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广东省南澳县南澳中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．食醋和黄酒是我国传统的日常调味品，均通过发酵技术生产。下列叙述错误的是（　　）
A．醋酸的发酵是好氧发酵，而酒精的发酵是厌氧发酵
B．以谷物为原料酿造食醋和黄酒时，伴有pH下降和气体产生
C．食醋和黄酒发酵过程中，微生物繁殖越快发酵产物产率越高
D．使用天然混合菌种发酵往往会造成传统发酵食品的品质不一
2．豆瓣酱是我国地方特色调味品，生产豆瓣酱的方法是先将蚕豆瓣制备成豆瓣曲（如图），再添加调味料进一步发酵。下列叙述错误的是（ ）
A．沸水漂烫能杀死蚕豆细胞，减少营养物质消耗
B．面粉可为菌种的快速繁殖和生长提供营养
C．菌种中含有产蛋白酶和淀粉酶的微生物
D．豆瓣曲的制备主要是利用厌氧微生物发酵
3．细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形成的。利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细菌气溶胶的浓度（菌落数/m ）。下列叙述错误的是（ ）
A．采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理
B．细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置
C．同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值
D．稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高
4．科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素（C22H23ClN2O8）能力强的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是（ ）
A．以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基
B．逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株
C．配制选择培养基时，需确保pH满足实验要求
D．用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面
5．兰州百合栽培过程中易受病毒侵染，造成品质退化。某研究小组尝试通过组织培养技术获得脱毒苗，操作流程如下图。下列叙述正确的是（ ）

A．①为脱分化过程，1号培养基中的愈伤组织是排列规则的薄壁组织团块
B．②为再分化过程，愈伤组织细胞分化时可能会发生基因突变或基因重组
C．3号培养基用于诱导生根，其细胞分裂素浓度与生长素浓度的比值大于1
D．百合分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，可以作为该研究中的外植体
6．研究人员用花椰菜（BB，2n=18）根与黑芥（CC，2n=16）叶片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有33条染色体。下列叙述正确的是（ ）
A．两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞
B．再生植株N的形成证明杂种细胞仍具有全能性
C．花椰菜和黑芥的原生质体能融合，证明两种植物间不存在生殖隔离
D．植株N的B组和C组染色体不能正常联会配对，无法产生可育配子
7．将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及（ ）
A．制备细胞悬液
B．置于等适宜条件下培养
C．离心收集细胞
D．用胰蛋白酶消化支架后分离片层
8．肿瘤坏死因子α（TNF-α）是一种细胞因子，高浓度时可以引发疾病。研究者利用细胞工程技术制备了TNF-α的单克隆抗体，用于治疗由TNF-α引发的疾病，制备流程如下图。下列叙述正确的是（　　）
A．①是从小鼠的血液中获得的骨髓瘤细胞
B．②含未融合细胞、同种核及异种核融合细胞
C．③需用特定培养基筛选得到大量的杂交瘤细胞
D．④需在体外或小鼠腹腔进行克隆化培养和抗体检测
9．研究显示，约70%的小鼠体细胞核移植胚胎未能成功发育至囊胚期，且仅有约2%的胚胎移植到代孕母鼠后可正常发育。下列叙述错误的是（ ）
A．体细胞核进入去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚
B．移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态
C．胚胎移植到代孕母鼠后成活率低，可能是早期胚胎未能及时从滋养层内孵化
D．为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植
10．科研人员通过对绵羊受精卵进行基因编辑和胚胎移植等操作，获得了羊毛长度显著长于对照组的优良品系。下列叙述错误的是（ ）
A．为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射促性腺激素进行超数排卵处理
B．为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致，需进行同期发情处理
C．受精卵发育至桑葚胚阶段，细胞数量和胚胎总体积均增加
D．对照组绵羊的选择需考虑年龄、性别等无关变量的影响
11．琼脂糖凝胶电泳常用于核酸样品的分析，样品1～4的电泳结果如图所示（“+”“-”分别代表电泳槽的阳极和阴极）。已知样品1和2中的DNA分子分别是甲和乙，甲只有限制酶R的一个酶切位点，样品3和4中有一个样品是甲的酶切产物。下列叙述错误的是（ ）
A．配制琼脂糖凝胶时需选用适当的缓冲溶液
B．该实验条件下甲、乙两种DNA分子均带负电荷
C．甲、乙两种DNA分子所含碱基对的数量可能不同
