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高二年级下学期第一次阶段性测试
生物试题参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
答案 C B D B D D B B A A C C D
题号 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
答案 B D AC AC ABD CD ABC
26．(1) 胰岛B 逆转录（反转录） 一种氨基酸可能对应多种密码子（密码子的简并性）
(2) 5' PstI (3) EcoRV T4DNA XhoⅠ、PstⅠ
(4) 不能 没有启动子和终止子，无法表达目的基因的产物
(5)氨苄青霉素 (6)0.8
27．(1)纤维素
(2) 菌种分离纯化 单个菌体 (3)④
(4) 104 给细菌提供生长所需的无机盐，并调节和维持微生物细胞的渗透压和pH
(5)产生透明圈
28．(1) 动物细胞融合、动物细胞培养 血清 95%的空气和5%的CO2
(2) 瘤细胞和瘤瘤细胞 补救合成 抗原抗体特异性结合
(3)双特异性抗体同时结合PSMA和CD28，使CD28接收激活信号，且实现癌细胞与T细胞的聚集，最终激活T细胞杀伤癌细胞
29.（1） ①. 低 ②. 4 ③. GTTT ④. AAAC
（2） ①. 卡那霉素 ②. Sac Ⅰ ③. ④
（3）1/4
答案第1页，共2页高二年级下学期第一次阶段性测试
生 物 试 题
一、单选题（共20题，每题2分，共40分）
1．安莎霉素主要用于治疗结核分枝杆菌导致的肺部感染。该抗生素是一种产自深海的赖氨酸缺陷型放线菌所产生的。为筛选出能产安莎霉素的菌种，科研工作者用紫外线对采自深海的放线菌进行诱变与选育，实验的部分流程如下图所示。下列叙述正确的是（ ）

注：原位影印可确保在一系列平板培养基的相同位置上接种并培养出相同菌落。
A．经过A处理，试管中大多数放线菌都可产生安莎霉素
B．在①中进行扩大培养时，接种后需对培养基进行灭菌处理
C．②和④是完全培养基，③是缺赖氨酸的不完全培养基
D．D菌落不能产生安莎霉素，而E菌落能产生安莎霉素
2．下图为研究人员对纤维素分解菌的分离操作（A组）和计数操作（B组）过程示意图。下列有关叙述错误的是（ ）

A．④和⑤所用培养基从物理性质分析，区别是④培养基中没有添加琼脂
B．⑨计数得到的细菌数与用细菌计数板计数法得到的细菌数相比较多
C．④的培养基应以纤维素为唯一碳源，还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质等的需求
D．可以在培养基中加入刚果红来鉴别纤维素分解菌
3．酒精性肠炎与肝炎是长期过量饮酒所致的一种肝肠疾病，患者会发生肝肠细胞损伤、肝脏炎症反应甚至肝衰竭，研究发现某些粪肠球菌能够分泌一种外毒素（即溶细胞素） ，在靶细胞膜上形成孔洞，使部分粪肠球菌转移到肝脏细胞中而毒害肝细胞。以体外培养的肝脏细胞为材料，进行相关实验，结果如图，下列说法错误的是（ ）
A．自变量为有无溶细胞素或酒精，因变量为细胞的死亡率或损伤率
B．长期过量饮酒可能会使肝脏中粪肠球菌所占比例升高
C．溶细胞素和酒精对肝脏细胞的毒害作用是独立发生且相互可加重病情
D．对照组中除培养液外不加入其他物质，不会有肝细胞死亡或损伤
4．CMV 是危害烟草的主要病毒，CMV 侵染烟草后，发病的叶片会褪绿变成黄色。为筛选抗 CMV的烟草突变株，科研小组进行的实验流程如图所示。下列说法正确的是（ ）
A．烟草幼苗茎尖病毒极少，直接取其进行组织培养可得到抗 CMV 植株
B．若发病叶片中出现绿色区域，取该区域进行组织培养可能得到抗CMV 植株
C．选取的叶片组织需先进行灭菌处理，再经过脱分化和再分化培养成抗 CMV 植株
D．接种CMV起到了选择作用，因此经组织培养后得到的植株无需再进行抗CMV 鉴定
