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(共62张PPT)
专题五
遗传的分子基础、变异、育种与进化
考点二
可遗传的变异与育种
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谢谢观赏考点二　可遗传的变异与育种
1.理清基因突变的相关知识
2.熟记基因重组的相关知识
3.归纳染色体变异的相关知识
（1）染色体结构变异
（2）染色体数目变异
4.据图理清五种生物育种方法
（1）识别各字母表示的处理方法
A：杂交，D：自交，B：花药离体培养，C：用秋水仙素处理幼苗，E：诱变处理，F：秋水仙素处理，G：转基因技术。
（2）判断育种方法及依据的原理
育种流程
育种方法
原理
亲本新品种
杂交育种
基因重组
亲本新品种
单倍体育种
染色体变异
种子或幼苗新品种
诱变育种
基因突变
种子或幼苗新品种
多倍体育种
染色体变异
植物细胞新品种
基因工程育种
基因重组
（3）育种方案的选择
①欲获得从未有过的性状——诱变育种，如对不抗旱的玉米诱变处理获得抗旱品种。
②欲将分散于不同品系的性状集中在一起（优势组合）——杂交育种和单倍体育种。
③欲增大原品种效应（如增加产量、增加营养物质含量等）——多倍体育种。
④欲明显缩短获得“纯合子”的时间——单倍体育种。
⑤欲定向改变生物的性状，可利用基因工程育种。
1.易误点澄清
（1）有关基因突变的易误点
①基因突变不一定都能遗传给后代。如果发生在减数分裂过程中，可以通过配子传递给后代。如果发生在体细胞的有丝分裂过程中，一般不遗传给后代，但有些植物可通过无性生殖传递给后代。
②基因突变一定会引起基因结构的改变，即基因中碱基排列顺序的改变。
③基因突变不一定会引起生物性状的改变。可能的原因有：由于密码子具有简并性或AA→Aa中产生a后，隐性基因控制的性状不能表现出来等。
④基因突变不一定都产生等位基因：真核生物染色体上的基因突变可产生它的等位基因，而原核生物和病毒基因突变产生的是一个新基因。
（2）有关基因重组的易误点
①基因重组一般发生在控制不同性状的基因间，至少两对等位基因，如基因型为AaBb，AaBb的基因位置既可位于2对同源染色体上——基因自由组合（发生在减数第一次分裂前期）；也可位于1对同源染色体上——交叉互换（发生在减数第一次分裂前期）。
②除了减数第一次分裂前期和后期，减数分裂的其他时期、有丝分裂、受精作用均不可发生基因重组。
③如果是一对相对性状的遗传，后代出现新类型可能来源于性状分离或基因突变，而不会是基因重组。
④发生基因重组的其他特殊情况：肺炎双球菌转化实验、基因工程、基因治疗。
⑤基因重组不可以产生新性状，但可以产生新的基因组合（多种基因型）。
（3）单倍体并非都不育，其体细胞中也并非都只有一个染色体组，也并非都一定没有等位基因和同源染色体。如由多倍体的配子发育成的个体，若含偶数个染色体组，则形成的单倍体含有同源染色体及等位基因。
（4）理清变异的种类
①同源染色体上非姐妹染色单体之间的交叉互换：属于基因重组。非同源染色体之间的互换：属于染色体结构变异中的易位。
②DNA分子上若干“基因”的缺失：属于染色体结构变异。基因内部若干“碱基对”的缺失：属于基因突变。
③基因突变和基因重组属于分子水平的变异，在光学显微镜下不能直接观察到。染色体变异是细胞水平的变异，一般在光学显微镜下可以观察到。
④基因突变改变基因的种类（基因结构改变，成为新基因），不改变基因的数量。基因重组不改变基因的种类和数量，但改变基因间的组合方式。染色体变异改变基因的数量或排列顺序。
（5）关注育种方法的易误点
①花药离体培养只是单倍体育种中的一个程序，要想得到纯合子，还需用秋水仙素处理单倍体幼苗使其染色体数目加倍。
②多倍体育种中用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，而单倍体育种只能用秋水仙素处理幼苗，而不能处理萌发的种子。
