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2.2 动物细胞工程
【高考目标定位】
1、动物细胞培养和体细胞克隆
2、动物细胞融合和单克隆抗体
【考纲知识梳理】
一、动物细胞培养
1、原理：细胞增殖
2、过程：
3、结果：获得细胞群
4、传代培养的原因：培养到一定时期细胞密度过大和代谢消耗引起营养枯竭。
二、动物体细胞核移植
1、不同细胞全能性的表现程度不同，如：受精卵＞胚胎干细胞＞多能干细胞＞单能干细胞＞体细胞。
2、动物细胞核的移植技术
项目 细胞核的移植[来源:21世纪教育网
概念 利用一个细胞的细胞核（供体核）来取代另一个细胞中的细胞核，形成一个重建的“合子”
原理 动物体细胞核具有全能性
过程
结果 获得与供体遗传物质基本相同的个体
意义 ①有利于遗传疾病的治疗，优良品种的培育②对物种的优化、濒危动物的保护和转基因动物的扩群有重要意义③降低畜牧业的成本，缩短育种年限，提高生产效率
三、动物细胞融合与单克隆抗体制备
1、原理：细胞膜的流动性、细胞增殖
2、诱导融合的因素：聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒、电激等。
3、意义：制备单克隆抗体。
4、单克隆抗体的制备：
（1）过程
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（2）主要优点：特异性强、灵敏度高，并可大量制备。
【要点名师精解】
动物细胞融合与植物体细胞杂交的不同
比较项目 细胞融合的原理 细胞融合的方法 诱导手段 用法
植物体细胞杂交 细胞膜的流动性 去除细胞壁后诱导原生质体融合 离心、电刺激、振动，聚乙二醇等试剂诱导 克服了远缘杂交的不亲和性，获得杂种植株
动物细胞融合 细胞膜的流动性 使细胞分散后诱导细胞融合 除应用植物细胞杂交手段外，再加灭活的病毒诱导 制备单克隆抗体的技术之一
【例1】某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处是不正确的
植物细胞工程 动物细胞工程
技术手段 植物组织培养，植物体细胞杂交 动物细胞培养和融合，单克隆抗体的制备
特殊处理 机械法去除细胞壁 胰蛋白酶处理，制成细胞悬液
融合方法 物理方法、化学方法 物理方法、化学方法、生物方法
典型应用 人工种子、杂种植株 单克隆抗体的制备
培养液区别 生长素和细胞分裂素影响 愈伤组织的生长和分化 动物血清不可缺少
A．1 B．2 C．3 D．4
【解析】通过熟记植物细胞工程与动物细胞工程的对比可知，植物细胞工程中去除细胞壁使用的是酶解法，即利用纤维素酶和果胶酶去除。
【答案】A
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【感悟高考真题】
（2010·福建高考）32．[生物—现代生物科技专题](10分)
红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO）期间要生产流程如右图
（1）图中①所指的是 技术。
（2）图中②所指的物质是 ，③所指的物质是 。
（3）培养重组CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换 。
（4）检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的 细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成
【解析】本题主要以人红细胞生成素生产为材料来考查基因工程和细胞工程中动物细胞培养技术、制备单克隆抗体技术。获取目的基因的方法有四种（从基因文库中获取、用PCR扩增技术、用反转录法、用化学合成法）由图以核DNA为模板获得目的基因的方法可知①为PCR技术。进行反转录的模板是mRNA。由题意可知重组CHO细胞适用于生产重组人红细胞生成素(rhEPO），所以重组CHO细胞能过表达出重组人红细胞生成素(rhEPO）或者红细胞生成素。培养动物细胞是用液体培养基——即培养液，细胞从培养液中吸收营养，并同时向培养液中排放代谢废物，当代谢废物积累时会危害细胞，因此要不断更新培养液。制备单克隆抗体是让淋巴B细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，然后由杂交瘤细胞来分泌抗体。
【答案】（1）PCR （2）mRNA rhEPO （3）培养液 （4）杂交瘤
（10浙江卷）4.下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是(D)
A. 培养保留接触抵制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞
B. 克隆培养法培养过程上多数细胞的基因型会发生改变
C. 二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的
D. 恶性细胞系的细胞可进行付代培养
【解析】本题主要考查细胞工程的有关知识，动物细胞培养可以分为原代培养，原代培养到一定程度后要进行传代,因为细胞有接触抑制现象,当细胞接触时就会停止分裂(在细胞培养过程中进行的为有丝分裂,所以培养出来的多数细胞基因型相同),但是细胞在培养过程中,传代次数也是有限的,一般为50次就会死亡,留下来的细胞就是发生了癌变的细胞,遗传物质发生改变,具有不死性,但是仍保留接触抑制现象,所以还是要传代培养,这个也就是人体中癌细胞会转移的原因,所以答案为D.
