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章末检测试卷(一)　(分值：100分)
一、选择题(本题包括20小题，每小题2.5分，共50分)
1．如表是微生物培养基的配方，下列相关叙述错误的是(　　)
成分 含量 成分 含量
NaNO3 3 g FeSO4 0.01 g
K2HPO4 1 g 葡萄糖 30 g
琼脂 15 g H2O 定容至1 000 mL
MgSO4·7H2O 0.5 g 抗生素 0.1万单位
A.依物理性质划分，该培养基属于固体培养基
B．由培养基的原料可知，所培养微生物是异养型，培养的微生物可以是酵母菌
C．本培养基中抗生素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求
D．若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去抗生素和NaNO3，并加入尿素
2．(2024·嘉兴高二期末)在生产、生活和科研实践中，避免杂菌的污染十分关键。下列关于无菌操作技术的叙述，正确的是(　　)
A．接种环在接种前需在酒精灯火焰上灼烧
B．塞入试管口、锥形瓶口的棉花需使用脱脂棉花
C．含尿素的培养基需500 g/cm2压力灭菌30分钟
D．接种环、涂布器等接种工具的灭菌方式只有灼烧灭菌
3．(2020·浙江7月选考，19)下列关于微生物培养及利用的叙述，错误的是(　　)
A．利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物，而保留利用尿素的微生物
B．配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pH
C．酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒
D．适宜浓度的酒精可使醋酸菌活化
4．(2023·金华高二检测)下列有关微生物筛选的叙述，不正确的是(　　)
A．用全营养LB培养基筛选大肠杆菌
B．用高NaCl的培养基筛选抗盐突变菌株
C．用含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株
D．利用高温条件筛选耐高温的细菌
5．酵母菌的培养与分离实验中，下列操作错误的是(　　)
A．斜面培养基制备完成后，剩余的培养基可用于制备固体培养基
B．制作棉塞需使用普通棉花以减少杂菌污染
C．使用接种环给液体培养基和斜面培养基接种
D．马铃薯蔗糖培养基不可用于培养酵母菌
6．巴氏杀菌乳是以生牛(羊)乳为原料，经巴氏杀菌等工序制得的液体产品，某兴趣小组进行了新鲜牛奶合适的消毒温度的探究。下列相关实验操作不合理的是(　　)
A．配制牛肉膏蛋白胨培养基并在121 ℃(1 kg/cm2压力)条件下处理15～20 min
B．将等量的新鲜牛奶分别置于60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃恒温水浴锅中处理15 min
C．对处理后的牛奶进行梯度稀释后，利用涂布法接种平板并在30～37 ℃下培养1～2 d
D．统计培养基上全部菌落数，以菌落数最少组的处理温度作为最适消毒温度
7．(2024·温州高二期中)刚果红能与纤维素形成红色复合物，但对纤维素水解后形成的纤维二糖和葡萄糖无作用。某同学利用刚果红配制选择培养基，分离土壤中能水解纤维素的微生物并统计菌落数。下列叙述正确的是(　　)
A．划线接种后统计平板上的菌落数，统计值比活菌实际数高
B．选择培养基中应以刚果红作为唯一碳源，并加入琼脂糖作凝固剂
C．培养基进行高压灭菌时，灭菌时间应从电源插上开始计时
D．可以把滤纸埋在土壤中，经过一段时间后，再从已腐烂的滤纸上筛选目的菌
8．(2023·金华高二质检)如图为实验室培养微生物的有关操作，下列相关叙述错误的是(　　)
A．步骤①中，需将接种工具灼烧至变红，以杀灭杂菌
B．步骤②中，将接种工具冷却时不宜距酒精灯火焰太远
C．图中接种方法的目的是使菌种逐渐稀释，经培养后获得单菌落
D．接种后应将培养皿倒置培养，培养后可以根据结果进行微生物计数
(2024·嘉兴高二期中)阅读下列材料，完成第9、10小题。
某学者利用“影印培养法”研究大肠杆菌抗链霉素性状产生的原因，先将原始菌种接种在1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和3号培养基上。待3号上长出菌落后，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再接种到5号培养基上，并重复以上步骤。实验过程如图所示。
9．下列关于实验操作的叙述，正确的是(　　)
A．大肠杆菌抗链霉素的产生是发生在与链霉素接触之后
B．1号和5号采用平板划线法将菌种接种在相应选择培养基上
C．要检测培养基是否灭菌彻底，可设置一个不接种菌液的平板在相同条件下培养作为对照
D．涂布操作前接种环要进行灼烧灭菌
10．下列相关叙述错误的是(　　)
A．大肠杆菌抗链霉素的性状是由基因突变引起的
B．7号培养基中观察到的菌落数一定等于初始时接种到该培养基上的菌体数
C．4号与8号培养液中，抗链霉素菌株的比例逐渐增大
D．在一定时间内，4号培养液中大肠杆菌的数量逐渐增多
11．如图为“能分解尿素的微生物的分离与计数”的实验过程，下列叙述错误的是(　　)
A．为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数
B．取不同稀释倍数的土壤稀释液各0.1 mL，分别涂布于LB固体培养基、尿素固体培养基上
C．将实验组和对照组37 ℃恒温培养24～48 h时，需将平板倒置
D．在尿素固体培养基上生长的细菌都是能分解尿素的细菌
12．如图是将酵母菌培养液稀释100倍后通过显微镜观察到的结果图像。下列相关叙述正确的是(　　)
A．制片时，先用吸管滴加样液再将盖玻片放在计数板上
B．利用血细胞计数板计数的方法属于显微镜计数法
C．需用吸水纸在盖玻片一侧吸引以加速酵母菌沉降到计数区底部
D．依据题图可估算出培养液中酵母菌密度约为6×107个·mL－1
13．幽门螺杆菌是急慢性胃炎和胃溃疡的主要致病菌，它能将尿素分解成氨气等物质。若从携带者胃黏膜样本中分离幽门螺杆菌，下列相关实验步骤和方法正确的是(　　)
A．配制培养基时应以尿素为唯一碳源
B．可利用酚红指示剂鉴定幽门螺杆菌的菌落
C．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌
D．样本可用蒸馏水稀释后涂布平板，统计样本中活菌数量
14．(2023·金华高二月考)如图简单示意葡萄酒的酿制过程，下列叙述错误的是(　　)
A．甲装置一天搅拌2～3次主要是为了释放产生的气体
B．白糖为甲装置中酵母菌提供能源物质
C．甲装置与乙装置中放出的气体主要是CO2
D．夏季，打开丙装置中的塞子，可能会有醋酸产生
15．在发酵技术中要避免杂菌污染，下列相关叙述错误的是(　　)
A．泡菜制作加食盐、白酒等调味品，可有助于防止杂菌污染
B．通过控制发酵温度，可在一定程度上抑制杂菌污染
C．与自然发酵相比，接种人工培养的菌种不易被杂菌污染
D．制成的果醋和泡菜需经高压蒸汽灭菌来避免杂菌污染
16．下列对发酵产品的分离、提纯和加工的说法，错误的是(　　)
A．为了获得大量酵母菌，可采用离心等方法
B．酿制白酒时，常用蒸馏的方法提取发酵产品
C．吸附发酵需要用到吸附剂
D．发酵过程中的环境条件只影响微生物的生长繁殖，不影响微生物代谢产物的形成
(2024·宁波高二期中)阅读下列材料，完成第17、18小题。
仙居杨梅除可以直接食用外，还可用于酿酒。智慧的劳动人民利用发酵工程技术(发酵罐如图)，大规模生产杨梅酒，使仙居杨梅的价值大增。发酵型杨梅酒的工艺流程依次包括挑选杨梅、清洗、打浆、糖酸调整、加入酵母菌、倒罐、发酵、除酸、过滤、澄清、杀菌、陈酿、成品等。
17．下列关于杨梅酒发酵的叙述，正确的是(　　)
A．图中②为杨梅酒出口，通过检测流出发酵液糖的浓度，决定何时终止发酵
B．图中③为叶轮，可以加快酵母菌的繁殖
C．采用真空发酵技术不能提高果酒发酵速率
D．夏季高温会促进发酵菌种的繁殖，大量获得发酵产物
18．某同学采用塑料瓶等自制简易杨梅醋发酵装置，下列叙述错误的是(　　)
A．可以采用杨梅酒为原料
B．保持通气，在发酵液表面会形成菌膜
C．发酵过程中，醋酸菌的生长繁殖和代谢产物的形成都与pH有关
D．吸取发酵液，在显微镜下观察可看到菌落
19．(2024·浙江七彩阳光联盟高二期中)发酵工程是重要的生物工程技术，可以为人类提供多样的生物产品。下列关于发酵工程的叙述，错误的是(　　)
A．可利用诱变育种或转基因技术改良菌种
B．菌种活化后须经扩大培养再接种进行发酵
C．发酵不同阶段所需控制的条件不同
D．发酵产品均可通过过滤、沉淀获得
20.(2021·山东，20)含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污水发臭。硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是否产生硫化氢及两种菌的运动能力，用穿刺接种的方法，分别将两种菌接种在含有硫酸亚铁铵的培养基上进行培养，如图所示。若两种菌繁殖速度相等，下列说法错误的是(　　)
