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单元检测卷(十二)　发酵工程与细胞工程
(时间:75分钟　分值:100分)
一、选择题:每小题3分,16小题,共48分。在所给出的四个选项中,只有一个选项最符合题目要求。
1.(2025·山西阳泉期末)张九龄有诗云:红泥乍擘绿蚁浮,玉盌才倾黄蜜剖。寥寥数语生动描绘了色香味俱全的客家米酒。客家米酒的特点之一是甜腻入口,这与其酿酒过程使用的甜酒曲有关,甜酒曲主要含有根霉、毛霉和酵母菌等微生物。下列有关酿酒过程的叙述,错误的是(　　)
A.若酿制的米酒呈酸味,可能与长期封闭酿酒容器有关
B.酵母菌在密闭酿酒容器内初期种群数量呈近似“J”形增长
C.客家人用稻草为酿酒容器“保暖”,主要目的是为了促进酵母菌增殖
D.根霉、毛霉与酵母菌构成竞争关系,应控制酒曲中各种微生物的比例
2.(2025·河南摸底)中药双向发酵技术是以含有活性成分的中草药作为发酵的药性基质,以有益的药用真菌作为发酵的菌种。药用真菌在药性基质上的生长过程中,通过一系列复杂的代谢反应过程产生新的活性成分和生理功能。下列有关叙述错误的是(　　)
A.中药基质为真菌提供生长需要的碳源、氮源等养分
B.优良药用真菌可通过诱变育种或基因工程育种获得
C.发酵产品中新的活性成分可能是真菌的某代谢产物
D.温度、通气状况等环境条件不影响发酵产品的药效
3.(2025·江西联考)黄瓜枯萎病是由尖镰孢菌引起的。研究表明,芽孢杆菌能产生几丁质酶等物质分解尖镰孢菌的细胞壁而被广泛用于黄瓜枯萎病的防治。实验室对抑菌率在69%以上的3株芽孢杆菌进行复筛,结果如图所示。下列叙述正确的是(　　)
A.该实验的对照组设置是平板上只接种芽孢杆菌
B.实验结果表明N2菌株抑制尖镰孢菌的效果最好
C.挑选出抑制效果最强的菌株后,需要对其进行纯化培养
D.利用尖镰孢菌发酵生产几丁质酶等物质,可用于防治枯萎病
4.(2025·广东揭阳联考)味精的主要成分是谷氨酸钠,其生产工艺流程如下图所示。下列说法正确的是(　　)
A.谷氨酸棒状杆菌的主要碳源、氮源分别是淀粉、尿素
B.谷氨酸棒状杆菌的呼吸方式和乳酸菌相同
C.发酵过程中应控制发酵液的pH 为弱碱性或中性
D.发酵结束后的发酵液经过滤、离心、纯化、结晶可得到味精
5.(2025·云南昆明联考)嗜盐单胞菌是一类嗜盐好氧微生物,能够在高pH、高盐和高温等极端条件下生长,可利用餐厨垃圾等多种碳源发酵生产高分子聚酯(PHA)。PHA具有类似于合成塑料的物化特性及合成塑料所不具备的生物可降解性等许多优良性能。下列说法错误的是(　　)
A.使用嗜盐单胞菌发酵可建立抗杂菌污染的开放式发酵系统
B.实验室用嗜盐单胞菌生产PHA时需要提供无氧等发酵条件
C.可采用分离和提纯等方法将PHA从发酵液中分离出来
D.利用嗜盐单胞菌生产PHA有利于对自然环境的保护
6.(2024·江苏南通海安模拟)抗体—药物偶联物(ADC)由单克隆抗体、高效“弹头”药物以及接头三部分构成,能特异性识别肿瘤细胞,实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。下列有关说法错误的是(　　)
A.单克隆抗体的制备需要将免疫后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合
B.ADC中抗体发挥靶向运输作用,药物发挥治疗效应
C.ADC通过抗体与受体特异性结合后,以主动运输方式进入肿瘤细胞
D.抑制细胞内信息传递或细胞分裂的药物可以作为“弹头”
7.(2025·云南文山联考)植物细胞悬浮培养是将植物细胞或较小的细胞团悬浮在液体培养基中进行培养,在培养过程中能够保持良好的分散状态。这些小的细胞团通常来自植物的愈伤组织,下列叙述正确的是(　　)
