资源简介

山东省聊城市2022-2023学年高二下学期期中考试生物质量检测试题
学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________
一、单选题
1．我国是世界上啤酒的生产和消费大国。啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，青岛啤酒的生产过程如下：麦芽的粉碎以及辅料的粉碎—糖化和糊化—麦汁过滤—麦汁煮沸（同时添加啤酒花）—回旋沉淀—麦汁冷却—进入发酵罐（同时充氧加酵母）—主发酵—后发酵—啤酒过滤—包装—出品。下列说法错误的是（　　）
A．利用大麦作原料时，淀粉需要在淀粉酶作用下水解成麦芽糖才能被酵母菌利用
B．麦汁煮沸的同时加入啤酒花是为了产生风味组分
C．主发酵阶段主要完成的是酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成
D．主发酵完成后，要在低温、通气的环境下储存一段时间进行后发酵
2．我国传统文化中记载了很多生物学知识。《小雅·信南山》中有“中田有庐，疆場有瓜。是剥是范，献之黄祖”的诗句，其中的“范”的本义指腌菜。北魏的《齐民要术》详细介绍了我们的祖先用白菜（古称“菘”）等原料腌渍酸菜的多种方法。下列说法正确的是（　　）
A．泡菜中含有亚硝酸盐，而绿色食品中因不含有亚硝酸盐可以放心食用
B．为了保证泡菜坛内的无氧环境，腌制时应将泡菜坛装满
C．将切好的新鲜蔬菜、香辛料和冷却好的盐水同时放入泡菜坛中
D．腌制过程中泡菜坛内液体表面可能出现一层由酵母菌繁殖形成的白膜
3．自然界中微生物繁多，种类庞杂，人们在研究、利用微生物时，需用无菌技术培养获取纯种微生物。下列说法错误的是（　　）
A．实验室获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染
B．在培养霉菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性
C．由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物
D．培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质
4．产朊假丝酵母的蛋白质和维生素B的含量都比啤酒酵母高，它能以尿素和硝酸作为氮源，在培养基中不需要加入任何生长因子即可生长，是生产单细胞蛋白的优良菌种。下图是培养产朊假丝酵母的一种方法。下列说法错误的是（　　）

A．朊假丝酵母生产的单细胞蛋白可以作为食品添加剂
B．生产单细胞蛋白体现了发酵工程在食品工业上的应用
C．对微生物进行扩大培养选用液体培养基，因为液体培养基有进行通气培养、振荡培养的优点
D．可利用加入青霉素的选择培养基进行产朊假丝酵母等真菌的分离
5．蝴蝶兰的花朵艳丽娇俏，既能净化空气又可作盆栽观赏，但价格贵。植物组织培养技术应用于蝴蝶兰种苗的规模化繁殖，使蝴蝶兰的价格大幅度下降，普通百姓也能购买和观赏。下列说法错误的是（　　）
A．用于植物组织培养的外植体是指离体培养的植物器官、组织或细胞等
B．MS培养基中添加蔗糖既能提供营养物质又能调节渗透压
C．愈伤组织发芽生根后进一步培养形成试管苗后，直接移栽入土
D．用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术叫做微型繁殖技术
6．“白雪公主”草莓被誉为“水果皇后”，具有广阔的市场前景和较高的经济价值。草莓是无性繁殖的植物，它感染的病毒很容易传播给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。下图是育种工作者选育高品质“白雪公主”草莓流程图。下列说法错误的是（　　）
A．通常采用70%的酒精和5%的次氯酸钠溶液对甲进行消毒处理
B．甲常选用茎尖，原因是该处的病毒极少甚至没有病毒
C．在植物组织培养过程中，经过筛选可能获得对人们有用的突变体
D．通过植物组织培养技术得到抗病毒的草莓脱毒苗
7．乳腺癌被称为“粉红杀手”，其发病率位居女性恶性肿瘤的首位。全新抗体—药物偶联物（ADC）ARX788在中国进行的一项实验达到主要研究终点。HER2蛋白是人类表皮生长因子受体，HER2蛋白过量表达会导致细胞功能紊乱，常与肿瘤的发生发展密切相关。乳腺癌细胞上的HER2蛋白是正常组织中的100倍以上，在单位细胞中的拷贝数接近200万，使其成为理想的肿瘤治疗靶标，可显著改善晚期HER2阳性乳腺癌生存期。下图为ADC的一种作用机制。下列说法错误的是（　　）
A．通过接头将抗HER2抗体与细胞毒素结合，制备出ADC
B．溶酶体裂解后释放的药物促使肿瘤细胞非程序性死亡
C．单克隆抗体除了在ADC中的应用外，还用于疾病的诊断和病原体鉴定
D．ADC在临床应用上的优势是细胞毒素仅杀伤肿瘤细胞，对正常细胞影响小
8．动物细胞培养是动物细胞工程的基础，人造皮肤的构建、动物分泌蛋白的规模化生产都离不开动物细胞培养。2023年春季，我国多地爆发了甲型H1N1流感，利用动物细胞培养技术快速生产流感疫苗逐渐成为一种有吸引力的选择。下列说法正确的是（　　）
A．用胰蛋白酶或胃蛋白酶处理剪碎的动物组织，可使其分散成单个细胞
B．用培养液培养的甲型H1N1流感病毒对其进行分析，进而加快疫苗的研制
C．通常将动物组织处理后在培养瓶中的初次培养称为原代培养
D．在细胞传代培养过程中，都需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞
9．2006年，科学家利用病毒将原癌基因（c—Myc）、抑癌基因（Klf4）、Sox2和Oct4等关键基因转入高度分化的小鼠成纤维细胞中，获得诱导多能干细胞（简称iPS细胞）。2022年3月，我国科学家在全世界首次发现了一种无转基因、快速和可控的方法，通过两个关键因子诱导DNA去甲基化，将人类多能性干细胞转化为8细胞阶段全能性胚胎样细胞（简称8CL细胞）。下列说法错误的是（　　）