【答案】D
（2009·山东高考）35.（8分）（生物一现代生物科技专题）
人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疾苗生产和抗体制备的流程之一如下图：
请回答：
（1）过程①代表的是 。
（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用 和
两种工具酶。
（3）过程③采用的实验技术是 ，获得的X是 。
（4）对健康人进行该传染病免疫预防时，
可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。
对该传染病疑似患者确诊时，可以疑似患者体内分离病毒，
与已知病毒进行 比较；或用图中的 进行特异性结合检测。
【解析】
本题以图展示了疫苗的生产和单克隆抗体的制备的过程，考察了中心法则、基因工程、动物细胞工程等现代生物科技。
（1）中心法则中，对于少数的以RNA为遗传物质的病毒，其遗传信息的传递过程需要补充的过程有RNA的逆转录和RNA的复制的过程，图中过程①正代表的是逆转录的过程
（2）基因工程的步骤是：目的基因的提取——构建基因表达载体——导入受体细胞——目的基因的检测和表达，其中构建基因表达载体中需要限制酶来切割以获取目的基因，同时需要相同的限制酶切割运载体以获取与目的基因相同的黏性末端，再通过 DNA连接酶连接目的基因和运载体。
（3）过程③是将瘤细胞与B淋巴细胞融合的过程，获得的叫杂交瘤细胞，其具备了瘤细胞的无限增殖的特性和B淋巴细胞的产生抗体的特性，从而制备单克隆抗体。
（4）本题考察了免疫预防的操作过程，以及欲确诊疑似患者而采取的方法。本题中提示该RNA病毒表面的A蛋白为主要的抗原，故而可选用通过基因工程生产的A蛋白制备疫苗；确诊时为判断该病毒是否为题目中的RNA病毒，可以进行核酸序列的比对，也可以利用单克隆抗体具备特异性，利用抗A蛋白的特异性单克隆抗体通过能否特异性结合判断病毒表面是否有A蛋白的存在进一步进行检测是否为目的RNA病毒。
【答案】
（1）逆转录
（2）限制性核酸内切酶（限制酶、限制性内切酶） DNA连接酶（两空可以互换）
（3）细胞融合 杂交瘤细胞
（4） A蛋白 核酸（基因）序列 抗A蛋白的单克隆抗体
（2009·浙江高考）用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是
A．都需用培养箱 B．都须用液体培养基
C．都要在无菌条件下进行 D．都可体现细胞的全能性
【解析】动、植物成体的体细胞进行离体培养都要在无菌条件下进行，动物成体的体细胞离体培养用液体培养基，不能体现细胞的全能性，植物成体的体细胞离体培养不一定用液体培养基，能体现细胞的全能性。故C正确。
【答案】C
（2009·四川高考）30.（22分）回答下列Ⅰ、Ⅱ两个小题。
Ⅰ.将小鼠胚胎干细胞定向诱导分化成一种特定的细胞（命名为M细胞），再将M细胞移植到糖尿病模型小鼠（胰岛细胞被特定药物破坏的小鼠）体内，然后小鼠的血糖浓度，结果如图所示（虚线表示正常小鼠的血糖浓度值）。请回答相关问题：（1）实验用的胚胎干细胞取自小鼠的早期囊胚，取出胚胎后一般用　　　　　酶将其分散成单个细胞。
（2）根据实验结果可以判定M细胞已具有　　　　　　细胞的功能。说明判定的理由　　　　。
（3）用胰岛素基因片段做探针，对小鼠胚胎干细胞和M细胞进行检测。请在下表的空格中填上检测结果（用“+”表示能检测到，用“-”表示不能检测到）。
用探针检测细胞的DNA 用探针检测细胞的RNA
胚胎干细胞 M细胞 胚胎干细胞 M细胞
上述实验结果表明，胚胎干细胞通过　　　　　　　　定向分化为M细胞。
（4）若将M细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中，重组细胞能否分化为其他类型细胞？
　　　　，请说明理由　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
【解析】本题考查的知识点如下：
1.糖尿病的机制
2.细胞的全能性和基因表达的相关知识
1．糖尿病的机制
由于胰岛B细胞受损导致无法合成胰岛素来降血糖，血糖浓度过高随尿排出，导致糖尿病的产生。本题中通过曲线反应了未移植M细胞和移植M细胞下血糖浓度的变化，可见移植M细胞血糖浓度降低，显然M细胞发挥了胰岛B细胞的功能
2．细胞的全能性和基因表达的相关知识
第（4）小问中考查了动物细胞核具有全能性的原因，即细胞核含有该物种所特有的全套遗传物质；第（3）问中通过表格的形式要求学生补充实验的结果，首先学生要明确这里的M细胞是通过小鼠的胚胎干细胞经过细胞增殖、分化而产生的，由于是通过有丝分裂增殖，所以M细胞和胚胎干细胞的DNA是一样的，然而细胞分化的实质为基因的选择性表达，追究到原因就是相同的DNA转录形成了不同的RNA，进一步合成了不同的蛋白质，所以M细胞和胚胎干细胞中的RNA是不一样的，从而在进行DNA探针杂交试验时出现了如表格中显示的杂交结果。
【答案】
Ⅰ.（12分）
（1）胰蛋白酶
（2）胰岛B
