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选择性必修三第一章第2节
微生物选择培养和计数导学案
【学习目标】
1.举例说明通过调整培养基的配方可有目的地培养某种微生物。
2概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。
3.讨论土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的方法。
【重点难点】
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的方法。
【预习案】
【预习指导】
通读教材（16页-21页）一遍，再依据导学案问题提示，进一步研读教材一遍，并用铅笔标记和勾画问题的答案。
2.在研读课本的基础上，独立填写预习案，规范书写，将疑问写在疑问栏。
一、选择培养基
1．水生栖热菌的筛选：水生栖热菌能在______ ℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下________。
2．选择培养基：在微生物学中，允许______的微生物生长，同时抑制或阻止________微生物生长的培养基。
二、微生物的选择培养
1．分解尿素的细菌的分离
分解尿素的细菌能合成__酶，该酶能催化尿素分解产生___，以此作为细菌生长的氮源。要将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方设计思路是__________________________________________________________。
2．稀释涂布平板法分离分解尿素的细菌
土壤中细菌的数量庞大，要想得到能分解尿素的细菌的纯培养物，必须要对土样进行_______，然后再将菌液涂布到制备好的____________，操作过程如下：
采集土样→将10 g土样加入盛有90 mL_____的锥形瓶中，充分___。取1 mL上清液加入盛有__ mL无菌水的试管中，依次______→取___ mL菌液，滴加到________表面→将涂布器浸在盛有___的烧杯中→将涂布器放在___上灼烧，待酒精燃尽、涂布器____后，再进行涂布→用涂布器将菌液均匀地涂布在______表面。涂布时可转动_______，使涂布均匀→涂布的菌液被培养基吸收后，将平板___，放入_____ ℃的恒温箱中培养1～2 d。
三、微生物的数量测定
1．稀释涂布平板法
(1)原理：当样品的_____足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的_______。通过___________，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数为__________的平板进行计数。
(2)注意问题：统计的菌落数往往比活菌的实际数目__。这是因为_____________。
2．显微镜直接计数法
(1)方法：利用特定的__________或_____________，在显微镜下观察、计数。
(2)注意问题：统计的结果一般是_________和________的总和。
【我的疑问】（请把你的疑问写在下面）



【预习自测】
1．下列关于产纤维素酶菌分离及运用的叙述，不合理的是
A．筛选培养基中应含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养
B．可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌
C．在分离平板上长出的菌落需进一步确定其产纤维素酶的能力
D．用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆可提高其饲用价值
2．下列有关土壤中微生物的分离与计数的说法中,错误的是
A．因为土壤中各类微生物的数量不同，所以，为获得不同类型的微生物要按不同的稀释倍数进行分离
B．测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围不同
C．如果得到了3个或3个以上菌落数目在30~300的平板，则说明稀释操作比较成功，并能够进行菌落的计数
D．牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数目明显小于选择培养基的数目，说明选择培养基已筛选出一些细菌菌落
3．下图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法的操作结果。下列叙述中错误的是
A．甲中涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能涂菌液
B．甲、乙操作中只有甲可以用于微生物的计数
C．乙中接种环需要灼烧5次
D．乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端
4．下列有关微生物培养的叙述，正确的是
A．培养过微生物的培养基经灭菌后仍可用于培养微生物
B．涂布接种时，要待涂布器上酒精燃尽后冷却再使用
C．对培养皿进行编号或对菌种进行标注时，应使用记号笔在皿盖标记便于观察
D．长期保存菌种时，可以采用甘油管藏的方法，放在 4℃冰箱中保存
5．稀释涂布平板法是微生物培养中的一种常用的接种方法。下列相关叙述错误的是
A．操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释
B．需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培养基表面
C．不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个的菌落
D．操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理
6．下列有关细菌培养的叙述，正确的是（ ）
A．在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌
B．在培养基中加入青霉素可抑制真菌促进破伤风杆菌的生长
C．向液体培养基中通入空气能促进厌氧菌的生长
D．可用无氮培养基培养自生固氮菌
7．在做分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。下列有关叙述，出现科学性错误的是
A．甲同学出现这种结果的原因可能是由于土样不同，也可能是操作过程出了问题
B．可以将甲同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养作为空白对照，以证明培养基是否受到污染
C．将其他同学用与甲同学一样的土壤进行实验，如果结果与甲同学一致，则可以证明甲同学无误
D．B、C选项的实验思路都遵循了实验的对照原则
8．物质W是一种含氮有机物，W在培养基中达到一定量时培养基表现为不透明。某小组欲从土壤中筛选出能降解W的细菌，结果如图。下列说法错误的是（　　）
A．透明圈的形成是因为W物质被分解
B．所用的选择培养基应该是以物质W为唯一氮源
C．甲菌落中的细菌可能是利用空气中的氮气作为氮源
D．乙菌落中的细菌都能降解W，不需要进一步纯化
9．下列关于微生物实验室培养的操作错误的是（ ）
A．统计样品中的活菌一般使用平板划线法
B．测定培养液中的微生物数量，可选用显微镜直接计数法计数
C．土壤中纤维素分解菌的筛选流程中“选择培养”是必不可少的
D．消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又避免消毒剂对细胞的伤害
10．某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如下图所示，①为土壤样品。下列相关叙述错误的是（ ）
A．图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为碳源
B．如果要测定②中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法
C．若图中④为对照实验，则其中应含除苯酚外的其他碳源
D．⑥上菌落分布均匀，是用平板划线法获得的单菌落
参考答案
1．A
2．D
3．C
4．B
5．C
6．D
7．D
8．D
9．A
10．D

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