A．从iPS细胞到8CL细胞的技术突破，有助于我们了解早期胚胎发育和疾病发生之间的关系
B．iPS细胞发育形成囊胚后移植到子宫中，使其进一步发育成新个体
C．把c—Myc、Klf4、Sox2和Oct4等基因转入成纤维细胞是诱导已分化细胞转变为未分化细胞
D．8CL细胞比iPS细胞的优势是全能性更高，来源更多
10．胚胎工程为优良牲畜的大量繁殖和稀有动物的种族延续提供了有效的解决办法，在畜牧业和制药业等领域发挥重要的作用，具有光明的应用前景。哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律是研究胚胎工程重要的理论基础。下列说法错误的是（　　）
A．孵化前，细胞平均体积在不断减少，胚胎所含的有机物总量不断降低
B．胚胎发育过程中，囊胚的滋养层细胞将来发育形成胎盘和胎膜
C．卵子排出后需要在输卵管进一步成熟，到MⅡ期才具备受精能力
D．哺乳动物排出的卵子有的可能是次级卵母细胞，有的可能已经完成减数分裂Ⅱ
11．2023年1月，宁夏首批体细胞克隆高产长寿超级奶牛诞生，科研人员选择高产长寿和抗逆性能优异的明星奶牛，采集其耳缘组织，培养皮肤成纤维细胞，再通过核移植生产克隆胚胎，进行胚胎移植及妊娠。下列说法错误的是（　　）
A．为获得更多的超级奶牛，可在胚胎移植前对囊胚或者原肠胚时期的胚胎进行胚胎分割
B．胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移
C．胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力
D．体细胞核移植的成功率非常低，人类对克隆技术的应用还有很多问题需要解决
12．斑点杂交是将待测DNA或RNA样品直接点在硝酸纤维素膜上，用已标记的探针进行杂交，洗膜（除去未接合的探针），放射自显影，判断是否有杂交及其杂交强度。下列说法错误的是（　　）
A．可用放射性同位素标记的目的基因片段做斑点杂交的探针
B．通过放射性自显影可以检测出整合有目的基因的受体细胞
C．斑点杂交技术可用于检测目的基因是否在受体细胞中成功表达
D．待测片段和探针杂交形成的双链区有氢键的形成
13．“黑寡妇”蜘蛛吐出的丝强过钢丝，用其吐出的丝织成的布比制造防弹背心所用纤维的强度高很多。科学家把“黑寡妇”蜘蛛体内蜘蛛丝蛋白基因，导入到山羊细胞内，培育出转基因“蜘蛛羊”乳腺生物反应器，获得了坚韧程度极强的蜘蛛丝蛋白，取名为“生物钢”，操作过程如下。下列说法错误的是（　　）
A．在构建基因表达载体时，要在蜘蛛丝蛋白基因序列上游加上能在乳腺中特异性表达的基因的启动子
B．通过显微注射的方法将含有蜘蛛丝蛋白基因的表达载体导入山羊的受精卵中，进而发育成“蜘蛛羊”
C．“蜘蛛羊”乳腺生物反应器生产的“生物钢”会造成环境污染
D．乳腺生物反应器具有产量高、成本低、产品质量好和易提取等优点
14．赖氨酸是人类的必需氨基酸，玉米中的赖氨酸含量很低，且在加工过程中易被破坏而缺乏。为提高玉米中赖氨酸的含量，若将天冬氨酸激酶中第352位的苏氨酸变为异亮氨酸，将二氢吡啶二羧酸合成酶中第104位的天冬酰胺变为异亮氨酸，可以使玉米种子中游离赖氨酸含量提高2倍。下列说法错误的是（　　）
A．蛋白质工程实质是通过改变基因的碱基排列顺序而改变蛋白质的结构
B．蛋白质工程是分子水平的操作，其过程无需构建基因表达载体
C．蛋白质工程理论上既能改造现有蛋白质，也能制造新的蛋白质
D．对基因的改造会经常用到基因的定点突变技术来进行碱基的替换、增添等
15．“三亲试管婴儿”为第四代试管婴儿，又叫卵浆置换技术。高龄产妇的胞浆已经老化，不利于胚胎的发育，选择高龄产妇自身活性较强的卵子的细胞核，借助年轻女性卵子的胞浆，将细胞核注入胞浆中，组合成新的卵子，就可以大幅度地提升受精卵质量，形成胚胎后移植到母体子宫。下列说法错误的是（　　）
A．该技术能大幅度改善卵子质量、解决卵子老化和精子质量不佳等问题
B．该技术能极大地提高高龄患者的试管婴儿成功率
C．年轻女性的卵子需要去掉细胞核，也就是去掉纺锤体—染色体复合物
D．“三亲试管婴儿”会导致伦理道德方面的质疑和争议
二、多选题
16．樱桃营养丰富，含铁量位于水果之首，常食樱桃可防治缺铁性贫血，但樱桃收获期短，不耐贮存，因此利用樱桃酿制果酒和果醋可获得较高的经济效益。下图为樱桃果酒和果醋的制作过程。下列说法正确的是（　　）

A．制作果酒和果醋利用的是同种微生物不同条件下的发酵
B．使用果胶酶和纤维素酶能提高樱桃的出汁率和澄清度
C．在制作果酒的基础上制作果醋，只需氧气充足，其他条件不变
D．果酒制作过程中培养液的pH会降低
17．腐乳是我国流传数千年的传统民间美食。公元5世纪，北魏时期的古书上就有“干豆腐加盐成熟后为腐乳”之说。下图为某兴趣小组制作普通腐乳和低盐腐乳的过程中测得腐乳样品中的相关数据。普通腐乳要经过盐腌阶段得到盐坯；低盐腐乳的制作过程中毛坯不含盐，在后期发酵中向发酵液中添加质量分数10%的食盐。氨基酸态氮含量是判断腐乳是否成熟的标准，标准中规定腐乳中氨基酸态氮的含量应不低于0.35g/100g。下列说法正确的是（　　）
A．传统制作腐乳的过程是包含酵母、曲霉和毛霉等多种微生物的固体发酵
B．发酵过程中微生物分泌的蛋白酶把豆腐中的蛋白质分解成小分子肽和氨基酸
C．低盐腐乳使腐乳的发酵时间缩短，氨基酸的含量增加
D．腐乳含盐量越低越好，高血压、心血管患者尽量少吃或不吃普通腐乳
18．新冠病毒感染自2023年1月8日起调整为“乙类乙管”，疫苗是最有效控制传染病的科技武器。灭活疫苗是将培养扩增的活病毒通过物理或化学手段灭活后，经过系列纯化制备的生物制剂。国产新冠灭活疫苗的大致生产流程如下图所示。下列说法错误的是（　　）

A．O2是细胞代谢必需的，所以需将Vero细胞置于含95%空气和5%O2的混合气体环境中培养
B．培养液需要定期更换，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害
