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秘密★启用前【考试时间：2025年 5月 13日】 4．为了判断培养基是否被杂菌污染和选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照组培养基分别是
高2023级高二下期半期考试 A.未接种的选择培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
生物试题 B.未接种的培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
C.接种了的选择培养基，接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
本试卷满分 100 分，考试时间 75 分钟
D.接种了的培养基，未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
注意事项： 5.发酵工程在食品工业、医药工业和农牧业等许多领域都得到了广泛的应用，下列关于发酵工程错误的是
1.答题前,考生务必在答题卡上将自己的学校、班级、姓名用 0.5毫米黑色签字笔填写清楚,同时用 2B A.啤酒生产中，后发酵阶段主要进行大部分糖的分解和代谢物的生成
铅笔将考号准确填涂在“考号”栏目内。
2.选择题使用 2B铅笔填涂在答题卡对应题目标号的位置上,如需改动,用橡皮擦擦干净后再选涂其它答 B.味精是谷氨酸棒状杆菌发酵产生的谷氨酸经过一系列处理获得的
案；非选择题用 0.5毫米黑色签字笔书写在答题卡的对应框内,超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、 C.将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌中，可通过发酵生产乙型肝炎疫苗
试题卷上答题无效。
3.考试结束后将答题卡收回。 D.冷却水从发酵罐下方进入从上方流出的目的是使冷却更充分
6.下列关于植物细胞工程应用的叙述错误的是
第I卷（选择题） A.利用微型繁殖技术可实现铁皮石斛的大量繁殖
一、选择题(共 25小题，每小题 2分，共 50分，每小题给出的四个选项中只有一个符合要求的选项) B.单倍体植株是进行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料
1.用猕猴桃制作果酒、果醋的发酵工艺包括打浆、酶解、酒精发酵、醋酸发酵等步骤，制作过程中需控制温 C.利用植物细胞工程培育的白菜—甘蓝，其变异类型为基因重组
度、糖度、接种量等参数。下列叙述错误的是 D.可通过细胞产物的工厂化生产，大批量获得次生代谢物
A.加入果胶酶进行酶解可分解细胞壁、提高果汁产量 7．下列叙述中，与植物体细胞杂交技术不相关的是
B.果酒发酵时可接种酵母菌，控制温度为 18～30℃ A.利用离心、振动、电场等诱导B.利用聚乙二醇（PEG）等试剂诱导
C.适当增加接种量可以提高发酵速率，抑制杂菌繁殖 C.克服远缘杂交不亲和的障碍 D.快速繁殖、培育无病毒植物
D.果酒和果醋发酵过程中均需控制发酵罐处于密闭状态 8.下列关于植物组织培养、微生物培养、动物细胞培养过程的描述，正确的是
2.下列关于微生物培养基的叙述，错误的是 A.马铃薯琼脂培养基的碳源一般是马铃薯滤液和葡萄糖，MS培养基的碳源通常是蔗糖
A.制备固体培养基，一般需在液体培养基中加入琼脂 B.哺乳动物细胞培养的温度在 36.5°C左右，多数动物细胞生存的适宜 pH为 4.2— 6.2
B.微生物在液体培养基中生长形成菌落，可以用肉眼观察到 C.纯化微生物、植物组织培养和动物细胞培养所用的都是固体培养基
C.根据微生物对碳源需要的差别，使用不同碳源的培养基 D.植物组织培养过程中，愈伤组织细胞的代谢类型为自养需氧型
D.倒平板冷却后的培养皿和接种后放入恒温培养箱的平板都需倒置 9.以下有关 iPS细胞及其应用的说法正确的是
3．选择培养基只是对菌种进行了初步筛选，还需对分离的菌种进行鉴定。在选择培养基中添加一些特殊物 A.iPS细胞和它分化形成的神经细胞都具有细胞周期
质，可配制成鉴别培养基。下列说法错误的是 B.人体内任何细胞都可以诱导成为 iPS细胞
A.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，用于鉴别分解尿素的细菌 C.iPS细胞不存在转变成肿瘤细胞的风险
B.在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红，可用于鉴别纤维素分解 D.白化病患者体细胞培养的 iPS细胞不能直接用于治疗白化病
C.培养乳酸菌时，可在培养基中添加维生素，用于鉴别乳酸菌 8．脂质体可作为运载工具，将药物分子运送到特定的细胞内发挥作用。为了提高药物运送的特异性，可在