A.接种过程中是将已分化的愈伤组织转接到灭菌的培养液中
B.培养液中蔗糖能为植物细胞提供营养并维持一定的渗透压
C.培养过程中需要间断地光照有利于植物细胞进行光合作用
D.利用悬浮培养技术生产次生代谢物需要培育出胚状体
8.(2025·重庆沙坪坝联考)植物细胞悬浮培养技术在生产中已得到广泛应用。某兴趣小组尝试利用该技术培养红豆杉细胞并获取紫杉醇(如图)。下列叙述错误的是(　　)
A.选择根尖组织为材料与其细胞分裂能力强,易于诱导形成愈伤组织有关
B.①②不能体现植物细胞具有全能性
C.愈伤组织来源的单个细胞不能进行光合作用,故培养液中应添加牛肉膏、蛋白胨等有机碳源
D.大规模培养高产细胞群时,应向培养液中通入无菌空气
9.(2025·湖南长沙联考)霉豆腐渣的原料是加工豆腐或豆浆后剩下的“副”产品——豆腐渣。采用传统发酵的办法,利用毛霉糖化淀粉和分解大豆蛋白的能力对豆腐渣进行加工,大致过程如图所示。下列说法正确的是(　　)
A.将豆腐渣烘干的主要目的是灭菌
B.拌霉即接种,与家庭酿制葡萄酒一样,都采用自然接种的方法
C.图中“ ”处的条件是密封无氧
D.在发酵过程中,豆腐渣中的蛋白质被分解成甘油和氨基酸
10.(2025·重庆摸底)嗜热菌可以在高温环境中生存,其产生的淀粉酶最适温度较高。筛选能产生耐高温淀粉酶的嗜热菌过程如图1所示,其中Ⅰ号培养基用碘液处理的结果如图2所示。下列叙述错误的是(　　)
A.甲、乙主要是梯度稀释,②是用稀释涂布平板法进行接种
B.图2中淀粉是唯一碳源,周围不显蓝色的菌落含有所需菌种
C.用接种环挑菌在Ⅱ号表面数次划线后培养可分离得到单菌落
D.丙中无琼脂,接种后放入适宜的较高温度培养箱中扩大培养
11.(2025·重庆开学考)我国研究人员经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴,流程如图所示,①~⑧表示过程,该动物可作为研究癌症等人类疾病的动物模型。下列说法错误的是(　　)
A.过程①用含血清的液体培养基,置于95%空气和5%CO2培养箱中培养
B.过程②表示的卵母细胞去核,实际去除的是纺锤体—染色体复合物
C.可用 Ca2+载体或乙醇激活重构胚,使其完成分裂和发育进程
D.代孕母猴分娩的食蟹猴性状表现与提供卵母细胞的雌性食蟹猴无关
12.(2025·河南开学考)水牛克隆技术在农业领域中的应用主要是针对水牛的繁殖、育种及经济价值方面。其基本流程包括体细胞的采集、受体卵母细胞的获得和去核、体细胞核的移植、细胞融合和激活、重构胚的培养与发育、胚胎移植等步骤。下列相关叙述正确的是(　　)
A.克隆动物与试管动物的生殖方式均为无性生殖
B.卵母细胞的去核方法有梯度离心、Ca2+载体等
C.进行胚胎移植前需对受体母牛进行同期发情处理
D.该过程涉及多项技术,如体外受精、核移植技术等
13.(2025·福建漳州联考)乳腺癌细胞的HER2蛋白是正常组织中的100倍以上,可作为理想的肿瘤治疗靶标。科研人员通过接头将抗HER2抗体与细胞毒素结合,制备出ADC来治疗乳腺癌。ADC的作用机制如图所示。下列相关叙述错误的是(　　)
A.HER2蛋白不是乳腺癌细胞膜上特有的蛋白
B.可运用动物细胞培养和动物细胞融合技术制备抗HER2抗体
C.ADC被溶酶体酶降解,释放出抗体和细胞毒素使乳腺癌细胞凋亡
D.荧光标记的抗HER2单克隆抗体可用于乳腺癌的定位诊断
14.(2025·甘肃平凉开学考)中华猕猴桃是中国所特有的一种水果,富含维生素C。为探究不同植物生长调节剂种类及浓度组合对不定芽形成的影响,科研人员分别以中华猕猴桃的叶片和叶柄为外植体进行了一系列相关实验,浓度组合如表所示,实验结果如图所示。下列叙述正确的是(　　)
　　NAA 6-BA　　 0.1 μg·mL-1 0.2 μg·mL-1 0.4 μg·mL-1