5．自杀基因系统是指外源基因导入受体细胞后会表达相应的酶，该酶可催化无毒的药物前体转化为有毒物质，从而导致受体细胞被杀死。为探究外源基因TK与药物更昔洛韦能否组成自杀基因系统，研究人员以肝癌细胞为受体细胞进行实验，结果如图所示。下列说法正确的是（ ）

A．培养肝癌细胞的过程中需定期更换培养液以保持无菌、无毒的环境
B．肝癌细胞在细胞培养过程中没有接触抑制，因而无需进行传代培养
C．对照组和实验组应分别为导入 TK 和未导入 TK的肝癌细胞
D．实验结果表明外源基因 TK 与更昔洛韦可组成自杀基因系统
6．A型塞内卡病毒（SVA）会导致猪患水疱传染病，症状与猪口蹄疫等传染病非常相似。已知SVA核衣壳上的主要蛋白质VP1可作为该病毒诊断蛋白。研究人员以小鼠为对象，利用单克隆抗体技术获得了与VP1结合位点不同的两种单克隆抗体2E10和3E4。为进一步快速精确检测出该病毒，研究人员利用以上两种单克隆抗体制作出快速检测试纸条，如下图所示。结合垫处含有过量胶体金标记的2E10，可向右扩散，当胶体金颗粒聚集时才会出现可见条带，检测线、质控线处包埋固定的抗体依次是3E4和山羊抗鼠IgG（可特异性结合各种鼠源抗体）。下列相关叙述正确的是（　　）

A．制备单克隆抗体过程中第二次筛选的目的是获得融合的杂交瘤细胞
B．3E4和山羊抗鼠IgG与VP1-2E10复合物的结合位点相同
C．病毒检测阴性的结果为检测线和质控线均无条带出现
D．病毒检测阳性的结果为检测线和质控线处均出现条带
7．基因组印记（通过甲基化实现受精卵中来自双亲的两个等位基因一个表达另一个不表达）阻碍了哺乳动物的“孤雌生殖”。某研究团队利用甲基化酶、去甲基化酶和基因编辑技术，改变了小鼠生殖细胞的“基因组印记”，使其“变性”，然后将一个第二极体注入修饰后的次级卵母细胞（类似受精作用），最终创造出“孤雌生殖”的小鼠。实验过程如图所示。下列相关叙述正确的是（ ）
A．基因组印记会阻碍次级卵母细胞与精子或第二极体的结合
B．需对代孕母鼠进行同期发情处理后，再进行胚胎移植，受体对移植来的胚胎几乎不发生免疫排斥
C．“孤雌小鼠”的诞生过程没有精子参与，所以其基因型与提供卵母细胞的雌鼠相同
D．移植后的囊胚进一步扩大，会导致滋养层破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫作孵化
8．我国科学家成功地用iPS细胞克隆出了活体小鼠，部分流程如下图所示，其中Kdm4d为组蛋白去甲基化酶，TSA为组蛋白脱乙酰酶抑制剂。下列说法正确的是（　　）

A．组蛋白脱乙酰化和去甲基化有利于重构胚后续的胚胎发育过程
B．用电刺激、Ca +载体等方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程
C．③过程中使用有活性的病毒处理的目的是诱导细胞融合
D．图示流程运用了重组DNA、体细胞核移植、胚胎移植等技术
9．双脱氧测序法（Sangtr法）是第一代DNA测序方法。在4支试管中分别加入4种dNTP和少量的1种ddNTP进行PCR，再把PCR产物变性，利用电泳进行分离，根据结果确定特定碱基的位置。通过该方法测定并比较某疾病患者与对照个体DNA模板链的一段碱基序列，结果如图所示。下列叙述错误的是（ ）

注：dNTP是PCR的四种原料；双脱氧核苷三磷酸（ddNTP）有ddATP、ddCTP、ddGTP、ddTTP四种；在DNA聚合酶作用下，ddNTP与dNTP竞争核苷酸链延长位点，以加入ddATP的体系为例：若配对的为ddATP，延伸终止；若配对的为dATP，继续延伸
A．5'-TAGTGCCCATC-3'为对照个体的一段序列
B．PCR过程中需要DNA聚合酶，不需要DNA解旋酶和DNA连接酶
C．上述PCR反应体系中模板链需要足够多
D．患者该段序列中某位点的碱基C突变为T
10．某研究小组构建了能表达ACTA1-GFP融合蛋白的重组质粒，该重组质粒的部分结构如下图所示。下列叙述错误的是（ ）
