资源简介

●浏览知识网络——胸怀全局
●高考考情分析——知己知彼
考纲要求 （1）基因工程的诞生（2）基因工程的原理及技术（3）基因工程的应用（4）蛋白质工程（1）植物的组织培养（2）动物的细胞培养与体细胞克隆（3）细胞融合与单克隆抗体（1）动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础（2）胚胎干细胞的移植（3）胚胎工程的应用（1）转基因生物的安全性（2）生物武器对人类的威胁（3）生物技术中的伦理问题（1）简述生态工程的原理（2）生态工程的实例
考情分析 高频考点 （1）基因工程的操作步骤（2）基因工程和蛋白质工程的区别（3）植物组织培养的过程和植物体细胞杂交的过程（4）单克隆抗体制备（5）核移植和试管动物技术（6）胚胎干细胞的特点和应用（7）生态工程的原理
考查形式 基因工程主要考查基因工程的操作工具、操作过程以及应用；细胞工程主要考查植物组织培养、植物体细胞杂交技术、动物细胞培养、核移植技术、动物细胞融合以及单克隆抗体制备；胚胎工程主要考查体内受精和胚胎发育、体外受精和早期胚胎培养以及胚胎移植、胚胎分割和胚胎干细胞的知识；生态工程主要考查原理以及相应的应用，主要与新农村建设、生态农业等相联系。
命题角度 常见化合物的化学组成、常见化合物的鉴定方法、蛋白质的形成、糖类和脂质的种类及作用、DNA和RNA的基本组成单位及DNA多样性形成的原因。
常见题型 选择题、综合题
备考建议 注意构建完整的知识体系，借助知识框架，理解并掌握各种基本概念和基本原理；借助基本步骤流程图、过程示意图，熟练掌握各种现代生物技术的操作流程，突破重点和难点。
●基本技能攻略——各个击破
攻略一 列表比较基因工程和蛋白质工程
【例1】（2017年新课标Ⅲ卷，38）编码蛋白甲的DNA序列（序列甲）由A、B、C、D、E五个片段组成，编码蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段组成，如图1所示。
回答下列问题：
（1）现要通过基因工程的方法获得蛋白乙，若在启动子的下游直接接上编码蛋白乙的DNA序列（TTCGCTTCT……CAGGAAGGA），则所构建的表达载体转入宿主细胞后不能翻译出蛋白乙，原因是_____________________________________。
（2）某同学在用PCR技术获取DNA片段B或D的过程中，在PCR反应体系中加入了DNA聚合酶、引物等，还加入了序列甲作为_____________________，加入了________________作为合成DNA的原料。
（3）现通过基因工程方法获得了甲、乙、丙三种蛋白，要鉴定这三种蛋白是否具有刺激T淋巴细胞增殖的作用，某同学做了如下实验：将一定量的含T淋巴细胞的培养液平均分成四组，其中三组分别加入等量的蛋白甲、乙、丙，另一组作为对照，培养并定期检测T淋巴细胞浓度，结果如图2。
①由图2 可知，当细胞浓度达到a时，添加蛋白乙的培养液中T淋巴细胞浓度不再增加，此时若要使T淋巴细胞继续增殖，可采用的方法是__________________。细胞培养过程中，培养箱中通常要维持一定的CO2浓度，CO2的作用是__________________。
②仅根据图、图2可知，上述甲、乙、丙三种蛋白中，若缺少______________（填“A”“B”“C”“D”或“E”）片段所编码的肽段，则会降低其刺激T淋巴细胞增殖的效果。
【答案】（1）编码乙的DNA序列起始端无ATG，转录出的mRNA无起始密码子
（2）模板　　 dNTP
（3）①进行细胞传代培养　　维持培养液是的pH ②C
【攻略技巧】列表比较基因工程和蛋白质工程的区别。
项目 蛋白质工程 基因工程
区别 过程 预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列 获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定
实质 定向改造或生产人类所需蛋白质 定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品
结果 生产自然界没有的蛋白质 一般是生产自然界已有的蛋白质
联系 蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程；对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因修饰或基因合成实现