2.课本边角排查
（1）基因突变的随机性表现在基因突变可以发生在生物个体发育的任何时期；可以发生在细胞内不同的DNA分子上；同一DNA分子的不同部位（必修二82页正文）。
（2）有性生殖的基因重组有助于物种在一个无法预测将会发生什么变化的环境中生存，原因是基因重组能够产生多样化的基因组合的子代，其中可能有一些子代会含有适应某种变化的、生存所必需的基因组合（必修二83页正文）。
（3）果蝇的缺刻翅是因染色体片段缺失引起，其棒状眼是因染色体片段增加引起（必修二85页图）。
（4）X射线照射野生型链孢霉能使其不能在基本培养基上生长，但在基本培养基中加入某种维生素则立即能生长，说明基因突变可能影响了酶的合成从而影响了维生素的合成（必修二96页技能应用）。
1.有人认为，自然条件下基因突变很低，而且大多数基因突变对生物体是有害的，因此，它不可能为生物进化提供原材料。你认为这样的看法正确吗？为什么？
提示：这种看法不正确。对于生物个体而言，发生自然突变的频率是很低的。但是，一个物种往往是由许多个体组成的，就整个物种来看，在漫长的进化历程中产生的突变还是很多的，其中有不少突变是有利突变，对生物的进化有重要意义。因此，基因突变能够为生物进化提供原材料。
2.白眼雌果蝇（XwXw）和红眼雄果蝇（XWY）交配，后代雄果蝇都应该是白眼的，后代雌果蝇都应该是红眼的。但大量的实验观察发现，在上述杂交后代中，2
000～3
000只红眼雌果蝇中会出现一只白眼雌果蝇，同样在2
000～3
000只白眼雄果蝇中会出现一只红眼雄果蝇。你怎样解释这种奇怪的现象？如何验证你的解释？
提示：雌果蝇卵原细胞减数分裂过程中，在2
000～3
000个细胞中，有一次发生了差错，两条X染色体不分离，结果产生的卵细胞中，或者含有两条X染色体，或者不含X染色体。如果含XwXw卵细胞与含Y的精子受精，产生XwXwY的个体为白眼雌果蝇，如果不含X的卵细胞与含XW的精子受精，产生XWO的个体为红眼雄果蝇，这样就可以解释上述现象。可以用显微镜检查细胞中的染色体，如果在上述杂交中的子一代出现的那只白眼雌果蝇中找到Y染色体，在那只红眼雄果蝇中找不到Y染色体，就可以证明解释是正确的。
　现有基因型为AABB和aabb某植物的种子。已知A基因和b基因控制的性状是优良性状，请写出快速培育具有两种优良性状新品种的育种方法和思路。
提示：应采用单倍体育种的方法。思路：种植基因型为AABB和aabb植物的种子，让两个品种的植株杂交，得到F1的种子，种植F1的种子，采集F1植株的花药进行离体培养得到单倍体的幼苗，用秋水仙素（或低温）诱导染色体加倍，得到四种纯合的二倍体植株，选择具有所需两种优良性状的植物进行自交并收获种子即为优良品种。
1.（2020·全国卷Ⅱ）关于高等植物细胞中染色体组的叙述，错误的是（　　）
A.二倍体植物的配子只含有一个染色体组
B.每个染色体组中的染色体均为非同源染色体
C.每个染色体组中都含有常染色体和性染色体
D.每个染色体组中各染色体DNA的碱基序列不同
解析：二倍体植物体细胞含有两个染色体组，减数分裂形成配子时染色体数目减半，即配子只含一个染色体组，A正确；由染色体组的定义可知，一个染色体组中所有染色体均为非同源染色体，不含同源染色体，B正确；不是所有生物都有性别之分，有性别之分的生物的性别不一定由性染色体决定，因此不是所有细胞中都有性染色体和常染色体之分，C错误；一个染色体组中的所有染色体在形态和功能上各不相同，因此染色体DNA的碱基序列不同，D正确。
答案：C
2.[2020·新高考卷Ⅰ（山东卷）]野生型大肠杆菌可以在基本培养基上生长，发生基因突变产生的氨基酸依赖型菌株需要在基本培养基上补充相应氨基酸才能生长。将甲硫氨酸依赖型菌株M和苏氨酸依赖型菌株N单独接种在基本培养基上时，均不会产生菌落。某同学实验过程中发现，将M、N菌株混合培养一段时间，充分稀释后再涂布到基本培养基上，培养后出现许多由单个细菌形成的菌落，将这些菌落分别接种到基本培养基上，培养后均有菌落出现。该同学对这些菌落出现原因的分析，不合理的是（　　）