A．乙菌的运动能力比甲菌强
B．为不影响菌的运动需选用液体培养基
C．该实验不能比较出两种菌产生硫化氢的量
D．穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌的污染
二、非选择题(本题包括5小题，共50分)
21．(每空1分，共9分)(2024·杭州高二期末)如表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题：
成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示剂 琼脂
含量/g 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL
(1)若根据用途划分，该培养基属于________(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分中应将蛋白胨改成________，并用__________作为指示剂。
(2)在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行__________；操作者的双手需要进行清洗和__________。
(3)图1和图2是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是____________和________________，这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的__________。图____所用的接种方法可用来对活菌进行计数。
22．(每空1分，共8分)(2024·嘉兴高二期末)酱油制作在我国具有悠久的历史，其中“海盐沈荡酱油酿造技艺”被列入嘉兴市非物质文化遗产名录。制作酱油的菌种主要有米曲霉、酵母菌、乳酸菌，基本流程如图。回答下列问题：
(1)米曲霉发酵过程中，加入的黄豆和面粉可以为米曲霉提供营养物质，黄豆中为米曲霉生长提供氮源的主要物质是______________。从培养基的成分看，属于______________培养基。米曲霉的代谢类型是__________________。
(2)抑制杂菌污染是保证酱油质量的重要因素。在“晒制发酵”过程中，________________(至少答出2种)等物质可以抑制杂菌生长。
(3)菌种是影响酱油风味的关键因素，米曲霉能分泌蛋白酶、淀粉酶等多种酶类，产生风味独特的成分。若平板培养基以淀粉为唯一碳源，接种菌液并培养，平板上长出菌落后加入显色剂，则可筛选出产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是______________，该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是___________________________________________________________。根据__________________________的大小，可粗略估计出菌株是否产淀粉酶及其产酶能力。若要保存优质菌种，可挑取单菌落，使用________法接种到斜面培养基上。
23．(每空1分，共10分)啤酒是一种含多种氨基酸、低分子糖等物质的低酒精浓度饮料。回答下列问题：
(1)啤酒酿造过程中起主要作用的微生物是____________，下列生物中与该微生物在结构上存在明显区别的是________(多选)。
A．噬菌体 B．青霉菌
C．乳酸菌 D．农杆菌
(2)从物理特征看，工业酿酒的培养基属于________培养基。啤酒酿造以刚萌发的大麦种子(麦芽)为原料，从培养基成分来看，麦芽为微生物生长提供了____________________。
(3)啤酒花是桑科葎草属植物，其雌花序和果穗可用于啤酒酿造，赋予啤酒独特的香味和苦味等。将适量啤酒花加入过滤后的麦芽汁中，煮沸1小时，目的不仅是使啤酒花中的物质溶出，且能够________________。啤酒花还具有抑菌作用，为研究啤酒花的抑菌作用，在LB固体培养基中添加不同浓度的啤酒花提取液，经灭菌后制成________，采用________________法接种大肠杆菌后置于恒温箱中培养24小时，观察并比较菌落数量及生长情况。
(4)发酵过程中发酵罐内的泡沫先逐渐增多后减少，泡沫减少的主要原因是______________。经测定发酵消耗的糖中，98.5%形成了酒精和其他发酵产物，其余则用于_____________。
(5)啤酒的不同风味由多种因素造成，请列举两种因素：______________________________。
24．(每空1分，共10分)(2024·浙江精诚联盟高二月考)科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜(甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖)为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图所示。回答下列问题：
(1)发酵工程一般包括菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、__________、接种、发酵、产品的__________________等方面。
(2)三位同学用稀释涂布平板法测定某一时间段内嗜盐单胞菌H的数量，他们的操作及统计结果如下：甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是209、240和250，取平均值233。在三位同学的统计中，______同学的统计是正确的。该方法要经过较长时间的培养，待____________________后进行统计。该方法统计出的结果往往偏低，原因是____________________________________________________。
(3)为获得对蔗糖的耐受能力和利用效率高的菌株H，可将蔗糖作为液体培养基的__________，并不断提高其浓度，多代培养选择。从功能上看，所用培养基为______________。
(4)基于菌株H嗜盐、对酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60 g/L、pH为10，菌株H可正常持续发酵60 d以上。该系统不需要灭菌，分析原因：一是培养基的盐浓度设为60 g/L，其他杂菌因____________而死亡；二是pH为10的条件下，其他杂菌的______变性失活，生长繁殖受抑制。
(5)研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵，结果发现发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵过程中，____________可能是高密度培养的限制因素。
25．(13分)随着抗生素临床使用及不合理使用的增加，细菌耐药性增加，抗生素的疗效下降。蛋白质的分泌对于细菌的毒性和生长必不可少，寻找新型抗生素抑制细菌蛋白质的分泌对于治疗细菌性疾病有重要的意义。现有一种新型抗生素(抗生素R)，为探究其作用效果，根据以下材料用具，写出实验思路，并分析实验结果。
实验材料：若干个培养瓶、培养液、无毒细菌M稀释液、新型抗生素R溶液。(要求与说明：细菌数目和蛋白质的含量可用仪器测定，试剂、仪器、用具及操作不作要求；实验条件适宜。)
(1)实验思路：
①取若干培养瓶编号为甲、乙，每个培养瓶中加入等量的_______________________________；
②_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________；
③甲组培养瓶中加入适量抗生素R溶液，乙组培养瓶加入________________________；
④在适宜条件下培养，每隔一段时间测定细胞数和分泌蛋白含量；
⑤对所得实验数据进行________________。
(2)若抗生素R有疗效，预测实验结果(请设计一个坐标系，并绘制预测单位数量的细菌分泌蛋白含量的变化曲线)。
(3)(3分)实验所用的培养瓶在使用前进行____________处理，以防杂菌污染。细菌耐药性的性状是由______________而产生的，抗生素的使用导致耐药性增强是______(填“人工”或“自然”)选择的结果。
答案精析
1．C　[从培养基成分看，配方中含有琼脂，属于固体培养基，A正确；从培养基成分看，配方中的葡萄糖属于有机碳源，因此所培养微生物的同化作用类型是异养型，抗生素能够抑制细菌的生长，因此培养的微生物可以是酵母菌，B正确，C错误。]