D.鉴别大肠杆菌时，可配制伊红一亚甲蓝琼脂培养基 脂质体表面连接识别特定细胞的单克隆抗体，形成药物—脂质体—单克隆抗体复合物（见图）。下列叙述不
正确的是
1
A.单克隆抗体的制备需使用特定的选择培养基来筛选杂交瘤细胞 16.基因工程需要用到多种酶，通常还需要用人工改造的质粒作为载体。下列相关叙述正确的是
B.可将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内来获取大量的单克隆抗体 A.限制酶主要是从真核生物中分离纯化出来的，具有特异性
C.药物作用的靶向性通过单克隆抗体识别特定细胞的方式来实现 B. PCR反应中温度的周期性改变是为了 DNA聚合酶催化不同的反应
D.脂质体的作用是帮助复合物通过主动运输进入特定细胞内 C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因
11.体细胞核移植技术是将供体细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，培养一段时间后，再把发育中的重构 D. DNA连接酶、RNA聚合酶和逆转录酶都能催化磷酸二酯键的形成
胚移植到动物体内的方法。下列相关叙述错误的是 17.下列有关"DNA的粗提取与鉴定"和"DNA片段的扩增及电泳鉴定"实验的叙述，错误的是
A.体细胞核移植技术可培育转基因克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 A.洋葱切碎加研磨液研磨过滤后，滤液中含有 DNA、蛋白质等物质
B.体细胞核移植技术得到的克隆动物拥有供体、受体和代孕母体三亲的遗传物质 B.向 DNA溶液中加入二苯胺试剂，摇匀后静置一段时间，可观察到溶液变蓝
C.核移植得到的绝大多数克隆动物存在健康问题，许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷 C.使用电泳鉴定 DNA时，通常要留一个加样孔加入指示分子大小的标准参照物
D.非人灵长类动物体细胞核移植技术困难的原因之一是供体细胞核在去核卵母细胞中不能完全恢复其功能 D.引物设计不合理可能导致琼脂糖凝胶电泳鉴定结果不止一条条带
12.下列有关哺乳动物精子、卵子的发生及受精作用的叙述，正确的是 18.下列有关基因表达载体的说法,正确的是
A.可将精子培养在人工配制的获能液中使其获能，获能液的有效成分有肝素、Ca 载体等 A.基因表达载体是基因工程的核心
B.胚胎工程操作中，常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精完成的标志 B.终止子是决定翻译过程结束的信号
C.精子入卵后，透明带会迅速发生生理反应，阻止其他精子入卵 C.基因表达载体不会因受体细胞不同及导入方法的差别而有所差别
D.体型大的动物产生的精子也大，同种动物的雄原核比雌原核大 D.有人认为将某生物的所有目的基因直接导入受体细胞更简便,不需构建基因表达载体
13.如图为受精作用及早期胚胎发育示意图，下列叙述正确的是 19.下列有关将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定的叙述，正确的是
A.可通过显微注射法直接将目的基因导入动物的受精卵中
B.用高 Ca 一高 pH溶液预先处理植物细胞，促进目的基因导入
A.①过程的完成需要依赖细胞膜的选择透过性，精子会释放出特殊的水解酶 C.转基因抗虫棉是否培育成功需要进行分子水平的检测和个体生物学水平的鉴定
B.②过程表示卵裂，该时期细胞体积逐渐变大 D.若重组载体成功导入，受体细胞一定表现出标记基因的相应性状
C.③过程胚胎进一步发育，除了存在细胞的分裂，还存在细胞的分化 20.如图为一种常用的大肠杆菌质粒 pUC18的结构示意图，其中 ori为复制原点，Amp 为氨苄青霉素抗性基
D.孵化是指胚胎进一步扩大，透明带破裂，桑葚胚从透明带中伸展出来的过程 因，lacZ基因能指导合成酶 1，该酶能将无色染料 X—gal变成蓝色。若目的基因插入的位点如下图所示，
14.回文序列是一段特定的核苷酸片段，其特点是一条核苷酸链与其互补链从 5'端到 3'端的碱基序列相同。 且将含有重组质粒的大肠杆菌用含有氨苄青霉素和无色染料 X— gal的培养基培养，下列分析正确的是
短回文序列往往是限制酶的识别位点，下列叙述正确的是
A.回文序列中（A+T）的数目与（C+G）的数目相等
B.回文序列可能会存在于质粒中
C.限制酶作用于回文序列的氢键
D.短回文序列均由 6个核苷酸组成 A.所用限制酶的切割位点一般位于质粒的启动子和终止子之间
15．PCR的特异性主要取决于 B.插入目的基因时，破坏了 lacZ基因，不利于后续筛选目的菌株
A.DNA聚合酶的种类 B.反应体系中 DNA模板的量 C.含有该重组质粒的大肠杆菌在上述培养基上生长出的菌落呈蓝色