注：F1和F2表示上游引物，R1和R2表示下游引物
A．ACTA1基因转录的模板链是a链，引物F1与a链的部分序列相同
B．仅用F2和R1一对引物，即可确定ACTA1基因插入方向是否正确
C．RNA聚合酶与启动子结合，调控ACTA1基因和GFP基因的表达
D．若用引物F2和R2进行PCR，能更好地区分ACTA1-GFP基因纯合子和杂合子
11．科研人员将四种酶的基因（EcCAT、QsGLO1、EcGCL、TSR）与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如图），在水稻叶绿体内构建了一条新代谢途径，提高了水稻的产量。下列说法正确的是（　　）
A．限制酶需要识别特定的序列具有专一性，DNA连接酶不具有专一性
B．含卡那霉素的培养基上不能存活的植物受体细胞未成功导入四种目的基因
C．OsGLO1、EcCAT基因转录时以DNA的不同单链为模板
D．利用PCR等技术检测OsGLO1基因是否转录时，需要的酶是Taq DNA聚合酶
12．模型是人们为了某种特定目的而对认识的对象所做的一种简化的概括性描述，模型构建是生物学教学、研究和学习的一种重要方法．对下列两个生物概念模型的理解或者分析正确的组合是（　　）
①若图1表示基因工程的操作流程图，则C表示重组质粒，D是受体细胞；
②若图1表示植物体细胞杂交过程，则A、B在融合前必须经过胰蛋白酶处理--制备原生质体，形成的C称为杂种细胞，从C到D需要的技术是植物组织培养；
③若图2中B是核移植技术，C是胚胎移植技术，则形成d的过程体现了高度分化的动物体细胞核也具有全能性；
④若图2中B表示下丘脑，C表示垂体，切断下丘脑与垂体的联系，对胰岛的影响比对甲状腺、肾上腺的影响更大．
A．①② B．③④ C．①③ D．②④
13．某同学拟用限制酶（酶1、酶2、酶3和酶4）、DNA连接酶为工具，将目的基因（两端含相应限制酶的识别序列和切割位点）和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。限制酶的切割位点如图所示，下列分析合理的是（ ）
A．可选择酶3切割质粒和目的基因，再用E.coliDNA连接酶连接
B．可选择酶2和酶4切割质粒和目的基因，再用E.coliDNA连接酶连接
C．可选择酶2切割质粒、酶4切割目的基因，再用E.coliDNA连接酶连接，连接后的片段仍能被酶2和酶4切割
D．为了让重组表达载体的构建合理且高效，可用酶1和酶2切割质粒和目的基因，再用T4 DNA连接酶连接
14．瑞典科学家斯万特帕博凭借对已灭绝古人类基因组和人类进化的发现荣获2022年诺贝尔奖生理学或医学奖。他在研究过程中使用了大引物PCR构建定点突变，其过程如图。下列相关叙述正确的是（ ）
A．进行PCR扩增需要的酶有解旋酶和耐高温的DNA聚合酶
B．利用该技术将某功能蛋白的结构改变属于蛋白质工程
C．第二轮PCR所用的引物为第一轮PCR所产生的DNA的两条链
D．要完成两处位点的突变，至少需要设计4种引物
15．下列关于基因工程的叙述，正确的是（ ）
A．若受体大肠杆菌含有构建重组质粒时用到的限制性核酸内切酶，则一定有利于该重组质粒进入受体并保持结构稳定
B．抗除草剂基因转入某抗盐植物获得2个稳定遗传转基因品系，抗性鉴定为抗除草剂抗盐和抗除草剂不抗盐。表明一定是抗盐性的改变与抗除草剂基因的转入无关
C．抗除草剂基因转入某植物获得转基因植株，其DNA检测均含目的基因，抗性鉴定为抗除草剂和不抗除草剂。表明一定是前者表达了抗性蛋白而后者只表达抗性基因RNA
D．已知不同分子量DNA可分开成不同条带，相同分子量的为一条带。用某种限制性核酸内切酶完全酶切环状质粒后，出现3条带。表明该质粒上一定至少有3个被该酶切开的位置
16.转录因子Ghl蛋白和GhE1 蛋白能调控棉花愈伤组织细胞的生长发育，其机制如图所示。下列相关分析正确的是 （ ）
A．愈伤组织增殖使用的培养基不需要添加植物激素类物质