C．新冠病毒用物理或化学手段灭活后会使其失去感染能力，但不会破坏其抗原结构
D．将新冠病毒接种到Vero细胞后，需在细胞培养液中加入适量血清以防止杂菌污染
三、单选题
19．小鼠正常2细胞期胚胎经过电融合诱导形成四倍体胚胎，四倍体胚胎具有发育缺陷，只能发育形成胎盘等胚体以外的结构。ES细胞能够诱导分化形成所有的细胞类型，但很难分化形成胎盘。将ES细胞和四倍体胚胎聚合形成新的重构胚，可发育成完整小鼠个体，称为四倍体补偿技术。下列说法错误的是（　　）
A．重构胚中的ES细胞具有自我更新能力，但很难分化为胎盘等胚外组织
B．重构胚发育至桑葚胚或囊胚再移植到生理状态相同的小鼠子宫内才能发育成完整小鼠个体
C．通过四倍体补偿技术得到的小鼠个体的基因型与供体ES细胞的基因型不同
D．利用四倍体补偿技术，可将ES细胞经过体外遗传学修饰，得到经过人为修饰的目的小鼠
四、多选题
20．生物学是以实验为基础的自然科学。我校生物实验课同学们选用菜花进行了“DNA的粗提取与鉴定”实验。下列说法错误的是（　　）
A．利用DNA不溶于酒精，蛋白质溶于酒精，可将DNA与蛋白质分离
B．将菜花切碎放入研钵中，倒入10ml体积分数为95%的酒精进行充分研磨
C．向含DNA的溶液中加入一定量的二苯胺试剂混合均匀后，溶液会呈现蓝色
D．利用DNA能溶于2mol/L的NaCl溶液，可将提取的丝状物或沉淀物溶解于2mol/L的NaCl溶液
五、非选择题
21．酿酒酵母被称为啤酒酵母，最早人们利用它进行啤酒和面包的工业化生产，后来人们从葡萄酒中分离培养出不同的菌株，进一步将其分为果酒用酵母、啤酒用酵母等不同类别。酿酒酵母的品质影响葡萄酒的产量和质量，研究人员为分离出产酒精能力强的酿酒酵母菌株，进行了下图实验，甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基，灭菌条件相同。
(1)制备培养基时，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的pH，及时对培养基进行分装，并进行 灭菌。
(2)图一中所用的分离产酒精能力强的酿酒酵母菌株的方法是 。
(3)通过计算得出葡萄酒过滤液每L的活菌数为 个，用这种方法统计的结果往往较实际值 ，原因是 。
(4)图二中丙瓶出现的现象是 ，原因是 。
(5)图二中乙瓶和丁瓶哪一瓶中的酿酒酵母产酒精能力强？ 。原因是 。
22．学名“毛花猕猴桃”的毛冬瓜营养价值极高，多种植在南方，20多年前生长在山里，无人问津；软枣猕猴桃果皮光滑无毛，果实营养丰富，耐寒。某科研所欲利用这两种猕猴桃体细胞，通过细胞工程的方法培育出猕猴桃新品种，培育过程如下图所示。
(1)从愈伤组织培养到试管苗的过程一般 （填“不需要”或“需要”）提供光照，原因是 。
(2)过程①通常用的操作方法是 ，过程②使用的化学法包括 和 。
(3)从过程④到过程⑤需要更换培养基，原因是 。
(4)过程②得到的两两融合的细胞有三种，因此需要进行筛选。已知用X射线处理会使染色体受影响而导致细胞失去分裂能力；用碘乙酰胺处理会使细胞内的酶失活而抑制生长。在①过程进行之前对“毛花猕猴桃”用X射线处理，对“软枣猕猴桃”用 处理，能在培养基上分裂生长的细胞是 （不能用图中字母表示）。
23．中国生物杨晓明团队发现针对德尔塔变异毒株有效的单克隆抗体2B11，2B11所识别的RBD表位与ACE2的结合位点高度重叠，可有效阻断新冠病毒与细胞表面的ACE2结合，进而阻止其感染细胞。单克隆抗体在多种疾病治疗上显示出极好的疗效和广阔的应用前景。下图为单克隆抗体的制备过程。
(1)与诱导植物细胞融合相比，诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合特有的方法是 。
(2)HAT培养基的作用是 ，经HAT培养基筛选后得到的细胞进行 ，这个过程常用到96孔板的培养和筛选，原理是对筛选出来的细胞的培养液充分稀释，使 ，通过培养让它增殖，再进行相应的抗体检测。
(3)若要大量制备单克隆抗体，可将多次筛选得到的符合要求的杂交瘤细胞注入小鼠B的 内，也可进行体外培养，在培养液中通入一定浓度的CO2，主要作用是 。
(4)与从动物血清中分离的抗体相比，单克隆抗体的主要优点是 ，并且可以大量制备。
24．宫颈癌是一种由HPV病毒（遗传物质是DNA）引发的癌症，至今已鉴定出200多种HPV类型。尤其是HPV16、HPV18，其检出率在宫颈癌中达到99.7%。2023年1月，国家卫生健康委等十个部门联合发布了《加速消除宫颈癌行动计划（2023—2030年）》，提出了“积极推动HPV疫苗接种”的要求。九价HPV疫苗在中国获批用于9-45岁女性，但却一针难求。将HPV16和HPV18两种病毒的衣壳蛋白基因（目的基因）与质粒连接，导入大肠杆菌表达后，就获得了疫苗的有效成分。
(1)在构建基因表达载体时要将HPV16和HPV18两种病毒的衣壳蛋白基因插入 和 之间。
(2)构建基因表达载体的目的是 。
(3)进行基因表达载体构建有两个方案：
方案一：只用EcoRI酶同时切割质粒和含目的基因的DNA片段；
方案二：使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同时切割质粒和含目的基因的DNA片段。
你认为哪个方案更好？ 。原因是 。
(4)基因表达载体导入大肠杆菌前，需用 处理大肠杆菌，目的是 。
25．实时荧光定量PCR简称qPCR，适用于新发传染病的快速筛查和诊断。在反应体系加入Taqman探针，Taqman探针两端连有荧光基团（R）和抑制荧光发出的淬灭基团（Q），完整的Taqman探针不发出荧光，当探针被水解后R基团会发出荧光，随着循环次数的增加，荧光信号强度增加，通过实时检测荧光信号强度，可得Ct（每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数）值。
(1)新冠病毒的核酸是RNA，利用PCR扩增前，需要在 酶作用下使RNA形成cDNA．
