资源简介

（满分60分，40分钟完成）
班级 姓名 总分
一、单选题（30分，每题3分）
1. 在做分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从对应106倍稀释的培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。甲同学的结果产生原因可能有（ ）
①土样不同 ②培养基污染③操作失误 ④没有设置对照
A. ①②③ B. ②③④ C. ①③④ D. ①②④
【答案】A
【解析】①土样不同可能导致计数偏差，①正确；②培养基污染，②正确；③操作失误可能增加微生物的数量和种类，菌落会增多，③正确；④没有设置对照不会增加菌落数目，④错误。
2. 下列有关从土壤中分离所需的微生物的叙述，不正确的是：（ ）
A. 土壤中微生物最多的是细菌，生活在酸碱度接近中性的潮湿土壤中
B. 测定土壤中细菌总量比测定分解尿素的细菌数量时的稀释倍数更大
C. 为了保证选出30-300间的菌落，应缩小稀释的范围
D. 应在火焰旁称取土壤，小铁铲和盛土样的信封都需灭菌处理
【答案】C

3.可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是( )
A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂
B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂
C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂
D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂
【答案】A
【解析】酚红指示剂只能用来检测尿素分解菌，故A正确；二苯胺试剂常用来进行DNA的鉴定，故B错误；苏丹Ⅲ试剂可以用来检测脂肪，故C错误；双缩脲试剂可以用来检测蛋白质，故D错误。
4.下列就“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验的有关叙述，不正确的是（ ）
A.经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置
B.同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数
C.在稀释度足够高时，所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息必定相同
D.在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染
【答案】C
【解析】 “土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验中，经高压蒸汽灭菌的培养基所倒平板和接种后培养时的平板均要倒置，以防止杂菌污染，A正确；同一稀释度下至少要涂布三个平板并且要培养到菌落数稳定时计数，并求其平均数，B正确；细菌进行二分裂增殖，不能保证遗传物质平均分配，在稀释度足够高时，所形成的单个菌落中所有细胞的遗传信息不一定相同，C错误；在相同培养条件下，未接种的培养基表面无菌落生长说明培养基没有被杂菌污染，D正确。
5.在以尿素作为唯一氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出( )
A．乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
B．分解尿素的细菌、大肠杆菌、放线菌
C．分解尿素的细菌、霉菌、放线菌
D．固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
【答案】C

6.欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，下列实验操作中不正确的是（ ）
A．将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释
B．用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌
C．同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板
D．可将未接种的培养基在相同条件下培养作为空白对照
【答案】B
【解析】要土壤中分离出能分解尿素的细菌，可先将土壤用无菌水进行一系列的梯度稀释，A正确；用加入刚果红指示剂的培养基可筛选出分解纤维素的细菌，用加入酚红指示剂的培养基可筛选出分解尿素的细菌，B错误；同一浓度的土壤稀释液应至少涂布三个平板，计数时取其平均值，C正确；可将未接种的培养基在相同条件下培养作为空白对照，D正确。
7.下图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀释示意图。据图分析正确的是（ ）

A．3号试管中的菌落稀释倍数为103倍
B．4号中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数恰为5号的10倍
C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×109个
D．该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高
【答案】B

8.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。产生A同学结果的原因可能有（ ）
①土样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照
A.①②③ B.②③④ C.①③④ D.①②③④
【答案】A
【解析】A同学获得的菌落远大于其他同学，可能是由于所取的土样不同，也可能操作过程被污染（培养基灭菌不彻底或操作过程没有保证无菌操作都会导致菌落数偏多），还可能是操作失误，比如培养基的稀释倍数搞错了，或培养基中混入了其他含氮物质等，但与是否设置对照无关，故A项正确，B、C、D项错误。
9.下列关于微生物的分离和培养的叙述中，正确的是( )
A.进行微生物培养前，需对培养瓶进行消毒处理
B.对细菌的分离和计数可用平板划线法和稀释涂布平板法
C.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染
D.用含刚果红的尿素培养基筛选鉴别出能分解尿素的菌株
【答案】C
【解析】选项A，应对培养瓶进行灭菌处理。选项B，对细菌进行计数时不能用平板划线法。选项D，用含酚红的尿素培养基筛选和鉴别出分解尿素的菌株。
10. 下图为从土壤中分离纯化尿素分解菌的过程。下列有关叙述错误的是（ ）

A. ①②③④培养基都应以尿素为唯一氮源
B. 图中所用培养基灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌
C. ①-③过程是梯度稀释，稀释溶剂是无菌水
D. 可用酚红染料鉴定，菌落周围是否出现红色圈
【答案】C

