细胞团将来发育为胎儿的各种组织，若取内细胞团细胞进行 DNA分析会破坏
胚胎结构，影响后续发育，应取将来发育为胎膜和胎盘的滋养层细胞进行检测，D错误。
7．C
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【详解】A、胚胎移植的生理学基础要求供体、受体进行同期发情处理，使二者生殖器官生
理状态一致，为胚胎移入提供相同的生理环境，因此受体 D需和供体 A、B同期发情处理，
A正确；
B、促性腺激素可促进雌性个体超数排卵，因此对供体雌性 A注射促性腺激素可实现超数排
卵，B正确；
C、受体子宫对外来胚胎基本不发生免疫排斥，是胚胎移植的生理学基础之一，因此不需要
对受体 D进行免疫检测，C错误；
D、后代 E是 A的卵细胞和 C的精子体外受精发育而来，遗传物质来自 A和 C，因此性状
与 A、C一致；后代 F是核移植（克隆）得到的个体，核遗传物质来自 B的体细胞，细胞
质遗传物质来自去核卵母细胞，因此性状与 B不完全一致，D正确。
8．B
【详解】A、图中甲是桑椹胚，体外受精时，获能的精子和成熟的卵子在体外共培养可完成
受精，受精卵早期发育可得到桑椹胚，因此甲可通过该方式获得，A正确；
B、胚胎干细胞来源于早期胚胎（如囊胚内细胞团）或原始性腺，嵌合体的皮肤组织是高度
分化的体细胞组织，即使发绿色荧光，也属于已分化的体细胞，无法从中分离出胚胎干细胞，
B错误；
C、①为胚胎移植，乙是囊胚，囊胚需要孵化（透明带破裂，胚胎脱出）后才能着床继续发
育，该过程发生在代孕动物体内，C正确；
D、该嵌合体的部分生殖细胞可携带目的基因（来自注入的转基因胚胎干细胞），因此可从
嵌合体的后代中筛选得到所需转基因动物个体，D正确。
9．B
【详解】A、低温诱导植物细胞染色体数目加倍的原理是低温可抑制有丝分裂前期纺锤体的
形成，洋葱根尖分生区细胞可进行有丝分裂，纺锤体形成受抑制后，着丝粒分裂产生的子染
色体无法移向细胞两极，会引起细胞内染色体数目加倍，A正确；
B、绿叶中的色素属于脂溶性有机物，易溶于无水乙醇等有机溶剂，因此无水乙醇可作为该
实验的提取液；DNA不溶于无水乙醇，因此 DNA粗提取实验中常用体积分数为 95%的冷
酒精使 DNA析出，B错误；
C、探究酵母菌细胞呼吸的方式实验中，自变量是氧气的有无，因变量是细胞呼吸产物的产
生情况，温度、培养液用量、酵母菌初始数量等均为无关变量，需保持相同且适宜，C正确；
D、模拟生物体维持 pH的稳定实验中，清水组、HCO -/H 2- -3 2CO3或 HPO4 /H2PO4缓冲液组均
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可作为对照组，生物材料组为实验组，D正确。
10．C
【详解】A、由图可知，A突变为 a是碱基对的替换（原序列第二个 T替换为 G），不是碱
基缺失，A错误；
B、E.coli DNA连接酶能高效连接黏性末端，对平末端的连接效率较低，AluⅠ切割后会产
生平末端，不宜用 E.coli DNA连接酶连接，B错误；
C、正常 A基因有 3个 HindⅢ识别位点，酶切后可得到 200bp、400bp两种长度的片段；突
变后 a基因中间的HindⅢ识别位点被破坏，仅剩下 2个HindⅢ位点，酶切后只得到 1条 600bp
的片段，酶切后产物长度不同，可以通过该酶酶切鉴定致病基因，C正确；
D、限制酶的本质是蛋白质，高温会使酶的空间结构改变而变性失活，限制酶适宜在低温保
存，D错误。
11．B
【详解】A、DNA的热稳定性强于蛋白质，60~75℃环境下蛋白质会发生变性沉淀，而 DNA
结构保持稳定，过滤即可除去变性的蛋白质杂质，措施合理，A不符合题意；
B、研磨后过滤得到的沉淀是细胞碎片等不溶性杂质，目标 DNA溶解在研磨后的滤液中，
对沉淀进行蛋白酶处理无法作用于含 DNA的滤液组分，不能提高 DNA纯度，措施不合理，
