资源简介

果酒和果醋的制作复习
一、知识与技能目标
本节要知道果酒、果醋制作所需的菌种，果酒、果醋制作的原理，会写反应式；说
出果酒、果醋的实验流程，正确理解影响发酵的因素。
二、过程与方法目标
根据实验流程示意图和提供的资料，自行设计果醋制作过程，学会收集、整理和
分析实验资料，定量表述实验结果，得出实验结论；在学习中体会已有知识的不足和
进一步探究、拓展的必要性。
三、情感与价值观目标
积极参加实验设计，在合作交流中探索未知，在发现、探究、操作过程中，获得知
识，体验成功的乐趣，激发学习的热情，树立学习的信心。
四、知识网络
五、例题
实例1 利用酵母菌发酵生产酒精时，投放的适宜原料和在生产酒精阶段要控 制的必要条件分别是( C )
A．玉米粉和有氧 Ｂ．大豆粉和有氧 C．玉米粉和无氧Ｄ．大豆粉和无氧
实验2 严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，直接关系到是否能得到质量高，产量多的理想产物，通常所指的发酵条件不包括( D )
A．温度控制 B．溶氧控制 C．pH控制 D．酶的控制
实例3 生产用菌种的来源主要是( D )
①自然环境 ②收集菌株筛选 ③购置生产用菌种 ④培养基
Ａ．①②④ Ｂ．①③④ C．②③④ Ｄ．①②③
实例4酵母菌、乳酸菌、醋酸菌和谷氨酸棒状杆菌异化作用的类型依次是( B )
①需氧型②厌氧型 ③兼性厌氧型
A．①②①③ Ｂ．③②①① C．③②①② Ｄ．②②③①
实例5 下列叙述能够防止发酵液被污染的是( ABCD )
Ａ．榨汁机要清洗干净，并晾干 Ｂ．发酵瓶要清洗干净，用体积分数为70％的酒精消毒
C．装入葡萄汁后，封闭充气口Ｄ．发酵装置的排气口要通过一长而弯曲的胶管与瓶身连接
例1 关于酵母菌的叙述，错误的是( BCD )
A．酵母菌代谢类型为异养、兼性厌氧 B．酵母菌主要繁殖方式为孢子生殖
C．酵母菌只在酒精发酵中发挥作用 Ｄ．酵母菌在含青霉素的培养基中不能生存
例2 食醋生产具有协同作用的菌是( C )①曲霉 ②细菌 ③酵母菌 ④醋酸菌
Ａ．②③④ Ｂ．①②④ C．①③④ Ｄ．①②③
例3 下列条件不是酵母菌快速生长繁殖因素的是( C )
A．含糖量高的培养基 B．温度20℃左右 C．Ph＝2．5 Ｄ．pH—6
例4葡萄的糖分是( D ) ①乳糖 ②麦芽糖 ③葡萄糖 ④蔗糖 ⑤果糖
例5 关于发酵的叙述，正确的是( D )
Ａ．发酵就是无氧呼吸 Ｂ．发酵就是发酵工程
C．发酵就是只获得微生物的代谢产物
Ｄ．发酵是通过微生物的培养来大量生产各种代谢产物的过程
一、基础知识
果酒的制作 果醋的制作 腐乳的制作
菌种的来源
代谢类型
所需要的条件 PH
温度
原理（用方程式来表示）
实验过程中需要注意事项 1、葡萄酒是红色的原因 酿酒过程中为什么不需要灭菌 画出果酒、果醋发酵装置 豆腐的含水量是卤汤中，酒精的含量是 加盐的作用是
思考回答：酒精发酵时要关闭 ，果醋发酵时打开
为什么排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连
出料口的作用：
二、练习
一、选择题
1．利用酵母菌发酵生产酒精时，投放的适宜原料和在生产酒精阶段要控制的必要条件分别是( )
A．玉米粉和有氧 Ｂ．大豆粉和有氧C．玉米粉和无氧 Ｄ．大豆粉和无氧
2． 严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，直接关系到是否能得到质量高，产量多的理想产物，通常所指的发酵条件不包括( )
A．温度控制 B．溶氧控制 C．pH控制 D．酶的控制
3． 生产用菌种的来源主要是( )
①自然环境 ②收集菌株筛选 ③购置生产用菌种 ④培养基
Ａ．①②④ Ｂ．①③④ C．②③④ Ｄ．①②③
4．酵母菌、乳酸菌、醋酸菌和谷氨酸棒状杆菌异化作用的类型依次是( )
①需氧型②厌氧型 ③兼性厌氧型
A．①②①③ Ｂ．③②①① C．③②①② Ｄ．②②③①
5．下列叙述不能够防止发酵液被污染的是( )
Ａ．榨汁机要清洗干净，并晾干
Ｂ．发酵瓶要清洗干净，用体积分数为70％的酒精消毒
