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选择性必修三第一章第2节
微生物的基本培养技术导学案
【学习目标】
1阐明在发酵工程中灭菌是获得纯净的微生物培养物的前提。
2阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。
3概述平板划线法和稀释涂布平板法是实验室进行微生物分离和纯化的常用方法。
【重点难点】
讨论并掌握微生物的纯培养的方法。
【预习案】
【预习指导】
1.通读教材（16页-21页）一遍，再依据导学案问题提示，进一步研读教材一遍，
并用铅笔标记和勾画问题的答案。
2.在研读课本的基础上，独立填写预习案，规范书写，将疑问写在疑问栏。
一、培养基的配制
1．培养基
人们按照微生物对_______的不同需求，配制出供其_________的营养基质。
2．培养基的种类

3．培养基的营养组成
各种培养基一般都含有__、___、___和无机盐等营养物质，此外还需要满足微生物生长对__、特殊营养物质以及__的需求。

二、无菌技术
1．获得纯净的微生物培养物的关键：防止__________。
2．消毒和灭菌

消毒
灭菌
概念
使用较为___的物理、化学或生物等方法杀死物体____或内部一部分微生物
使用____的理化方法杀死物体内外____的微生物，包括_______
常用方法
___消毒法、巴氏消毒法、___消毒法、紫外线消毒法
____灭菌、干热灭菌、____灭菌
适用对象
操作空间、双手等
接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等
3.具体操作
(1)对实验操作的____、操作者的衣着和手进行清洁和___。
(2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行____。
(3)为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在_________附近进行。
(4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与__________接触。
三、微生物的纯培养
1．纯培养：在微生物学中，将接种于_____内，在合适条件下形成的含_______的群体称为培养物。由_________所获得的微生物群体称为纯培养物，获得________的过程就是纯培养。
2．微生物纯培养的步骤：微生物的纯培养包括配制培养基、____、____、分离和培养等步骤。
3．酵母菌的纯培养
(1)菌落：分散的微生物在适宜的________表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的__________。
(2)获得单菌落的方法：_______法和__________法。

【预习自测】
1．下列有关平板划线操作的叙述，正确的是（ ）
A．使用灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌
B．打开含菌种的试管后需要将试管口通过火焰，蘸取菌种后需要马上塞上棉塞
C．培养皿盖打开后将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可
D．待接种环冷却后再伸入菌液中蘸取一环菌液
2．下列关于高压蒸汽锅灭菌法的说法，错误的是（ ）
A．灭菌锅内要加入适量的蒸馏水，且物品的摆放不能过挤
B．关闭电源后，打开排气阀，待压力表指针降为0后，打开灭菌锅盖
C．接通电源加热后，先打开排气阀，以排尽灭菌锅内的冷空气
D．待灭菌锅内的温度降至60℃以下后，方可取出锅内物品
3．下列关于培养基的叙述，正确的是（ ）
A．培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质
B．培养基都含有水、碳源、氮源、无机盐和生长因子等
C．牛肉蛋白胨培养基属于合成培养基，营养全面
D．微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌
4．科学家利用营养缺陷型菌株A、B，在缺乏A、B所需营养物质的培养基上培养，结果如下图所示。下列叙述不正确的是（ ）
A．各组实验所用的培养基均需灭菌处理
B．菌株A、B混合后能在上述培养基上生长
C．U型管实验证明菌株A、B释放的代谢产物形成了互补
D．推测菌株A、B通过接触发生了遗传物质重新组合
5．将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱，是很多人日常储藏西瓜的办法。有人认为盖上保鲜膜储藏的西瓜中细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组针对上述说法进行探究，他们将盖保鲜膜保存了三天的西瓜的瓜瓤制备成浸出液，再将浸出液接种到培养基平板上进行观察。下列说法正确的是（ ）
A．培养基可不加碳源是因为接种的浸出液中含糖
B．可采用稀释涂布平板法或平板划线法进行接种
C．只需要设置未接种瓜瓤浸出液的空白平板作对照
D．培养一段时间后应统计培养基上的菌落的种类和数量
6．下列关于生物实验室的安全规则的叙述，正确的是（ ）
A．严禁在实验室吃喝任何东西
B．可以穿拖鞋进实验室
C．可以用燃着的酒精灯去点燃另一盏酒精灯
D．实验材料在丢弃前都要进行灭菌处理
7．下列关于培养基的叙述，正确的是（　　）
A．在配制培养基时，除满足营养需求外，还应考虑pH、O2及特殊营养物质的需求
B．获得假单胞杆菌菌落后，在进行扩大培养时，应选用固体培养基
C．从土壤中获取乙草胺降解菌，为了防止杂菌的污染，可在培养基中加入青霉素
D．倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上
8．微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作中错误的是（　　）
①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 ②接种操作要在酒精灯火焰旁进行 ③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 ④培养基要进行高压蒸汽灭菌 ⑤加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
A．①③⑤ B．①④⑤ C．③④⑤ D．③⑤
9．许多生物学实验十分重视无菌操作，防止杂菌污染。下列操作正确的是（　　）
A．对无菌室、超净台和实验员可采用紫外线杀菌
B．家庭制作酸奶时，要将容器和鲜牛奶进行灭菌
C．加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌
D．灼烧灭菌法杀死微生物的营养体和芽孢
10．在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的过程中加入琼脂这一理想的凝固剂，下列关于琼脂的说法错误的是（ ）
A．不被所培养的微生物分解利用，对所培养的微生物无毒害作用
B．在微生物生长温度范围内保持固体状态
C．琼脂凝固点低，利于微生物的生长
D．琼脂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强
【我的疑问】（请把你的疑问写在下面）


参考答案
1．D
2．B
3．A
4．C
5．D
6．A
7．A
8．D
9．D
10．C

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