B符合题意；
C、2mol/L的 NaCl溶液中 DNA溶解度很高，部分蛋白质在此浓度下溶解度低会析出，过
滤去除析出的蛋白质后，再将 NaCl浓度调至 0.14mol/L让 DNA析出，此时多数蛋白质仍溶
解在溶液中，可进一步除杂，措施合理，C不符合题意；
D、DNA不溶于冷却的 95%酒精，而蛋白质等杂质可溶于酒精，重复沉淀、溶解 DNA的操
作可以逐步去除溶于酒精的杂质，提高 DNA纯度，措施合理，D不符合题意。
12．C
【详解】A、EcoRⅠ切割产生黏性末端，EcoR V切割产生平末端，A错误；
B、EcoRⅠ和MfeⅠ切割产生的黏性末端相同，既能被 E.coliDNA连接酶连接，也能被
T4DNA连接酶连接，B错误；
C、BamHⅠ和 Sau3AⅠ切割产生的黏性末端相同，连接后的序列含有 Sau3AⅠ的识别序列
GATC，因此能被 Sau3AⅠ切割，C正确；
D、由五种限制酶的识别序列和酶切位点可知，这五种限制酶均能识别双链 DNA的特定序
列，并切开特定部位的磷酸二酯键，D错误。
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13．A
【详解】在进行 PCR操作时，引物应分别与基因两条链的 3′端根据碱基互补配对原则结合，
图所示碱基序列磷酸端为 5′端，羟基（-OH）端为 3′端，草甘膦抗性基因上面那条链的右边
为 3’端，引物 5'-CTTGGATGAT-3'与该链的 3'端互补结合；草甘膦抗性基因下面那条链的左
边为 3’端，引物 5’-TCTGTTGAAT-3’与该链的 3'端互补结合”，A符合题意。
14．B
【详解】A、PCR扩增中引物与 DNA模板链的 3’端通过氢键结合，A错误；
B、1个图示 DNA分子经 PCR循环 n次后，可获得两条脱氧核苷酸链等长的 Bt基因（2n-2n）
个，B正确；
C、要使 Bt基因与载体正确连接，则需在引物的 5’端添加相应的限制酶识别序列，C错误；
D、Bt抗虫蛋白只有在鳞翅目昆虫肠道的碱性环境中才能表现出毒性，而牛的胃液呈酸性，
而且牛的肠道细胞上没有相应的特异性受体，黄牛吃了转基因抗虫棉的叶片，不会导致其肠
上皮细胞的细胞膜穿孔而死亡，D错误。
15．D
【详解】A、蛋白质工程的本质是通过改造或合成基因实现对蛋白质的改造，对水蛭素的改
造属于蛋白质工程，必须对基因进行操作，A错误；
B、天然蛋白质的合成过程是遵循中心法则从 DNA到 RNA再到蛋白质，而水蛭素改造（蛋
白质工程）的基本思路是从预期蛋白质功能出发，反向推导得到对应的基因序列，二者思路
不同，B错误；
C、密码子具有简并性，即一种氨基酸可对应多种密码子，因此依据蛋白质的氨基酸序列推
测得到的 mRNA（b）核糖核苷酸序列不止一种，C错误；
D、若改造后水蛭素抗凝血活性更高，会延缓凝血过程，小鼠尾静脉出血时间会更长，因此
可通过该方法鉴定其抗凝血活性，D正确。
16．B
【详解】A、普通试管婴儿的作用是解决不孕不育问题，无需对胚胎进行遗传学诊断，“设计
试管婴儿”需要在胚胎移植前做遗传学诊断以筛选符合特定要求的胚胎，A错误；
B、将α-淀粉酶基因与目的基因共同转入植物后，可实现花粉中特异表达α-淀粉酶，分解花
粉中的淀粉使花粉不育，避免转基因花粉携带目的基因扩散至近缘物种，可防止基因污染，
B正确；
C、生物武器包含致病菌、病毒、生化毒剂以及基因重组的致病菌等，干扰素是免疫调节用
答案第 1页，共 2页
的免疫活性物质，抗生素是抑制细菌增殖的药物。二者都不属于生物武器，C错误；
D、生殖性克隆需要经体细胞核移植、早期胚胎培养、胚胎移植最终获得完整克隆个体；治
疗性克隆的目的是获取胚胎干细胞并诱导分化为所需组织器官用于疾病治疗，不需要进行胚
胎移植，D错误。
17．B
【详解】A、1g土壤溶于 99mL无菌水，相当于稀释了 102倍，再稀释 104倍后总稀释倍数