B．Gh1 与GhE1 单独作用均能促进GhPs 基因的表达
C．促进GhEl基因的表达可促进愈伤组织分化成根等器官
D．图示是从转录水平对GhPs基因的表达进行调控
17.HER-2（一种跨膜糖蛋白）高表达通常只出现于胎儿期，正常人体组织中其表达量极低，在乳腺细胞中高表达可加速细胞分裂，使其增殖、分化过程失衡，最终转变为乳腺癌。抗体-药物偶联物T-DMI由曲妥珠单抗和药物DMI连接而成，对HER-2有很强的靶向性。下列相关分析错误的是（　　）
A．胎儿期HER-2高表达可能与胚胎发育有关，成人HER-2含量高可为乳腺癌诊断提供参考
B．因为获取的B淋巴细胞可能有多种，所以曲妥珠单抗制备过程需进行专一抗体阳性检测
C．DMI与HER-2特异性结合是T-DMI对癌细胞进行选择性杀伤的关键
D．利用同位素标记的曲妥珠单抗在乳腺组织中成像的技术可定位诊断肿瘤的位置
18.为了对重金属污染的土壤进行生物修复，研究者将从杨树中克隆的重金属转运蛋白（HMA3）基因与外源高效启动子连接，导入杨树基因组中（如图）。
为检测获得的转基因杨树苗中是否含有导入的HMA3基因，同时避免内源HMA3基因的干扰，在进行PCR扩增时，应选择的引物组合是（ ）
A．①+③ B．①+② C．③+② D．③+④
19、药用植物板蓝根（2n=14）具有抗病毒及抗菌等作用。某课题组以甘蓝型油菜（2n=38）与板蓝根作为原材料，通过体细胞杂交培育了抗病菌的板蓝根-油菜杂交种。部分杂交种细胞染色体组成以及分裂过程中细胞两极染色体数目占比如表所示，下列叙述正确的是（ ）
杂交种 体细胞染色体数 后期I细胞两极染色体数目比的占比（%）
26:26 28:24 23:29 27:25 其它
AS1 52 63.4 10.6 7.2 14.8 0.0
AS6 52-62 32.3 9.6 8.2 11.0 38.8
AS7 52-58 40.3 9.6 7.2 12.5 30.5
A．板蓝根—油菜杂种AS1属于二倍体，体细胞中有两个染色体组
B．板蓝根产生的配子与甘蓝型油菜产生的配子受精后需用秋水仙素诱导细胞染色体数目加倍
C．杂交种ASI在后期I时，有10.6%的细胞两极染色体数目比为28：24，造成这一现象的可能原因是后期I有部分染色单体未分离
D．若要将获得的AS1、AS6和AS7等杂交种作为有性杂交的亲本，最好选择AS1
20.根据抗菌特性可将抗菌剂分为抑菌剂和杀菌剂，其中抑菌剂可抑制细菌生长，杀菌剂能杀死细菌。为分析抗菌剂的抗菌特性，有人将不同抗菌剂分别添加到培养的细菌悬液中，用稀释涂布平板法或显微镜直接计数法测定细菌数量，评估细菌的生长情况，变化趋势曲线如图所示（不考虑抗菌剂残留对计数的影响），其中曲线1为仅添加无菌水的实验结果。下列说法不正确的是（ ）
A．用稀释涂布平板法进行计数时，若平板上的菌落数大于300，应提高稀释倍数
B．曲线2代表添加抑菌剂后的细菌数量，曲线3代表添加杀菌剂后的细菌数量
C．若曲线2和3为添加某抗菌剂后两种方法的计数结果，则3采用的显微镜直接计数法
D．若添加某抗菌剂后两种方法统计的细菌数量均下降，推测细菌出现裂解而死亡
二、不定项选择（共5个小题，每题3分，共15分）
21．CD47 是一种细胞膜表面的糖蛋白，可与巨噬细胞结合，从而抑制巨噬细胞的功能。为验证抗 CD47 的单克隆抗体能减弱 CD47 对巨噬细胞的抑制作用，某科研小组进行了实验，实验过程如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．通常向肿瘤细胞共培养体系加入血清，可提供某些营养物质
B．融合、筛选得到的杂交瘤细胞都能产生抗 CD47 的单克隆抗体
C．CD47 与巨噬细胞结合后会抑制后者的抗原处理、呈递功能
D．预期实验结果为对照组的巨噬细胞的吞噬能力高于实验组的