C．装入葡萄汁后，封闭充气口
Ｄ．发酵装置的排气口要通过一个长而直的胶管与瓶身连接
6关于酵母菌的叙述，正确的是( )
A．酵母菌代谢类型为异养、兼性厌氧B．酵母菌主要繁殖方式为孢子生殖
C．酵母菌只在酒精发酵中发挥作用 Ｄ．酵母菌在含青霉素的培养基中不能生存
7．食醋生产具有协同作用的菌是( )
①曲霉 ②细菌 ③酵母菌 ④醋酸菌
Ａ．②③④ Ｂ．①②④ C．①③④ Ｄ．①②③
8． 下列条件不是酵母菌快速生长繁殖因素的是( )
A．含糖量高的培养基 B．温度20℃左右 C．Ph＝2．5 Ｄ．pH—6
9．葡萄的糖分是( )
①乳糖 ②麦芽糖 ③葡萄糖 ④蔗糖 ⑤果糖
A．①②③④⑤ Ｂ．③④ C．①③④⑤ Ｄ．③⑤
10．关于发酵的叙述，正确的是( )
Ａ．发酵就是无氧呼吸 Ｂ．发酵就是发酵工程
C．发酵就是只获得微生物的代谢产物
Ｄ．发酵是通过微生物的培养来大量生产各种代谢产物的过程
11．有甲、乙两组等量的酵母菌，甲组酵母菌进行有氧呼吸，乙组酵母菌进行发酵。若它们消耗了等量的葡萄糖，则它们放出的CO2之和与它们消耗的O2之和比为
A．1：1 B．3：0 C．6：0 D．4：3
12．细胞结构是原核，生长繁殖过程绝对不需要氧，体内不含有氧呼吸酶的微生物是
A．乳酸菌 B．酵母菌 C．变形虫 D．固氮菌
13．培养单细胞绿藻的培养液和培养单细胞酵母菌的培养液，在所含成分上最大的区别是A．前者必须含有机成分 B．后者必须含有机成分
C．前者可以不含无机盐 D．后者可以不含无机盐
14．在适宜的温度条件下，在下列装置中都放入干酵母（内有活酵母菌），其中适于产生酒精的装置是
A B C D
15．下列4支试管中分别含有不同的化学物质和活性酵母制备物，经一定时间的保温后，会产生CO2的试管是
A．丙酮酸+细胞膜已破裂的细胞 B．葡萄糖+线粒体
C．丙酮酸+线粒体 D．丙酮酸+内质网
16．在无氧条件下，酵母菌利用葡萄糖进行呼吸作用，最后形成
A．CO2和H2O B．CO2和酒精 C．乳酸 D．丙酮酸和CO2
17．下列物质中，醋酸菌细胞内不具有的是
A．葡萄糖 B．脱氧核糖 C．核糖 D．纤维素
18．细菌繁殖中不可能发生的是
A．有丝分裂 B．DNA复制 C．细胞壁形成 D．蛋白质合成
19．酿酒用的酵母菌既可进行有性生殖，又可进行出芽生殖，二者相比，前者特有的是
A．基因突变 B．基因重组 C．染色体变异 D．不可遗传的变异
20．利用酵母菌制酒时，从开始便持续向发酵罐内通入氧气，结果是
A．酵母菌大量死亡，酒精减产 B．酵母菌数量不变，酒精产量不变
C．酵母菌数量增多，酒精减产 D．酵母菌数量增多，不产生酒精
21．当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇直接变为
A．醋酸B．乙醛C．乙酸D．乙烯
22．果醋制作过程中，需要
A．先通氧气一段时间，以后停止通入B．整个过程要不断通入氧气
C．整个过程不需要氧气D．接种后，先密封一段时间，然后再通氧气
23．制作果醋时要适时向发酵液充气是因为
A．醋酸菌发酵时需要充足是氧气 B．酵母菌发酵时需要充足的氧气
C．防止发酵液温度过高 D．防止发酵时二氧化碳过多引起发酵瓶爆裂
24．用酵母菌发酵制作葡萄酒时，酒精成分一般不会超过14%，正确解释是
A．原料中用于发酵的成分太少 B．酒精达到一定的浓度会抑制酵母菌的发酵
C．酒精达到一定的浓度会妨碍酵母菌的存活D．随着发酵的进行，高温会使酵母菌死亡
25．在制作馒头时，可采纳用小苏打或者通过酵母菌发酵的方法使馒头松软，请问这两种方法中，馒头中的营养和含有的能量情况相比较最有可能的是
A．后者所含营养丰富、能量少 B．后者所含营养单一、能量少
C．前者所所含的营养丰富、能量多D．前者所含营养和能量相同
二．非选择题
20．下图表示大气中氧的浓度对酵母菌细胞内CO2产生的影响，请据图回答
（1）A点表示酵母菌组织释放的CO2较多，这些CO2是 的产物。
（2）由A到B，CO2的释放量急剧减少，其原因是 。
（3）由B到C，CO2的释放量又不断增加，其主要原因是 。
（4）为了有利于减少有机物的消耗，氧气浓度应调节到图中的那一点所对应的浓度？