D．据图推测样品3可能是甲被酶R完全酶切后的产物
12．利用蛋白质工程对干扰素进行改造，可在一定条件下延长其保存时间。下列叙述错误的是 （ ）
A．天然蛋白质合成的过程按照中心法则进行，蛋白质工程与之相反
B．利用蛋白质工程对干扰素进行改造时，操作对象是干扰素
C．经改造后的干扰素基因能通过工程菌的繁殖实现遗传
D．对干扰素的改造遇到的难题之一是干扰素的高级结构十分复杂
13．深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下，该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜，实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是（ ）
组别 压强 纤维素 淀粉 菌落
① 常压 - + -
② 常压 + - -
③ 高压 - + -
④ 高压 + - +
注： “+”表示有；“一”表示无
A．可用平板划线法对该菌计数
B．制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌
C．由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在常压下生长
D．由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长
14．水母雪莲是我国的一种名贵药材，主要活性成分为次生代谢产物黄酮。水母雪莲生长缓慢，长期的掠夺性采挖导致该药材资源严重匮乏。研究人员开展了悬浮培养水母雪莲细胞合成黄酮的工程技术研究，结果如表所示。下列叙述错误的是（　　）
转速（r/min） 55 65 75 85
相对生长速率 0.21 0.25 0.26 0.25
细胞干重（g/L） 7.5 9.7 11.4 9.5
黄酮产量（g/L） 0.2 0.27 0.32 0.25
A．黄酮产量与细胞干重呈正相关
B．黄酮是水母雪莲细胞生存和生长所必需的
C．氧气供给对于水母雪莲细胞生长、分裂和代谢是必需的
D．转速为75r/min时既利于细胞分裂，又利于黄酮的积累
15．研究者探究不同浓度的雌激素甲对牛的卵母细胞和受精卵在体外发育的影响，实验结果如下表所示。根据实验数据，下列叙述错误的是（ ）
甲的浓度（μg/mL） 卵母细胞（个） 第一极体排出（个） 成熟率（%） 卵裂数（个） 卵裂率（％）
0 106 70 66.0 28 40.0
1 120 79 65.8 46 58.2
10 113 53 46.9 15 28.3
100 112 48 42.8 5 10.4
A．实验结果说明甲抑制卵裂过程
B．甲浓度过高抑制第一极体的排出
C．添加1μg/mL的甲可提高受精后胚胎发育能力
D．本实验中，以第一极体的排出作为卵母细胞成熟的判断标准
16．下列关于“DNA 粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（ ）
A．实验中如果将研磨液更换为蒸馏水，DNA提取的效率会降低
B．利用DNA和蛋白质在酒精中的溶解度差异，可初步分离DNA
C．DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，该原理可用于纯化DNA粗提物
D．将溶解的DNA粗提物与二苯胺试剂反应，可检测溶液中是否含有蛋白质杂质
二、解答题
17．刺梨是一种落叶灌木，其果实富含维生素C、维生素P和超氧化物歧化酶（SOD），维生素C含量是苹果的800倍，被称为“维生素C大王”。为提高刺梨的经济价值，研究人员以刺梨果实为原料制备刺梨果醋，工艺流程如下：将新鲜成熟的刺梨果清洗干净→切块、榨汁、过滤、酶解→加入白砂糖并加入活化酵母菌→Ⅰ阶段发酵→直接加入一定量活性醋酸菌→Ⅱ阶段乙酸发酵→处理→装罐→刺梨果醋。回答下列问题：
(1)Ⅰ阶段发酵过程中，需定期排气的原因是______________。判断Ⅰ阶段发酵结束的主要指标是____________。
(2)Ⅱ阶段乙酸发酵中，每日2次彻底搅拌发酵液，搅拌的目的是_____________________________________________________。
(3)实验中，在酒精发酵第0、7 d及乙酸发酵第3~7 d取发酵样液，分别命名为原汁、果酒、Ⅱ-3 d、Ⅱ-4 d、Ⅱ-5 d、Ⅱ-6 d、Ⅱ-7 d。如图为不同发酵阶段刺梨发酵液的总酸含量和pH变化。果酒发酵过程中的pH变化较小，这是因为______________________，在乙酸发酵0~3 d中，总酸含量增加幅度小，可能原因是____________________。
18．某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中，需要表达N蛋白胞外段，制备相应的单克隆抗体，增加其对N蛋白胞外段特异性结合的能力。
Ⅰ.N蛋白胞外段抗原制备，流程如图1
(1)构建重组慢病毒质粒时，选用氨苄青霉素抗性基因作为标记基因，目的是____________。
Ⅱ.N蛋白胞外段单克隆抗体制备，流程如图2
(2)用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后，取小鼠脾组织用________酶处理，制成细胞悬液，置于含有混合气体的______中培养，离心收集小鼠的B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞进行融合。
(3)用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行____培养。用_______技术检测每孔中的抗体，筛选既能产生N蛋白胞外段抗体，又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株，经体外扩大培养，收集细胞培养液，提取单克隆抗体。
(4)利用N蛋白胞外段抗体与药物结合，形成_________，实现特异性治疗。