攻略二 巧用图解分析植物组织培养过程
【例2】（2017年海南卷，31）甲、乙两名同学分别以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为材料，利用植物组织培养技术繁殖该植物。回答下列问题：
（1）以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下进行组织培养，均能获得试管苗，其原理是____________________。
（2）甲、乙同学在诱导愈伤组织所用的培养基中，均加入一定量的蔗糖，蔗糖水解后可得到__________。若要用细胞作为材料进行培养获得幼苗，该细胞应具备的条件是____________（填“具有完整的细胞核”“具有叶绿体”或“已转入抗性基因”）。
（3）图中A、B、C所示的是不同的培养结果，该不同结果的出现主要是由于培养基中两种激素用量的不同造成的，这两种激素是________。A中的愈伤组织是叶肉细胞经_______形成的。
（4）若该种植物是一种杂合体的名贵花卉，要快速获得与原植株基因型和表现型都相同的该种花卉，可用组织培养方法繁殖，在培养时，___________（填“能”或“不能”）采用经减数分裂得到的花粉粒作为外植体，原因是____________。
【答案】（1）绿色叶片和白色花瓣的细胞具有全能性，在一定条件下能发育成完整的植株。
（2）葡萄糖、果糖　　具有完整的细胞核
（3）细胞分裂素、生长素 脱分化
（4）不能　　对杂合体的植株来说，其体细胞的基因型相同，而花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同。用花粉粒进行组织培养得到花卉基因型不同于原植株
【解析】（1）植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。
（2）蔗糖水解后可得到葡萄糖、果糖。用细胞作为材料进行培养获得幼苗，细胞必须具有完整细胞核，才具有发育为个体的一整套完整遗传信息。
（3）影响植物组织培养的两种主要激素是细胞分裂素和生长素。愈伤组织是叶肉细胞经脱分化形成的。
（4）由于花粉粒的基因型与体细胞的基因型不同，组织培养得到花卉基因型不同于原植株，导致不能保留亲本性状。
【攻略技巧】可利用植物组织培养的过程图来分析。
攻略三 巧用流程图理解单克隆抗体制备过程
【例3】（2017年江苏卷，11）牛雄性胚胎中存在特异性H-Y 抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y 单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是（　　）
A．H-Y 单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌
B．应选用原肠胚做雌雄鉴别
C．鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植
D．用H-Y 抗原免疫母牛可获得相应抗体
【答案】D
【解析】单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌，A错误；做雌雄性别鉴别应选择囊胚期的滋养层细胞，B错误；由于是利用乳腺生物反应器进行生物制药，则鉴别后的雌性胚胎可直接做胚胎移植，雄性胚胎没有意义，C错误；H-Y抗原免疫母牛，使其体内产生体液免疫，产生相应的浆细胞，获得相应抗体，D正确。
【攻略技巧】可通过过程图解进行分析。杂交瘤细胞具有骨髓瘤细胞和B淋巴细胞的遗传物质，既能无限增殖，又能产生特异性抗体；单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点。
攻略四 理解胚胎干细胞的特点和意义
【例4】（2017年江苏卷，14）下列关于小鼠体外受精及胚胎发育的叙述，错误的是（　　）
A．精子在获能液中于37℃、5% CO2条件下培养的目的是使精子获能
B．小鼠在特定光控周期条件下饲养，注射相关激素有促进超数排卵的作用
C．分割的胚胎细胞有相同的遗传物质，因此发育成的个体没有形态学差异
D．注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育