二、非选择题（30分，每格2分）
11.（16分）下表所示配方的培养基可筛选某种细菌，该细菌可以在该培养基上生长，进而形成菌落。回答下列问题：
KH2P04
1.4g
Na2HP04
2.lg
MgS04?7H20
0.2g
葡萄糖
10.Og
尿素
1.Og
琼脂
15g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容至lOOOmL
（1）该培养基可筛选的细菌是___________，判断的依据是______________________。
（2）如果从土壤中获取的样本含该细菌的数量较少，需要对样本中的细菌进行扩大培养，请判断能否用表格中的培养基来扩大培养___________（填“能”或“不能”），理由是______________________。
（3）如果需要对该细菌进行计数，则应用___________法接种。为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌，需要在培养基中加入___________指示剂。另一种接种细菌的常用方法是___________。该方法在操作时，每一次划线前都要进行灼烧，目的是______________________。
【答案】（1） 尿素分解菌 培养基中尿素是唯一的氮源 （2） 不能 扩大培养应该用液体培养基，表格中的配方含有琼脂，是固体培养基 （3） 稀释涂布平板 酚红 平板划线法 杀死残留在接种环上的细菌

12．（14分）某生物兴趣小组想对土壤中能分解尿素的细菌进行分离，并统计每克土壤样品中的活菌数目，确定了培养基配方(如下表)。将配方中各种物质溶解后，用蒸馏水定容到l 000 mL，再经高温灭菌，制成固体培养基以备用。
KH2PO4
Na2HPO4
MgSO4·7H2O
蛋白胨
葡萄糖
尿素
琼脂
11.4g
2.1g
0.2g
1.0g
10.0g
1.0g
15.0g
（1）为保持干燥，培养皿用________________法灭菌；待培养基冷却到________℃(填“20”“30”“40”或“50”)左右时，在酒精灯附近倒平板；待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，可以防止____________________________，防止造成污染。
（2）根据培养基的成分判断，该同学不能分离出土壤中分解尿素的细菌，原因是_____________________。
（3）该同学采用稀释涂布平板法检测样液中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是________________________________；然后，将l mL样液稀释l00倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升样液中的活菌数为________________。
（4）若该同学采用显微镜直接计数法测量细菌数量，左下图是一块血细胞计数板正面示意图，其上有2个计数室。右下图是计数室中一个中格的细菌分布示意图，该中格内细菌数量应计为________。

【答案】 （1）干热灭菌 50 培养皿盖上的水珠落入培养基 （2） 培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，(培养基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素) （3）检测培养基平板灭菌是否合格 3.9×107 （4） 15




1. 牛或山羊的瘤胃中生活着多种微生物，若想从瘤胃中分离出能够分解尿素的细菌，下列操作错误的是（ ）
A. 以尿素为唯一氮源 B. 以葡萄糖作为碳源
C. 将培养基调至酸性 D. 培养环境有充足02
【答案】D

2. 关于从土壤中分离出分解尿素的细菌，相关描述正确的是（ ）
A. 细菌适宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，取样时要在酒精灯火焰旁铲去3-8cm表层土
B. 取土样的小铁铲、盛土样的信封在使用前都要采取干热灭菌措施
C. 称取土样时不能再酒精灯火焰旁，因为会使分解尿素的细菌死亡
D. 某些细菌将尿素分解后产生氮气和二氧化碳
【答案】B
【解析】细菌分布在距地表约3～8cm的土壤层，故要铲去表层土，大约3cm，A错误；取样用的小铁铲和信封在使用前需要进行灭菌处理，采取干热灭菌，B正确；称取土壤时，为避免杂菌污染，需要在酒精灯火焰旁进行操作，C错误；细菌将尿素分解后产生氨气和二氧化碳，D错误；
3.分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是( )
①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐 ⑧不加硝酸盐
A．①③⑤⑦ B．①③⑤⑧ C．②④⑥⑧ D．①④⑥⑦
【答案】B
【解析】要分离分解尿素的细菌应以尿素为唯一氮源，故1需要2错误，故C错误。需要用固体培养基必须加入琼脂，故3正确，4错误，D错误。需要加碳源即葡萄糖，故5正确，6错误。不需要氮源，故不需要甲硝酸眼，故7错误，8正确，因此A错误，B正确。
4.从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操作不正确的（ ）
A.将土壤用无菌水稀释，制备10﹣3～1O﹣5土壤稀释液
B.将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上
C.用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌
D.从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株
【答案】C
【解析】A、将土壤用无菌水稀释，然后经过系列稀释，制备10﹣3～1O﹣5土壤稀释液；A正确．
B、将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上；B正确．
C、用加入酚红指示剂的选择培养基筛选分解尿素的细菌，刚果红指示剂是用于分离分解纤维素的菌；C错误．
D、分解尿素的菌在分解尿素时产生氨气，氨气能使酚红指示剂显红色，从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶的菌株；D正确．
5.下图表示从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。下列与该实验相关内容的叙述中不正确的是（ ）