为 102×104=106倍，取 0.1mL涂布得到 120个菌落，因此 1g土壤中尿素分解菌的数目为 120
÷0.1×106=1.2×109个，A正确；
B、血细胞计数板规格为 25中格×6 小格；台盼蓝等体积稀释菌液（稀释 2 倍）。一个中格
内 无色活菌 9 个、蓝色死菌 6 个，平均每中格活菌=9个，总计数室活菌数 = 9×25=225，
计数板体积为 0.0001mL，原稀释梯度：土壤总稀释 106倍，台盼蓝又等体积稀释×2，因此
1g土壤活菌总数=225÷0.0001×106×2=4.5×1012个，B错误；
C、尿素分解菌产生的脲酶可分解尿素产生氨，使酚红指示剂变红，菌株分解尿素能力越强，
产生的氨越多，菌落周围红色圈范围越大，因此红色圈与菌落直径比值大的菌株分解尿素能
力更强，C正确；
D、双缩脲试剂显色原理是双缩脲试剂与两个及以上 CO NH 的结构结合显紫色； 双缩脲
分子 H2N CO NH CO NH2含有 2 个 CO NH 结构，可和双缩脲试剂生成紫色络合物，
D正确。
18．D
【详解】A、第二幅图的细胞中有 3套染色体，这三套染色体会进行复制形成 P1、P1、P2、
P2、M、M6套染色体，然后融合成 P1P2（死亡）、MP1、MP2二倍染色体细胞，然后经过
细胞分裂增殖及内细胞团一分为二，最终形成带有不同比例的MP1、MP2的胚胎，所以姐
弟俩来源于母亲的染色体都是M，而来源于父亲的染色体为 P1或 P2，A错误；
B、精子受精前的准备是获能，获能指的是获得受精能力，并非获得能量，B错误；
C、该半同卵双胞胎是同一个卵细胞与两个精子受精所致，而不是被更多个精子受精所致，
说明透明带和卵细胞膜均发生了一定的生理反应，而非均未发生生理反应，C错误；
D、据过程 5可知两个内细胞团共用一个滋养层，滋养层会发育成胎儿的胎膜和胎盘，所以
双胞胎共用一个胎盘，D正确。
19．A
【详解】A、差速离心法通过控制不同的离心速率，可将质量不同的细胞组分分离，细胞核
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质量大，会在较低转速下最先沉淀，因此可从解冻组织匀浆液中获得细胞核，A正确；
B、电融合法是用于诱导供体细胞与去核卵母细胞的细胞膜融合的操作，若已经直接将提取
的细胞核注入去核卵母细胞的细胞质中，无需再进行电融合，只需进行激活处理即可，B错
误；
C、细胞核全能性是指细胞核含有发育为完整个体的全套遗传物质，具有发育成完整个体的
潜能，利用心脏来源的细胞核未成功构建 ntES是受当前实验条件限制，不能说明其细胞核
本身不具有全能性，C错误；
D、核移植的成功比例受冷冻对不同组织细胞核的损伤程度、操作误差等多种因素影响，不
能仅根据成功率更低就直接判定胰腺细胞分化程度更高，且神经细胞属于高度分化的终末细
胞，分化程度高于多数胰腺细胞，D错误。
20．D
【详解】A、由图可知，突变引物 FP2和 RP1存在互补的碱基序列，若将两对引物置于一个
扩增体系中，则引物 FP2和 RP1会发生互补，影响其与模板结合，故过程①需要把两对引
物分别加入两个扩增体系中以提高扩增效率，A错误；
B、通用引物 FP1与模板链的一端结合，经过一轮复制后，得到一个全长的 DNA和一个含
突变引物 RP1的不等长的 DNA，第二轮复制时，以含突变引物 RP1的链作为模板即可扩增
得到图示等长的片段，即过程①经 2轮 PCR即可得到图中所示 PCR产物，B错误；
C、过程②的产物不都可以完成延伸过程，因为子链只能从引物的 3’端开始延伸，C错误；
D、若过程④得到 16个突变的基因，由于模板链中不含有通用引物，而每条子链合成都需
要引物，则产生的 16个突变基因中共需要消耗 16×2－2=30个通用引物，而需要通用引物
RP2的数量为 30÷2=15个，D正确。
21．B
【详解】A、XhoⅠ的酶切位点在基因 A内部，不能选择，否则会破坏基因 A，A错误；