19．科学家设想将HIV的壳体蛋白（CA）基因与Ti质粒连接构建重组载体转染到枸杞细胞内，利用愈伤组织作为反应器生产HIV的壳体蛋白作为疫苗，以研究CA疫苗对人体的免疫应答。建立愈伤组织反应器的主要过程如图所示。回答下列问题：
(1)①是___________过程，进行①过程操作的目的是_____________________________________________________________________________________________。
(2)选用Ti质粒作为HIV的CA基因的载体，原因是____________________________________________________________________________________。
(3)切割CA-DNA和Ti质粒所用的限制酶是___________________，不选用其他两种限制酶的原因是_____________________________________________________。
(4)为了筛选出含重组载体的农杆菌，在选择培养基上添加氨苄青霉素，一段时间后，培养基上形成的菌落___________（填“一定”或“不一定”）含有重组载体，原因是_________________________________________。
三、实验题
20．为在大肠杆菌中表达酶X，某同学将编码酶X的基因（目的基因）插入质粒P0，构建重组质粒Px，并转入大肠杆菌。该同学设计引物用PCR方法验证重组质粒构建成功（引物1~4结合位置如图所示，→表示引物5＇→3＇方向）。回答下列问题：
(1)PCR是根据DNA复制原理在体外扩增DNA的技术。在细胞中DNA复制时解开双链的酶是________，而PCR过程中解开双链的方法是________。
(2)PCR过程中，因参与合成反应、不断消耗而浓度下降的组分有________。
(3)该同学进行PCR实验时，所用模板与引物见下表。实验中①和④的作用是：________；②无扩增产物，原因是________；③、⑤和⑥有扩增产物，扩增出的DNA产物分别是________。
管号 ① ② ③ ④ ⑤ ⑥
模板 无 P0 Px 无 P0 Px
引物对 引物1和引物2 引物3和引物4
(4)设计实验验证大肠杆菌表达的酶X有活性，简要写出实验思路和预期结果________。
四、解答题
21．如图是构建转基因大肠杆菌生产胰岛素所用的质粒和目的基因的结构。β-半乳糖苷酶在X-gal和IPTG存在的情况下，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。请结合图示完善下列操作步骤：
(1)目的基因的筛选与获取：可以从______________（填“胰岛A细胞”或“胰岛B细胞”）中提取mRNA，逆转录获取cDNA．
(2)基因表达载体的构建：为使目的基因与载体正确连接，最好选用限制酶___________________切割质粒。为保证目的基因能和质粒连接，扩增目的基因时需在引物的______端添加相应序列，左侧引物上连接的序列是__________________。
(3)将目的基因导入受体细胞：将重组DNA导入大肠杆菌细胞之前，需要用_________处理大肠杆菌。
(4)目的基因的检测与鉴定：将目的基因导入受体细胞后，用选择培养基进行筛选，培养基中除大肠杆菌必需的营养物质外，还应加入___________________________。后续还需要进行分子水平的检测和个体水平的鉴定，其中检测目的基因是否完成表达的方法是__________________。
(5)从基因改造角度分析，利用转基因技术生产胰岛素相比传统提取方法有哪些优点：___________________________________________________________________________。
试卷第1页，共3页
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《广东省南澳县南澳中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题》参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 C D D D D B D B C C
题号 11 12 13 14 15 16
答案 D B D B A D
1．C
2．D
3．D
4．D
5．D
6．B
7．D
8．B
9．C
10．C
11．D
12．B
13．D
14．B
15．A
16．D
17．(1) 酒精发酵过程中会产生CO2(，因此需要定期排气) 糖度不再变化(或酒精不再增加)
(2)增加发酵液的溶解氧，保证醋酸菌的活性；(让发酵液与醋酸菌充分接触，)使发酵更充分
(3) 酵母菌主导的发酵主要代谢产物是乙醇，产酸性物质很少 醋酸菌适应发酵基质较为缓慢，此时产乙酸能力低
18．(1)便于重组DNA分子的筛选
(2) 胰蛋白酶或胶原蛋白 CO2培养箱
(3) 克隆化 抗原—抗体杂交
(4)抗体—药物偶联物(ADC)
19．(1) 逆转录 将单链RNA逆转录为双链DNA，获得CA基因的DNA片段以便与Ti质粒连接成重组载体
(2)Ti质粒的T-DNA能将目的基因转移并整合到被侵染植物细胞的染色体DNA上
(3) PatⅠ和BamHⅠ EcoRⅠ会破坏目的基因，NotⅠ的切割位点不在T-DNA中
(4) 不一定 (未导入目的基因的)Ti质粒和重组载体均含有氨苄青霉素抗性基因
20．(1) 解旋酶 高温变性
(2)引物、脱氧核苷三磷酸
(3) 作为对照（或答:鉴定反应体系是否有模板污染） P0不含与引物1和引物2互补的碱基序列 目的基因、质粒片段、含目的基因和部分质粒序列的片段
(4)提取酶X，催化相应底物（反应物）的反应，检测是否有产物生成。有产物生成，则证明酶X有活性
21．(1)胰岛B细胞
(2) XhoⅠ和MunⅠ 5' 5'-CTCGAG-3'
(3)Ca2+
(4) X-gal、IPTG、氨苄青霉素 抗原—抗体杂交
(5)能大规模培养，持续、高效地生产胰岛素;可降低生产成本;能保证胰岛素的纯度和质量
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