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(3)为了进一步研究燕鸥的食性，研究人员采集了两种燕鸥的粪便样本，进行DNA提取、
扩增，确定两种燕鸥的摄食种类如表。与粉红燕鸥相比，褐翅燕鸥的食性生态位更
食物种类
甲壳类
小型鱼类
软体动物
昆虫
褐翅燕鸥
粉红燕鸥
(4)依据上述研究，西沙群岛两种燕鸥共存的原因可能是
为更全面地了解其共存机制，从生态位的角度分析，还可以研究两种燕鸥的
19.(13分)异种器官移植是解决人类器官短缺的重要途径。近年来，我国科研团队在此领
域取得了突破性进展。云南农业大学某研究团队与多家机构合作，于2025年成功培育出无
特定病原体的10基因编辑猪，并利用体细胞核移植技术克隆10基因编辑猪，用于异种器官
移植研究，主要技术操作流程如下图：
普通猪
基因编辑
10基因编辑猪→⑤是爱
①供体细胞培养
激活、培养、移植代孕母猪
③
重构胚
分娩
去核
普通猪→
克隆猪
②
(10基因编辑猪)
()过程①所用培养液的成分除无机盐、维生素、血清外，还含的营养成分有
(答出2点即可)。
(2)过程②可通过显微操作对MⅡ期卵母细胞进行“去核”，“去核”实际上去除的是“纺锤
体一染色体复合物”，理由是
(3)过程③需要激活重构胚，目的是
(4)为提高基因编辑猪细胞核移植的成功率，可以用胚胎细胞核移植替代体细胞核移植，原因
是
(⑤)研究人员培育10基因编辑猪的过程包括：敲除猪的3个抗原基因(GGTA1、CMAH和
B4 GalNT2)和导入7个人源基因(hCD55、hCD59、hTBM等)，其中敲除猪的3个抗原基因
的目的是
若要检测基因编辑猪胚胎
中是否成功导入hCD55基因，操作的基本程序是：
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20.(10分)香树脂醇具有抗炎等功效，从植物中提取难度大、产率低。通过在酵母菌中表达
外源香树脂醇合酶基因N,可高效生产香树脂醇。回答下列问题。
EcoR I中ad亚各限制酶的识别序列和切制位点
空自
Xho
EcoR I S-GAATTC-3
实验组
对照组
终止子
标记基因
3'-CTTAAG-5
M.1
2345
PYL
Spe I 5-ACTAGT-3
碱基对
7.2b)
3-TGATCA-S
3000
1
2000
复制原点
Xho I 5-CTCGAG-3'
一3'GAGCTC-3'
1000
750
Xba I -TCTAGA-3
500
SpeI
一·3-AGATCT-S
250
mr链
1
引物1
引物2
HindⅢS-AGCTT--3'
i
b伸
3-TTCGAA-5'
注：M为指示分子大小的标准参照物，
蒸因N
1~4为菌株号。
图1
图2
(1)可从
中查询基因N的编码序列，设计特定引物。如图1所示，a链为转录模板链，
为保证基因N与质粒pYL正确连接，需在引物1和引物2的5'端分别引入
识别序列。本实验中，从基因N扩增到载体构建完成的整个过程共需要
种酶。
(2)构建的重组质粒，大小约9.5kb(kb为千碱基对；假设构建重组质粒前后质粒pYL对应部
分大小基本不变)。进一步筛选构建的质粒，以1~4号菌株中提取的质粒为模板，使用引
物1和引物2进行PCR扩增，电泳PCR产物结果如图2。在第5组的PCR反应中，使用无菌
水代替实验组的模板DNA,目的是检验PCR反应中是否有
的污
染。初步判断实验组
(从“1~4”中选填)的质粒中成功插入了基因N。
(3)为提高香树脂醇合酶催化效率，将编码第240位脯氨酸或第243位苯丙氨酸的碱基序列替
换为编码丙氨酸的碱基序列，丙氨酸的密码子有GCA等。a是诱变第240位脯氨酸编码序列
的引物(GCA为诱变序列)，b、c、d其中一条是诱变第243位苯丙氨酸的引物，其配对模
板与a的配对模板相同。据此分析，丙氨酸的密码子除GCA外，还有
(填字母)。
a:5'-GCA/CCC/GAG/TTC/TGG/CTG/TTT/CCC/TCT/TTC/TTC...-3
b:5'-GAA/CTG/TGG/GAC/ACC/CTG/AAC/TAC/TTC/TCT/GAG----3'
c:5'-GCT/TGG/CTG/TTT/CCC/TCT/TTC/TTC/CCC/TAC/CAC...-3'
d:5'-.GAT/AAT/AAG/ATC/CGA/GAG/AAG/GCC/ATG/CGA/AAG-.-3'
(4)进一步检测转基因酵母菌发酵得到的，
含量并进行比较，可以选出最优的香树脂
醇合酶基因的改造方案。
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