河南省濮阳市部分学校2025-2026学年高二下学期6月考试生物试题(扫描版,含答案)

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河南省濮阳市部分学校2025-2026学年高二下学期6月考试生物试题(扫描版,含答案)

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注意事项:
1.答题前,务必将自己的个人信息填写在答题卡上,并将条形码粘贴在答题卡上的指定
位置。
2.回答选择题时,选出每小题答案后,用铅笔把答题卡对应题目的答案标号涂黑。如需
改动,用橡皮擦干净后,再选涂其他答案标号。回答非选择题时,将答案写在答题
卡上。
一、选择题:本题共16小题,每小题3分,共48分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是
符合题目要求的。
1.下列与神经系统有关的叙述,正确的是
A.外周神经系统包括传人神经和传出神经,传出神经包括自主神经系统
B.交感神经活动占优势时,心跳加快、支气管扩张、胃肠蠕动加快
C.自主神经系统不受意识控制,也不受脑中各级中枢的控制
D.自主神经系统均属于脊神经,包括交感神经和副交感神经
2.经皮电刺激(TES)是一种安全的电刺激镇痛技术,原理如图所示。传导兴奋的感觉神经
纤维包括并行的粗纤维和细纤维,粗纤维传导的信号能短暂关闭“闸门”,阻断细纤维向大
脑传递信号。下列叙述不合理的是
粗纤维脊髓背角(“闸门”)
皮肤
脊髓
电刺激
细纤维
肌肉
A.脊髓背角中的神经元主要接收来自传人神经纤维的信号
B.高血钠症患者使用TENS时,其镇痛效果可能有所下降
C.使用TENS镇痛可在肌肉处施加电刺激,阻断痛觉信号
D.粗纤维接收信号后,兴奋传导方向与膜内电流方向一致
3.瘦素是一种激素,能抑制食欲,减少脂肪积累。为研究A、B两种食欲旺盛的小鼠肥胖的原
因,研究人员用减重后的A、B小鼠以及正常小鼠进行连体实验,通过手术使两种小鼠的血
生物学第1页(共8页)
液循环贯通,连体成功后每组鼠均提供充足的食物,实验结果如图所示。下列叙述错误
的是
20
前者体重变化
■后者体重变化
10
-10
A-正常A-AB-正常B-AB-B正常-正常
注:第1组“A-正常”表示A小鼠与正常小鼠连体,A是前者,正常是后者;其余组别同理。
正值代表增加,负值代表减少。
A.据图推测A小鼠肥胖的原因可能是缺乏瘦素
B.相比正常小鼠,B小鼠体内的瘦素含量可能较高
C.连体成功后,两种小鼠内环境中的物质可通过体液运输作用于对方
D.A小鼠切除下丘脑,B小鼠不切除,可探究下丘脑是否接受瘦素信号
4.鲑鱼的幼鱼在淡水中孵化后游入海洋,海水中的鲑鱼生活到性成熟后会返回出生地产卵,
称为洄游。下列叙述正确的是
A.鲑鱼的幼鱼从淡水中人海时,肾小管对水的重吸收会减弱
B.标记重捕法不能用于研究某水域中鲑鱼的种群数量的变化
C.鲑鱼的洄游行为可以促进不同水域间的物质和能量的循环
D.鲑鱼种群数量由出生率和死亡率、迁入率和迁出率直接决定
5.研究人员采用模型预测三江源国家公园的部分有蹄类动物在不同碳排放模式下,两个未来
时期的适宜栖息地变化情况,结果如表所示。下列叙述错误的是
适宜栖息地面积减少比例/%
动物种类
主要取食植物的类型
2041-2060年
2061—2080年
低碳排放
高碳排放
低碳排放
高碳排放