A.操作过程中出现杂菌污染
B.M、N菌株互为对方提供所缺失的氨基酸
C.混合培养过程中，菌株获得了对方的遗传物质
D.混合培养过程中，菌株中已突变的基因再次发生突变
解析：操作过程当中出现杂菌污染，基本培养基上生长的为杂菌，A合理；若M、N菌株互为对方提供所缺失的氨基酸形成的菌落，需要MN混合在一起才能生存，而该菌落来自于单个细菌形成的菌落，单个细菌不可能是混合培养的细菌，B项不合理；M、N菌株混合培养后在基本培养基上可以生存。推测可能是混合培养过程当中，菌株间发生了基因交流，获得了对方的遗传物质，C合理；基因突变是不定向的，在混合培养过程中，菌株当中已突变的基因也可能再次发生突变得到可在基本培养基上生存的野生型大肠杆菌，D合理。
答案：B
3.[2020·新高考卷Ⅰ（山东卷）]两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如下图所示。下列说法错误的是（　　）
A.过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理细胞
B.过程②的目的是使中间偃麦草的染色体断裂
C.过程③中常用灭活的病毒诱导原生质体融合
D.耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段
解析：从图中看出①是去掉植物细胞壁，②是用紫外线诱导染色体变异，③融合形成杂种细胞。过程①是获得植物细胞的原生质体，需要用纤维素酶和果胶酶将细胞壁分解，A正确；据题干信息分析可知“将其中一个细胞的染色体在融合前断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种”故过程②通过紫外线照射是使中间偃麦草的染色体断裂，B正确；灭活的病毒诱导是动物细胞融合特有的方法，诱导植物原生质体融合常用物理法、化学法，C错误；实验最终将不抗盐的普通小麦和抗盐的偃麦草整合形成耐盐小麦，说明耐盐小麦染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段，D正确。
答案：C
4.（2020·江苏卷）下列叙述中与染色体变异无关的是（　　）
A.通过孕妇产前筛查，可降低21三体综合征的发病率
B.通过连续自交，可获得纯合基因品系玉米
C.通过植物体细胞杂交，可获得白菜－甘蓝
D.通过普通小麦和黑麦杂交，培育出了小黑麦
解析：21三体综合征属于染色体数目变异中的非整倍性变异，A不符合题意；连续自交可获得纯合基因品系玉米，原理为基因重组，子代染色体结构和数目均未改变，与染色体变异无关，B符合题意；植物体细胞杂交的过程细胞发生了染色体数目的变异，C不符合题意；普通小麦与黑麦杂交后，需用秋水仙素处理使染色体数目加倍，才能培育出稳定遗传的小黑麦，利用了染色体数目的变异原理，D不符合题意。
答案：B
5.（2020·全国卷Ⅰ）遗传学理论可用于指导农业生产实践。回答下列问题：
（1）生物体进行有性生殖形成配子的过程中，在不发生染色体结构变异的情况下，产生基因重新组合的途径有两条，分别是______________________________
_____________________________________________
___________________________________________。
（2）在诱变育种过程中，通过诱变获得的新性状一般不能稳定遗传，原因是　　　　　　　　　　，若要使诱变获得的性状能够稳定遗传，需要采取的措施是　　　　　　　　　　　　　　　　。