。采取这一措施的理由是 。
21．下面是古代家庭酿酒的具体操作过程：先将米煮熟，待冷却至30℃时，加少许水和一定量的酒酿（做实验是用酵母菌菌种）与米饭混用后置于一瓷坛内（其他容器也可），在中间要挖一个洞，加盖后置于适当的地方保温（28℃），12h即成。现请你从以下几个方面对其发酵过程作一个简单的分析：
（1）在中间挖一个洞的目的是 。
（2）发酵坛没有密封，那么坛内无氧发酵的环境是由什么造成的？
。
写出发酵反应式 。
（3）请你用文字或坐标曲线的形式来说明在发酵坛内有氧呼吸和无氧呼吸的此消彼长的过程。
（4）在具体操作过程中，要根据米饭的多少加适量的酒酿，如把握不住，宁多而不能少，如果加少了将引起什么后果？为什么？
22．如图简单表示了葡萄酒的酿制过程，请据图分析：
（1）葡萄酒的酿制原理是先通气进
行 ，以增加酵母菌的
数量，然后再 获得葡萄酒。
（2）随着发酵程度的加深，液体密度
会逐渐变低（可用密度计测量），原因
是 。
（3）下列叙述中不正确的是
A．在甲中进行搅拌是为了增加氧溶量
B．在甲中，酵母菌的能量来源将全部消耗
C．甲与乙放出的气体主要是二氧化碳
D．揭开丙容器的盖子，可能会有醋酸产生
23．将酵母菌研磨离心分离后，得到上清液（含细胞质基质）和沉淀物（含细胞器）。将等量的上清液、沉淀物和未经离心的匀分别放入甲、乙、丙三只试管中进行下列实验，请回答：
（1）实验一：向三只试管分别滴加等量的葡萄糖溶液，3只试管中的最终产物分别是：甲 ；乙 ；丙 。
（2）实验二：向三只试管分别滴加等量的丙酮酸，三支试管的最终产物是：甲 ；乙 ；丙 。
（3）实验三：在隔绝空气的情况下，重复实验一，3支试管的最终产物是：甲 ；乙 ；丙 。
（4）实验二：向三只试管分别滴加等量的荧光素（荧火虫尾部提取的可发光物质）重复实验一和实验三，从理论上讲，发光最强的是实验 中的 试管。
供选答案（A）水和二氧化碳（B）乙醇和二氧化碳（C）水（D）无反应
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
答案 C D D B D A C C D D D A B
题号 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
答案 A C B D A B A B B A C A
加入水
加入葡萄
糖和水
加入葡萄糖
加入葡萄糖和
水并不断搅拌
A
B
C
0
5
1000
15
20
25
O2%
CO2释放的相对值
葡萄汁+白糖+酵母菌一天搅拌2～3次
断绝与空气接触
（15～20℃约7天）
气泡不再发生时，盖上盖子（15～20℃约 3～5天）
甲
乙
丙
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1一、找出DNA的粗提取与鉴定操作的错误 二、找出血红蛋白的提取和分离错误
三、例题
例1：
关于DNA粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验结果的比较，最终选择鸡血做实验材料。请据图回答问题：
（1）鸡血细胞中红细胞 ，
家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而
血液中 细胞的数目较多，
可以提供丰富的 。
（2）实验前由老师制备血细胞液提供
给同学们做实验材料，而不用鸡全血，
主要原因是
。
（3）生活在牧羊区的人们，采取牛、羊号和马血较方便，若他们按实验要求完成实验步骤后，结果是 ，这是因为这些动物和人类一样 。但若改用动物的肝脏做实验材料，实验能顺利进行，这是因为 。
（4）若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加 程序，使组织细胞更易分离。
答案：⑴有细胞核 红 DNA ⑵鸡血细胞液中DNA相对含量高 ⑶很难提取到DNA 红细胞无细胞核 肝细胞有细胞核 ⑷研磨
例2：