A．实验中所用的培养基①②③④均属于选择培养基
B．通过图中I、Ⅱ过程目的是增加目标微生物的数量
C．统计⑤处培养基中的菌落数并不一定代表接种到④上的活菌数
D．在⑤处培养基上能生长的一定是能降解对羟基苯甲酸的微生物
【答案】D

6.下列叙述不正确的是 ( )
A．因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离
B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同
C．如果得到了多个菌落数目在30—300的平板，则说明稀释操作比较成功
D．牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显少于选择培养基上的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落
【答案】D
【解析】牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目明显多于选择培养基上的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落，D错误 。
7.选择培养基是根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求或对一些物理、化学抗性而设计的培养基。利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。为选择酵母菌和硝化细菌，应选用的培养基分别为( )
A.伊红美蓝培养基、含青霉素培养基
B.含青霉素培养基、含氨的无机培养基
C.含氨的无机培养基、含青霉素培养基
D.含青霉素培养基、伊红美蓝培养基
【答案】B

8.用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( )
A.未接种的选择培养基
B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
C.接种了的选择培养基
D.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
【答案】D
【解析】选择的目的是为了分离、筛选，对照遵循的原则是单一变量，因此用接种了的普通培养基和选择培养基进行对照，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目。
9.下面从土壤中筛选纤维素分解菌的实验步骤，正确的是( )
①土壤取样
②称取10 g土壤加入盛有90 mL无菌水的锥形瓶中
③吸取0.1 mL进行平板涂布
④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107稀释度
A.①→②→③→④ B.①→③→②→④
C.①→②→④→③ D.①→④→②→③
【答案】C
【解析】在分离土壤中某细菌时，应先选取土样(10 g)，然后加无菌水获得土壤浸出液，并进行不同倍数稀释，最后将稀释液涂布到培养基表面进行培养，并分离和计数。
10. 在做分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从对应10-6培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。下列有关叙述，出现科学性错误的是（ ）
A. 甲同学出现这种结果的原因可能是由于土样不同，也可能是操作过程出了问题
B. 将甲同学配制的培养基再接种菌种培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染
C. 让其他同学用与甲同学相同土壤进行实验，结果与甲同学一致，则可以证明甲同学无误
D. 可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染
【答案】B

11.人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：
（1）分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，培养基常用的灭菌方法有 。
（2）将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程每一步都要在 旁进行操作。接种后的培养皿 于37℃的 中培养。
（3）用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于 培养基。若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的 使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力 。
（4）与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数 。
A．多 B．少 C．相等 D．几乎为零
【答案】（1）高压蒸汽灭菌（2）酒精灯火焰旁 倒置 恒温培养箱（3）选择 氨 越强（4）B

12. 在农业用地中发现一种广泛使用的除草剂（含氮有机化合物）在土壤中不易降解，长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度一定，该除草剂的培养基不透明）。

（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行________处理。
（2）要从________ 的土壤中分离目的菌，上述培养皿中培养基的特点是：________体培养基且以________ 。若需要调节培养基pH，应该在各种成分都溶化后且分装________（填“前”或“后”）进行。对培养基进行灭菌，常采用的方法是________ 。
（3）若对活菌进行计数，常用的接种方法为_____________ 。
（4）培养后发现，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是________________
，或有氧条件抑制了这些细菌的生长。
（5） 为了计数微生物的数量，一位同学在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0．1mL，培养后菌落数分别为155、160、176、149个，则每毫升原土壤样液中上述微生物数量为___________。
【答案】（1）稀释（2）富含（或长期使用）该除草剂 固 除草剂为唯一氮源 前 高压蒸汽灭菌
（3）稀释涂布平板法（4）培养基中缺少这些细菌可利用的氮源（5）1．6×109
【解析】（1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理。
（2）要从富含（或长期使用）该除草剂的土壤中分离目的菌；利用该培养基的目的是筛选能降解除草



一、筛选菌株
【知识点讲解】
1.实验室微生物的筛选原理
人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
2.土壤中分解尿素的细菌的分离原理
土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶，这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到催化作用。
①选择培养基的成分：尿素作为唯一的氮源
②鉴定方法：在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，pH升高，说明细菌能分解尿素
3.选择培养基
允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。加入青霉素的培养基：细菌不生长，酵母菌、霉菌等真菌能生长。不加含碳有机物的无碳培养基：分离自养型微生物。
【典型例题】
用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是( )
A.未接种的选择培养基
B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
C.接种了的选择培养基
D.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
【答案】D