(2)引物的作用是 ，引物长度通常为20~30个核苷酸，过短会导致 。
(3)PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行，缓冲溶液一般要添加Mg2+，原因是 。
(4)qPCR过程中，TaqDNA聚合酶的两个作用是 。
(5)一般来说确诊者出现症状时，Ct值 （填“较低”或“较高”），检测样本中病毒浓度 （填“较低”或“较高”）。
试卷第1页，共3页
试卷第1页，共3页
参考答案：
1．D
【分析】发酵：指人们利用微生物，在适宜条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程。参与啤酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。啤酒制作的原理：(1)在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖；(2)在无氧条件下，酵母菌进行无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。
【详解】A、淀粉是生物大分子，不能直接被生物利用，利用大麦作原料时，淀粉需要在淀粉酶作用下水解成麦芽糖才能被酵母菌利用，A正确；
B、加入啤酒花是为了产生风味组分，而蒸煮可以终止酶的作用，还可以对糖浆灭菌，B正确；
C、啤酒的酿制利用的微生物为酵母菌，主发酵阶段主要完成的是酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成，C正确；
D、主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒，D错误。
故选D。
2．D
【分析】制作泡菜时要用到乳酸菌，乳酸菌是一种厌氧菌，在无氧的条件下，乳酸菌发酵产生乳酸，使得菜呈现一种特殊的风味，还不改变菜的品质。因此泡菜制作的原理是需利用乳酸菌在无氧条件下发酵形成乳酸，然后制作成泡菜。
【详解】A、泡菜中含有亚硝酸盐，而绿色食品中含有亚硝酸盐相对较少，而不是不含有，A错误；
B、制作泡菜所需要的微生物为乳酸菌，为厌氧菌，为保证泡菜发酵过程中的无氧环境，在装坛发酵前后需要检泡菜坛有无裂纹和砂眼，并对泡菜坛进行用水密封坛口处理，制作时应装至八成满即可，B错误；
C、将切好的新鲜蔬菜、香辛料分层放入泡菜坛中，而后将冷却好的盐水缓缓倒入坛中，使盐水没过全部菜料，C错误；
D、由于酵母菌为兼性厌氧型微生物，因此腌制过程中泡菜坛内液体表面可能出现一层由酵母菌繁殖形成的白膜，D正确。
故选D。
3．B
【分析】培养基的成分一般都有微生物生长所必需的营养：碳源、氮源、无机盐、水。因微生物不同，对碳源、氮源、无机盐、生长因子的需求也不相同，可以根据微生物的生长需求制备特殊的选择培养基，来获得单一纯种。
【详解】A、实验室获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染，即保证无菌操作，A正确；
B、不同微生物对培养基中的pH的要求不同，培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性，B错误；
C、在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物，平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法，C正确；
D、培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质，因微生物不同，对碳源、氮源、无机盐、生长因子的需求不相同，D正确。
故选B。
4．B
【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。
【详解】A、产朊假丝酵母的蛋白质和维生素B的含量都比啤酒酵母高，朊假丝酵母生产的单细胞蛋白可以作为食品添加剂，A正确；
B、发酵工程生产的单细胞蛋白是微生物的细胞，含有糖类、脂质等多种化合物，可作为家畜的优质饲料，属于发酵工程在农牧业上的应用而非食品工业的应用，B错误；
C、对微生物进行扩大培养选用液体培养基，因为液体培养基有进行通气培养、振荡培养的优点，有利于微生物与营养物质和氧气充分接触，利于其繁殖，C正确；
D、青霉素可以杀死细菌，可利用加入青霉素的选择培养基进行产朊假丝酵母等真菌的分离，D正确。
故选B。
5．C
【分析】植物组织培养的关键：(1)条件：离体，一定营养物质，激素(生长素、细胞分裂素)等。(2)培养基状态：固体培养基(需再分化，生根培养基和生芽培养基)。(3)体内细胞未表现全能性的原因：基因的表达具有选择性。(4)光照的应用：脱分化阶段不需要给予光照，再分化阶段需要给予光照，以利于叶绿素的形成。
【详解】A、用于植物组织培养的离体的植物器官、组织或细胞等称为外植体，A正确；
B、植物组织培养的培养基中需添加蔗糖，目的是提供营养，同时调节渗透压，B正确；
C、愈伤组织发芽生根后进一步培养形成试管苗后，要移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土，C错误；
D、用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技术叫做微型繁殖技术，能对濒危植物进行有效的保护，D正确。
故选C。
6．D
【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。
【详解】A、对外植体的消毒通常采用体积分数为70%的酒精和5%次氯酸钠溶液，消毒后需用无菌水进行冲洗，A正确；
B、茎尖的病毒极少甚至没有病毒，所以常用茎尖作为外植体，B正确；
C、在植物组织培养过程中，愈伤组织容易发生突变，经过筛选可能获得对人们有用的突变体，C正确；
D、通过植物组织培养技术得到草莓脱毒苗，但是不抗病毒，D错误。