胰岛B细胞分泌的胰岛素是唯一降血糖的激素
（3）
基因的选择性表达（胰岛素基因的表达）
（4)能 细胞核含有该物种所特有的全套遗传物质（细胞核的全能性）
（2009·江苏高考）32．（8分）动物器官的体外培养技术对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个新生小鼠的肝脏小块培养装置示意图。请回答下列问题。
（1）肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细胞 。
（2）气室中充入5％C02：气体的主要作用是 。
（3）培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生长，但要注意选择抗生素的 ，以保证抗生素对肝脏无害。
（4）有机物X有毒性，可诱发染色体断裂。利用上图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏小块对有机物X是否具有解毒作用。
材料用具：
肝脏小块，外周血淋巴细胞，淋巴细胞培养液，植物凝集素（刺激淋巴细胞分裂）；显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨染液（使染色体着色），有机物X溶液等。实验过程：
①在淋巴细胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴细胞，取4等份，备用。
②利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置，按下表步骤操作（“√”表示已完成的步骤）。
甲 乙 丙 丁
步骤一：加人肝脏培养液[21世纪教育网 √ √ √ √
步骤二：加入有机物X溶液 √ √
步骤三：放置肝脏小块 √
上表中还需进行的操作是 。
③培养一段时间后，取4组装置中的等量培养液，分别添加到4份备用的淋巴细胞培养液中继续培养。
④一段时间后取淋巴细胞分别染色、制片。在显微镜下观察 ，并对比分析。若丙组淋巴细胞出现异常，而甲组的淋巴细胞正常，则说明 。
【解析】本题考查动物细胞培养的相关知识。（1）把肝脏切成小薄片，有利于肝脏细胞的呼吸代谢，即吸收氧气和营养物质、排出代谢废物（2）气室中充入5％C02的作用是形成碳酸来维持培养液适宜的pH，（3）同时也要注意选择抗生素的种类和数量来抑制细菌生长（4）乙组或丁组没有处理向乙(或丁)组装置中放置肝脏小块作为对照实验，有机物X有毒性，可诱发染色体断裂所以要观察淋巴细胞的染色体形态和数量是否变化。甲组添加肝脏小块淋巴细胞染色体正常，丙组没有添加出现染色体异常，说明肝脏小块对有机物X具有解毒作用，所以甲组正常。
【答案】
（1）吸收氧气和营养物质、排出代谢废物
（2）维持培养液适宜的pH
（3）种类和剂量
（4）向乙（或丁）组装置中放置肝脏小块 染色体形态和数量 肝脏小块对有机物X具有解毒作用
（2008·宁夏高考）[ 生物──选修3现代生物科技专题]（15分）
回答下列有关动物细胞培养的问题：
(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂长年到细胞表面 时，细胞会停止分裂增增殖，这种现象称为细胞的 。此时，瓶壁上形成的细胞层数是 。要使贴壁细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是 。
(2)随首细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进面出现 的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变面变成 细胞，该种细胞的黏着性 ，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量 。
(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被污色，而活细胞不染色，原因是 。
(4) 检查某种毒物是否能改变细胞染一的数目，最好选用细胞分裂到 期的细胞用显微镜进行观察。
(5)在细胞培养过程中，通常在 条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中 的活性降低，细胞 的速率降低。
(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作 进行攻击。
【解析】本题以“动物细胞培养”为主题综合考查了动物细胞培养的条件、特点、细胞分裂、免疫等有关知识，虽属于识记内容，但是综合了选修和必修，综合性较强。
【答案】
（1）相互接触 接触抑制 单层（或一层） 胰蛋白酶
（2）衰老甚至死亡 不死性 降低 减少
（3）由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）
（4）中21世纪教育网
（5）冷冻（或超低温、液氮） 酶 新陈代谢
（6）抗原