22．转运肽能够引导在细胞质中合成的蛋白质进入叶绿体，组装成叶绿体的完整结构，从而使植物能够顺利地进行光合作用。研究人员尝试将抗除草剂基因（抗草丁膦基因）和转运肽基因（如图1）同时导入大豆细胞并获得高产量的抗除草剂转基因大豆作物（如图2）。已知T-DNA上的基因在农杆菌中不能表达，而在植物细胞中能表达。下列叙述错误的是（ ）

A．用ClaI和SacI酶对转运肽基因酶切后能插入到T-DNA区内
B．T-DNA携带目的基因进入大豆细胞并整合到其染色体DNA上
C．导入重组Tì质粒的农杆菌不能在含卡那霉素的培养基中正常生长
D．喷施一定浓度的草丁膦可检测转基因大豆是否获得抗除草剂抗性
23．科学家将鼠抗人大肠癌单克隆抗体基因（ND-1）与酵母胞嘧啶脱氨酶基因（CD）融合，在大肠杆菌中成功地表达了单链抗体与酶的融合蛋白，这类蛋白的疗法称为由抗体介导的酶解前药疗法（ADEPT）。ND-1—CD融合基因的构建方法如图所示。下列有关叙述合理的是（　　）
A．图中产物一和产物二的获得至少需要经过2次扩增循环
B．图中杂交链延伸生成ND-1——CD融合基因的过程应不用加入引物
C．获得的融合基因在构建好基因表达载体后可被经Mg离子处理后的大肠杆菌吸收
D．该融合蛋白应是利用抗体部分特异性的识别人大肠癌细胞并将酶带到靶部位
24．科学家从某植物中提取乙烯受体基因（Ers1），通过基因工程技术将Ers1基因反向连接到质粒中，筛选出转入反义Ersl基因的该种植物，其果实的储藏期将延长，过程如图所示。下列说法错误的是（ ）
A．PCR时需在Ers1基因左右两端分别添加XhoI、HpaI酶切序列
B．过程②可用氯化钙处理农杆菌，有助于促进重组Ti质粒转化到农杆菌细胞中
C．过程③后可在培养基中添加卡那霉素对转化的植物细胞进行筛选
D．可利用抗原—抗体杂交技术检测该植物染色体上是否插入目的基因
25．天冬氨酸缺陷型菌株不能合成天冬氨酸，必须从外界环境中获取天冬氨酸才能生长繁殖。影印法（部分过程如图所示）可用于天冬氨酸缺陷型菌株的筛选，其中基本培养基中不含氨基酸，完全培养基中含所有种类的氨基酸；转印是将揭起的丝绒布平移到培养基上，使吸附的菌体“印”在培养基平板上。下列叙述错误的是（ ）
A．培养皿1中的培养基是基本培养基
B．过程①和过程②应使用相同的接种工具
C．过程②中，应将揭起的丝绒布先转印至培养皿2在转印至培养皿3中
D．菌落A可能是天冬氨酸缺陷型菌株的菌落
三、填空题（共4个小题，除注明外每空1分，共45分）
26．下图是利用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒（图1）、目的基因的部分结构（图2）及相关限制酶的识别序列（图3）。

注：图中数值代表到复制原点的距离，氨苄青霉素抗性基因，新霉素抗性基因

(1)获得胰岛素基因的方法有多种，如根据胰岛素的氨基酸序列人工合成DNA片段，或者利用人体 细胞中的mRNA通过 得到胰岛素基因。前者人工合成DNA片段有多种可能的序列，原因是 。
(2)为使目的基因与载体E正确连接，在设计PCR引物时可将限制酶的识别序列添加在PCR两种引物的 （选填“3'”或“5'”）端，与a链相结合的引物上添加的是限制酶 的识别序列。
(3)由于PCR扩增出的目的基因末端为平末端，如果不在目的基因的两端添加合适的限制酶识别序列，还可借助中间载体P将目的基因接入载体E。构建重组载体P时，应选择 酶进行剪切，再用 连接酶进行连接。为了便于该目的基因接入载体E，可用限制酶 切割重组载体P。
(4)（重组）载体P （选填“能”或“不能”）作为基因表达载体，理由是 。
(5)科研人员需在细胞培养基中加入一定浓度的 以筛选导入重组质粒E的受体细胞。
(6)已知由扩增后的基因先与载体P连接后得到重组质粒E的长度为8.9kb，依据图中数据分析可知目的基因的长度为 kb。
27．某生态研究小组为了从纤维素分解菌中获取纤维素酶，以便将农作物秸秆作为酿酒工业的原料，设计了如下操作流程分离提取较纯的纤维素分解菌。请分析回答问题：
①土壤取样→②选择培养→③梯度稀释→④将样品接种到鉴别纤维素分解菌的培养基上→⑤挑选菌落。