【答案】C
【攻略技巧】胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞，在形态上，表现为体积小、细胞核大、核仁明显；在功能上，具有发育的全能性，即可以分化为成年动物体内任何一种组织细胞，另外在体外培养的条件下，胚胎干细胞可以增殖而不发生分化。
●名校试题演练——决胜2018
1．下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（　　）
A．动物细胞培养所需的营养物质与植物细胞培养相同
B．传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞
C．癌细胞在培养瓶中培养不会出现接触抑制现象
D．动物细胞培养时需要添加抗生素以防止杂菌污染
【答案】A
【解析】试题分析：动物细胞培养所需的营养物质有血清、血浆，植物细胞培养需要蔗糖等，A错；传代培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞，B正确；癌细胞膜表面的糖蛋白减少，细胞间信息交流受到限制，在培养瓶中培养不会出现接触抑制现象，C正确；动物细胞培养时需要添加抗生素以防止杂菌污染，D正确。
2．下列有关生态工程的说法，正确的是（　　）
A．无废弃物农业主要体现了生态工程的整体性原理
B．生态工程是无消耗、多效益、可持续的工程体系
C．生态经济主要实行“循环经济”的原则
D．在林业工程建设中，应重点遵循系统整体性原理
【答案】C
3．下图是通过植物细胞工程技术获得紫杉醇的途径，下列叙述不正确的是（　　）　
A．该途径依据的原理是植物细胞具有全能性
B．过程①需控制好培养基中植物激素的比例
C．经过程①后细胞的形态和结构发生了变化
D．过程③需使用液体培养基，有利于细胞增殖
【答案】A
【解析】该过程是为了得到细胞群及细胞产物，依据的原理是植物组织培养，没有体现细胞的全能性，A错误；过程①为脱分化，在培养基中应加入适量的生长素和细胞分裂素，B正确；愈伤组织是无定形的薄壁细胞，所以经过程①细胞的形态和结构发生了明显变化，C正确；过程③是细胞大量增殖的过程，需要液体培养基，D正确。
4．下列有关高等哺乳动物胚胎工程的叙述，错误的是
A. 早期胚胎培养通常需要加入动物血清
B. 为了获得更多的卵母细胞，需对受体动物进行同期发情处理
C. 从动物体内获取的精子不能直接与卵母细胞结合完成受精过程
D. 为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵双胎
【答案】B
【解析】早期胚胎培养通常需要加入动物血清，以补充合成培养基缺乏的物质，A正确；为了获得更多的卵母细胞，对供体母畜注射促性腺激素可促其超数排卵，B错误；从动物体内获取的精子经过获能处理后才能与卵子结合完成受精作用，C正确；为了进一步扩大繁殖规模，可通过胚胎分割技术获得同卵多胎，该技术应该选择发育良好，形态正常的桑椹胚或囊胚进行，D正确。
5．在应用农杆菌侵染植物叶片获得耐旱基因植株的实验步骤中，不需要的是（　　）
A．将耐旱基因导入农杆菌并通过农杆菌侵染植物叶片细胞
B．利用标记基因和选择培养基的作用筛选导入耐旱基因的细胞
C．用PEG诱导转基因细胞的原生质体融合后培养出愈伤组织
D．将转基因幼苗栽培在干旱环境中以检验植株的耐旱性
【答案】C
【解析】应用农杆菌侵染植物叶片获得耐旱基因植株，需要将耐旱基因导入农杆菌并通过农杆菌侵染植物叶片细胞；利用标记基因和选择培养基的作用筛选导入耐旱基因的细胞；该过程不涉及细胞融合，不需要使用促融剂聚乙二醇；将转基因幼苗栽培在干旱环境中，在个体水平检验植株的耐旱性。
6．基因组编辑技术是研究基因生物功能的重要手段，下图是对某生物B基因进行定点编辑的过程，该过程中用sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的切割位点，相关说法不正确的是（　　）
A．靶基因部分序列与sgRNA通过碱基互补配对原则进行配对
B．核酸内切酶Cas9可断裂脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键
C．被编辑后的B基因与编辑前的B基因互称为非等位基因
D．通过破坏B基因后生物体的功能变化可推测B基因的功能
【答案】C