（2008·全国Ⅰ）下列关于细胞工程的叙述，错误的是
A．电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合、
B．去除植物细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理
C．小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体
D．某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同
【解析】本题是对细胞工程内容的综合考查，属于考纲理解层次，难度适中。通过植物细胞工程中的植物体细胞杂交技术得到的甲乙两植物的细胞杂种染色体数目是甲乙体细胞染色体数目之和；而通过有性杂交得到的甲乙两品种杂交后代的染色体数目是甲乙两品种体细胞染色体数目之和的一半（或两品种的配子所含染色体数目之和）。
【答案】D
（2008·上海高考）制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括
①细胞培养 ②细胞融合
③胚胎移植 ④细胞核移植
A．①② B．①③ C．②③ D．③④
【解析】本题考查单克隆抗体的制备原理，属于考纲理解层次，难度较小。制备单克隆抗体时，首先要通过细胞融合得到杂交瘤细胞，然后通过细胞培养，获得单克隆抗体。
【答案】A
（2008·宁夏高考）回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）在动物细胞培养过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面　　 　时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的 　。此时，瓶壁上形成的细胞层数是　　 　。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是　　　 　。
（2）随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现　　 　　的现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成　　　 　细胞，该种细胞的黏着性　　　 　，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）的量　　 　　。
（3）现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是　 　。
（4）检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到　 　期的细胞用显微镜进行观察。
（5）在细胞培养过程中，通常在　　　条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中　　的活性降低，细胞　　　　　的速率降低。
（6）给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作__________________进行攻击。
【解析】本题是对有关动物细胞培养过程及应用的综合考查，属于考纲理解层次，难度较小。（1）动物细胞培养过程中，有接触性抑制的现象，当细胞在瓶壁上长满一层时，停止生长，此时需要用胰蛋白酶处理，使贴壁的细胞分离下来。（2）细胞培养到50代时，有些细胞的遗传物质发生改变，变成不死性细胞（癌细胞）。（3）细胞膜具有选择透过性，大分子物质不能通过，细胞死亡后，细胞膜的选择透过性消失，大分子物质可以自由地进出细胞。（4）观察染色体的数目和形态，应该选取有丝分裂中期的细胞进行观察。（5）细胞在超低温的情况下，酶的活性降低，新陈代谢的速率降低。因此，需要在低温或冷冻的条件下保存。（6）对于患者来说，移植的皮肤属于抗原，有可能引起排斥现象。
【答案】（1）相互接触//接触抑制//单层（或一层）//胰蛋白酶；（2）衰老甚至死亡//不死性//降低 减少；（3）活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色（或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色）；（4）中；（5）冷冻（或超低温、液氮）//酶//新陈代谢；（6）抗原。
【考点精题精练】
1. 关于动物细胞培养的叙述，正确的是（ D ）
A.培养中的人效应T细胞能产生单克隆抗体 B.培养中的人B细胞能够无限地增殖
C.人的成熟红细胞经过培养能形成细胞株 D.用胰蛋白酶处理肝组织可获得单个肝细胞
2. （2010·浙江省台州市高三一模）下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是 C
A．动物细胞培养的目的是获得大量的分泌蛋白
B．通过动物细胞培养获得细胞株或细胞系，证明了动物细胞也是有全能性