红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带氧气或二氧化碳，我们可以选用猪、牛、羊或其化脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题：
（1）血红蛋白提取和分离的程序可分为四步： 、 、 和 。
（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集血红蛋白溶液。
①加入柠檬酸钠的目的是
②以上所述的过程即是样吕处理，它包括 、 、收集血红蛋白溶液。
（3）收集的血红蛋白溶液在透析袋中可以经过透析，这就是样品的粗他离。
①透析的目的是 。
②透析的原理是 。
（4）然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。
①样品纯化的目的是 。
②血红蛋白有什么特点？ 。
这一特点对进行蛋白质的他离有什么意义？ 。
答案：⑴样品处理 粗分离 纯化 纯度鉴定 ⑵①防止血液凝固 ②红细胞洗涤 血红蛋白释放 ⑶①去除相对分子质量较小的杂质 ②透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内 ⑷①通过凝胶色谱法，将相对分子质量大的杂质蛋白除去 ②呈现红色 在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液，这使血红蛋白的分离过程非常直观大简化了实验操作
一、基础知识
1、提取生物大分的基本思路：选用一定的 或 方法分离具有不同 或 的生物大分子。
2、概念：就是利用DNA与 、 和 等在 和 方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
3、方法：DNA和蛋白质等其他成分在不同同浓度的 溶液中溶解度不同。利用这一特点，选择适当的 就能使NDA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相扫，以达到分离的目的。
DNA不溶于 ，但是细胞中的某些蛋白质则溶于此溶液。 能水解蛋白质，但对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受 的高温，而DNA在 以上才会变性。洗涤剂能分解 ，但对DNA没有影响。
DNA的鉴定：在 的条件下，DNA遇二苯胺会染成 。
4、蛋白质分离的原理：大多数凝胶内部是由 构成的小球体，内部有许多的通道，当不同的蛋白质进入凝胶内部的通道，路程 ，移动速度 ；而 的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在 移动，路程 ，移动速度 。样品中的 蛋白质先流出， 的蛋白质后流出。因此，相对分子量不同的蛋白质得以分离。
5、蛋白质的提取和分离一般分为四步： 、 、 和 。
6、细胞的洗涤目的：去除 。
7、分离血红蛋白溶液：将搅拌好的混合液离心一可观察到试管中溶液分为4层：第一层： ；第二层： 的沉淀层；第三层： 的水溶液， 透明液体；第四层：其他杂质的 色沉淀物。
8、样品的加入和洗脱
（1）加样前：打开流出口，使柱内凝胶面上的 下降到与 平齐，关闭出口。
（2）加样：用 将1mL 的样品加到色谱柱的 。
（3）加样后：打开 ，使样品渗入凝胶床内，等完全进入后，关闭下端出口。小心加入缓冲液到 ，连接缓冲洗液脱瓶，打开下端出口，进得洗脱，待红公的蛋白质接近色谱柱底端时，用试管收集流出认，每 收集一管，连续收集。
二、练习
1、向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不断加入蒸馏水，在这个过程DNA和杂质蛋白质的溶解度变化情况分别是
A．减小；减小B．增大；增大C．先减小后增大；增大D．减小；增大
2、下面关于DNA对高温的耐受性的说法不正确的是
A．DNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强
B．超过80OC后DNA将变性，即使恢复到常温，生物活性也不能恢复
C．不同生物的DNA的变性温度不一定相同