B、F1位于基因 A的下游，要让基因 A正向插入质粒，F1的 5'端需要带有 HindⅢ的酶切位
点，对应质粒上靠近β-半乳糖苷酶基因的酶切位点； F2位于基因 A的上游，其 5'端需要带
有 XbaⅠ的酶切位点，对应质粒上靠近启动子的酶切位点。 这样切割后，基因 A的两端就
能和质粒切割后的黏性末端互补连接，且保证基因 A的转录方向和质粒上的启动子方向一
致，B正确；
C、F1位于基因A的下游， F2位于基因A的上游，若 F1、F2的 5'-端分别含有AccⅠ、HindⅢ
酶切位点，会导致基因与质粒反接，C错误；
答案第 1页，共 2页
D、PvuⅠ、ScaⅠ的酶切位点位于 Ampr抗性基因内部，切割会破坏抗性标记基因，无法后
续筛选重组质粒，D错误。
22．D
【详解】A、DNA子链的延伸方向为 5'→3'，引物需要结合在目的片段两端，且延伸方向朝
向目的片段内部，因此选择引物 b和引物 c可以扩增目标片段，A正确；
B、PCR使用的酶是耐高温的 Taq DNA聚合酶，该酶的激活确实需要Mg2+，B正确；
C、PCR的三步流程中：变性后温度下降到 50℃左右（复性阶段），引物才会通过碱基互补
配对与单链 DNA结合，C正确；
D、双链等长的目的 DNA片段最早在第 3次循环后才会出现，D错误。
23．C
【详解】A、题干中 X+Y融合蛋白由两个独立基因表达后经自我切除并无痕连接两侧肽链
形成，非直接构建融合基因，构建 X+Y融合蛋白基因，也不存在碱基序列相互影响问题，
A错误；
B、从图中可以看到，内含肽序列并未嵌入 X蛋白的功能结构内，而是在 X蛋白的功能结
构外侧，这样才能保证 X蛋白功能结构的完整，最终融合蛋白功能正常，B错误；
C、从图中过程可以看出，内含肽的 IntAN与 IntA 、IntB 与 IntB 通N过能匹配的结构相互识
别，进而发挥特异性切除和连接作用，C正确；
D、由图可知，内含肽在反应后被完全切除，得到的 X+Y融合蛋白不含内含肽结合部位，
所以再为 X+Y融合蛋白提供“内含肽+某蛋白”，也不能实现自我切除并无痕连接两侧肽链，
不能赋予 X+Y融合蛋白新的结构，D错误。
24．A
【详解】A、PCR反应分为变性、复性、延伸三个阶段，Taq DNA聚合酶是耐高温的 DNA
聚合酶，主要在延伸阶段催化脱氧核苷酸连接合成子链，在延伸过程起作用，A正确；
B、PCR反应缓冲液中添加的是Mg2+用于激活 DNA聚合酶，B错误；
C、DNA聚合酶只能从引物的 3’端开始连接脱氧核苷酸，子链合成方向为 5’→3’，C错误；
D、G和 C之间通过 3个氢键连接，A和 T之间通过 2个氢键连接，引物 GC含量越高，双
链结构越稳定，复性所需温度越高，D错误。
25．A
【详解】A、蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的，也被称为第二代基因工程，A
正确；
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B、蛋白质工程的操作对象是基因，通过改造或合成目的基因间接实现对蛋白质结构的改造，
并不直接改造蛋白质结构，B错误；
C、蛋白质工程既可以改造自然界已有的蛋白质，也可以制造自然界原本不存在的新型蛋白
质，C错误；
D、蛋白质工程最终需要借助基因工程技术，将改造后的目的基因导入受体细胞，使其表达
获得目标蛋白质，离不开基因工程技术，D错误。
26．(1) BCDFG ABCDEFG CEF
(2) 细胞膜 细胞质（细胞质基质） 蛋白质是生命活动的主要承担者，核糖体
是合成蛋白质的场所
(3) ①④ 10
(4)
【详解】（1）A为 T2噬菌体，B为细菌，C为蓝细菌，D为酵母菌，E为植物细胞，F为眼
虫，G为草履虫，图示结构中，属于生命系统结构层次中个体层次的是 BCDFG。病毒、原
核生物和真核生物都能发生基因突变，能发生基因突变的是ABCDEFG；同化作用类型为自