藏原羚
豆科、禾本科、菊科
27.18
37.87
38.68
46.72
藏羚
禾本科、莎草科、豆科
38.82
44.56
43.81
71.65
藏野驴
以禾本科为主
21.37
23.20
40.29
54.37
禾本科、莎草科
野牦牛
25.09
25.16
29.23
36.35
(以莎草科为重要食物)
A.与低碳排放相比,高碳排放下四种有蹄类动物栖息地面积更小
B.相比于其他三种有蹄类动物,高碳排放下藏羚受威胁的程度最大
C.气候变暖可能导致四种有蹄类动物生态位重叠和种间竞争加剧
D.禾本科植物减少对藏野驴的影响最小,而对野牦牛的影响最大
生物学第2页(共8页)1. A
【详解】A、外周神经系统按功能可分为传入神经(感觉神经)和传出神经(运动神经),传出神经包括支配躯体运动的躯体运动神经,以及支配内脏、血管和腺体的内脏运动神经(即自主神经系统),A 正确;
B、交感神经活动占优势时人体处于应急状态,表现为心跳加快、支气管扩张,但胃肠蠕动会受抑制而减慢, B 错误;
C、自主神经系统不受意识直接控制,但会受到大脑皮层、下丘脑、脑干等脑内各级中枢的调控,比如排尿反射的低级中枢在脊髓,可受大脑皮层的调控,C 错误;
D、自主神经系统属于传出神经范畴,脑神经和脊神经中均包含传出神经组分,因此自主神经并不都属于脊神经,D 错误。
2. C
【详解】A、脊髓背角属于神经中枢区域, 粗纤维、细纤维均为传入神经, 将外周的信号传导至脊髓背角的神经元,因此脊髓背角中的神经元主要接收来自传入神经纤维的信号,A 正确;
B、动作电位的形成依赖 内流,高血钠症患者细胞外 浓度高,神经兴奋时动作电位峰值更高,细纤维传导的痛觉信号更强, 更难被阻断, 因此使用 TENS 时镇痛效果可能有所下降, B 正确;
C、由图可知粗纤维分布于皮肤,细纤维连接肌肉,TENS 镇痛需要刺激皮肤处的粗纤维以关闭“闸门”,若在肌肉处施加电刺激,会激活细纤维传导痛觉相关信号,无法阻断痛觉信号,C 错误;
D、兴奋在神经纤维上传导时,兴奋传导方向与膜内局部电流方向一致,与膜外局部电流方向相反,D 正确。 3. D
【详解】A、从"A-正常"组和"A-A"组的实验结果来看, 当 A 小鼠和正常小鼠连体后, 正常小鼠的瘦素可以抑制 A 小鼠的体重增加,而两只 A 小鼠连体后体重都大幅增加,说明 A 小鼠自身缺乏瘦素,无法抑制食欲和体重增加, A 正确;
B、从"B-正常"组和"B-A"组的实验结果来看, B 小鼠和正常小鼠连体后, 正常小鼠体重减少, 说明 B 小鼠体内的瘦素可以作用于正常小鼠,抑制正常小鼠的食欲;B小鼠和 A 小鼠连体后,A 小鼠体重减少,说明 B 小鼠体内的瘦素可以作用于 A 小鼠,抑制 A 小鼠的体重增加。由此推测 B 小鼠体内的瘦素含量可能较高, 但自身对瘦素不敏感,B 正确;
C、连体实验使两种小鼠的血液循环贯通,内环境中的物质(如瘦素)可以通过血液循环(体液运输)作用于对方, C 正确;
D、要探究下丘脑是否接受瘦素信号,应该选择对瘦素敏感的小鼠,而 A 小鼠缺乏瘦素,无法确定其下丘脑是否接受瘦素信号。应该选择正常小鼠或 B 小鼠(体内瘦素含量较高)进行实验,切除其中一只小鼠的下丘脑,另一只不切除,观察体重变化,从而探究下丘脑是否接受瘦素信号, D 错误。
4. D
【详解】A、鲑鱼幼鱼从淡水进入高渗透压的海水时, 机体易失水, 为减少水分排出, 肾小管对水的重吸收会增强, 而非减弱, A 错误;