2．A　[塞入试管口、锥形瓶口的棉塞制作需使用普通棉花，因为脱脂棉吸水后容易引起污染，B错误；高温会使尿素分解，含有尿素的培养基不能加热灭菌，通常使用已灭菌的G6玻璃砂漏斗对其进行过滤除菌，C错误；接种环、涂布器等接种工具的灭菌方式还有高压灭菌、干热灭菌，D错误。]
3．A　[以尿素为唯一氮源的固体培养基是选择培养基，让能利用尿素的微生物生长，其他微生物不能生长，但不能迅速杀死其他微生物，A错误；不同微生物生长的适宜pH不同，B正确；酿酒时酵母菌直接利用的物质是葡萄糖，因此酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒，C正确；醋酸发酵时，适宜浓度的酒精可使醋酸菌活化，较高浓度的酒精会抑制醋酸菌的活化，D正确。]
4．A　[大多数微生物在全营养的LB培养基上都可以生长，所以不能用全营养LB培养基筛选大肠杆菌，A错误；在高NaCl的培养基中生活的微生物能抗盐，因此可实现筛选抗盐突变菌株的目的，B正确；分解尿素的菌株可将培养基中的尿素分解为氨，使培养基的pH升高，使酚红变红，C正确。]
5．D　[斜面培养基中含有凝固剂，可用于制备固体培养基，A 正确；脱脂棉吸水后容易引起污染，所以制作棉塞时应该使用普通棉花，B正确；给液体培养基接种、用划线法给平板和斜面培养基接种都要用到接种环，C正确；马铃薯蔗糖培养基含有酵母菌所需要的营养物质，适用于培养酵母菌，D错误。]
6．D　[配制的牛肉膏蛋白胨培养基需使用高压蒸汽灭菌法灭菌，即在121 ℃(1 kg/cm2压力)条件下处理15～20 min，将培养基彻底灭菌，以避免培养基上的微生物影响实验结果，A正确；新鲜牛奶应使用巴氏消毒法消毒，为了探究新鲜牛奶合适的消毒温度，可将等量的新鲜牛奶分别置于60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃恒温水浴锅中处理15 min，并检测不同温度处理下的牛奶中微生物的数量并进行比较，B正确；若要统计消毒后的牛奶中微生物的数量，可用稀释涂布平板法，所以可对处理后的牛奶进行梯度稀释后，利用涂布法接种平板并在30～37 ℃下培养1～2 d，C正确；由于温度过高会影响蛋白质的结构，进而破坏牛奶中的营养成分，所以菌落数最少的组对应的温度不一定是最适的消毒温度，D错误。]
7．D　[划线接种不能用于菌落的计数，A错误；刚果红相当于指示剂，要用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，B错误；培养基进行高压灭菌时，灭菌时间应从达到设定的温度或压力值后开始计时，C错误；滤纸的主要成分是纤维素，可以通过题述操作获得能够分解纤维素的微生物，D正确。]
8．D　[图中所示的接种方法是平板划线法，目的是使接种的菌种逐渐稀释，经培养后获得由单个细胞繁殖而来的菌落，C正确；图示的平板划线法不能用于微生物的计数，D错误。]
9．C　[大肠杆菌抗链霉素的性状是由基因突变引起的，该突变发生在与链霉素接触之前，A错误；由题图可知，1号和5号采用稀释涂布平板法将菌种接种在相应选择培养基上，B错误；若要检测培养基是否灭菌彻底，最有效的方法是将未接种的培养基作为对照组放在相同条件下培养，若出现菌落，则说明培养基没有灭菌彻底，C正确；进行稀释涂布操作时，将需要用到的涂布器进行灼烧灭菌，D错误。]
10．B　[当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故7号培养基中观察到的菌落数可能少于初始时接种到该培养基上的菌体数，B错误；3号与2号、7号与6号培养基中的菌落数的比值是抗性菌落占全部菌落的比例，由此可推测4号与8号培养液中，抗链霉素菌株的比例逐渐增大，C正确；在接种大肠杆菌后，因4号培养液中的营养充足、条件适宜，故在一定时间内大肠杆菌的数量会随着自身的分裂增殖而逐渐增多，D正确。]
11．D　[在尿素固体培养基上生长的细菌大多数是能分解尿素、以尿素为氮源的细菌，还有一些是能利用空气中的氮的微生物等，D错误。]
12．B　[制片时，应先将专用的盖玻片盖在计数板上，再用吸管滴加样液，A错误；显微镜计数法是测定细菌数量的常用方法，利用血细胞计数板计数的方法属于显微镜计数法，B正确；将盖玻片放在计数板上，用滴管在盖玻片边缘滴加菌液后，让菌液自行渗入，多余的菌液再用滤纸吸去，C错误；此血细胞计数板的计数区是25×16型，即大方格内分为25中方格，每一中方格又分为16小方格，计数区的规格为1 mm×1 mm×0.1 mm，图中每个中方格的平均酵母菌数为24，酵母菌培养液稀释100倍，则1 mL培养液中酵母菌数约为24×25×100÷0.1×1 000＝6×108(个)，D错误。]
13．B　[选择培养基时应以尿素为唯一氮源，A错误；在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素，为幽门螺杆菌的菌落，B正确；尿素溶液不能用高压蒸汽灭菌法灭菌，C错误；稀释涂布平板法的样本需要用无菌水进行稀释，D错误。]
14．A　[甲装置一天搅拌2～3次主要是为了增加溶氧量，让酵母菌进行需氧呼吸从而大量繁殖，添加白糖主要是为酵母菌提供能源物质，A错误，B正确；甲装置中酵母菌主要进行需氧呼吸，乙装置中酵母菌进行厌氧呼吸，两个装置中放出的气体主要是CO2，C正确；夏季，打开丙装置中的塞子，空气中的醋酸菌可能进入容器中，在有氧、高温条件下，醋酸菌将乙醇氧化为醋酸，D正确。]
15．D　[泡菜制作时加入食盐可以抑制杂菌生长，同时还要加入少量白酒，使泡菜更加脆爽、清香的同时也能起到抑制杂菌生长的作用，A正确；不同微生物发酵的适宜温度不同，因此通过控制发酵温度，可在一定程度上抑制杂菌的生长繁殖，B正确；与自然发酵相比，人工接种过程中采取了严格的灭菌措施，可以防止其他杂菌污染，且发酵获得的产品品质更好，C正确；制成的果醋和泡菜不需要经高压蒸汽灭菌，否则会破坏其风味，D错误。]
16．D　[生物代谢产物是经化学反应生成的，生物体内的化学反应几乎都需要酶的催化，与温度、pH、氧气等环境条件都有关系，D错误。]
17．B　[图中①为冷却水的进口，②为冷却水的出口，不能通过②检测流出发酵液糖的浓度，A错误；图中③为叶轮，叶轮的搅拌不仅能使气泡与发酵液混合，而且使微生物细胞与发酵液中的营养物质接触，可以加快酵母菌的繁殖，B正确；在无氧条件下，酵母菌能进行厌氧发酵，因此，采用真空发酵技术能提高果酒发酵速率，C错误；酵母菌生长繁殖的适宜温度范围是18～30 ℃，夏季高温不能促进发酵菌种的繁殖，D错误。]
18．D　[醋酸菌在有氧条件下可将乙醇氧化为醋酸，因此可以采用杨梅酒为原料制作杨梅醋，A正确；菌落是在适宜固体培养基表面或内部形成的一团肉眼可见的、有一定形态构造的子细胞集团，吸取发酵液，在显微镜下不能看到菌落，可直接看到微生物，D错误。]
19．D　[可以从自然界中筛选优良菌种，也可以通过人工诱变或基因工程选育新菌株用于发酵，A正确；确定菌种后，还要将菌种进行多次扩大培养，以培养出足够多的菌种，再进行接种，这样可以缩短菌种在发酵罐中发酵的时间，B正确；根据菌种不同、发酵时间不同，发酵过程中需要控制的条件不同，C正确；如果发酵的产品是菌体本身(如酵母菌)，可采用过滤、沉淀等方法从培养液中分离出来，但如果发酵产品是微生物的代谢产物，则可采用真空发酵、吸附发酵、萃取发酵等方法进行提取，D错误。]
20．B　[从图中可以看出，甲菌在试管中分布范围小于乙菌，说明乙菌的运动能力比甲菌强，A正确；为了不影响菌的运动需选用半固体培养基，B错误；该实验可以根据黑色沉淀的多少初步比较细菌产生硫化氢的能力，但不能测定产生硫化氢的量，C正确；微生物接种技术的核心是防止杂菌的污染，D正确。]
21．(1)鉴别　尿素　酚红　(2)灭菌　消毒　(3)稀释涂布平板法　平板划线法　单菌落　1
解析　(1)分析表格可知，该培养基具备碳源、氮源、无机盐等营养成分，并且该培养基加入了指示剂，因此属于鉴别培养基。筛选尿素分解菌需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，该配方中的蛋白胨需要改成尿素；由于尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解为氨，使培养基pH升高，故培养基中加酚红指示剂。(2)微生物培养过程中，应注意无菌操作，需要对培养基和培养皿进行灭菌，操作者的双手需要进行清洗和消毒。
22．(1)蛋白质　天然　异养需氧型　(2)食盐、乳酸、乙醇　(3)碘－碘化钾溶液　淀粉遇碘－碘化钾溶液显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈　透明圈与菌落直径比值　平板划线
解析　(1)黄豆中含有丰富的蛋白质，黄豆中的蛋白质含有N，可为米曲霉的生长提供氮源；从培养基成分来看，该培养基属于天然培养基；米曲霉发酵过程需要提供营养物质、晒制发酵，说明米曲霉的生长需要消耗有机物质和氧气，可知其代谢类型是异养需氧型。(2)由题目可知，在发酵池中酵母菌产生的乙醇能抑制杂菌的生长，乳酸菌产生的乳酸使发酵液呈酸性，也能抑制杂菌的生长，同时往发酵池中添加的食盐也能抑制杂菌的生长，故该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是乙醇、乳酸和食盐等。(3)筛选出产淀粉酶的微生物可加入碘－碘化钾溶液作显色剂，因为淀粉遇碘－碘化钾溶液变蓝，产生淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，不显蓝色，会形成透明圈；根据透明圈与菌落直径比值的大小，可粗略估计出菌株是否产淀粉酶及其产酶能力；若要保存优质菌种，可挑取单菌落，使用平板划线法接种到斜面培养基上。