D．深海热泉附近生活的生物的DNA对高温耐受性更强，其DNA中鸟嘌呤所占的比例更高
3、在DNA的粗提取与鉴定的实验中，初步析出DNA和提取纯净的DNA所用的药品和浓度是：①0.1g/mL柠檬酸钠溶液；②2mol/LNaCl溶液；③0.14mol/LNaCl溶液；④体积分数为95%的酒精溶液；⑤0.015mol/LNaCl溶液。以上几点正确的是
A．①③⑤B．③④C．②④D．②③④
4、在提取DNA的过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是
A．不易破碎B．减少DNA的损失C．增加DNA的含量D．容易涮洗
5、玻璃棒搅拌出的较纯净的DNA的颜色以及DNA遇二苯胺（沸水浴）染上的颜色分别是
A．黄色、紫色B．白色、砖红色C．白色、蓝色D．蓝色、砖红色
6、关于血红蛋白的提取和分离的操作不正确的是
A．色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡，必须重装
B．凝胶用自来水充公溶胀后，配成凝胶悬浮液
C．为加快凝胶膨胀，可以将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热，逐渐升温至沸腾，通常只需1－2h
D．在血红蛋白提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理，是让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能
7、实验中对DNA进行鉴定时，做如下操作：
A B
1 加2mol/NaCl溶液5ml 加2mol/LNaCl溶液5ml
2 不加 加入提取的DNA丝状物并搅拌
3 加4ml二苯胺，混匀 加4ml二苯胺，混匀
4 沸水浴5分钟 沸水浴5分钟
实验现象
实验结论
（1）根据上图，完成表格空白处的实验内容。
（2）对B试管，完成1、2、3的操作后溶液颜色如何？
（3）在沸水中加热的目的是 ，同
时说明DNA对高温有较强的 。
（4）A试管在实验中的作用是 。
（5）B试管中溶液颜色的变化程度主要与 有关。
8、下面是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入和洗胶示意图，请据图回答下列问题。
（1）在加样示意图中，正确的加样顺
序是 。
（2）用吸管加样时，应注意正确操作，分别
是①
②
③ 。
（3）等样品 时，
才加入缓冲液。
（4）待 接近色谱柱
底端时，用试管收集流出液，每 ml
收集一管，连续收集。
答案
一、基础填空
1、物理 化学 物理 化学性质 2、RNA 蛋白质 脂质 物理 化学性质 3、氯化钠 盐浓度 酒精溶液 蛋白酶 10－80度 80度 细胞膜 沸水浴 蓝色 4、多糖类化合物 长 慢 相对分子质量大 凝胶外 短 快 相对公子质量大 相对分子质量小 5、样品 血红蛋白释放 纯化 纯度鉴定 6、血浆中蛋白质 7、甲苯层 脂类 血红蛋白 红色 暗红 8、⑴缓冲液 凝胶 ⑵滴管 血红蛋白液 顶端⑶出口 适当高度 5ml
二、练习
1、C 2、B 3、B 4、B 5、C 6、B
7、
A B
1 加2mol/NaCl溶液5ml 加2mol/LNaCl溶液5ml
2 不加 加入提取的DNA丝状物并搅拌
3 加4ml二苯胺，混匀 加4ml二苯胺，混匀
4 沸水浴5分钟 沸水浴5分钟
实验现象 溶液不变蓝色 溶液逐渐变蓝色
实验结论 DNA在沸水浴中遇二苯胺会被染成蓝色
⑴
⑵溶液颜色基本不变 ⑶加快颜色反应速度 耐受性 ⑷对照 （5）加入试管中丝状物的多少
8、⑴④①②③ ⑵①不要触及破坏凝胶面 ②贴壁加样 ③使吸管管品沿管壁环绕移动 ⑶完全进入凝胶层 ⑷红色蛋白质 5ml
DNA的粗提取与鉴定和血红蛋白的提取和分离
1、凝胶色谱柱的装填：用蒸馏水溶胀凝胶，分两次均匀填入色谱柱，在约50cm的操作压一用300ml浓度为20mmoL/L的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶12h，以去除凝胶中的气泡