B、标记重捕法适用于活动能力强、活动范围大的动物种群密度调查, 鲑鱼符合该特点, 可用于研究某水域中鲑鱼的种群数量变化, B 错误;
C、生态系统中能量是单向流动、逐级递减的, 不存在循环的特点, 因此鲑鱼洄游只能促进物质循环, 无法促进能量循环, 错误;
D、出生率和死亡率、迁入率和迁出率是种群数量的直接决定因素,鲑鱼洄游过程中存在迁入、迁出行为, 其种群数量由上述四个因素直接决定, D 正确。
5. D
【详解】A、对比表格中同时间段低碳排放和高碳排放的栖息地减少比例, 高碳排放下四种动物适宜栖息地减少比例均更高, 即剩余适宜栖息地面积更小, A 正确;
B、高碳排放模式下 2061—2080 年藏羚适宜栖息地减少比例达 71.65%,为四种动物最高值,说明藏羚受威胁程度最大, B 正确;
C、气候变暖导致四种动物适宜栖息地均收缩,且四种动物的食物来源存在重叠(均取食禾本科等植物), 会导致动物向剩余适宜栖息地集中,生态位重叠增加,种间竞争加剧,C 正确;
D、藏野驴主要取食植物为禾本科,野牦牛除禾本科外还以莎草科为重要食物,因此禾本科减少对藏野驴的影响更大,对野牦牛的影响相对较小,D 错误。
6. C
【详解】A、非密度制约因素的作用强度与种群密度无关, 干旱属于气候类因素, 其对农作物生长的影响不受农作物种群密度的影响,属于非密度制约因素,A 正确;
B、群落的垂直结构是指同一群落内部不同物种在垂直方向上的分层现象,山顶、山腰属于不同的地理区域, 分布的是不同的生物群落, 不属于同一群落的垂直结构, B 正确;
C、群落演替是指随着时间推移,一个群落被另一个群落替代的过程,山顶树林一年中不同时间生物种类和数量的差异属于季节性的季相波动, 不属于群落演替, 更不属于次生演替, C 错误;
D、治理过程中因地制宜适配植被、生产模式,兼顾生物与环境的适应性,遵循了生态工程的协调原理;同时兼顾生态效益、经济效益和社会效益, 遵循了生态工程的整体原理, D 正确。
7. B
【详解】A、能量流动逐级递减, 营养级越高, 可利用的能量越少, 生物量通常越低。甲的生物量占比最高, 属于第一营养级(生产者),是最低营养级,A 错误;
B、根据生物量占比判断,营养级从低到高为:甲(第一营养级,生产者) > 丙、丁(第二营养级,初级消费者)>乙(第三营养级),第三营养级属于次级消费者,B 正确;
C、丙和丁的生物量接近,属于同一营养级,因此可形成甲→丙→乙、甲→丁→乙至少两条食物链,并非一条食物链, C 错误;
D、丙和丁同属第二营养级,二者为竞争关系,不存在捕食关系,因此丙同化的能量不会流向丁,D 错误。 8. B
【详解】A、流入自然生态系统的总能量是该生态系统全部生产者固定的太阳能, 生产者除草本植物外, 还包含地衣、光合自养微生物等其他类群, 因此总能量不只是草本植物固定的太阳能, A 错误;
B、高寒草甸分布在高原、高山区域,空气稀薄、氧含量低,长期栖息在此的啮齿动物经过自然选择,普遍具备低氧耐受的特性, B 正确;
C、取食花蜜的昆虫依靠活的植物制造的有机物获取能量,属于消费者; 分解者是营腐生生活的生物,以动植物残体、排泄物等非活体有机物为能量来源, C 错误;
D、高寒草甸具有寒冷、强风、生长期短、土壤浅薄等环境特点,不适宜高大乔木生长,盲目迁入高大乔木不仅无法存活,还会破坏原有生态系统的稳定性,D 错误。
9. A