23．(1)酵母菌　ACD　(2)液体　碳源、氮源(水、无机盐、生长因子)　(3)杀灭杂菌　平板　稀释涂布平板　(4)酵母菌细胞呼吸产生二氧化碳减少　酵母菌自身生长和繁殖
(5)不同的菌种、不同菌株、不同环境条件、不同原料、不同微生物的相互作用
24．(1)灭菌　分离、提纯　(2)丙　菌落数稳定　当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的往往只是一个菌落
(3)唯一碳源　选择培养基　(4)失水过多　酶　(5)氧气(或溶解氧)
解析　(2)为了保证计数结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板计数，应至少对同一稀释度下3个平板进行计数，并求平均值，增强实验的说服力与准确性。在三位同学的统计中，甲同学只涂布了两个平板，偶然性太大，乙同学计数的三个平板上，其中一个菌落数过少，且与其余两个误差较大，丙同学选择菌落数在30～300的平板计数，故只有丙同学的统计是正确的。该方法要经过较长时间的培养，待菌落数稳定(保证所有菌株都发育为菌落)后进行统计。(3)根据题意分析，该实验的目的是提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，结合微生物的代谢需求，其液体培养基应该以蔗糖作为唯一碳源，并不断提高其浓度，经多次传代培养可筛选出目标菌株，从功能上看，能进行筛选的培养基是选择培养基。(5)分析题意，扩大培养时，在适宜的营养物浓度、温度、pH等条件下，发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵过程中氧气不足，使菌种进行厌氧呼吸产生乙醇，即氧气(或溶解氧)是限制高密度培养的重要因素。
25．(1)①培养液和无毒细菌M稀释液　②取其中的培养瓶，分别测定细胞数和分泌蛋白含量　③等量的培养液　⑤统计分析　(2)如图所示
(3)灭菌　基因突变　自然(共77张PPT)
章末检测试卷(一)
第一章 发酵工程
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A.依物理性质划分，该培养基属于固体培养基
B.由培养基的原料可知，所培养微生物是异养型，培养的微生物可以是酵母菌
C.本培养基中抗生素的添加满足了微生物生长对特殊营养物质的要求
D.若用该培养基分离能分解尿素的细菌，应除去抗生素和NaNO3，并加入尿素
1.如表是微生物培养基的配方，下列相关叙述错误的是
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选择题
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成分 含量 成分 含量
NaNO3 3 g FeSO4 0.01 g
K2HPO4 1 g 葡萄糖 30 g
琼脂 15 g H2O 定容至1 000 mL
MgSO4·7H2O 0.5 g 抗生素 0.1万单位
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从培养基成分看，配方中含有琼脂，属于固体培养基，A正确；
从培养基成分看，配方中的葡萄糖属于有机碳源，因此所培养微生物的同化作用类型是异养型，抗生素能够抑制细菌的生长，因此培养的微生物可以是酵母菌，B正确，C错误。
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2.(2024·嘉兴高二期末)在生产、生活和科研实践中，避免杂菌的污染十分关键。下列关于无菌操作技术的叙述，正确的是
A.接种环在接种前需在酒精灯火焰上灼烧
B.塞入试管口、锥形瓶口的棉花需使用脱脂棉花
C.含尿素的培养基需500 g/cm2压力灭菌30分钟
D.接种环、涂布器等接种工具的灭菌方式只有灼烧灭菌
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塞入试管口、锥形瓶口的棉塞制作需使用普通棉花，因为脱脂棉吸水后容易引起污染，B错误；
高温会使尿素分解，含有尿素的培养基不能加热灭菌，通常使用已灭菌的G6玻璃砂漏斗对其进行过滤除菌，C错误；
接种环、涂布器等接种工具的灭菌方式还有高压灭菌、干热灭菌，D错误。
选择题
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3.(2020·浙江7月选考，19)下列关于微生物培养及利用的叙述，错误的是
A.利用尿素固体培养基可迅速杀死其他微生物，而保留利用尿素的微生物
B.配制培养基时应根据微生物的种类调整培养基的pH
C.酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒
D.适宜浓度的酒精可使醋酸菌活化
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以尿素为唯一氮源的固体培养基是选择培养基，让能利用尿素的微生物生长，其他微生物不能生长，但不能迅速杀死其他微生物，A错误；
不同微生物生长的适宜pH不同，B正确；
酿酒时酵母菌直接利用的物质是葡萄糖，因此酵母菌不能直接利用糯米淀粉发酵得到糯米酒，C正确；
醋酸发酵时，适宜浓度的酒精可使醋酸菌活化，较高浓度的酒精会抑制醋酸菌的活化，D正确。
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4.(2023·金华高二检测)下列有关微生物筛选的叙述，不正确的是
A.用全营养LB培养基筛选大肠杆菌
B.用高NaCl的培养基筛选抗盐突变菌株
C.用含酚红的尿素培养基筛选鉴别出分解尿素的菌株
D.利用高温条件筛选耐高温的细菌
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大多数微生物在全营养的LB培养基上都可以生长，所以不能用全营养LB培养基筛选大肠杆菌，A错误；
在高NaCl的培养基中生活的微生物能抗盐，因此可实现筛选抗盐突变菌株的目的，B正确；
分解尿素的菌株可将培养基中的尿素分解为氨，使培养基的pH升高，使酚红变红，C正确。
选择题
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5.酵母菌的培养与分离实验中，下列操作错误的是
A.斜面培养基制备完成后，剩余的培养基可用于制备固体培养基
B.制作棉塞需使用普通棉花以减少杂菌污染
C.使用接种环给液体培养基和斜面培养基接种
D.马铃薯蔗糖培养基不可用于培养酵母菌
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斜面培养基中含有凝固剂，可用于制备固体培养基，A 正确；
脱脂棉吸水后容易引起污染，所以制作棉塞时应该使用普通棉花，B正确；
给液体培养基接种、用划线法给平板和斜面培养基接种都要用到接种环，C正确；
马铃薯蔗糖培养基含有酵母菌所需要的营养物质，适用于培养酵母菌，D错误。
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6.巴氏杀菌乳是以生牛(羊)乳为原料，经巴氏杀菌等工序制得的液体产品，某兴趣小组进行了新鲜牛奶合适的消毒温度的探究。下列相关实验操作不合理的是
A.配制牛肉膏蛋白胨培养基并在121 ℃(1 kg/cm2压力)条件下处理15～20 min
B.将等量的新鲜牛奶分别置于60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃恒温水浴锅中处理15 min
C.对处理后的牛奶进行梯度稀释后，利用涂布法接种平板并在30～37 ℃下培养
　1～2 d
D.统计培养基上全部菌落数，以菌落数最少组的处理温度作为最适消毒温度
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配制的牛肉膏蛋白胨培养基需使用高压蒸汽灭菌法灭菌，即在121 ℃
(1 kg/cm2压力)条件下处理15～20 min，将培养基彻底灭菌，以避免培养基上的微生物影响实验结果，A正确；
新鲜牛奶应使用巴氏消毒法消毒，为了探究新鲜牛奶合适的消毒温度，可将等量的新鲜牛奶分别置于60 ℃、70 ℃、80 ℃、90 ℃恒温水浴锅中处理15 min，并检测不同温度处理下的牛奶中微生物的数量并进行比较，B正确；
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若要统计消毒后的牛奶中微生物的数量，可用稀释涂布平板法，所以可对处理后的牛奶进行梯度稀释后，利用涂布法接种平板并在30～37 ℃下培养1～2 d，C正确；