C．动物细胞培养一般不需要脱分化过程[来源:21世纪教育网]
D．胚胎干细胞培养时，加饲养层细胞是为了促进干细胞分化
3. 胚胎干细胞功能特性不包括 C
A.具有发育的全能性 B.体外培养可以增殖而不分化
C. 经过冷冻就能进行了遗传改造 D.体积小，细胞核大，核仁明显
4. 一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件 D
①无毒的环境 ②无菌的环境 ③合成培养基需加血清、血浆 ④温度与动物体温相近 ⑤需要O2，不需要CO2 ⑥CO2能调节培养液pH
A．①②③④⑤⑥ B．①②③④ C．①③④⑤⑥ D．①②③④⑥
5. 下列对动物核移植技术的描述不正确的是 D
A．哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植，动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎核移植
B．体细胞核移植的过程中可通过显微操作去核法去除卵母细胞中的核
C．体细胞核移植过程中通常采用MⅡ期卵母细胞作为受体细胞
D．通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞动物进行了100%的复制
6. 单克隆抗体与血清抗体相比，优越之处在于 C
A．单克隆抗体能够制成“生物导弹”
B．单克隆抗体可以在体外制备
C．单克隆抗体的特异性强、灵敏度高，产量也大大高于血清抗体
D．单克隆抗体的制备过程简单
7. （2010·安徽省巢湖市高三一模）单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合后，要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能增殖的细胞是 A
①B淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞
④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞
A ①②③④ B ①③④ C ①③ D ②③
8. 关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（　D　）
A．可以制成诊断盒用于疾病的珍断　　B．可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗
C．可以利用基因工程技术生产　　　　D．可以在生物体内生产，不能在体外生产
9. 利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列叙述正确的是 D
A 把纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体
B 体外培养单个B淋巴细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C 将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D 利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
10. （2010·上海市长宁区高三二模）单克隆抗体产生于 B
A．促融剂作用下形成的杂交瘤细胞 B．单个杂交瘤细胞增殖形成的细胞群
C．B淋巴细胞分化形成的浆细胞 D．胚胎干细胞定向诱导形成的淋巴细胞
11. 下列是应用动物细胞工程技术获取单克隆抗X抗体的具体操作步骤，其中对单克隆抗体制备的相关叙述中不正确的是 C
①从患骨髓瘤的小鼠体内获取骨髓瘤细胞②将X抗原注入小鼠体内，获得能产生抗X抗体的B淋巴细胞③将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔培养④筛选出能产生抗X抗体的杂交瘤细胞⑤利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞⑥从腹水中提取抗体⑦利用促细胞融合因子使两种细胞发生融合
A.实验顺序应当是①③⑦⑤④③⑥ B.③过程中产生的多个杂交瘤细胞称为克隆
C.⑦过程获得的细胞均可无限增殖 D.利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选
12. 下列不属于动物细胞工程应用的是（ C ）
A．大规模生产干扰素。用于抵抗病毒引起的感染
B．为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞
C．大规模生产食品添加剂、香料等
D．利用胚胎移植技术，加快优良种畜的繁殖
13. （多选）下列有关动物细胞工程的有关说法中，不正确的是 ABD
A．胰蛋白酶将动物细胞膜表面的糖蛋白去掉，细胞黏着性降低，细胞散开
B．在培养液中添加抗生素，以便清除代谢产物
C．培养基应置于5%的CO2中，CO2使培养基的pH值维持在7.2～7.4