C.引物的碱基序列特异性 D.4种脱氧核苷酸的浓度 D.若大肠杆菌细胞内导入了不含目的基因的空质粒，则不会形成菌落
2
21.基因工程在农牧业、医药卫生领域、食品工业方面都有广泛的应用，以下叙述错误的是 第 II 卷（非选择题）
A.目前利用基因工程技术可以生产细胞因子、抗体和疫苗等 二、非选择题（50 分）
B.将药用蛋白基因导入奶牛乳腺细胞可构建乳腺生物反应器 26. (12分)产脂肪酶酵母可用于含油废水的处理，为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。
C.用基因工程技术获得的工业用酶纯度高、生产成本显著降低 (1)在分离纯化酵母菌种时，配制好的培养基常采用 法进行灭菌。倒平板操作中，待培养基冷凝后通常
D.将来源于某些病毒、真菌的抗病基因导入植物中，可培育转基因抗病植物 需要将平板 ，以免造成平板污染。
22．下图表示一个细胞周期所用的时间，下列说法正确的是 (2)下图是在 3个平板上各接种稀释倍数为 103的菌液样品 0.2mL后，培养一段时间所得到的结果示意图，
①甲→乙的过程表示分裂间期 该操作过程中所用接种工具为 。培养一段时间后，平板上的菌落数分别为 254个、260个、266个，则
②乙→甲的过程表示分裂期 每升原菌液样品中的细菌数为__个。
③一个细胞周期是指甲→甲的全过程
④一个细胞周期是指乙→乙的全过程
A.①②④B.④C.③D.①②③
23．某动物体内处于有丝分裂后期的细胞中有 76条染色体，则处于有丝分裂前期的细胞中核 DNA数和染 （3）为了进一步提高酵母产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行诱变育种。将辐照处理后的酵
色单体数分别为 母菌涂布在以__________为唯一碳源的固体培养基上。培养一段时间后，向该培养基中加入苏丹Ⅲ染液，
A.38、76 B.38、38 C.76、76 D.76、0 选择__________的菌落，纯化后获得了 A、B两突变高产菌株。因为发酵罐的体积较大，所以在发酵之前还
24．下列有关有丝分裂的叙述，正确的是 需要对菌株进行__________。
A.与动物细胞有丝分裂相比，植物细胞有丝分裂末期可形成赤道板 （4）在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价 A、B两菌株的相关性能，
B.动物细胞有丝分裂中中心粒的倍增发生在间期 进行了培养研究，结果如下图。据图分析，应选择菌株__________进行后续相关研究，理由是__________。
C.与有丝分裂相比，无丝分裂没有出现纺锤丝的变化和 DNA的复制
D.有丝分裂的结果是亲代细胞所有遗传物质平均分到子细胞，从而保持了亲子代间遗传的稳定性
25．下图表示细胞有丝分裂的某时期(图 1)和不同时期染色体和核 DNA分子的数量关系(图 2)。下列有关叙
述不正确的是
27.（12分）
下图为利用甲、乙两种远缘二倍体植物培育丙植物的基本流程。请据图回答下列问题：
A.图 1表示有丝分裂的中期图，属于图 2的 bc段
B.完成图 2中 cd段变化的细胞分裂时期是末期
C.图 2中 ab段细胞完成 DNA分子的复制在 ab段进行
D.bc段细胞中染色体数∶染色单体数∶核 DNA分子数为 1∶2∶2
3
（1）图中③代表________过程，该过程中应将植物组织培养瓶置于 18-22℃的培养箱中培养，形成的试管 29.（14分）
苗用流水清洗掉根部的培养基后，移栽到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土。 科学家将北极比目鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄植株的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生
（2）若要进行突变体育种，应该对图中的________进行诱变处理（填图中的文字或字母），该育种方式所依 长。构建基因表达载体的质粒上有 Pst I、Sma I、Hind III、Alu I等四种限制酶切割位点，下图 1是转基因抗
据的原理是________________________。 冻番茄培育过程的示意图（AmpR为抗氨苄青霉素基因），其中①—④是转基因抗冻番茄培育过程中的相关
（3）丙植物的培育过程与脱毒草莓培育过程都包含的技术流程是________（用图中数字序号表示），其中需 步骤，甲表示重组质粒、乙表示番茄植株的体细胞，请据图作答：
要提供适宜光照的是________（用图中数字序号表示）。
（4）甲植物细胞具有放线菌素抗性，但在 MS培养基上不能增殖。乙植物对放线菌素敏感，但能在 MS培
养基上增殖。将过程②所得的融合细胞置于________中培育可筛选出杂种细胞 A。
（5）甲植物和乙植物的某些性状并没有在丙植物中表现出来，可能的原因是________。