由于温度过高会影响蛋白质的结构，进而破坏牛奶中的营养成分，所以菌落数最少的组对应的温度不一定是最适的消毒温度，D错误。
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7.(2024·温州高二期中)刚果红能与纤维素形成红色复合物，但对纤维素水解后形成的纤维二糖和葡萄糖无作用。某同学利用刚果红配制选择培养基，分离土壤中能水解纤维素的微生物并统计菌落数。下列叙述正确的是
A.划线接种后统计平板上的菌落数，统计值比活菌实际数高
B.选择培养基中应以刚果红作为唯一碳源，并加入琼脂糖作凝固剂
C.培养基进行高压灭菌时，灭菌时间应从电源插上开始计时
D.可以把滤纸埋在土壤中，经过一段时间后，再从已腐烂的滤纸上筛选目的菌
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划线接种不能用于菌落的计数，A错误；
刚果红相当于指示剂，要用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，B错误；
培养基进行高压灭菌时，灭菌时间应从达到设定的温度或压力值后开始计时，C错误；
滤纸的主要成分是纤维素，可以通过题述操作获得能够分解纤维素的微生物，D正确。
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8.(2023·金华高二质检)如图为实验室培养微生物的有关操作，下列相关叙述错误的是
A.步骤①中，需将接种工具灼烧至
　变红，以杀灭杂菌
B.步骤②中，将接种工具冷却时不
　宜距酒精灯火焰太远
C.图中接种方法的目的是使菌种逐渐稀释，经培养后获得单菌落
D.接种后应将培养皿倒置培养，培养后可以根据结果进行微生物计数
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图中所示的接种方法是平板划线法，目的是使接种的菌种逐渐稀释，经培养后获得由单个细胞繁殖而来的菌落，C正确；
图示的平板划线法不能用于微生物的计数，D错误。
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(2024·嘉兴高二期中)阅读下列材料，完成第9、10小题。
某学者利用“影印培养法”研究大肠杆菌抗链霉素性状产生的原因，先将原始菌种接种在1号培养基上，培养出菌落后，将灭菌绒布在1号上印模，绒布沾上菌落并进行转印，使绒布上的菌落按照原位接种到2号和
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3号培养基上。待3号上长出菌落后，在2号上找到对应的菌落，然后接种到不含链霉素的4号培养液中，培养后再接种到5号培养基上，并重复以上步骤。实验过程如图所示。
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选择题
9.下列关于实验操作的叙述，正确的是
A.大肠杆菌抗链霉素的产生是发生在与链霉
　素接触之后
B.1号和5号采用平板划线法将菌种接种在相
　应选择培养基上
C.要检测培养基是否灭菌彻底，可设置一个不接种菌液的平板在相同条
　件下培养作为对照
D.涂布操作前接种环要进行灼烧灭菌
√
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大肠杆菌抗链霉素的性状是由基因突变引起的，该突变发生在与链霉素接触之前，A错误；
由题图可知，1号和5号采用稀释涂布平板法将菌种接种在相应选择培养基上，B错误；
若要检测培养基是否灭菌彻底，最有效的方法
是将未接种的培养基作为对照组放在相同条件下培养，若出现菌落，则说明培养基没有灭菌彻底，C正确；
进行稀释涂布操作时，将需要用到的涂布器进行灼烧灭菌，D错误。
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10.下列相关叙述错误的是
A.大肠杆菌抗链霉素的性状是由基因突变
　引起的
B.7号培养基中观察到的菌落数一定等于初
　始时接种到该培养基上的菌体数
C.4号与8号培养液中，抗链霉素菌株的比例逐渐增大
D.在一定时间内，4号培养液中大肠杆菌的数量逐渐增多
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当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故7号培养基中观察到的菌落数可能少于初始时接种到该培养基上的菌体数，B错误；
3号与2号、7号与6号培养基中的菌落数的比值
是抗性菌落占全部菌落的比例，由此可推测4号与8号培养液中，抗链霉素菌株的比例逐渐增大，C正确；
在接种大肠杆菌后，因4号培养液中的营养充足、条件适宜，故在一定时间内大肠杆菌的数量会随着自身的分裂增殖而逐渐增多，D正确。
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11.如图为“能分解尿素的微生物的分离与计数”的实验过程，下列叙述错误的是
A.为了保证结果准确，一般选择菌
　落数在30～300的平板进行计数
B.取不同稀释倍数的土壤稀释液各
　0.1 mL，分别涂布于LB固体培养基、尿素固体培养基上
C.将实验组和对照组37 ℃恒温培养24～48 h时，需将平板倒置
D.在尿素固体培养基上生长的细菌都是能分解尿素的细菌
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在尿素固体培养基上生长的细菌大多数是能分解尿素、以尿素为氮源的细菌，还有一些是能利用空气中的氮的微生物等，D错误。
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12.如图是将酵母菌培养液稀释100倍后通过显微镜观察到的结果图像。下列相关叙述正确的是
A.制片时，先用吸管滴加样液再将盖玻片
　放在计数板上
B.利用血细胞计数板计数的方法属于显微
　镜计数法
C.需用吸水纸在盖玻片一侧吸引以加速酵母菌沉降到计数区底部
D.依据题图可估算出培养液中酵母菌密度约为6×107个·mL－1
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制片时，应先将专用的盖玻片盖在计数板
上，再用吸管滴加样液，A错误；
显微镜计数法是测定细菌数量的常用方法，
利用血细胞计数板计数的方法属于显微镜计数法，B正确；
将盖玻片放在计数板上，用滴管在盖玻片边缘滴加菌液后，让菌液自行渗入，多余的菌液再用滤纸吸去，C错误；
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此血细胞计数板的计数区是25×16型，
即大方格内分为25中方格，每一中方格
又分为16小方格，计数区的规格为1 mm
×1 mm×0.1 mm，图中每个中方格的平均酵母菌数为24，酵母菌培养液稀释100倍，则1 mL培养液中酵母菌数约为24×25×100÷0.1×
1 000＝6×108(个)，D错误。
选择题
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13.幽门螺杆菌是急慢性胃炎和胃溃疡的主要致病菌，它能将尿素分解成氨气等物质。若从携带者胃黏膜样本中分离幽门螺杆菌，下列相关实验步骤和方法正确的是
A.配制培养基时应以尿素为唯一碳源
B.可利用酚红指示剂鉴定幽门螺杆菌的菌落
C.培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌
D.样本可用蒸馏水稀释后涂布平板，统计样本中活菌数量
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选择培养基时应以尿素为唯一氮源，A错误；
在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素，为幽门螺杆菌的菌落，B正确；
尿素溶液不能用高压蒸汽灭菌法灭菌，C错误；
稀释涂布平板法的样本需要用无菌水进行稀释，D错误。
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14.(2023·金华高二月考)如图简单示意葡萄酒的酿制过程，下列叙述错误的是
A.甲装置一天搅拌2～3次主要是为
　了释放产生的气体
B.白糖为甲装置中酵母菌提供能
　源物质
C.甲装置与乙装置中放出的气体主要是CO2
D.夏季，打开丙装置中的塞子，可能会有醋酸产生
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甲装置一天搅拌2～3次主要是为了增加溶氧量，让酵母菌进行需氧呼吸从而大量繁殖，添加白糖主要是为酵母菌提供能源物质，A错误，B正确；
甲装置中酵母菌主要进行需氧呼吸，乙装置中酵母菌进行厌氧呼吸，两个装置中放出的气体主要是CO2，C正确；