(1)纤维素分解菌选择培养的培养基中添加的碳源为 。
(2)图甲所示接种方法主要用于 ，该方法不能用于测定菌体的数目，其原因主要是许多菌落并不是由 形成的。
(3)图乙中的培养对应于流程图中步骤 （填写序号）。
(4)若选择培养后预估锥形瓶中细菌细胞数为2×107个/mL，若要在鉴别平板上涂布0.1ml稀释后的菌液，且使得每个平板上长出的菌落在200个左右，则至少应将锥形瓶中的菌液稀释 倍。在鉴别培养基中含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用是： 。
(5)流程图中步骤⑤的操作中，应挑选 的菌落。
28．某些种类癌细胞表面有高表达的银蛋白PSMA，CD28是T细胞表面受体，T细胞的有效激活依赖于两个条件：一是CD28接收激活信号，二是实现癌细胞与T细胞的聚集。图甲为科研人员尝试构建以PSMA×CD28为抗原的双特异性抗体；图乙为该双特异性抗体的结构及作用机理图，请据图分析：
(1)图甲分析可知，制备双特异性抗体PSMA×CD28的过程中，用到的动物细胞工程技术主要有 （答出2点）。在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加 等天然成分。同时为了维持培养液的pH，应该将细胞置于含有 的混合气体的CO2培养箱中培养。
(2)筛选得到杂交瘤A/B的过程实际是两次筛选。
①第一次筛选目的是得到杂交瘤细胞。核苷酸合成有两个途径，如图丙所示。其中，骨髓瘤细胞只能利用全合成途径进行无限增殖；B淋巴细胞两种途径都能进行。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选未融合细胞，或两两融合后的细胞时，其中 （选填细胞的简写名称“瘤细胞”“B细胞”“瘤瘤细胞”“BB细胞”“B瘤细胞”）会因无法进行图中两个途径而在HAT培养基上不能增殖。杂交瘤细胞在“HAT培养基”上可以通过 途径合成核酸。
②将第一次筛选获得的细胞进行多倍稀释，借助多孔细胞培养板，利用 原理进行第二次筛选，选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。
(3)该双特异性抗体协助杀伤癌细胞的机理是 。
29. 研究发现基因L能够通过脱落酸信号途径调控大豆的逆境响应。利用基因工程技术编辑基因L，可培育耐盐碱大豆品系。在载体上的限制酶BsaI切点处插入大豆基因L的向导DNA序列，将载体导入大豆细胞后，其转录产物可引导核酸酶特异性结合基因组上的目标序列并发挥作用。载体信息、目标基因L部分序列及相关结果等如图所示。
（1）用PCR技术从大豆基因组DNA中扩增目标基因L时，所用引物越短，引物特异性越______（填“高”或“低”）。限制酶在切开DNA双链时，形成的单链突出末端为黏性末端，若用BsaI酶切大豆基因组DNA，理论上可产生的黏性末端最多有______种。载体信息如图甲所示，经BsaI酶切后，载体上保留的黏性末端序列应为5'-______-3'和5'-______-3'。
（2）重组载体通过农杆菌导入大豆细胞，使用抗生素______筛选到具有该抗生素抗性的植株①∶④。为了鉴定基因编辑是否成功，以上述抗性植株的DNA为模板，通过PCR扩增目标基因L，部分序列信息及可选用的酶切位点如图乙所示，PCR产物完全酶切后的电泳结果如图丙所示。据图可判断选用的限制酶是______，其中纯合的突变植株是______（填序号）。
（3）实验中获得1株基因L成功突变的纯合植株，该植株具有抗生素抗性，检测发现其体细胞中只有1条染色体有T-DNA插入。用抗生素筛选这个植株的自交子代，其中突变位点纯合且对抗生素敏感的植株所占比例为______，筛选出的敏感植株可用于后续的品种选育。
答案第1页，共2页

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