【解析】sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的切割位点，因此基因定点编辑前需要设计与被切割基因两端碱基序列配对的sgRNA，A正确；核酸内切酶Cas9可断裂脱氧核糖核苷酸之间的化学键，即磷酸二酯键，B正确；被编辑后的B基因与编辑前的B基因由于位于同源染色体的相同位置，所以它们互称为等位基因，C错误；通过破坏B基因后生物体的功能变化可推测B基因原有的功能，D正确。
7．科学家通过基因工程的方法，能使马铃薯块茎含有人奶主要蛋白。以下有关基因工程的叙述，不正确的是（　　）
A．基因工程至少需要两种工具酶，即限制性核酸内切酶和DNA酶
B．作为目的基因的载体，要有一至多个限制酶切割位点，并能在宿主细胞中正常复制
C．将目的基因导人不同类型宿主细胞的方法会有所不同
D．目的基因会因需求不同而不同，载体也会根据实际需要而有所不同
【答案】A
8．下列关于蛙胚胎发育过程的叙述，正确的是（　　）
A．通过细胞分裂不断增加细胞数量，并在一定时期发生细胞分化
B．胚胎发育过程中细胞不断分裂，但不发生凋亡
C．随着细胞分裂次数的增加，蛙胚的有机物总量不断增加
D．发育过程中蛙胚从环境中获得的氧气和营养物质逐渐增加
【答案】A
【解析】蛙胚胎发育过程为：受精卵→卵裂（即有丝分裂）→桑椹胚→囊胚→原肠胚→蝌蚪，在此过程中，通过细胞分裂不断增加细胞数量，囊胚时期细胞开始出现分化，A项正确；胚胎发育过程中细胞不断分裂，但也会发生凋亡，B项错误；随着细胞分裂次数的增加，细胞呼吸消耗的有机物越来越多，所以蛙胚的有机物总量不断减少，C项错误；蛙胚胎发育过程中，所需营养物质主要来自于受精卵，D项错误。
9．植物被野生型农杆菌感染后会产生瘤状结构（类似愈伤组织），主要原因是农杆菌的Ti质粒中含有生长素合成基因、细胞分裂素合成基因和冠瘿碱合成基因。冠瘿碱是农杆菌生命活动必需的有机物质，而植物自身不能合成和利用。下列叙述错误的是（　　）
A．去除生长素合成基因，瘤状结构会生出许多根
B．去除冠瘿碱合成基因，农杆菌在被感染植物体内不能大量繁殖
C．去除生长素合成基因和细胞分裂素合成基因，不会产生明显的瘤状结构
D．为获得正常生长的转基因植物，应去除Ti质粒中的上述3种基因
【答案】A
10．下图为哺乳动物早期胚胎发育的过程，下列有关叙述正确的是（　　）
A．过程a和b使胚胎中有机物的含量减少
B．Ⅰ、Ⅱ时期的胚胎中都含有全能细胞
C．胚胎移植必须使用处于Ⅱ或Ⅲ时期的胚胎
D．图示过程中，部分细胞中的遗传物质可能发生改变
【答案】ABD
【解析】过程a表示卵裂形成桑椹胚，过程b表示桑椹胚形成囊胚，这两个过程细胞均需要消耗能量，故胚胎中有机物的含量均减少，A正确；Ⅰ表示桑椹胚，含有的所有细胞都是全能细胞，Ⅱ表示囊胚，含有的内细胞团细胞为全能细胞，B正确；胚胎移植必须使用处于Ⅰ桑椹胚或Ⅱ囊胚时期的胚胎，C错误；图示过程中，细胞进行有丝分裂，在间期DNA复制过程中，部分细胞中的遗传物质可能发生改变，D正确11．池塘养鱼过程中，由于饲料中含N和P的营养物质未被鱼类全部摄取，成为废弃物，不仅影响鱼类生长速度，还加剧了水体的富营养化。利用养殖废水进行水稻灌溉，可大大降低水中N、P的含量。下列说法不正确的是（　　）
A．土壤颗粒对N、P有吸附作用
B．这些废弃物有利于水稻的正常生命活动
C．微生物分解含N和P的废弃物成为自身物质和能量来源
D．这种措施主要遵循生态工程物种多样性的原理
【答案】D
【解析】水稻田里的土壤颗粒对N、P有吸附作用，A项正确；这些废弃物中含有饲料中的N和P等营养物质，经微生物分解变成无机物后，可被水稻吸收利用，有利于水稻的正常生命活动，B项正确；微生物大多属于分解者，可分解含N和P的废弃物成为自身物质和能量来源，C项正确；这种措施主要遵循生态工程物质循环再生的原理，D项错误。
12．科学家拟采用基因敲出技术将小鼠的1g基因敲出，代之以人的1g基因，然后用H7N9病毒感染小鼠，得到对H7N9病毒具有免疫力的小鼠，在经单克隆抗体技术生产大量的人源化抗体用于诊断、治疗H7N9病毒感染。
（1）长期以来人们获得抗体的方法是向动物体内反复注射某种抗原，然后从动物的_________中分离出抗体，用这种方法制得抗体的缺点是_________。
（2）本次基因敲出技术的受体细胞不是小鼠的受精卵，而是_________细胞，再将处理过的该细胞重新植入小鼠脾脏中增殖。