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夏季，打开丙装置中的塞子，空气中的醋酸菌可能进入容器中，在有氧、高温条件下，醋酸菌将乙醇氧化为醋酸，D正确。
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选择题
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15.在发酵技术中要避免杂菌污染，下列相关叙述错误的是
A.泡菜制作加食盐、白酒等调味品，可有助于防止杂菌污染
B.通过控制发酵温度，可在一定程度上抑制杂菌污染
C.与自然发酵相比，接种人工培养的菌种不易被杂菌污染
D.制成的果醋和泡菜需经高压蒸汽灭菌来避免杂菌污染
√
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选择题
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泡菜制作时加入食盐可以抑制杂菌生长，同时还要加入少量白酒，使泡菜更加脆爽、清香的同时也能起到抑制杂菌生长的作用，A正确；
不同微生物发酵的适宜温度不同，因此通过控制发酵温度，可在一定程度上抑制杂菌的生长繁殖，B正确；
与自然发酵相比，人工接种过程中采取了严格的灭菌措施，可以防止其他杂菌污染，且发酵获得的产品品质更好，C正确；
制成的果醋和泡菜不需要经高压蒸汽灭菌，否则会破坏其风味，D错误。
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选择题
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16.下列对发酵产品的分离、提纯和加工的说法，错误的是
A.为了获得大量酵母菌，可采用离心等方法
B.酿制白酒时，常用蒸馏的方法提取发酵产品
C.吸附发酵需要用到吸附剂
D.发酵过程中的环境条件只影响微生物的生长繁殖，不影响微生物代谢
　产物的形成
√
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选择题
生物代谢产物是经化学反应生成的，生物体内的化学反应几乎都需要酶的催化，与温度、pH、氧气等环境条件都有关系，D错误。
24
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(2024·宁波高二期中)阅读下列材料，完成第17、18小题。
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选择题
仙居杨梅除可以直接食用外，还可用于酿酒。智慧的劳动人民利用发酵工程技术(发酵罐如图)，大规模生产杨梅酒，使仙居杨梅的价值大增。发酵型杨梅酒的工艺流程依次包括挑选杨梅、清洗、打浆、糖酸调整、加入酵母菌、倒罐、发酵、除酸、过滤、澄清、杀菌、陈酿、成品等。
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选择题
17.下列关于杨梅酒发酵的叙述，正确的是
A.图中②为杨梅酒出口，通过检测流出发酵液
　糖的浓度，决定何时终止发酵
B.图中③为叶轮，可以加快酵母菌的繁殖
C.采用真空发酵技术不能提高果酒发酵速率
D.夏季高温会促进发酵菌种的繁殖，大量获得
　发酵产物
√
24
25
图中①为冷却水的进口，②为冷却水的出口，不能通过②检测流出发酵液糖的浓度，A错误；
图中③为叶轮，叶轮的搅拌不仅能使气泡与发酵液混合，而且使微生物细胞与发酵液中的营养物质接触，可以加快酵母菌的繁殖，B正确；
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选择题
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在无氧条件下，酵母菌能进行厌氧发酵，因此，采用真空发酵技术能提高果酒发酵速率，C错误；
酵母菌生长繁殖的适宜温度范围是18～30 ℃，夏季高温不能促进发酵菌种的繁殖，D错误。
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选择题
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18.某同学采用塑料瓶等自制简易杨梅醋发酵装置，下列叙述错误的是
A.可以采用杨梅酒为原料
B.保持通气，在发酵液表面会形成菌膜
C.发酵过程中，醋酸菌的生长繁殖和代谢产物的形成都与pH有关
D.吸取发酵液，在显微镜下观察可看到菌落
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选择题
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醋酸菌在有氧条件下可将乙醇氧化为醋酸，因此可以采用杨梅酒为原料制作杨梅醋，A正确；
菌落是在适宜固体培养基表面或内部形成的一团肉眼可见的、有一定形态构造的子细胞集团，吸取发酵液，在显微镜下不能看到菌落，可直接看到微生物，D错误。
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选择题
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19.(2024·浙江七彩阳光联盟高二期中)发酵工程是重要的生物工程技术，可以为人类提供多样的生物产品。下列关于发酵工程的叙述，错误的是
A.可利用诱变育种或转基因技术改良菌种
B.菌种活化后须经扩大培养再接种进行发酵
C.发酵不同阶段所需控制的条件不同
D.发酵产品均可通过过滤、沉淀获得
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选择题
可以从自然界中筛选优良菌种，也可以通过人工诱变或基因工程选育新菌株用于发酵，A正确；
确定菌种后，还要将菌种进行多次扩大培养，以培养出足够多的菌种，再进行接种，这样可以缩短菌种在发酵罐中发酵的时间，B正确；
根据菌种不同、发酵时间不同，发酵过程中需要控制的条件不同，C正确；
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选择题
如果发酵的产品是菌体本身(如酵母菌)，可采用过滤、沉淀等方法从培养液中分离出来，但如果发酵产品是微生物的代谢产物，则可采用真空发酵、吸附发酵、萃取发酵等方法进行提取，D错误。
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选择题
20.(2021·山东，20)含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污水发臭。硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是否产生硫化氢及两种菌的运动能力，用穿刺接种的方法，分别将两种菌接种在含有硫酸亚铁铵的培养基上进行培养，如图所示。若两种菌繁殖速度相等，下列说法错误的是
A.乙菌的运动能力比甲菌强
B.为不影响菌的运动需选用液体培养基
C.该实验不能比较出两种菌产生硫化氢的量
D.穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌的污染
√
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选择题
从图中可以看出，甲菌在试管中分布范围小于乙
菌，说明乙菌的运动能力比甲菌强，A正确；
为了不影响菌的运动需选用半固体培养基，B错误；
该实验可以根据黑色沉淀的多少初步比较细菌产
生硫化氢的能力，但不能测定产生硫化氢的量，C正确；
微生物接种技术的核心是防止杂菌的污染，D正确。
24
25
非选择题
21.(2024·杭州高二期末)如表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，请根据表格和所学知识回答下列相关问题：
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成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示剂 琼脂
含量/g 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL (1)若根据用途划分，该培养基属于______(填“选择”或“鉴别”)培养基。若要用上述培养基来筛选出土壤中的尿素分解菌，培养基的营养成分中应将蛋白胨改成______，并用______作为指示剂。
鉴别
尿素
酚红
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非选择题
