资源简介

(共1张PPT)
目的基因导入受体细胞
微生物细胞
农杆菌转化法、
基因枪法、花
粉管通道法
显微注射技术
常用方法
生物种类
体细胞
将含有目的基
因的表达载体
提纯→取受精
卵→显微注射
→受精卵发育
→获得具有新
性状的动物
以农杆菌转化
法为例：
将目的基因插
入Ti质粒的
T-DNA上→农杆
菌→导入植物
细胞→整合到
受体细胞的DNA
上→表达
转化过程
植物细胞
动物细胞
Ca2+处理法
受体细胞
受精卵
原核细胞
Ca2+处理细胞→感受态细胞
→重组表达载体与感受态细
胞混合→感受态细胞吸收
DNA分子
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DNA连接酶与DNA聚合酶的比较
DNA连接酶
DNA聚合酶
催化两个脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯键
不需要模板
需要DNA的一条链为模板
游离的DNA片段
单个的脱氧核苷酸
形成完整的DNA分子
形成DNA的一条链
基因工程
DNA复制
相同点
不
同
点
模板
作用
对象
作用
结果
用途
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质粒的功能和特点
①能够自我复制
②有多个限制酶
切割位点
③有标记基因
限制酶
DNA连接酶
-A
-TGCGC
CGCGT-
A-
载体
目
的
基
因
质粒
形成重组DNA分子
碱基互补
作用于
作用于
作用于
具备
条件
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含有正常
基因的细胞
基因治疗的过程
正常基因
适当的基因载体
基因重组
细胞注入体内产生正常的蛋白质
重组DNA分子
导入离体细胞
之
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目的基因的检测与鉴定
方 法
检测转基因生物染色体DNA分子上是否插入了
目的基因,采用DNA分子杂交技术
检测目的基因是否转录出了mRNA，采用分子杂
交技术
分子
水平
检测
导入DNA
分子
转录
翻译
除了分子检测外，还需要进行个体生物学水平
的鉴定，如做抗虫或抗病接种实验等
检测目的基因是否翻译成蛋白质，采用抗
原—抗体杂交技术
个体水平鉴定
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PCR技术与DNA复制的比较
DNA复制
PCR技术
解旋酶催化
DNA在高温作用下变性解旋
细胞内（主要在细胞核内）
细胞外（主要在PCR扩增仪内）
DNA解旋酶、普通的DNA
聚合酶等
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）
细胞内温和条件
需控制温度，在较高温度下进行
区
别
解旋
方式
场所
酶
温度
条件
合成的
对象
DNA分子
DNA片段或基因
联系
①模板：均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质合成
②原料：均为四种脱氧核苷酸
③酶：均需要DNA聚合酶进行催化
④引物：均需要引物，使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧
核苷酸
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基因表达载体的构建
质粒
同一种限制酶
DNA分子
+
DNA连接酶
重组DNA
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基因工程的概念
基因工程的别名
DNA重组技术
操作环境
生物体外
操作对象
基因
操作水平
DNA分子水平
基本过程
剪切→拼接→导入→表达
结果
人类需要的新的生物类型
和生物产品
国驰名弯

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