养型的是 CEF。
（2）B~G共有的细胞结构是细胞膜、细胞质、核糖体。细胞都具有核糖体的原因是蛋白质
是生命活动的主要承担者，核糖体是合成蛋白质的场所。
（3）（a）①②是目镜，目镜的镜头越长，其放大倍数越小；③④是物镜，物镜的镜头越长，
其放大倍数越大。图像 2中④的细胞数目最多说明放大倍数最小，应该选择①④。
（b）选择目镜 5×，物镜 10×时，则所观察到的物像是实际物体的 5×10=50倍，此时遍布于
视野中的细胞数目为 160个，若目镜不变，物镜换为 40×，由于放大倍数是放大的长或宽所
以视野缩小的是长乘宽，因此视野中观察到的细胞约为 160÷4÷4=10个。
（4）据图分析，显微镜下小动物先向右下再往右上移动，由于显微镜观察到的物像是倒像，
为了能保证这只小动物始终在视野内，则玻片应先向右下，再往右上移动，移动的轨迹是
。
27．(1) 有无以核膜为界限的细胞核 有氧条件利于酵母菌快速繁殖；防止发酵液
溢出
答案第 1页，共 2页
(2) 选择 碳源、氮源 （酸性）重铬酸钾
(3) 平板划线法（或稀释涂布平板法） 乙酸（醋酸）
【详解】（1）果酒发酵的菌种是酵母菌，属于真核生物；果醋发酵的菌种是醋酸菌，属于原
核生物，二者核心结构差异是有无核膜包被的成形细胞核。装瓶留 1/3空间的作用有两点：
一是预留的氧气可支持酵母菌前期有氧呼吸大量繁殖，增加菌种数量；二是可容纳发酵产生
的 CO2，避免发酵液溢出。
（2）选择培养基能定向筛选目标微生物，因此用于从杂菌中分离酵母菌。微生物生长需要
的基础营养包括水、无机盐、碳源、氮源，黑枸杞果汁可以提供后两类营养。酸性条件下重
铬酸钾与酒精反应会由橙色变为灰绿色，因此用于酒精检测。
（3）平板划线法、稀释涂布平板法都可以通过分离得到单菌落，是纯化微生物的常用接种
方法。醋酸菌为好氧菌，当氧气、糖源都充足时，可直接将糖类分解为醋酸。
28．(1)胰蛋白（胶原蛋白）
(2) 抗体检测 无菌、无毒 95% 空气
(3) 特异性强、灵敏度高，可大量制备 a
(4)溶酶体
【详解】（1）动物细胞间的主要成分为蛋白质，胰蛋白酶或胶原蛋白酶可以分解该类物质，
将动物组织分散为单个细胞，便于后续培养。
（2）细胞融合后得到的杂交瘤细胞种类复杂，需要经过克隆化培养和专一抗体阳性检测，
才能筛选出能分泌所需特异性抗体的杂交瘤细胞；动物细胞体外培养的首要条件是无菌、无
毒的环境，避免杂菌污染和代谢废物毒害细胞；培养所需气体为 95%的空气（提供 O2，满
足细胞有氧呼吸需求）和 5%CO2（维持培养液的 pH稳定）。
（3）单克隆抗体的核心优点是特异性强、灵敏度高，并且可以通过体外培养大量制备；ADC
中 a为抗体部分，负责特异性识别靶细胞（乳腺癌细胞），b为药物部分，因此单克隆抗体
对应 a。
（4）结合图 2可知，ADC通过胞吞进入乳腺癌细胞后，会和溶酶体融合，溶酶体中含有多
种水解酶，可将 ADC裂解，释放出药物发挥作用。
29．(1) Mg2+ 脱氧核苷酸 能与DNA母链的一段碱基序列互补配对 变性
碱基对之间的氢键 让两种引物通过碱基互补配对与两条单链 DNA结合
(2) 农杆菌转化 携带目的基因进入植物细胞，并整合到植物细胞的染色体DNA上
【详解】（1）PCR反应体系应添加含Mg2+的缓冲液、引物、模板、4种脱氧核苷酸和耐高
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温的 DNA聚合酶等。引物是一小段能与 DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。
PCR的变性阶段通过加热破坏 DNA双链碱基对之间的氢键，使双链解开。复性时需要将温
度设置为 50 ℃左右，目的是让两种引物通过碱基互补配对与两条单链 DNA结合。
（2）构建好的基因表达载体常通过农杆菌转化法导入白桦树细胞，农杆菌 Ti质粒上的