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分析表格可知，该培养基具备碳源、氮源、无机盐等营养成分，并且该培养基加入了指示剂，因此属于鉴别培养基。筛选尿素分解菌需要使用以尿素为唯一氮源的选择培养基，该配方中的蛋白胨需要改成尿素；由于尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解为氨，使培养基pH升高，故培养基中加酚红指示剂。
成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示剂 琼脂
含量/g 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL 24
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非选择题
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成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示剂 琼脂
含量/g 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL (2)在微生物培养的过程中，为防止杂菌污染，需要对培养基和培养皿进行______；操作者的双手需要进行清洗和______。
灭菌
消毒
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非选择题
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微生物培养过程中，应注意无菌操作，需要对培养基和培养皿进行灭菌，操作者的双手需要进行清洗和消毒。
成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 指示剂 琼脂
含量/g 10.0 5.0 5.0 2.0 0.2 12.0
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL 24
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非选择题
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(3)图1和图2是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是________________和___________，这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖所形成的________。图____所用的接种方法可用来对活菌进行计数。
稀释涂布平板法
平板划线法
单菌落
1
24
25
非选择题
22.(2024·嘉兴高二期末)酱油制作在我国具有悠久的历史，其中“海盐沈荡酱油酿造技艺”被列入嘉兴市非物质文化遗产名录。制作酱油的菌种主要有米曲霉、酵母菌、乳酸菌，基本流程如图。回答下列问题：
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非选择题
(1)米曲霉发酵过程中，加入的黄豆和面粉可以为米曲霉提供营养物质，黄豆中为米曲霉生长提供氮源的主要物质是_________。从培养基的成分看，属于______培养基。米曲霉的代谢类型是_____________。
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蛋白质
天然
异养需氧型
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非选择题
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黄豆中含有丰富的蛋白质，黄豆中的蛋白质含有N，可为米曲霉的生长提供氮源；从培养基成分来看，该培养基属于天然培养基；米曲霉发酵过程需要提供营养物质、晒制发酵，说明米曲霉的生长需要消耗有机物质和氧气，可知其代谢类型是异养需氧型。
24
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非选择题
(2)抑制杂菌污染是保证酱油质量的重要因素。在“晒制发酵”过程中，___________________(至少答出2种)等物质可以抑制杂菌生长。
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食盐、乳酸、乙醇
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非选择题
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由题目可知，在发酵池中酵母菌产生的乙醇能抑制杂菌的生长，乳酸菌产生的乳酸使发酵液呈酸性，也能抑制杂菌的生长，同时往发酵池中添加的食盐也能抑制杂菌的生长，故该阶段中可以抑制杂菌生长的物质是乙醇、乳酸和食盐等。
24
25
非选择题
(3)菌种是影响酱油风味的关键因素，米曲霉能分泌蛋白酶、淀粉酶等多种酶类，产生风味独特的成分。若平板培养基以淀粉为唯一碳源，接种菌液并培养，平板上长出菌落后加入显色剂，则可筛选出产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是___________________，
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碘－碘化钾溶液
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非选择题
该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是__________________________
_______________________________________________。根据__________
______________的大小，可粗略估计出菌株是否产淀粉酶及其产酶能力。若要保存优质菌种，可挑取单菌落，使用__________法接种到斜面培养基上。
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淀粉遇碘－碘化钾溶液显蓝
色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，形成透明圈
透明圈与
菌落直径比值
平板划线
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非选择题
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筛选出产淀粉酶的微生物可加入碘－碘化钾溶液作显色剂，因为淀粉遇碘－碘化钾溶液变蓝，产生淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，不显蓝色，会形成透明圈；根据透明圈与菌落直径比值的大小，可粗略估计出菌株是否产淀粉酶及其产酶能力；若要保存优质菌种，可挑取单菌落，使用平板划线法接种到斜面培养基上。
24
25
非选择题
23.啤酒是一种含多种氨基酸、低分子糖等物质的低酒精浓度饮料。回答下列问题：
(1)啤酒酿造过程中起主要作用的微生物是________，下列生物中与该微生物在结构上存在明显区别的是_______(多选)。
A.噬菌体 B.青霉菌
C.乳酸菌 D.农杆菌
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酵母菌
ACD
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非选择题
(2)从物理特征看，工业酿酒的培养基属于______培养基。啤酒酿造以刚萌发的大麦种子(麦芽)为原料，从培养基成分来看，麦芽为微生物生长提供了___________________________________。
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液体
碳源、氮源(水、无机盐、生长因子)
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非选择题
(3)啤酒花是桑科葎草属植物，其雌花序和果穗可用于啤酒酿造，赋予啤酒独特的香味和苦味等。将适量啤酒花加入过滤后的麦芽汁中，煮沸1小时，目的不仅是使啤酒花中的物质溶出，且能够__________。啤酒花还具有抑菌作用，为研究啤酒花的抑菌作用，在LB固体培养基中添加不同浓度的啤酒花提取液，经灭菌后制成______，采用______________法接种大肠杆菌后置于恒温箱中培养24小时，观察并比较菌落数量及生长情况。
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杀灭杂菌
平板
稀释涂布平板