【详解】A、内分泌腺是动物特有的结构, 植物不存在内分泌腺, 茉莉酸甲酯是由植物的特定部位产生的, A 错误;
B、茉莉酸甲酯是可传递信息的化学物质, 属于生态系统的化学信息, B 正确;
C、菌丝系统能够传递茉莉酸甲酯,帮助相邻大豆产生防御物质抑制蚜虫取食,因此对大豆有利、对蚜虫不利, C 正确;
D、题述信息传递可调节大豆和蚜虫的种间关系,有助于维持生态系统的稳定,D 正确。
10. D
【详解】A、修复后的湿地生态系统物种丰富度升高, 营养结构更复杂, 自我调节能力更强, 因此抵抗力稳定性比修复前增强, A 正确;
B、移除富营养化沉积物可降低水体中 N、P 等污染物的含量,利于本土生物生存繁殖,能够在一定程度上恢复湿地的自生功能(即生态系统自我维持、自我调节的功能),B 正确;
C、水生植物可通过光合作用释放氧气,提升水体溶氧量,为需氧菌代谢提供充足氧气,进而促进需氧菌对污染物的分解, C 正确;
D、湿地蓄洪防旱的生态调节功能属于生物多样性的间接价值,而湿地作为重要景观的旅游观赏价值属于生物多样性的直接价值, 并非都体现间接价值, D 错误。
11. A
【详解】A、配制培养基的标准流程为计算 称量 溶化 调节 灭菌 倒平板,先调 再灭菌可避免调 pH 操作引入杂菌污染,A 正确;
B、尿素被脲酶分解为 和 ,尿素分解菌为异养生物,碳源来自培养基中的葡萄糖,分解产物无法为其提供碳源, 尿素仅作为氮源, B 错误;
C、平板划线法不能用于微生物计数,对尿素分解菌分离计数需采用稀释涂布平板法,梯度稀释后进行涂布接种而非划线, C 错误;
D、稀释涂布平板法计数时,应选择菌落数在 30~300 区间的平板统计, D 错误。
12. B
【详解】A、滚管培养采用密封试管, 试管内氧气含量有限, 仅适合厌氧型或兼性厌氧型微生物培养, 不适用于需氧型微生物的分离纯化, A 错误;
B、稀释涂布平板法需要开盖进行涂布操作,易接触外界环境中的杂菌,而滚管培养仅在接种时短暂开口, 后续培养全程在密封试管内进行,可减少杂菌污染的风险,B 正确;
C、乳酸菌无法分解利用纤维素,其培养基不需要添加纤维素,通常添加葡萄糖、维生素等乳酸菌可利用的营养物质, C 错误;
D、培养基含有水分和遇高温易分解的营养成分,不能使用干热灭菌,需采用高压蒸汽灭菌,仅玻璃材质的培养皿、试管可使用干热灭菌,D 错误。
13. A
【详解】A、紫外线属于物理诱变因子, 酵母菌为真核生物, 含有染色体, 紫外线处理既可以诱发基因突变, 也可能引发染色体变异,A 正确;
B、酵母菌是真菌,细胞壁主要成分为几丁质,植物细胞壁的主要成分才是纤维素和果胶,因此不能用纤维素酶或果胶酶去除酵母菌细胞壁,B 错误;
C、原生质体融合依赖细胞膜的融合,依据的原理是细胞膜的流动性,不是选择透过性,C 错误;
D、融合前的紫外线处理可能会损伤部分遗传物质,且融合后的细胞在发育过程中也可能丢失部分染色体, 因此新型酵母菌不具有两种酵母完整的遗传信息,D 错误。
14. B
【详解】A、过程①为供体细胞与去核卵母细胞的融合, 电融合法是诱导动物细胞融合的常用方法之一, A 正确;
B、过程②为重构胚的激活和早期胚胎培养,目的是让重构胚通过有丝分裂发育为早期胚胎,重构胚不会进行减数分裂, B 错误;
C、DNA 甲基化会抑制相关基因的表达,过程③注射去甲基化酶会降低相关基因的甲基化水平,引起相关基因的表达水平发生改变, 从而提高克隆成功率, C 正确;