故选D。
7．B
【分析】据图分析，抗体上带有细胞毒素，抗体与靶细胞膜上的特异性受体结合通过胞吞的方式把细胞毒素一并带进靶细胞，引起靶细胞溶酶体膜的破裂，最后导致细胞凋亡。
【详解】A、由图可知，抗HER2抗体通过接头与细胞毒素结合形成抗体—药物偶联物（ADC），A正确；
B、溶酶体裂解后释放的药物促使肿瘤细胞死亡是正常的生理过程，属于细胞凋亡，是细胞的程序性死亡，B错误；
C、单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂，它在多种人类疾病及动植物病害的诊断和病原体鉴定是发挥重要的作用，C正确；
D、单克隆抗体具有导向作用，能将药物定向带到肿瘤细胞所在位置，在原位杀死肿瘤细胞，既不损伤正常细胞，又减少用药剂量，D正确。
故选B。
8．C
【分析】动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。
【详解】A、处理动物组织应用胰蛋白酶或者胶原蛋白酶，A错误；
B、甲型H1N1流感病毒营寄生，应用活细胞培养，B错误；
C、原代培养指的是经过剪碎、酶处理后进行的初次培养，C正确；
D、在细胞传代培养过程中，对于贴壁细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，而悬浮细胞无需用酶处理，D错误。
故选C。
9．B
【分析】科学家已尝试采用多种方法来制备iPS细胞，包括借助载体将特定基因导入细胞中，直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞。iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能被诱导为iPS细胞。
【详解】A、将人类多能性干细胞转化为8细胞阶段全能性胚胎样细胞（简称8CL细胞），故从iPS细胞到8CL细胞的技术突破，有助于我们了解早期胚胎发育和疾病发生之间的关系，A正确；
B、iPS细胞为多能干细胞，不具有发育的全能性，故iPS细胞无法发育形成囊胚，B错误；
C、把c—Myc、Klf4、Sox2和Oct4等基因转入成纤维细胞是诱导已分化细胞转变为未分化细胞，细胞的全能性升高，C正确；
D、8CL细胞（全能性胚胎样细胞）比iPS细胞的优势是全能性更高，来源更多，D正确。
故选B。
10．D
【分析】刚刚排出的精子，不能立即与卵子受精，必须在雌性动物生殖道或人工配置的获能液中获能后，才能获得受精能力；动物排出的卵子都要在输卵管内进一步成熟，当达到减数第二次分裂期才具备与精子受精的能力。
【详解】A、孵化（胚胎从透明带中伸展出来）前，细胞平均体积在不断减少，胚胎所含的有机物总量不断降低，A正确；
B、胚胎发育过程中，囊胚的滋养层细胞将来发育形成胎盘和胎膜，内细胞发育成胎儿的各种组织，B正确；
CD、动物排出的可能是初级卵母细胞也可能是次级卵母细胞，都要在输卵管内进一步成熟，达到减数第二次分裂期时，才具备与精子受精的能力，C正确，D错误。
故选D。
11．A
【分析】1、胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术；
2、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一。
【详解】A、胚胎移植一般选择桑葚胚或囊胚时期的胚胎，A错误；
B、胚胎移植是指早期胚胎移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术，实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，B正确；
C、胚胎移植可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，较短时间内得到更多的后代，C正确；
D、体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此体细胞核移植的成功率非常低，体细胞核移植技术的研究仍在继续，人类对克隆技术的应用还有很多问题需要解决，D正确。
故选A。
12．C
【分析】1、探针是指以放射性同位素、生物素或荧光染料等进行标记的已知核苷酸序列的核酸片段，可用于核酸分子杂交以检测目标核苷酸序列是否存在；
2、目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测；①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因；②检测目的基因是否转录出了mRNA；③检测目的基因是否翻译成蛋白质：抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、根据杂交原理，作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件：一应是单链；二应带有容易被检测的标记，例如放射性和荧光标记，因此可用放射性同位素标记的目的基因片段做斑点杂交的探针，A正确；
B、可用含有目的基因的DNA探针检测目的基因是否转入受体细胞，通过放射性自显影可以检测出整合有目的基因的受体细胞，B正确；
C、基因探针可以和DNA或RNA上的碱基互补配对，所以既可以检测DNA，也可以检测RNA，但无法检测蛋白质，C错误；
D、待测片段和探针杂交形成的双链区，即形成杂交带，遵循碱基互补配对原则，碱基间有氢键的形成，D正确。
故选C。
13．C
【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。
【详解】A、启动子具有特异性，在构建基因表达载体时，要在蜘蛛丝蛋白基因序列上游加上能在乳腺中特异性表达的基因的启动子，A正确；
B、受精卵的全能性较高，通过显微注射的方法将含有蜘蛛丝蛋白基因的表达载体导入山羊的受精卵中，进而发育成“蜘蛛羊”，B正确；