（3）动物细胞融合技术常用的诱导因素有OPEG、电激和_______，培养液中共有 种类型的融合细胞（只考虑细胞两两融合的情况）。该技术最重要的应用是：利用融合得到_来制备单克隆抗体，可通过_______培养基获得这种细胞。
（4）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断H7N9病毒感染者，这种诊断运用了__________________杂交技术。
【答案】 血淸 抗体产量低、特异性差 B淋巴 灭活病毒 特定的杂交瘤细胞 选择 抗原一抗体分子
【解析】（1）长期以来人们利用抗原刺激小鼠，从小鼠的血浆中提取抗体；单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、可大量制备。
（2）此处基因敲除技术的受体细胞不是小鼠的受精卵，而是小鼠的B淋巴细胞细胞，因为B淋巴细胞可以产生抗体。
（3）在诱导细胞融合时，常用的诱导因素有OPEG、电激和灭活病毒，若考虑两两融合，则有AA、BB和AB三类细胞。该技术最重要的应用是：利用融合得到特定的杂交瘤细胞来制备单克隆抗体，可通过选择培养基获得这种细胞。
（4）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断H7N9禽流感病毒的感染者，这种诊断运用了抗体--抗原杂交技术。
13．选取A、B植株的细胞进行如下图操作，请回答问题：
　　　
（1）实现图中的①过程最常用的方法是________。
（2）②过程的发生，必须进行____________，其方法有____________法和____________法。
（3） 若细胞A内含a个染色体，细胞B内含b个染色体，则“杂种细胞”内含________个染色体；若A、B植株采用常规杂交育种方法成功的话，得到的后代含_____个染色体，必须用______________来处理幼苗，才能得到可育的杂种植株，其中含有_____个染色体。这两种方法相比，体细胞杂交方法的优点是：__________________________________。
（4）如果原生质体A为小鼠的浆细胞，原生质体B为小鼠的骨髓瘤细胞，诱导二者融合时，独特的方法是用_______处理。
【答案】（1）酶解法（纤维素酶、果胶酶）
（2）诱导融合　　物理方法　　化学方法
（3）a+b　　a+b /2　　秋水仙素　　a+b　　克服远缘杂交不亲和的障碍
（4）灭活的病毒
（3）则“杂种细胞”具有两个细胞的染色体，有a+b条染色体。细胞A产生的生殖细胞中含有a /2条染色体，细胞B产生的生殖细胞中含有b/2条染色体，利用杂交育种获得的后代体细胞中所含有的遗传物质各包含两亲本的一半，即a+b /2，此植株是高度不育的，必须利用秋水仙素处理使其染色体数目加倍，即细胞中染色体数目为a+b条，植株可育。说明体细胞杂交方法的优点是克服远缘杂交不亲和的障碍。
（4）动物细胞融合特有的方法是灭活的病毒。
14．2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。
　　　
据图回答下列问题：
（1）由于女性的自然周期产生的卵子太少，捐献者在取卵前通常需要注射____________激素，促使一次有更多的卵泡发育。
（2）重组细胞需培养到MⅡ中期的原因是该时期的卵母细胞才具备________________，重组细胞体外培养所需的气体主要是O2和CO2，CO2的主要作用是___________________。
（3）从受精卵到三亲婴儿的培育还需要_________________和___________________等技术。胚胎发育的卵裂期在 _________（填“透明带”或“放射冠”）内进行。受精卵经72小时体外培养发育成32细胞左右的胚胎，叫做____________，可用于胚胎移植。
（4）为了某些需要，需对胚胎的性别进行鉴定。目前最有效最准确的方法是SRY- PCR法，操作的基本程序是：从被测的囊胚中取出几个 ___________________（填“滋养层”或“内细胞团”）细胞，提取DNA为模板；然后用位于Y染色体上的性别决定基因（即SRY基因）的一段核苷酸序列作 ______________，在 __________________________催化作用下进行PCR扩增；最后与 SRY特异性探针出现阳性反应者，胚胎为__________性。