D、过程④为胚胎移植,哺乳动物的胚胎移植一般选择发育到桑葚胚或囊胚期的胚胎,D 正确。
15. C
【详解】A、鸡血细胞含有细胞核, 可作为实验材料, 但猪是哺乳动物, 其成熟红细胞无核和众多细胞器, 几乎不含 DNA,不能作为提取 DNA 的材料,A 错误;
B、对研磨液离心的目的是使细胞碎片等不溶性杂质沉淀,DNA 会溶解在上清液中,该操作不能加速 DNA 沉淀,B错误;
C、DNA 不溶于冷却的 95%酒精,而蛋白质等杂质可溶于酒精,向上清液中加入冷却的 95%酒精并搅拌, 可析出 DNA,以此获得粗提取的 DNA,C 正确;
D、沸水浴条件下,DNA 与二苯胺试剂反应呈现蓝色,紫色是蛋白质与双缩脲试剂反应的特征颜色,D 错误。
16. C
【详解】根据图可知, 氨基酸序列片段与抗体无反应,而 氨基酸序列片段与抗体有反应,说明该单克隆抗体识别的区域应该包括 62~86 位氨基酸。75~111 氨基酸序列片段与抗体无反应,而 62~111 氨基酸序列片段与抗体有反应,说明该单克隆抗体识别的区域还包括 62~74 位氨基酸。综上分析可知,该单克隆抗体识别抗原(A 蛋白)的区域大概为 62~74 位氨基酸,C 正确,ABD 错误。
17. (1) 胰岛素 组织细胞加速摄取、利用和储存葡萄糖
(2) 自身免疫 免疫自稳
(3) 作为对照 血糖浓度、胰岛B 细胞存活率 改造后的胰岛 B 细胞过表达 PDL1,抑制了 T 细胞的活化,减少了免疫排斥,同时小球藻可通过光合作用为移植部位供氧,提高了胰岛B细胞的存活率 【详解】(1)正常血糖升高时,胰岛B细胞分泌胰岛素增加,胰岛素通过两个方面调节血糖:一方面促进组织细胞加速摄取、利用和储存葡萄糖,另一方面抑制肝糖原分解和非糖物质转化为葡萄糖,减少血糖来源,从而降低血糖。
(2)据题干信息可知,人体感染某种细菌后,该细菌中的蛋白可以引发 T 细胞持续攻击胰岛B 细胞,导致 1 型糖尿病的发生,属于自身免疫病,是由于免疫系统的免疫自稳功能出现异常导致的,因为免疫自稳可以清除衰老或损伤的细胞,进行自身调节,维持内环境稳态的功能,若功能异常时会攻击自身正常细胞,引发自身免疫病。
(3)甲组为未移植人工胰岛的糖尿病模型组,作用是作为空白对照,用于对比不同人工胰岛的治疗效果; 评价人工胰岛的治疗效果,可以观测血糖浓度、胰岛素浓度、胰岛B细胞存活率、小鼠存活时间等指标。 结合题干信息,丁同时结合两种优化策略:改造后的胰岛 B 细胞 PD-L1 过表达抑制了 T 细胞活化,降低了机体对胰岛B细胞的免疫排斥;同时小球藻通过光合作用产氧,缓解了移植部位缺氧的问题,共同提高了胰岛B细胞的存活率和分泌胰岛素的功能,因此降血糖效果最好。
18. (1) 红外触发相机 栖息和繁衍 协同进化
(2) 遗传多样性和物种多样性 物理
(3) 白昼 繁殖 繁殖季人类活动与红腹锦鸡活动节律的重叠面积更大 严格控制保护区内
人类活动的时间,在红腹锦鸡活动高峰时段减少人类进入保护区的频次
【详解】(1)红外触发相机无惊扰、可全天候监测动物活动节律,同时能通过捕获影像计数估算种群密度, 适合红腹锦鸡这类野生鸟类调查;自然保护区为保护物种提供食物、空间、繁殖场所等栖息和繁衍的适宜环境。群落中每种生物占据相对稳定的生态位, 是物种之间、生物与环境之间协同进化的结果。
(2)生物多样性分为基因多样性、物种多样性、生态系统多样性三个层次,保护红腹锦鸡这个物种本身, 既保护了该物种(物种多样性),也保存了其种群内的基因库(遗传多样性);生态系统的信息中,声音属于物理信息, 因此噪音属于物理信息。