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非选择题
(4)发酵过程中发酵罐内的泡沫先逐渐增多后减少，泡沫减少的主要原因是_________________________________。经测定发酵消耗的糖中，98.5%形成了酒精和其他发酵产物，其余则用于____________________。
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酵母菌细胞呼吸产生二氧化碳减少
酵母菌自身生长和繁殖
(5)啤酒的不同风味由多种因素造成，请列举两种因素：______________
________________________________________________________。
不同菌株、不同环境条件、不同原料、不同微生物的相互作用
不同的菌种、
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25
非选择题
24.(2024·浙江精诚联盟高二月考)科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H，以糖蜜(甘蔗榨糖后的废弃液，含较多蔗糖)为原料，在实验室发酵生产PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整体利用价值，工艺流程如图所示。回答下列问题：
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(1)发酵工程一般包括菌种的选育、扩大培养、培养基的配制、______、接种、发酵、产品的____________等方面。
灭菌
分离、提纯
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非选择题
(2)三位同学用稀释涂布平板法测定某一时间段内嗜盐单胞菌H的数量，他们的操作及统计结果如下：甲同学涂布了两个平板，统计的菌落数是236和260，取平均值248；乙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是21、212和256，取平均值163；丙同学涂布了三个平板，统计的菌落数是209、240和250，取平均
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值233。在三位同学的统计中，____同学的统计是正确的。该方法要经过较长时间的培养，待___________后进行统计。该方法统计出的结果往往偏低，原因是____________________
________________________________________。
丙
菌落数稳定
当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的往往只是一个菌落
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非选择题
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为了保证计数结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板计数，应至少对同一稀释度下3个平板进行计数，并求平均值，增强实验的说服力与准确性。在三位同学的统计中，甲同学只涂布了两个平板，偶然性太大，乙
同学计数的三个平板上，其中一个菌落数过少，且与其余两个误差较大，丙同学选择菌落数在30～300的平板计数，故只有丙同学的统计是正确的。该方法要经过较长时间的培养，待菌落数稳定(保证所有菌株都发育为菌落)后进行统计。
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非选择题
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(3)为获得对蔗糖的耐受能力和利用效率高的菌株H，可将蔗糖作为液体培养基的__________，并不断提高其浓度，多代培养选择。从功能上看，所用培养基为___________。
唯一碳源
选择培养基
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非选择题
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根据题意分析，该实验的目的是提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率，结合微生物的代谢需求，其液体培养基应该以蔗糖作为唯一碳源，并不断提高其浓度，经多次传代培养可筛选出目标菌株，从功能上看，能进行筛选的培养基是选择培养基。
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非选择题
(4)基于菌株H嗜盐、对酸碱耐受能力强等特性，研究人员设计了一种不需要灭菌的发酵系统，其培养基盐浓度设为60 g/L、pH为10，菌株H可
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正常持续发酵60 d以上。该系统不需要灭菌，分析原因：一是培养基的盐浓度设为60 g/L，其他杂菌因_________而死亡；二是pH为10的条件下，其他杂菌的____变性失活，生长繁殖受抑制。
失水过多
酶
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(5)研究人员在工厂进行扩大培养，在适宜的营养物浓度、温度、pH条件下发酵，结果发现发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵过程中，________________可能是高密度培养的限制因素。
氧气(或溶解氧)
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分析题意，扩大培养时，在适宜的营养物浓度、温度、pH等条件下，发酵液中菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期，并产生了少量乙醇等物质，说明发酵过程中氧气不足，使菌种进行厌氧呼吸产生乙醇，即氧气(或溶解氧)是限制高密度培养的重要因素。
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非选择题
25.随着抗生素临床使用及不合理使用的增加，细菌耐药性增加，抗生素的疗效下降。蛋白质的分泌对于细菌的毒性和生长必不可少，寻找新型抗生素抑制细菌蛋白质的分泌对于治疗细菌性疾病有重要的意义。现有一种新型抗生素(抗生素R)，为探究其作用效果，根据以下材料用具，写出实验思路，并分析实验结果。
实验材料：若干个培养瓶、培养液、无毒细菌M稀释液、新型抗生素R溶液。(要求与说明：细菌数目和蛋白质的含量可用仪器测定，试剂、仪器、用具及操作不作要求；实验条件适宜。)
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非选择题
(1)实验思路：
①取若干培养瓶编号为甲、乙，每个培养瓶中加入等量的____________
________________；
②______________________________________________；
③甲组培养瓶中加入适量抗生素R溶液，乙组培养瓶加入_____________；
④在适宜条件下培养，每隔一段时间测定细胞数和分泌蛋白含量；
⑤对所得实验数据进行__________。
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培养液和无
毒细菌M稀释液
取其中的培养瓶，分别测定细胞数和分泌蛋白含量
等量的培养液
统计分析
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非选择题
(2)若抗生素R有疗效，预测实验结果(请设计一个坐标系，并绘制预测单位数量的细菌分泌蛋白含量的变化曲线)。
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答案　如图所示
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非选择题
(3)实验所用的培养瓶在使用前进行______处理，以防杂菌污染。细菌耐药性的性状是由__________而产生的，抗生素的使用导致耐药性增强是______(填“人工”或“自然”)选择的结果。
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灭菌
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自然
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