C、“蜘蛛羊”乳腺生物反应器生产的“生物钢”，可以被生物降解，不会造成环境污染，C错误；
D、乳腺生物反应器具有产量高、成本低、产品质量好和易提取等优点，D正确。
故选C。
14．B
【分析】1、蛋白质工程是指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要；蛋白质工程的实质：定向改造或生产人类所需蛋白质，生产自然界没有的蛋白质；
2、蛋白质工程的基本原理：它可以根据人的需求来设计蛋白质的结构。蛋白质工程的基本途径是：根据预期的蛋白质功能设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，推测出相对应的脱氧核苷酸序列或合成新的基因，再经表达过程产生预期蛋白质。
【详解】A、蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成，是通过改变基因的碱基排列顺序而改变蛋白质的结构，A正确；
B、基因表达载体的构建是基因工程的核心，基因工程是蛋白质工程的基础，故蛋白质工程都需要构建基因表达载体，B错误；
C、蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要，C正确；
D、对蛋白质的改造是指通过基因工程中的定点诱变技术来进行碱基的替换、增添等，有目的改造蛋白质分子中某活性部位的1个或几个氨基酸残基，以改善蛋白质的性质和功能，D正确。
故选B。
15．A
【分析】试管婴儿技术主要用到了胚胎工程和细胞工程中的体外受精、胚胎移植、动物细胞培养、早期胚胎培养等技术。
【详解】A、结合题干可知，该技术能大幅度改善卵子质量、解决卵子老化的问题，但是没有解决精子不佳的问题，A错误；
B、大龄女性容易产生质量不佳的卵子，而重组的卵细胞成活力较强，该技术能极大地提高高龄患者的试管婴儿成功率，B正确；
C、年轻女性的卵子需要去掉细胞核，也就是去掉纺锤体—染色体复合物，因为处于减数第二次分裂时期的次级卵母细胞内没有细胞核，C正确；
D、该技术孕育的后代，卵子的遗传物质来源于两个女性，会导致伦理道德方面的质疑和争议，D正确。
故选A。
16．BD
【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。在有氧的情况下酵母菌生长繁殖速度快，把糖分解成二氧化碳和水。在无氧的环境中酵母菌把糖分解成酒精和二氧化碳。
2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【详解】A、制作果酒和果醋利用的是不同种微生物（酵母菌、乳酸菌）不同条件下（温度、控制通气情况）的发酵，A错误；
B、植物细胞有细胞壁，使用果胶酶和纤维素酶能提高樱桃的出汁率和澄清度，B正确；
C、在制作果酒的基础上制作果醋，需氧气充足，适当提高发酵温度，C错误；
D、果酒制作过程中产生二氧化碳，溶于水，pH降低，D正确。
故选BD。
17．ABC
【分析】1、让豆腐上长出毛霉：将豆腐块平放在笼屉内，将笼屉中的温度控制在15～18℃，并保持在一定的湿度。约48h后，毛霉开始生长，3d之后菌丝生长旺盛，5d后豆腐块表面布满菌丝。豆腐块上生长的毛霉来自空气中的毛霉孢子。
2、加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐，随着层数的加高而增高盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些。加盐研制的时间约为8d左右。加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中不会过早酥烂。同时，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。
3、加卤汤装瓶：卤汤直接关系到腐乳的色、香、味。卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在12%左右。加酒可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味。香辛料种类很多，如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等。香辛料可以调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用。可据个人口味配置卤汤。
4、密封腌制。
【详解】A、传统制作腐乳的过程时包含酵母、曲霉和毛霉等多种微生物进行的固体发酵，A正确；
B、传统制作腐乳的过程是包含酵母、曲霉和毛霉等多种微生物的固体发酵，B正确；
C、图1中低盐腐乳盐含量的增加幅度比普通腐乳盐含量的降低幅度要大，由图2可知低盐腐乳氨基酸态氮含量先达到0．35g/100g，所以成熟较早，缩短了发酵时间，同时氨基酸态氮含量也比普通腐乳高，C正确；
D、腐乳含盐量太低可能会引起杂菌污染，所以并不是越低越好，D错误。
故选ABC。
18．AD
【分析】动物培养条件：
（1）无菌无毒环境：无菌--对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素；无毒-一定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。
（2）营养：成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基）。
（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。
（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2是细胞代谢所必需的， CO2主要作用是维持培养液的pH。
【详解】A、O2是细胞代谢必需的，CO2的可维持pH，所以需将Vero细胞置于含95%空气和5%CO2的混合气体环境中培养，A错误；