【方法点拨】选择培养基的制作方法
(1)在培养基全部营养成分具备的前提下，加入物质：依据某些微生物对某些物质的抗性，在培养基中加入某些物质，以抑制不需要的微生物，促进所需要的微生物生长，如培养基中加入高浓度食盐时可抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长，从而可将该菌分离出来；而在培养基中加入青霉素时可抑制细菌、放线菌的生长，从而分离得到酵母菌和霉菌。
(2)通过改变培养基的营养成分达到分离微生物的目的：培养基中缺乏氮源时，可分离自生固氮微生物，非自生固氮微生物因缺乏氮源而无法生存；培养基中若缺乏有机碳源则异养微生物无法生存，而自养微生物可利用空气中的CO2制造有机物生存。
(3)利用培养基的特定化学成分分离特定微生物：如当石油是唯一碳源时，可抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，从而分离出能消除石油污染的微生物。
(4)通过某些特殊环境分离微生物：如在高盐环境中可分离耐盐菌，其他菌在盐浓度高时易失水而不能生存；在高温环境中可分离得到耐高温的微生物，其他微生物在高温环境中因酶失活而无法生存。
【变式训练】
苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。请回答下列问题：

(1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入________作为碳源，②中不同浓度碳源的培养基________(A.影响；B.不影响)细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用____________________法。
(2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于
________________________________________________________________________；
使用______________________________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的原因是_____________________________________________________
______________________________________________________________________。
(3)实验过程中如何防止其他微生物的污染？
________________________________________________________________________。
【答案】 (1)苯酚 A 稀释涂布平板(2)④的培养基没有加入苯酚作为碳源，⑤的培养基加入了苯酚作为碳源 稀释涂布平板法或平板划线 防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基(3)培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程进行无菌操作 学科*网
二、统计菌落数目的方法
【知识点讲解】
（1）显微镜直接计数法：
①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。
②方法：用计数板计数。
③缺点：不能区分死菌与活菌。
（2）间接计数法(活菌计数法)：
①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
②计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。
③操作：设置重复组，增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。
【典型例题】
通过实验测定土壤中的细菌数量，下列与此操作有关的叙述中，不正确的是( )
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105倍的土壤稀释液0.1 mL，分别涂布于各组平板上
C．将培养皿倒置，37℃恒温培养24～48小时
D．选择菌落数在300个以上的培养皿进行计数
【答案】D

【变式训练】
两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下两种统计结果。
1、甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230。
2、乙同学在该浓度下涂布了A、B、C三个平板，统计的菌落数分别为21、212、256，该同学以这三个平板上菌落数的平均值163作为统计结果。
你认为这两位同学的作法正确吗？如果有问题，错在哪？
甲：没有重复实验（至少涂布3个平板）。
乙：A组结果误差过大，不应用于计算平均值。 学科*网
【方法点拨】 稀释涂布平板法计算注意事项
①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。
②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。
③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。
④涂布平板法所选择的稀释度很重要，一般以三个稀释度中的第二个稀释度所出现的平均菌落数在50个左右为最好。
三、实验设计
【知识点讲解】
1.土壤取样
从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。
2.制备培养基
牛肉膏蛋白胨培养基作为对照，判断选择培养基是否起到选择作用。
3.样品稀释、取样涂布
因为土壤中各类微生物的数量是不同的，为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。
注意：由于初次实验，对于稀释的范围没有把握，因此选择了一个较为宽泛的范围：稀释倍数为103～107。
4.微生物的培养、观察并记录结果
将涂布好的培养皿放在30℃下培养。比较牛肉膏培养基和选择培养基中菌落的数量、形态等，并做好记录。
不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间
5.细菌的计数学科*网
当菌落数目稳定时，选取菌落数在30~300的平板进行计数。在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均值，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。
【典型例题】
在做分离“分解尿素的细菌”实验时，A同学从对应10﹣6培养基中筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．下列有关叙述不正确的是（ ）
A. A同学出现这种结果的原因可能是土样不同
B. 可以将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染
C. 让其他同学用与A同学一样的土壤进行实验，如果结果与A同学一样，则可证明A同学无误
D. B选项的实验思路都遵循了实验的对照原则，而C选项的没有
【答案】D

【变式训练】
下列关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述中，不正确的是( )
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高压蒸汽灭菌后倒平板
B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL涂布到不同平板上培养
C.将实验组和对照组平板倒置，37 ℃恒温培养24～48小时
D.确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的平板进行计数
【答案】D

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