解析：（1）基因重组是指在生物体进行有性生殖的过程中，控制不同性状的基因的重新组合。它包括：①减数第一次分裂过程中，随着非同源染色体的自由组合，非等位基因自由组合；②减数分裂形成四分体时期，位于同源染色体上的等位基因随着非姐妹染色单体的交换而发生交换，导致染色单体上的基因重组。由分析可知，减数分裂形成配子的过程中，基因重组的途径有减数第一次分裂后期，非同源染色体上的非等位基因自由组合；减数第一次分裂前期同源染色体的非姐妹染色单体之间发生交叉互换。（2）在诱变育种过程中，诱变获得的新个体通常为杂合子，自交后代会发生性状分离，故可以将该个体进行自交，筛选出符合性状要求的个体后再自交，重复此过程，直到不发生性状分离，即可获得稳定遗传的纯合子。
答案：（1）在减数分裂过程中，随着非同源染色体的自由组合，非等位基因自由组合；同源染色体上的等位基因随着非姐妹染色单体的交换而发生交换，导致染色单体上的基因重组　（2）控制新性状的基因是杂合的　通过自交筛选性状能稳定遗传的子代
热点一　考查生物变异的类型及特点
1.（2020·浙江卷）某条染色体经处理后，其结构发生了如图所示的变化。这种染色体结构的变异属于（　　）
A.缺失　　　　　　　　　B.倒位
C.重复
D.易位
解析：分析图示可知，原来排列为123456的染色体，经过断裂后，重新连接为125436的排列顺序，可知其中的345片段发生了180°的颠倒，此类染色体结构变异为倒位。
答案：B
2.（2020·深圳外国语学校测试）下列关于生物变异叙述正确的是（　　）
A.花药离体培养过程会发生基因重组
B.三倍体西瓜不能进行正常联会导致减数分裂异常，因此其结实后一颗种子也没有
C.果蝇的缺刻翅是因染色体某一片段缺失引起，其棒眼是因染色体某一片段增加引起的
D.任何生物、任何基因都可发生基因突变，都体现了基因突变的随机性
解析：花药离体培养过程中进行的是有丝分裂，因此不会发生非同源染色体自由组合，即不会导致基因重组，A错误；三倍体西瓜联会紊乱导致减数分裂异常，但也有极低概率可能产生一些正常配子，故并不是一颗种子也没有，B错误；果蝇的缺刻翅是染色体片段缺失引起的，棒眼是染色体片段增加引起的，C正确；任何生物、任何基因都可以发生发生基因突变体现了基因突变的普遍性，D错误。
答案：C
热点二　考查染色体组、单倍体、二倍体和多倍体
3.（2020·胶州期末）下图中甲、乙、丙、丁分别表示四种生物体细胞中染色体的组成，下列有关叙述不正确的是（　　）
A.甲、乙细胞中都含有3个染色体组
B.丙细胞对应个体一定是二倍体
C.丁细胞对应个体一定是单倍体
D.乙对应个体的基因型可能是AAa
解析：含有三个染色体组的体细胞有细胞甲、乙，A正确；丙如果由配子发育而来，则是单倍体，B错误；丁细胞只含1个染色体组，所以对应个体一定是单倍体，C正确；乙含有三个染色体组，对应个体的基因型可能是AAa，D正确。
答案：B
4.（2020·苏州期末）下列关于植物单倍体、二倍体、多倍体的叙述，错误的是（　　）
A.由合子发育成的生物体，体细胞中含有几个染色体组就是几倍体
B.单倍体的体细胞中只有一个染色体组
C.单倍体植株长得弱小，一般高度不育
D.多倍体植株一般茎秆粗壮，叶片、果实、种子都比较大
解析：由合子或受精卵发育成的生物体，体细胞中含有几个染色体组就是几倍体，A正确；凡是由配子发育而来的个体，均称为单倍体。体细胞中可以含有1个或几个染色体组，B错误；单倍体植株长得弱小，一般高度不育，C正确；多倍体植株一般茎秆粗壮，叶片、果实、种子都比较大，表现为巨大性，D正确。
答案：B
热点三　生物变异类型的探究
5.（2020·广州市白云区测试）果蝇是科研人员经常利用的遗传实验材料，其灰身和黑身、刚毛和截毛各为一对相对性状，分别由等位基因A、a和D、d控制。某科研小组用一对灰身刚毛果蝇进行了多次杂交实验，F1的雄性个体的表现型为灰身刚毛∶灰身截毛∶黑身刚毛∶黑身截毛＝3∶3∶1∶1，雌性个体的表现型为灰身刚毛∶灰身截毛∶黑身刚毛∶黑身截毛＝3∶0∶1∶0。分析回答下列问题：
（1）果蝇控制灰身和黑身的等位基因位于　　　　（填“常”或“X”）染色体上。
（2）F1果蝇中，截毛基因的基因频率为　　　　（用分数表示）。