B、培养Vero细胞时，培养液需要定期更换，及时清除代谢产物，以保证细胞培养的无毒的环境，B正确；
C、新冠病毒用物理或化学手段灭活后，使新冠病毒失去感染能力，但不会破坏其表面的蛋白结构，保留其抗原性，C正确；
D、将新冠病毒接种到Vero细胞后，需在细胞培养液中加入适量抗生素以防止杂菌污染，D错误。
故选AD。
19．C
【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术。胚胎工程的许多技术，实际是在体外条件下，对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。嵌合体-遗传学上用以指不同遗传性状嵌合或混杂表现的个体。
【详解】A、据题干信息“ES细胞能够诱导分化形成所有的细胞类型，但很难分化形成胎盘”，所以重构胚中的ES细胞具有自我更新能力，但很难分化为胎盘等胚外组织，可分化为处胎盘以外的所有细胞类型，A正确；
B、胚胎发育至桑椹（桑葚）胚或囊胚期再移植入与之生理状态相同的小鼠子宫内才可以进一步发育，B正确；
C、四倍体胚胎与ES细胞的嵌合体则会使二者的发育潜能相互补偿，可得到ES小鼠，其中的四倍体胚胎只能发育成胚外组织，所以嵌合体发育形成的ES小鼠基因型与供体ES细胞的基因型相同，C错误；
D、正常小鼠是二倍体，所以两个2细胞期胚胎用灭活病毒等诱导法使细胞融合，可得到一个含四个染色体组的细胞，再经胚胎的早期培养可得到四倍体胚胎，可将ES细胞经过体外遗传学修饰，得到经过人为修饰的目的小鼠，D正确。
故选C。
20．BC
【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：1、DNA的溶解性：（1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCI溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，以达到分离目的。（2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。2、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响。大多数蛋白质不能忍受60-80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响。3、DNA的鉴定：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺试剂会被染成蓝色，因此二苯胺试剂可以作为鉴定DNA的试剂。
【详解】A、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离，A正确；
B、95%的酒精作用是分离DNA和蛋白质，将菜花切碎放入研钵中，倒入10ml体积分数为研磨液进行充分研磨，B错误；
C、向含DNA的溶液中加入一定量的二苯胺试剂混合均匀后，水浴加热后溶液会呈现蓝色，C错误；
D、利用DNA能溶于2mol/L的NaCl溶液，可将提取的丝状物或沉淀物溶解于2mol/L的NaCl溶液，D正确。
故选BC。
21．(1)高压蒸汽灭菌
(2)稀释涂布平板法
(3) 6.8×109 偏低 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落
(4) 没有酒精产生，瓶内活菌数量不低 丙瓶密封不严，酿酒酵母进行有氧呼吸，所以没有酒精产生
(5) 丁 甲瓶接种无菌水，瓶中无菌，说明培养基灭菌彻底，无菌操作正常，丁瓶的活菌数比乙瓶少，酒精浓度和乙瓶一样多，所以丁瓶酿酒酵母产生酒精能力比乙瓶强
【分析】1、酵母菌是兼性厌氧微生物。在无氧条件下进行酒精发酵。
2、图一所示取样后稀释104倍和105倍，在同一稀释度数下，对3个平板进行了重复计数，这种计数方法是稀释涂布平板法。
3、图二表示甲，乙，丙，丁瓶中所产生的酒精浓度和活菌数量。
【详解】（1）培养基需要无菌处理，对培养基进行分装，并进行高压蒸汽灭菌。
（2）图一中，在同一稀释度数下，用稀释涂布平板法，对3个平板进行分离和计数。
（3）图一所示的六个计数的平板中，当稀释104倍时对应的3个平板可以用于计数，取其平均值68，即这涂布用的0.1mL稀释104倍的样品中约68个活菌，算得葡萄酒过滤液的活菌数为68×10000×10000= 6.8×109个／L，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落，所以此数值可能低于实际的活菌数。
（4）乙，丙，丁组中的活菌数量在1×104~2×104个·L-1，乙和丁组中的酵母菌产生酒精，丙组不产生酒精，可能是丙瓶密封不严，酿酒酵母进行有氧呼吸，所以没有酒精产生。
（5）甲瓶接种无菌水，瓶中无菌，说明培养基灭菌彻底，无菌操作正常，丁瓶的活菌数比乙瓶少，酒精浓度和乙瓶一样多，即丁组酵母菌数量较少，但产生的酒精量并不少于乙组，所以丁瓶酿酒酵母产生酒精能力比乙瓶强。
22．(1) 需要 叶绿素的合成需要光照
(2) 用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁 聚乙二醇（PEG）融合法 高Ca2+—高pH融合法
(3)诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同
(4) 碘乙酰胺 杂种细胞
【分析】分析题图可知，图示表示植物体细胞杂交的具体过程，其中①表示去壁过程，②为诱导原生质体融合，③为杂种细胞再生出新的细胞壁，④为脱分化，⑤为再分化。
【详解】（1）从愈伤组织培养到试管苗的过程一般需要提供光照，原因是叶绿素的合成需要光照，叶绿素的合成有利于光合作用的进行制造有机物。