（5）三亲婴儿的培育技术________（填“能”或“不能”）避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，而___________（填“能”或“不能”）避免母亲的红绿色盲基因传递给后代。
（6）设计试管婴儿技术与为解决不孕夫妇的生育问题而出现的试管婴儿技术主要区别是植入前对胚胎进行___________________。设计试管婴儿、克隆人等都是引起人们广泛争论的问题。我国不反对治疗性克隆，即可利用人体细胞核移植等技术治疗人类疾病，在去除卵母细胞的细胞核时，可用微型吸管把位于_______________________之间的第一极体一并吸出。
【答案】（1）促性腺
（2）（与精子）受精的能力　　维持培养液的pH
（3）早期胚胎培养　　胚胎移植　　透明带　　桑椹胚
（4）滋养层　　引物　　热稳定DNA聚合酶（Taq酶）　　男
（5）能　　不能
（6）遗传学诊断　　卵细胞膜与透明带
【解析】（1）对女性注射促性腺激素可促使其超数排卵。
（2）处于减数第二次分裂中期的卵母细胞具有与精子的受精的能力，因此重组细胞需要培养到此时期。动物细胞培养时培养环境需要一定气体环境，其中CO2的主要作用维持培养液的pH。
（3）据图分析可知，三亲婴儿的培育需要核移植、体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等技术。胚胎发育的卵裂期在透明带内进行；受精卵外培养发育成32细胞左右的胚胎叫桑椹胚，可以用于胚胎移植。
（6）设计试管婴儿技术与试管婴儿技术主要区别是植入前对胚胎进行遗传学诊断（或基因检测或基因诊断）。体细胞核移植过程中，在去除卵母细胞的细胞核时，可用微型吸管把位于卵细胞膜与透明带之间的第一极体一并吸出。
15．请根据资料回答问题：
资料1：人体器官移植最大的难题是免疫排斥。猪细胞表面有一些人体没有的抗原，如α-l，3半乳糖苷转移酶就是其中的一种，因此人体会对移植的猪器官产生免疫排斥反应。
资料2:可利用基因打靶技术对猪细胞α-l，3半乳糖苷转移酶基因细胞进行改造，去除α-l， 3半乳糖苷转移酶引起的免疫排斥，主要过程如下：
第一步：从猪囊胚中分离出胚胎干细胞（野生ES）。需要改造的基因称为“靶基因”。
第二步：在含有一段与靶基因同源的序列上，插入新霉素抗性基因（neo）完成打靶载体的构建。
第三步：打靶载体导入胚胎干细胞，与含有同源序列的DNA分子重新组合，发生置换，形成突变ES细胞基因。
　　　
第四步：突变ES细胞筛选、增殖。
（1）除了经济易获取因素外，请写出科学家选择猪器官作为人体器宫移植供体的生物学依据（写出其中一条即可）____________________________________________。
（2）资料2基因改造过程中，“靶基因”是______________________，打把载体的构建过程相当于基因工程基本操作步骤中的______________________。插入新霉素抵抗基因后，“靶基因”不能表达的原因是______________________，插入的新霉素抵抗基因作为标记基因起到______________________作用。
（3）利用___________技术，使突变ES细胞增殖、分化，培育出不合成α—1，3半乳糖苷转移酶的猪器官，但得到的器官还不能直接移植入人体，原因是______________________。
（4）基因打靶技术给人体移植器官短缺难题的解决带来了可能，该项技木能精准定位进行基因改造是由于______________________。
【答案】 结构、大小与人体相似 （或“猪体内隐藏的、可导致人类疾病的病毒要远远少于灵长类动物） （猪细胞的）α-1，3半乳糖苷转移酶基因 目的基因的获取 基因结构被破坏 筛选 克隆 人体对猪细胞还存在其他抗原引起的排斥反应 同源重组
（3）利用克隆技术，使突变ES细胞增殖、分化，培育出不合成α—1，3半乳糖苷转移酶的猪器官，但由于人体对猪细胞还存在其他抗原引起的排斥反应，得到的器官还不能直接移植入人体。
（4）据题干信息分析可知，该项技木能精准定位进行基因改造是因为“打靶载体导入胚胎干细胞，与含有同源序列的DNA分子重新组合，发生置换”即同源重组。

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