2、打开流出口，使缓冲液与凝胶面平齐，关闭出口
3、样品的加入和洗脱
（1）用吸管将1ml样品逐滴滴入凝胶面上，打开出口，使校品渗入凝胶床内后，关闭出口。
（2）小心加入物质的量浓度为20mmol/L的磷酸缓冲液到适当高度后，连接缓冲液洗脱瓶，打开下端出口，进行洗脱。
（3）待红色的蛋白质从色谱柱底端流出时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集。
凝胶色谱操作
红细胞洗涤：
1、采集血样，超速短时离心，取红细胞，倒入烧杯加等体积的生理盐水，缓慢搅拌10min，再低速离心，重复洗涤三次，直到溶液呈淡黄色分离出干净的红细胞。
2、向红细胞中加入等体积的蒸馏水和浓度40%的甲苯搅拌10min
3、将混合液以2000r/min离心10min，分离出最下层暗红色透明液体
4、将盛有血红蛋白溶液1mL的透析袋放入300mL浓度为20mmol/L磷酸缓冲液中透析2小时。
样品处理
DNA鉴定：
DNA在水溶液中遇二苯胺变成淡蓝色
对DNA进一步提纯：滤液中加入与滤液体积相等的、冷却的95%的酒精，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，即粗提取的DNA
DNA黏稠物再溶解：
将其放在2g/mL的氯化钠溶液中溶解
过滤：
用多层纱布过滤，含DNA的黏稠物留在纱布上
过滤：用纱布滤得含DNA的滤液
析出含DNA的黏稠物：
向滤液中加入蒸馏水，并玻璃棒不停搅拌，直到丝状物不再增加时，停止搅拌。
过滤：除去蛋白质，得滤液
溶解核内DNA：滤中加入2g/mL氯化钠溶液
提取血细胞核物质：
1、猪血中加入蒸馏水迅速搅拌。
2、滤纸过滤：除去细胞膜等破碎物，得滤液
3、原理：蒸馏水相对于细胞内液是低渗溶液，细胞吸水涨破，玻璃棒搅拌加速DNA溶解
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酶的研究与应用复习
学习目标：
1．简述果胶酶的作用；检测果胶酶的活性；
2．探究温度和pH对果胶酶活性的影响以及果胶酶的最适用量；搜集有关果胶酶应用的资料。
3．探讨温度对加酶洗衣粉洗涤的影响；探讨不同种类的加酶洗衣粉对同一污物和不同污物洗涤效果的区别
4．说出加酶洗衣粉的洗涤原理、固定化酶和固定化细胞的作用和原理；。
5．尝试制备固定化酵母细胞，并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵。
复习重点：
1．温度和pH对果胶酶活性的影响。
2．制备固定化酵母细胞。
3．区别不同种类的加酶洗衣粉对同一污物和不同污物的洗涤效果。
复习难点：
1．果胶酶的最适用量。
2．制备固定化酵母细胞。
3．实验过程中各种变量的控制。
例题
例1 研究认为，用固定化酶技术处理污染物足很有前途的。如将从大肠杆菌得到磷酸二酯酶固定到尼龙膜上制成制剂，可用于降解残留在土壤中的有机磷农药，与微生物降解相比，其作用不需要适宜的( D )
A．温度 B．pH C．水分 D．营养
例2将小麦种子分别置于20℃和30℃培养箱中培养4天，依次取等量的萌发种子分别制成提取液Ⅰ和提取液Ⅱ。取3支试管甲、乙、丙，分别加入等量的淀粉液，然后按下图加入等量的提取液和蒸馏水，45℃水浴保温5分钟，立即在3支试管中加入等量斐林试剂并煮沸2分钟，摇匀观察试管中的颜色。结果是D
A．甲呈蓝色，乙呈砖红色，丙呈无色
B．甲呈无色，乙呈砖红色，丙呈蓝色
C．甲、乙皆呈蓝色，丙呈砖红色
D．甲呈浅砖红色，乙呈砖红色，丙呈蓝色
三、练习
1．下列有关酶的正确叙述是( )
①是由分泌功能的细胞产生的 ②有的从食物中获得，有的在体内转化而来③凡是能产生激素的细胞都能产生酶 (4)酶是活细胞产生的，只能在生物体内发挥作用，离开活细胞，酶就失去催化能力 (5)酶都是蛋白质 (6)有的酶是蛋白质，有的是RNA ⑦酶在代谢中有多种功能 (8)酶在新陈代谢和生殖发育中起调控作用 ⑨化学反应前后，酶的数量和化学性质不变 （10）酶的活性随温度的而不断升高
A．①③④ B．③⑥⑨ C．②⑤⑦ D．②⑥⑧