(3)从图中可以看出,红腹锦鸡的相对活跃度在 6:00~18:00(白昼)远高于夜间,因此主要在白昼活动; 题干说明阴影代表人类活动与红腹锦鸡活动的重叠,对比两图可知繁殖季人类活动与红腹锦鸡活动节律的重叠面积更大, 说明人类活动对繁殖季影响更大; 为避免人类活动影响红腹锦鸡的活动节律, 可通过严格控制保护区内人类活动的时间,在红腹锦鸡活动高峰时段减少人类进入保护区的频次。
19. (1) 组成成分 物质循环和能量流动 温度
(2) 生产者的光合作用 含碳有机物 动植物的呼吸作用和分解者的分解作用
(3) 乔木层的生物量更大,且乔木寿命长,树干等器官中储存的碳更多,分解速率慢 灌木林和阔叶林的温度、湿度条件更适合分解者生存, 枯落物的分解速率更快, 因此枯落物层储存的碳更少
【详解】(1)生态系统的结构包含生态系统组成成分和营养结构(食物链/网)两部分,研究生态系统结构需先明确其组成成分和食物链 (网); 食物链和食物网是生态系统中物质循环和能量流动的渠道; 随海拔升高温度下降明显, 温度是决定不同海拔植物分布的主要非生物因素。
(2)碳进入生物群落最主要的途径是生产者的光合作用; 碳在生物群落内部始终以含碳有机物的形式传递; 生物群落中的碳最终通过生产者、消费者的呼吸作用和分解者的分解作用,以 形式返回大气。
(3)① 在阔叶林和针叶林中,乔木层的碳密度明显高于灌木层和草本层,其原因可能是乔木层植株体型更大、生物量远高于灌木与草本;乔木生命周期更长,树干、木质器官储存大量碳,且木质组织分解速度缓慢, 因此单位面积储碳量 (碳密度) 显著更高。
②碳密度代表单位面积现存储存的碳总量,枯落物层的碳是未分解有机物中储存的碳,相比于针叶林,灌木林和阔叶林枯落物明显增多, 但枯落物层的碳密度反而更少, 在温带环境中, 灌木林和阔叶林的温度、 湿度条件更适合分解者生存, 枯落物的分解速率更快, 因此枯落物层储存的碳更少, 碳密度低于针叶林的枯落物层。
20. ( 1 )从上到下依次是 A、F、D、H、E、I(E 和 I 位置可以互换)
(2) PD-L1 H 聚乙二醇(PEG)融合法、灭活病毒诱导法 选择
(3)补充营养物质,清除代谢废物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害 (4)特异性强,能将海兔毒素定向输送到肿瘤细胞,减少对正常细胞的损伤;药效更高,毒副作用更小
【详解】(1)单克隆抗体制备的流程为:给小鼠注射特定抗原(B) 获得已免疫的 B 淋巴细胞(A),同时培养骨髓瘤细胞(C) 得到骨髓瘤细胞(F) 诱导两种细胞融合获得杂交瘤细胞(D) 通过抗体检测得到能产生目标抗体的阳性杂交瘤细胞(H)→对阳性细胞分别进行体外培养(E)或小鼠腹腔体内培养
(I) 最终获得单克隆抗体 (G),因此从上到下依次是 (E 和 位置可以互换)。
(2)本实验目的是制备抗 PD-L1 的单克隆抗体,因此注射的特定抗原为 PD-L1;过程 H 筛选阳性细胞时, 需要通过抗原-抗体杂交检测抗体, 也会用到 PD-L1; 动物细胞融合常用诱导方法, 除电融合法外, 还有聚乙二醇融合法、灭活病毒诱导法; 筛选杂交瘤细胞需要使用选择培养基, 只有杂交瘤细胞可在该培养基生长。