（3）控制果蝇眼色的基因仅位于X染色体上，红眼（R）对白眼（r）为显性。研究发现，眼色基因可能会因染色体片段缺失而丢失（记为Xc）；若果蝇两条性染色体上都无眼色基因，则其无法存活。在一次用纯合红眼雌果蝇（XRXR）与白眼雄果蝇（XrY）杂交的实验中，子代中出现了一只白眼雌果蝇。欲用一次杂交实验判断这只白眼雌果蝇出现的原因，请简要写出实验方案的主要思路：________________________________________________________________________
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
实验现象与结论：
①若子代果蝇出现　　　　　　　　　　　　　　　，则是环境条件改变导致的；
②若子代果蝇出现　　　　　　　　　　　　　　　，则是染色体片段缺失导致的；
③若子代果蝇出现　　　　　　　　　　　　　　　，则是基因突变导致的。
解析：（1）由于后代雌、雄个体中都有灰身和黑身，且比例均为3∶1，由此可见该性状的遗传与性别无关，所以果蝇控制灰身和黑身的等位基因位于常染色体上。（2）亲本的基因型为AaXDXd和AaXDY，如果只考虑刚毛和截毛这一对相对性状，后代的基因型为XDXD、XDXd、XDY、XdY，且4种基因型所占比例相等，则截毛基因Xd基因频率为＝。（3）由于纯合红眼雌果蝇（XRXR）与白眼雄果蝇（XrY）杂交的实验中，子代中出现了一只白眼雌果蝇，所以要判断这只白眼雌果蝇出现的原因，需要让这只白眼雌果蝇与任意的一只红眼雄果蝇杂交，观察后代果蝇的表现型和比例情况。如果是环境条件改变导致的不可遗传变异，则子代红眼雌果蝇∶红眼雄果蝇∶白眼雄果蝇＝2∶1∶1；如果是染色体片段缺失导致的（XrXc），则子代XcY致死，子代红眼雌果蝇∶白眼雄果蝇＝2∶1；如果是基因突变导致的，则子代果蝇红眼雌果蝇∶白眼雄果蝇＝1∶1。
答案：（1）常　（2）　（3）让这只白眼雌果蝇与红眼雄果蝇杂交，观察和统计后代果蝇的表现型和比例　红眼雌果蝇∶红眼雄果蝇∶白眼雄果蝇＝2∶1∶1　红眼雌果蝇∶白眼雄果蝇＝2∶1　红眼雌果蝇∶白眼雄果蝇＝1∶1
变异类型的实验探究方法归纳
（1）可遗传变异与不可遗传变异的判断。
①自交或杂交获得子代，子代自交或子代之间杂交，用这种方法确定变异的原因。如果子代自交或杂交的后代出现变异性状，则变异性状是由于遗传物质变化引起的；反之，变异性状的出现仅是由环境引起的，遗传物质没有改变。
②将变异个体和正常个体培养在相同的环境条件下，两者没有出现明显差异，则原来的变异性状是由环境引起的。
（2）染色体变异与基因突变的判别。
①判别依据：光学显微镜下能观察到的是染色体变异，不能观察到的是基因突变。
②具体操作：制作正常个体与待测变异个体的有丝分裂临时装片，找到中期图进行染色体结构与数目的比较，可以判断是否发生了染色体变异。
（3）显性突变与隐性突变的判定。
①理论基础：受到物理、化学和生物因素的影响，AA个体如果突变成Aa个体，则突变性状在当代不会表现出来，只有Aa个体的自交后代才会有aa变异个体出现，因此这种变异个体一旦出现即是纯合子。相反，如果aa个体突变成Aa个体，则当代就会表现出突变性状。
②判断方法：
a.选择突变体与其他已知未突变体杂交，通过观察后代变异性状的比例来判断基因突变的类型。
b.植物还可以利用突变体自交观察后代有无性状分离来进行显性突变与隐性突变的判定。
热点四　考查育种的方法、原理、过程和特点
6.（2020·广州期末）下列关于生物育种的叙述，正确的是（　　）
A.杂交育种就是将不同物种的优良性状重新组合
B.单倍体育种的最终目的是通过花药离体培养获得单倍体
C.诱变育种中人工诱导可提高突变频率和定向改变生物性状
D.多倍体育种中获得多倍体植株通常茎秆粗壮、营养物质增多
解析：不同物种存在生殖隔离而无法产生可育后代，杂交育种利用基因重组将同一物种的优良性状重新组合，A错误；单倍体育种的最终目标是获得纯合的二倍体，B错误；诱变育种利用基因突变原理，基因突变具有不定向性，不可定向改变生物性状，C错误；多倍体育种的优点是营养器官增大、提高产量与营养成分，获得多倍体植株通常茎秆粗壮、营养物质增多，D正确；故选D。