28.（12分）
我国科学家利用 CRISPR/Cas9基因编辑技术和体细胞核移植（SCNT）技术，成功构建了体细胞 BMAL1基
因（产生昼夜节律必需的基因）敲除的生物节律紊乱猴，为相关疾病研究提供了新型动物模型。其中
BMAL1基因敲除猴的基本构建流程如图所示。回答下列相关问题： （1）提取北极比目鱼的总 DNA，利用 PCR扩增抗冻蛋白基因时，需要向反应体系中加入引物，引物的作
用是____________________________________。若反应体系中，初始的含有抗冻蛋白基因的模板 DNA为 n
个，则进行第 4轮复制需要引物____对。
（2）构建基因表达载体时，可用一种或多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末
端发生任意连接，在此实例中，应该选用____________酶分别对目的基因和质粒进行切割。构建的基因表达
载体中必须有启动子，它是____________识别和结合的部位，能驱动基因的转录。
（3）研究人员在进行步骤②时，一般应采用____________法将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。
（1）为了让母猴超数排卵，以便采集更多的卵母细胞，需要给它注射__________。采集卵母细胞后，在体 （4）某限制酶的识别序列及切割位点为-↓GATC-，某 DNA分子上有 4个该限制酶的识别位点，用该限制
外培养到________期才去核，去除的“核”实际上是指__________。除了使用图中的显微操作法去核，还可使 酶切割该 DNA分子，会生成 4个片段。若用 BamHⅠ（-G↓GATGG-）切割该 DNA分子会生成 2个片段，
用梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等方法去核。 则该 DNA分子为 （填“环”或“链”）状结构。若用两种酶同时处理该 DNA分子，则会生成 个
（2）一次核移植技术后，需要获得更多的基因敲除猴，可在 对早期胚胎进行胚胎分割。胚胎分割的 片段。
主要仪器设备为__________和显微操作仪。胚胎分割指采用________方法将早期胚胎进行切割，在分割该阶
段的胚胎时，要注意将__________均等分割。若要对移植前的胚胎进行性别鉴定，应选择囊胚期的________
细胞。
（3）将早期胚胎移植到代孕母猴子宫内，为了使代孕母猴生理状况更适合完成该操作，要对代孕母猴进行
________处理，以提高成功率。移植一段时间后，应对代孕母猴进行____检查，以确定是否移植成功。
（4）不考虑基因突变，利用 A6的成纤维细胞进行克隆获得的多只第二代基因敲除猴的基因型______（填
“相同”或“不相同”）。与第一代 BMAL1基因敲除猴模型相比，第二代猕猴模型用于研究生物节律紊乱及相
关药物研发的优势是__________。
4
高二下期中答案
选择题，共50分
DBCBA CDADD BACBC DBACA BBCBB
非选择题，共50分
26.（12分，按标注给分）
（1）高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）（1 分） 倒置（1 分）
（2）涂布器（1 分） 1.3×10 （2 分）
（3）脂肪（1 分） 周围出现透明圈(或周围橘黄色变浅)（2 分） 扩大培养（1 分）
（4）B（1 分） 菌株 B 增殖速度快，单细胞蛋白的产量高；同时降解脂肪的能力强，净化效果更好（2
分）
27.（12分，按标注给分）
（1）脱分化（2分）
（2）B（2 分） 基因突变和植物细胞的全能性（或“突变和植物细胞的全能性”，或“基因突变、染色体变
异、植物细胞的全能性”）（2 分）
（3）③④⑤（1 分） ④⑤（1 分）
（4）含放线菌素的MS 培养基（2 分）
（5）在同一个体内，甲植物和乙植物的遗传物质的表达相互干扰，不能像之前一样有序表达（或生物体内
基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控、相互影响的）（2 分）
28.（12分，每空1分）
（1）外源促性腺激素（1 分） MII（减数分裂 II 中期）（1 分） 纺锤体—染色体复合物（1 分）
（2）囊胚期 体视显微镜 机械 内细胞团均等分割 滋养层 （1分）
（3）同期发情（1 分） 妊娠（1 分）
（4）相同（1 分） 遗传背景相同（1 分）
29.（14分，按标注给分）
（1）使 DNA 聚合酶能够从引物的 3'端开始连接脱氧核苷酸(2 分) 8n(2 分)
（2）Pst I 和 Sma I(2 分) RNA 聚合酶(2 分)
（3）农杆菌转化(2 分)
（4）环(2 分) 4(2 分)
5

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