(3)动物细胞体外培养时,定期更换培养液,一方面可以清除细胞代谢积累的废物,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害,另一方面可以补充细胞消耗的营养物质,保证细胞正常增殖。
(4)抗体-药物耦联物利用单克隆抗体特异性识别抗原的特点,相比单独使用海兔毒素,优点是特异性强, 能将海兔毒素定向作用于肿瘤细胞,减少对正常细胞的损伤;药效更高,毒副作用更小。
21. (1) 耐高温的 DNA 聚合酶 延伸
(2) 互补 过程I形成的杂合链的互补区段可以作为引物,DNA 聚合酶能够以此为起点延伸合成融合基因
(3) TCT 右端
(4) 将工程菌 E 破碎后得到粗提取液,用纤维素材料进行吸附,然后处理材料使 CBD 与纤维素分离, 收集洗脱液即可得到纯净的乳糖酶
【详解】(1)PCR 技术是在体外模拟 DNA 复制的过程, 该过程中需要使用耐高温的 DNA 聚合酶(Taq 酶), 因为 PCR 的变性步骤温度高达 90-95°C, 普通的 DNA 聚合酶会失活, 而耐高温的 DNA 聚合酶可以在高温环境下保持活性。耐高温的 DNA 聚合酶主要在 PCR 的延伸过程中起作用: 在退火步骤引物与模板链结合后, 延伸阶段中 DNA 聚合酶会以引物为起点, 按照碱基互补配对原则合成新的 DNA 链。
(2)为了方便构建融合基因,F2 和 R1 引物设计时需要引入一定长度的互补序列,这样在过程I中,LacZ 基因和CBD 基因扩增出来的片段就能通过互补序列结合在一起, 为后续形成融合基因做准备。过程II不需要添加引物的原因是过程I形成的杂合链的互补区段可以作为引物, DNA 聚合酶能够以此为起点延伸合成融合基因:过程I得到的两个基因片段通过互补序列形成了部分双链结构,这个结构可以直接作为 DNA 聚合酶的延伸起点,从而合成完整的 LacZ-CBD 融合基因。
(3)题目要求不改变其氨基酸序列,丝氨酸的密码子为 UCC、UCG,根据碱基互补配对原则,密码子 UCC 对应的 DNA 模板链碱基是 AGG, 编码链是 TCC; 密码子 UCG 对应的 DNA 模板链是 AGC, 编码链是 TCG。所以可以将编码丝氨酸的碱基 TCC 替换成 TCT (TCT 对应的密码子是 UCA, 也是丝氨酸的密码子, 不会改变氨基酸序列)。根据转录的方向判断,转录是从启动子向终止子方向进行,图 2 中质粒的转录方向是从启动子开始,向右进行,所以 EcoRI的识别序列应添加在 LacZ-CBD 融合基因的右端,这样才能保证融合基因按照正确的方向转录,使其正常表达。
(4)将构建的重组质粒导入大肠杆菌前,一般先用 处理大肠杆菌细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA 分子的状态, 这种细胞称为感受态细胞。根据 CBD 能吸附在纤维素材料表面, 且结合纤维素后会破坏 CBD 和乳糖酶间的连接, 释放活性乳糖酶的特性, 获得纯净乳糖酶的方案: 将工程菌 E 破碎后得到粗提取液,用纤维素材料进行吸附,然后处理材料使 CBD 与纤维素分离,收集洗脱液即可得到纯净的乳糖酶。原理是粗提取液中的融合蛋白会通过 CBD 吸附在纤维素材料上,其他杂质不会被吸附,然后破坏 CBD 与纤维素的连接, 乳糖酶就会被释放到洗脱液中, 从而得到纯净的乳糖酶。

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