T-DNA可将携带的目的基因转移至植物细胞，并整合到植物细胞的染色体DNA上，使目的
基因随受体细胞的 DNA同步复制。农杆菌是一种在土壤中生活的微生物，能在自然条件下
侵染双子叶植物和裸子植物。
30．(1) pH 不会 胰蛋白酶处理时间过长会过度分解细胞表面蛋白质，损伤细
胞
(2) ①④或③④ 将不含 P基因的空质粒导入乳腺癌细胞
(3) 抑制 促进
【详解】（1）动物细胞培养中，CO 的作用是维持培养液正常的 pH，若 CO 不足会导致培
养液 pH异常；乳腺癌细胞是癌细胞，细胞膜上糖蛋白减少，失去了接触抑制特性，因此培
养时不会出现接触抑制；胰蛋白酶处理贴壁细胞分散细胞时，处理时间过长会过度分解细胞
蛋白、损伤细胞，因此需要控制处理时间。
（2）构建重组质粒时，需要保证目的基因插入方向正确：质粒启动子在插入位点左侧，转
录方向从左到右，而 P基因自身转录方向向左，因此需要将 P基因的右端（转录起点侧）
连接靠近启动子的 Bgl II位点，左端连接靠近终止子的 Hind III位点，但因质粒的复制原点
有Hind III的酶切位点，在启动子和复制原点之间还有 BamH I的酶切位点，故只能选择 Bgl
II作为靠近启动子的酶切位点、Spe I作为靠近终止子的酶切位点。根据碱基互补配对，Bgl
II识别序列为 AGATCT，P基因右端序列匹配引物③（5'-AGATCTAGGCAT-3'）；Spe I识别
序列为 ACTAGT，P基因左端序列匹配引物④（5'-ACTAGTCCGTGT-3'），因此选引物③④。
BglⅡ和 BamHⅠ酶切产生的黏性末端相同，扩增 P基因时，也可以在上游引物的 5'端添加
BamHⅠ识别序列，选择引物①和④。
本实验探究 P基因的作用，实验组导入含 P基因的重组质粒，对照组需要排除质粒本身的
影响，因此对照组为转入不含 P基因的空质粒的乳腺癌细胞，其余条件与实验组一致。
（3）启动子甲基化会阻碍 RNA聚合酶与启动子结合，因此 P蛋白诱导 S基因启动子甲基
化，会抑制 S基因的转录；S基因的作用是抑制 DNA损伤修复、抑制肿瘤增殖，S基因表
达被抑制后，DNA损伤修复可以正常进行，因此会促进肿瘤耐药。
31．(1) EcoRⅠ和 SmaⅠ T4 DNA连接酶
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(2) 引物和模板（或 phyA基因） 变性、复性、延伸
(3) 不含组氨酸 导入重组质粒的菌株能合成组氨酸
(4) 使酵母菌快速大量增殖 甲醇
【详解】（1）要避免质粒自身环化和目的基因反向连接，需要选择两种不同限制酶进行双酶
切，且不能破坏目的基因：AvrⅡ的酶切位点位于phyA基因内部，切割会破坏目的基因，SacⅠ
会破坏质粒的启动子，应选用 EcoRⅠ和 SmaⅠ限制酶切割目的基因与质粒；EcoRⅠ切割产
生黏性末端，SmaⅠ切割产生平末端，T4 DNA连接酶既可以连接黏性末端也可以连接平末
端，因此连接效率更高。
（2） PCR反应体系除了 Taq酶、dNTP、缓冲液等，还需要引物和模板（或 phyA基因）；
PCR一次循环的三步为：高温变性（解开 DNA双链）、复性（引物结合模板）、延伸（合成
子链）。
（3）重组质粒携带 HIS4(组氨酸合成基因)，而受体毕赤酵母是组氨酸缺陷型，自身不能合
成组氨酸，因此使用不含组氨酸的培养基筛选：只有成功导入重组质粒的毕赤酵母才能合成
组氨酸，在不含组氨酸的培养基存活，未导入的无法存活，从而初步筛选出工程菌。
（4）根据题干信息，该甲醇诱导型启动子在葡萄糖存在时不驱动转录，仅甲醇为碳源时驱
动转录：因此先添加葡萄糖的目的是让工程菌先大量增殖、积累菌体数量，此时目的基因不
表达，避免能量浪费；之后加入甲醇诱导目的基因表达。
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