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2026-2027学年高二下学期生物人教版选择性必修三
1.2微生物的培养技术及应用 模拟练习题
姓名：_____________ 学号：_____________ 班级：_____________
一、单项选择题（共8小题）
1 . 消毒和灭菌是培养基配制时的必要措施。下列关于培养基配制的叙述，错误的是（　　）
A．对操作者的衣着和手进行消毒和灭菌处理
B．灭菌和消毒对微生物的杀伤程度是不同的
C．培养基中营养物质浓度过高可能不利于微生物的生长
D．通常用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌
2 . LB培养基是微生物学实验室中最常用的基础培养基之一，广泛用于大肠杆菌等细菌的培养，其配方如表所示。下列叙述错误的是（ ）
成分 胰蛋白胨 酵母提取物 氯化钠 琼脂
含量（g/L） 10.0 5.0 10.0 15.0
A．该培养基属于固体培养基
B．一般培养基应先进行灭菌处理再调节pH
C．胰蛋白胨可以提供碳源、氮源和维生素等
D．倒平板后，待培养基冷却凝固后，将培养基倒置
3 . 民间俗语“清明蔗，毒过蛇”，其实这句俗语并非指所有甘蔗都有毒 ，而是特指 霉变的甘蔗 。某兴趣小组为了弄清楚霉变的甘蔗中含有什么霉菌，要进行实验培养，首先要对实验室进行严格的灭菌和消毒。下列说法正确的是（　　）
A．消毒和灭菌仅是为了获得纯净的微生物培养物
B．无菌操作时，要对实验操作的空间、操作者的衣物和手进行清洁和消毒
C．灭菌和消毒均可以杀死环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子
D．灼烧法灭菌的对象是金属器具，不能是玻璃器具
4 . 防止杂菌污染获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提。下列关于微生物培养技术及应用的叙述，错误的是（ ）
A．稀释涂布平板法和平板划线法都可用于微生物的分离和纯化培养
B．培养微生物时，要满足微生物对特殊营养物质、pH、O2等的需求
C．微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离、培养等步骤
D．接种后需立即倒置培养以避免皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染
5 . 如图为5个不同浓度的土霉素溶液对大肠杆菌生长影响的实验结果。下列相关叙述不正确的是（ ）
A．对培养皿进行灭菌可以采用干热灭菌的方法
B．所用培养基是固体培养基，通常加入琼脂作为凝固剂
C．倒平板之后，在接种前要对培养基进行高压蒸汽灭菌
D．结果显示，对大肠杆菌抑制作用最明显的土霉素浓度是⑤
6 . 黄色短杆菌可自主合成L—亮氨酸，研究小组欲筛选L—亮氨酸缺陷型突变株(无法自主合成L—亮氨酸)，他们先对黄色短杆菌菌液进行振荡培养和诱变处理，取菌液接种到含L—亮氨酸的培养皿A中培养，待长出菌落，用灭菌金丝绒接种至含L—亮氨酸的培养皿B和不含L—亮氨酸的培养皿C中继续培养，部分过程如图所示。下列叙述错误的是（　　）
A．振荡培养可增加菌种数量，同时保证菌体获得充足氧气和营养物质
B．培养皿A、B中含L—亮氨酸，可同时培养出野生型和缺陷型菌株
C．培养皿应进行干热灭菌，接种操作要在酒精灯火焰附近进行
D．培养皿C中有菌落生长的位置，对应培养皿B中的菌落为缺陷型突变株
7 . 生长圈法是基于营养缺陷型指示菌与目的菌株共生关系建立的微生物筛选技术。目前，工业上用大肠杆菌赖氨酸缺陷型指示菌，从土壤中筛选谷氨酸棒状杆菌高产赖氨酸菌株，通过生长圈大小快速初筛，再结合发酵复筛确定生产株。如图表示初筛目的菌株时，某一平板上的菌落及生长圈的形成情况。下列叙述正确的是（ ）
A．初筛阶段，应配制pH为酸性且不含有赖氨酸的固体培养基
B．微生物乙、丙、丁为指示菌，甲、戊、己为谷氨酸棒状杆菌
C．若从图中平板初筛高产目的菌株，应选择菌落较大的戊或己
D．发酵复筛目的菌株时，仍需要大肠杆菌赖氨酸缺陷型指示菌
8 . 瘤胃是牛、羊等反刍动物具有的特殊器官，其中生活着多种微生物。下图表示从牛的瘤胃中分离和鉴定纤维素分解菌。下列叙述正确的是（ ）
A．提取的牛瘤胃液不能使用干热灭菌，应使用湿热灭菌
B．甲和乙应使用纤维素为唯一碳源的牛肉膏蛋白胨培养基
C．乙和丁的接种方法均可分离纯化并进行计数
D．以纤维素为唯一碳源的刚果红培养基中，会出现以目的菌为中心的透明圈
二、解答题（共2小题）
9.
安莎霉素（一种抗生素）主要用于治疗结核分枝杆菌导致的肺部感染，其是深海的赖氨酸缺陷型放线菌所产生的次生代谢产物。为筛选出能产生安莎霉素的放线菌种，科研人员用采自深海的放线菌进行选育。实验的部分流程如下图所示。
(1)过程A的接种方法为_________，在该过程中，统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致_________。
(2)与④相比，③使用的培养基成分的主要区别是_________，这些培养基均需_________灭菌。
(3)从④中挑取_________（填字母）菌落进行纯化培养并扩大培养，获取其细胞代谢产物。将培养基的皿底分为4个区域，分别标记为a、b、c、d．先将_________接种到培养基上，然后在a、b、c区域分别放置含_________的圆形滤纸片，d区域放置不含该成分的圆形滤纸片，在适宜条件下培养一段时间。若观察到_________的现象，说明该赖氨酸缺陷型放线菌能产安莎霉素。
(4)科研人员用过程A的接种方法对提取的赖氨酸缺陷型放线菌进行计数，将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接种0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为46、58和55，据此可得出每升该样品中的活菌数为_________个。
10.
科研人员从落叶堆积的森林土壤中筛选高效纤维素分解菌，用于农业秸秆的生物降解，实验流程包括土壤取样、系列梯度稀释、涂布接种、刚果红染色鉴定，部分操作如图所示。回答下列问题：
(1)土壤取样时应铲去表层土，原因是__________；筛选培养基以纤维素作为唯一碳源，可抑制____________的生长；培养基配制完成后常用__________法进行灭菌。
(2)涂布器经灼烧灭菌后需__________再进行涂布；平板划线法不能用于活菌计数的原因是_________。稀释涂布平板法统计的菌落数往往比实际数目__________，原因___________。
(3)刚果红能与纤维素形成__________色复合物；菌落分解纤维素的能力越强，透明圈直径与菌落直径的比值越__________；若将稀释倍数为106的菌液涂布0.1 mL，3个平板菌落数分别为128、132、145，则每mL菌液中活菌数为__________个。
习题答案
一、单项选择题
1 答案：A
2 答案：B
3 答案：B
4 答案：C
5 答案：C
6 答案：D
7 答案：B
8 答案：D
二、解答题
9
(1) 稀释涂布平板；低估菌落数目
(2) 不含赖氨酸；高压蒸汽
(3) C；结核分枝杆菌；安莎霉素；滤纸片周边出现透明抑菌圈
(4) 5.3×10
10
(1) 表层土壤微生物受外界干扰大，纤维素分解菌含量低；不能利用纤维素的微生物；高压蒸汽灭菌
(2) 冷却；多个菌体连在一起只形成一个菌落；偏小；两个或多个细胞连在一起时平板上只形成单个菌落
(3) 红；大；1.35×10

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