答案：D
热点五　考查育种方案的设计
7.（2020·全国卷Ⅲ）普通小麦是目前世界各地栽培的重要粮食作物。普通小麦的形成包括不同物种杂交和染色体加倍过程，如图所示（其中A、B、D分别代表不同物种的一个染色体组，每个染色体组均含7条染色体）。在此基础上，人们又通过杂交育种培育出许多优良品种。回答下列问题：
一粒小麦　×　斯氏麦草
（AA）　　　　（BB）
↓
杂种一
拟二粒小麦　×　滔氏麦草
（AABB）　　
　　（DD）
↓
　　　　　　　　　　　　　　杂种二
　　　　　　　　　
↓
普通小麦
　　　　　　　
（AABBDD）
（1）在普通小麦的形成过程中，杂种一是高度不育的，原因是　　　　　　　　　　　　　　　。已知普通小麦是杂种二染色体加倍形成的多倍体，普通小麦体细胞中有　　　　条染色体。一般来说，与二倍体相比，多倍体的优点是　　　　　　　　　　　　　（答出2点即可）。
（2）若要用人工方法使植物细胞染色体加倍，可采用的方法有　　　　　　　（答出1点即可）。
（3）现有甲、乙两个普通小麦品种（纯合体），甲的表现型是抗病易倒伏，乙的表现型是易感病抗倒伏。若要以甲、乙为实验材料设计实验获得抗病抗倒伏且稳定遗传的新品种，请简要写出实验思路__________
___________________________________________。
解析：（1）杂种一是一粒小麦和斯氏麦草杂交的产物，细胞内含有一粒小麦和斯氏麦草各一个染色体组，所以细胞内不含同源染色体，不能进行正常的减数分裂，因此高度不育；普通小麦含有6个染色体组，每个染色体组有7条染色体，所以体细胞有42条染色体；多倍体植株通常茎秆粗壮，叶片、果实和种子都比较大，糖类和蛋白质等营养物质的含量都有所增加。
（2）人工诱导植物细胞染色体加倍可以采用秋水仙素或低温处理。
（3）为获得稳定遗传的抗病抗倒伏的小麦，可以利用杂交育种，设计思路如下：
将甲和乙两品种杂交获得F1，将F1植株进行自交，选取F2中既抗病又抗倒伏的，且自交后代不发生性状分离的植株，即为稳定遗传的抗病又抗倒伏的植株。
答案：（1）无同源染色体，不能进行正常的减数分裂　42　营养物质含量高、茎秆粗壮　（2）秋水仙素处理
（3）甲、乙两个品种杂交，F1自交，选取F2中既抗病又抗倒伏，且自交后代不发生性状分离的植株
热点六　考查低温诱导染色体数目变化的实验
8.（2020·益阳市安化县期末）下列关于低温诱导染色体加倍实验的叙述，不正确的是（　　）
A.原理：低温抑制纺锤体的形成，影响染色体移向细胞两极
B.解离：盐酸酒精混合液可以使洋葱根尖解离
C.染色：改良苯酚品红溶液和醋酸洋红溶液都可以使染色体着色
D.观察：显微镜下可以看到大多数细胞的染色体数目发生改变
解析：低温能抑制纺锤体的形成，使有丝分裂后期着丝点分裂后产生的子染色体不能分别移向两极，A正确；盐酸和酒精混合液（1∶1）作为解离液，可以使洋葱根尖组织细胞相互分离开来，B正确；改良苯酚品红、醋酸洋红、龙胆紫溶液都可以使染色体着色，便于观察，C正确；大多数细胞处于分裂间期，因此观察到显微镜下大多数细胞的染色体数目没有发生改变，D错误。
答案：D
低温诱导植物染色体数目变化的实验要点
（1）原理：低温处理植物分生组织细胞，能够抑制纺锤体的形成，以致影响染色体被拉向两极，细胞也不能分裂成两个子细胞，于是，植物细胞染色体数目发生变化。
（2）实验步骤：培养根尖→取材→固定（用卡诺氏液固定）→冲洗（用95%酒精冲洗，洗去卡诺氏液）→解离→漂洗（清水漂洗）→染色（改良苯酚品红染液）→制片→显微镜观察。
（3）实验现象：视野中既有正常的二倍体细胞，也有染色体数目改变的细胞（因为低温处理时，不是每个细胞都恰好正要形成纺锤体）。

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