2．有关加酶洗衣粉的叙述不正确的是( )
A．加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉
B．加酶洗衣粉含的酶的化学成分是蛋白质或RNA
C．加酶洗衣粉的使用减少了对环境的污染
D．加酶洗衣粉的洗涤效果比普通洗衣粉的洗涤效果要好
3．固定化酶和固定化细胞是利用物理或化学方法将酶或细胞固定在一定空间的技术，其中适合细胞固定的方法是( )
A．包埋法 B．物理吸附法 C．化学结合法 D．高温冷却法
4．蛋白质代谢是在多种酶的参与下完成的，使肽键断裂的酶是( )
A．呼吸酶 B．蛋白酶 C．转氨酶 D．脱氨基酶
5．酶是活细胞产生的。下列关于酶的论述错误的是( )
A．有些酶是核酸 B．酶的数量因素与化学反应而减少
C．酶的活性与pH有关 D．酶的催化效率很高
6．有关制备固定化酵母细胞的叙述正确的是( )
A．首先用蒸馏水把干酵母、CaCl2、海藻酸钠配制成溶液，但配制CaCl2溶液需要加热
B．配制海藻酸钠的溶液成糊状
C．配制酵母细胞溶液，要用玻璃棒搅拌，使酵母细胞混合均匀
D．酵母细胞溶液首先要和CaCl2溶液混合
7．在制备固定化酵母细胞的操作中正确的是( )
A．制备好海藻酸钠后，需立即将其与酵母细胞混合以防凝固
B．制备固定化酵母细胞过程应用注射器
C．以恒定的速度把混合液注射到CaS04溶液内
D．凝胶珠在溶液中应浸泡10min左右
8．将乳清蛋白、淀粉、胃蛋白酶、唾液淀粉酶和适量水混合装入一容器内，调整pH至2．0，保存于370C的水浴锅内。过一段时间后，容器内剩余的物质是( )
A．淀粉、胃蛋白酶、多肽、水
B．唾液淀粉酶、麦芽糖、胃蛋白酶、多肽、水
C．唾液淀粉酶、胃蛋白酶、多肽、水
D．唾液淀粉酶、淀粉、胃蛋白酶、水
9．下列说法不正确的是( )
A．固定化酶和固定化细胞的技术方法包括包埋法、化学结合法和物理吸附法
B．固定化酶更适合采用化学结合法和物理吸附法
C．由于细胞个大，而酶分子很小，因此细胞多采用物理吸附法固定
D．反应物是大分子物质应采用固定化酶
10．酶更适合采用化学结合和物理吸附法固定化的原因是( )
A．酶分子很小，个小的酶容易从包埋材料中漏出
B．酶分子很大，且带有电荷
C．酶分子化学性质稳定
D．酶的化学本质是蛋白质，易于发生化学反应
11．请参照细胞固定化技术的相关基础知识，完成下列问题。
(1)细胞固定化技术一般采用包埋法固定化，采用该方法的原因是_________。
(2)包埋法固定化是指_____________ 。
(3)包埋法固定化细胞常用的载体有________________________________________
(4)与固定化酶技术相比，固定化细胞技术的优点是_ _________。
(5)制备固定化酵母细胞的四个大步骤是：
①______________________________________ 。
②_________________________________________ 。
③_______________________________________。
④_________________________________________。
12．昆虫学家用人工诱变的方法使昆虫产生基因突变，导致酯酶活性升高，该酶可催化分解有机磷农药。近年来已将控制酯酶合成的基因分离出来，通过生物工程技术将它导人细菌体内，并与细菌内的DNA分子结合起来。经过这样处理的细菌仍能分裂繁殖。请根据上述资料回答：
(1)人工诱变在生产实践中已得到广泛应用，因为它能提高___________，通过人工选择获得_______________。
(2)酯酶的化学本质是__________，基因控制酯合成要经过________和________两个过程。
(3)用固定化酶技术将该酯酶固定在尼龙网膜上后，在用于降解污水中有机磷的突出优点是_________________。
(4)通过生物工程产生的细菌．其后代同样能分泌酯酶，这是由于____________
(5)请你具体说出一项上述科研成果的实际应用________________________.