D．单克隆抗体制备过程中，第一次筛选是为了获取产生特异性抗体的细胞
14. （2010·江苏省盐城市高三第二次凋考）哈佛大学的科学家从怀孕妇女胎盘的羊水中提取了干细胞,并在实验室培养后生成了多种人体器官组织，如骨骼、肌肉、肝脏等。下列有关叙述正确的是 ABC
A．该研究说明干细胞具有发育的全能性
B．这些干细胞与由其生成的肌肉细胞的染色体组成相同
C．这些干细胞在器官移植上将有较好的的医学用途21世纪教育网
D．这些骨骼、肌肉等的形成与细胞分裂和分化有关而与细胞凋亡无关
15. 下列有关细胞工程的叙述中，正确的是（ B ）
A、植物细胞工程中，融合叶肉细胞时，应先去掉细胞膜，制备原生质体
B、植物体细胞杂交培育出的新品种一定不是单倍体
C、植物细胞工程中，叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织
D、单克隆抗体制备过程，采用不经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合从而获得杂交瘤细胞
16. （2010·上海市长宁区高三二模）目前，临床上癌症治疗的方法一般是先通过手术切除肿瘤，为杀死体内残留的癌细胞，在手术后进行化疗。有同学从资料上获知：二氯二乙胺能够阻止参与DNA复制的酶与DNA相互作用。由此推测：二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖，可作为一种癌症的化疗药物，并就此问题设计实验进行了探究。
实验材料：肝部长有肿瘤的小鼠，二氯二乙胺溶液，蒸馏水，生理盐水，含有全部营养物质的细胞培养液，显微镜，细胞计数板，试管，吸管等。
（1）请为一学生设计的实验内容补充完整，不正确之处请修改。
实验操作如下：
取洁净的培养皿一个，加入适量的培养液；从小鼠肝部切取肿瘤组织并将其剪碎，利用某种酶处理，使细胞分散开，置于培养皿中培养。
取洁净的试管5支，加入等量培养液，编号1、2、3、4、5， 在1-4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液，5号试管中加入 。分别从5支试管取样，在显微镜下观察计数，记录数据。
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从培养皿中吸取等量的培养液置于1-5号试管中，振荡后，在冰箱中培养一段时间。
从静置的5支试管中吸取适量的培养液置于细胞计数板内，在显微镜下观察计数，记录数据。
（2）请你纠正上面这位同学操作上的错误：
① ；
② 。（3）上述细胞培养液中必需包含细胞生长的营养物质，如： 、
和 等。
（4）该学生根据修改后的正确方法进行实验，得到的结果如下：
① 在该实验中，遵循了实验设计的 原则和 原则。
② 根据实验结果，你能得出的结论是：
第一， ；
第二， 。
答案：（10分）
（1）等量生理盐水
（2）①在“冰箱中”应改为在“适宜温度下”或“恒温箱中”
②“从静置的5支试管中吸取适量的培养液”应改为“振荡摇匀后，从5支试管中吸取适量的培养液”
（3）糖类、氨基酸、无机盐、水（或碳源 氮源、生长因子等）
（4）① 对照 单一变量（控制变量）
② 在一定范围内，二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖；
随二氯二乙胺浓度的增大，抑制作用逐渐增强（2分）
17. 下图表示用生物工程制备人抗A抗体的过程。请回答下列问题
（1）人的红细胞膜表面有被称为凝集原的特异________：从免疫学角度看，这种凝集原是________。
（2） 图中细胞中1是小鼠体内注入人A型血红细胞后而获得的________细胞，这种细胞具有产生
的特点，但难以在体外培养。甲培养皿中培养的细胞2，是从患骨髓瘤的小鼠体内获取的骨髓瘤细胞，这种细胞在体外培养时能________________，但不会产生抗体。
（3）为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点，经特殊处理，在促细胞融合因子的作用下，使两种细胞发生融合，形成图中的细胞3，这种细胞称为________________。把它在乙培养皿中进行培养，则能产生大量的细胞群，这种方法称为________________。
（4）过程①的主要目的______________。通过过程②或③的培养方法能产生大量___________抗体。[来源:21世纪教育网
答案：
（1）糖蛋白 抗原（每格1分）
（2）免疫B淋巴 单一的抗A抗体（或单一的特异性抗体） 快速大量增殖（每格1分）
（3）杂交瘤细胞 单克隆（每格1分）
（4）筛选出能产生单一抗A抗体的杂交瘤细胞 抗A单克隆（每格1分）
②
①
提取
病毒
RNA
DNA
A基因
A基因
表达载体
受体
细胞
A蛋白
小鼠皮下
小鼠骨髓瘤细胞
效应B淋巴细胞
X
抗A蛋白的单克隆抗体
③
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