资源简介

4月23日 基因工程的基本操作程序
高考频度：★★★☆☆ 难易程度：★★★☆☆
基因工程的操作步骤包括以下几步，正确的操作顺序是
①目的基因与运载体结合
②将目的基因导入受体细胞
③目的基因的检测与鉴定
④提取目的基因
A．④①②③
B．③②④①
C．②④①③
D．③④①②
【参考答案】A
1．限制酶BamHⅠ和BglⅡ是两种常见的工具酶，它们的识别序列及切割位点依次为G↓GATCC和A↓GATCT。研究中用BamHⅠ切割DNA获得目的基因，用BglⅡ切割质粒，并连接得到重组质粒。相关叙述正确的是
A．限制酶作用于DNA的过程中是将碱基对之间的氢键切断
B．目的基因经BamHⅠ切割后形成的黏性末端是—CTAGG
C．经两种酶处理得到的重组质粒不能再被这两种酶所识别
D．分别用两种限制酶切割，保证了目的基因定向插入质粒
2．在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是
A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸
B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C．将重组DNA分子导入烟草原生质体
D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
3．图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是
A．在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRⅠ
B．如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含 有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有1个
C．为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶 同时处理
D．一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团
1．【答案】C
2．【答案】A
【解析】本题考查基因工程相关知识。限制性核酸内切酶只能切割特定的脱氧核酸序列，而烟草花叶病毒的核酸是核糖核酸，A错误；构建基因表达载体时，需要用限制酶切割得到抗除草剂基因和切开载体，再用DNA连接酶将两者连接形成重组DNA，B正确；基因表达载体构建好之后，需要将重组DNA分子导入受体细胞（烟草原生质体），C正确；基因工程的最后一步是目的基因的检测和鉴定，可以用含有除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞，D正确。本题选A。
3．【答案】B
因两端应各含1个EcoRⅠ酶切位点，即重组DNA中EcoRⅠ酶切点有2个，B错误；为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理，C正确；图示质粒上只有一个EcoRⅠ限制酶切割位点，因此图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团，D正确。

展开更多......

收起↑