13．下图依次表示酶浓度一定时，反应速率和反应物浓度、温度、pH的关系。请据图回答下列问
题：
(1)图A中，反应物达到某一浓度时，反应速率不再上升，其原因是_______________.
(2)图B中，a点所对应的温度称________.
(3)图B中，a点到b点的曲线急剧下降，其原因是______________________。
(4)将装有酶与反应物的甲、乙两试管分别放人12℃和75℃水浴锅中，20分钟后取出，转入37℃的水浴锅中保温，两试管内反应分别应为：甲______________乙_____________。
(5)图C表示了_________催化反应的速率变化曲线。
A．唾液淀粉酶 B.胃蛋白酶 C．胰蛋白酶 D.植物淀粉酶
14．(1)人们不会在热泉中发现活着的嗜冷海藻而经常可以在冷水环境中分离出嗜热微生物。请根据酶的特性分析产生这种现象的原因。
(2)淀粉酶可以通过微生物发酵生产。为了提高酶的产量，请你设计一个实验，利用诱变育种方法，获得产生淀粉酶较多的菌株。
①写出主要实验步骤，
②根据诱发突变率低和诱发突变不定向性的特点预期实验结果。
参考答案
1．B 2．B 3．A 4．B 5．B 6．C 7．B 8．A 9．C 10．A
11．(1)细胞个大，不易从包埋材料中漏出 (2)将微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中 (3)明胶、琼脂糖、 海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等(4)成本更低，操作更容易 (5)①酵母细胞的活化②溶化海藻酸钠③海藻酸钠溶液与酵母细胞混合④酵母细胞的固定化
12．(1)基因突变频率；人们所需要的突变性状(2)蛋白质；转录；翻译(3)酶被固定化后可连续反复使用，降低成本(4)控制酯酶合成的基因随细菌DNA分子复制而复制，并在后代中表达(5)用于降解污水中的有机磷农药，以保护环境(用生物工程技术可以改造生物的遗传特性，为人所用；用诱变技术提高生物基因的突变率，从中选育出优良的生物品种；酶固定化技术使酶能反复使用，提高效率降低成本，或增大酶与反应物接触面，并且不混合在生成物中，可互相利用。答出一项即可)
13．(1)受反应液中的酶浓度限制(或酶不足)(2)酶反应的最适温度(3)温度升高使酶活性下降(4)速度加快；无催化反应(5)C
14．(1)嗜冷海藻体内的酶遇到高温后，酶的分子结构被破坏而失去活性，海藻很快死亡；而嗜热微生物体内的酶遇到骶温环境，酶的活性降低，但酶分子结构没有被破坏，遇到合适的温度又可恢复活性。(2)①主要实验步骤；第一步：将培养好的生产菌株分为两组，一组用一定剂量的诱变剂处理，另一组不处理，做对照。第二步：制备含淀粉的培养基。第三步：把诱变组的大量菌株接种于多个含淀粉的固体培养基上，同时接种对照组，相同条件下培养。第四步：比较两组菌株菌落周围透明圈的大小，选出透明圈变大的菌株。②预期实验结果： a．由于诱发突变率低，诱变组中绝大多数菌落周围的透明圈大小与对照组相同。 b．由于诱发突变不定向性，诱变组中极少数菌落周围的透明圈与对照组相比变大或变小。
浓度
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