（2）过程①（去除植物细胞壁）通常用的操作方法是用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，过程②（诱导原生质体融合）使用的化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法和高Ca2+—高pH融合法。
（3）从过程④（脱分化）到过程⑤（再分化）需要更换培养基，原因是诱导愈伤组织形成和诱导愈伤组织分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例不同。
（4）已知用X射线处理会使染色体受影响而导致细胞失去分裂能力；用碘乙酰胺处理会使细胞内的酶失活而抑制生长，过程②得到的两两融合的细胞有三种（毛花猕猴桃体细胞—毛花猕猴桃体细胞、毛花猕猴桃体细胞—软枣猕猴桃体细胞、软枣猕猴桃体细胞—软枣猕猴桃体细胞），故在①过程进行之前对“毛花猕猴桃”用X射线处理，对“软枣猕猴桃”用碘乙酰胺处理，能在培养基上分裂生长的细胞是杂种细胞（毛花猕猴桃体细胞—软枣猕猴桃体细胞）。
23．(1)灭活病毒诱导法
(2) 筛选出杂交瘤细胞 克隆化培养和抗体检测 每一个孔中只接种一个杂交瘤细胞
(3) 腹腔 维持培养液的pH
(4)特异性强、灵敏度高
【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。
【详解】（1）淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，此过程常用聚乙二醇作为诱导剂，与诱导植物细胞融合相比，诱导动物融合特有的方法是灭活病毒诱导法。
（2）HAT培养基属于选择培养基，可以筛选出杂交瘤细胞，经HAT培养基筛选后得到的细胞进行克隆化培养和抗体检测，这个过程常用到96孔板的培养和筛选，原理是对筛选出来的细胞的培养液充分稀释，使每一个孔只接种一个杂交瘤，通过培养让它增殖，再进行相应的抗体检测。
（3）若要大量制备单克隆抗体，可将多次筛选得到的符合要求的杂交瘤细胞注入小鼠B的腹腔内，也可进行体外培养，在培养液中通入一定浓度的CO2，主要作用是维持培养液的pH。
（4）与普通抗体相比较，单克隆抗体最主要的优点在于它的特异性强，灵敏度高，可大量制备。
24．(1) 启动子 终止子
(2)让目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用
(3) 方案二 防止目的基因和质粒的自身环化和随意连接等
(4) Ca2+ 使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法；
（4）目的基因的检测与鉴定：
分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因——DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA——分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质——抗原—抗体杂交技术；
个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】（1）在构建基因表达载体时要将HPV16和HPV18两种病毒的衣壳蛋白基因插入启动子和终止子之间；
（2）构建基因表达载体的目的是让目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给下一代，使目的基因能够表达和发挥作用；
（3）方案二更好，原因是：如果用EcoRI对外源DNA和质粒进行酶切，因为黏性末端相同，将多个含有目的基因的DNA片段与多个质粒的酶切产物用DNA连接酶进行连接后，两两连接所形成的产物有空质粒，反向连接的质粒，正向连接的质粒三种。为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同时切割质粒和含目的基因的DNA片段。
（4）基因表达载体导入大肠杆菌前，需用Ca2+处理大肠杆菌，目的是使大肠杆菌细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，可以提高转化效率。
25．(1)逆转录
(2) 使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸 特异性差
(3)TaqDNA聚合酶（耐高温的DNA聚合酶）需要Mg2+激活
(4)催化合成DNA子链；催化探针水解
(5) 较低 较高
【分析】PCR是聚合酶链式反应的缩写，原理为DNA半保留复制，在体外提供参加DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。反应需要在一定的缓冲液中才能进行，需要DNA提供模板，分别与两条模板链结合的2种引物，4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶；同时通过控制温使DNA复制在体外反复进行。
【详解】（1）新冠病毒的核酸是RNA，利用PCR扩增前，需要在逆转录酶作用下使RNA形成cDNA，需要的原料是四种游离的脱氧核苷酸。
（2）引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸，引物长度通常为20~30个核苷酸，过短会导致特异性差，得不到所需要的目的基因片段。
（3）PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行，缓冲溶液一般要添加Mg2+，原因是TaqDNA聚合酶（耐高温的DNA聚合酶）需要Mg2+激活。
（4）结合题图可知，qPCR过程中，TaqDNA聚合酶的两个作用是催化合成DNA子链；催化探针水解。
（5）结合题干和题图，若荧光信号达到设定的阈值时，经历的循环数越少（Ct值越小），说明扩增次数少，说明更多的荧光探针与目的基因进行了碱基互补配对，可推测检测样本中病毒浓度较高。
答案第1页，共2页
答案第1页，共2页

展开更多......

收起↑