2.0 μg·mL-1 1 2 3
1.0 μg·mL-1 4 5 6
0.5 μg·mL-1 7 8 9
注:6-BA为细胞分裂素类生长调节剂,NAA是生长素类生长调节剂。1~9为不同的浓度组合。
A.植物组织培养依据的生物学原理是植物细胞的全能性
B.随6-BA/NAA浓度比值下降,不定芽的再生率先升高后下降
C.后续诱导生根的培养中,培养基中各成分的含量不需要做任何变化
D.作为外植体的叶片诱导培养前需要用酒精消毒,然后立刻用清水清洗2~3次
15.(2024·湖北模拟)人体骨膜组织具有空间诱导定向定型生成软骨结构性组织、器官的能力,这称为空间诱导再生。科研人员基于空间诱导再生机制,利用如图所示的技术流程,成功得到耳形软骨并应用于临床实践。下列叙述错误的是(　　)
A.该项技术需要进行体外细胞培养,且需提供无菌无毒的环境
B.该项技术表明,特定的空间结构可能影响细胞的分裂和分化
C.骨膜组织定向生成软骨组织,并不能体现骨膜细胞的全能性
D.再生出的耳形软骨用于自体移植时,可以避免免疫排斥反应
16.(2025·湖南开学考)2023年我国科研团队在猪体内成功培育出人源中期肾脏,是国际首次成功实现的人源功能性实质器官异种体内再造、为解决供体器官严重短缺问题开辟了新方向。下图为器官异种体内再造基本思路,下列说法错误的是(　　)
A.诱导具有多向分化潜能人多能干细胞分化的实质是动物细胞核具有发育的全能性
B.制备诱导多能干细胞的方法是将相关因子如特定基因、特定蛋白等导入细胞
C.由于供体细胞来源于患者自体,理论上将有效避免器官移植中存在的免疫排斥问题
D.所用的模型猪应缺乏肾脏或肾脏发育基因,异种嵌合胚胎才能发育得到人源化肾脏
二、非选择题:共4小题,52分。
17.(12分)(2025·黑龙江哈尔滨摸底)雅安藏茶是一种黑茶,具有解油腻、去脂减肥、清除自由基等保健功效。藏茶初加工工序主要包括:杀青、揉捻、渥堆和干燥等。杀青是将茶叶放入260~280 ℃左右的铁锅中翻炒;随后将茶叶揉制15分钟初揉成茶坯;渥堆时将茶坯堆积到高1.5~1.7米,并覆盖上棕垫、麻袋等,堆积至茶坯叶色由暗绿变为黄褐、带有酒糟气;再次揉制5分钟左右,将茶叶置于70 ℃左右环境下烘焙干燥;随后压制成型置于适宜条件下自然陈化。
(1)(2分)杀青能快速去除茶叶中的水分,同时还能　　　　　　　　,从而减少茶叶中茶多酚等营养成分的分解。
(2)(4分)渥堆时将茶坯堆积并覆盖上棕垫、麻袋的目的是　　　　　　　　,渥堆过程会产生酒糟气,请写出相关反应式:　　　　　　　　　　　　　　　　。
(3)(2分)烘焙干燥工序去除茶叶中的水分,有利于　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　(至少答两点)。
(4)(4分)陈化能够使藏茶具有独特的风味物质。经研究发现,风味物质的形成主要与青霉、黑曲霉和酵母菌等真菌相关,筛选计数风味物质形成相关的菌种应选用　　　　法接种。该过程往往会在培养基中添加一些乳酸,添加乳酸的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
18.(12分)(2025·辽宁开学考)非对称细胞融合技术常指利用某种外界因素(如射线)辐照某一细胞原生质体,选择性地破坏其细胞核,使其染色体片段化并丧失再生能力;再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与另一原生质体融合,从而实现有限基因的转移,在保留亲本之一全部优良性状的同时,改良其某个不良性状。用这种方法可以将胡萝卜的抗黑腐病性状转移到烟草中,获得抗黑腐病(由真菌引起)烟草杂种植株,流程如图所示。回答下列问题:
(1)(6分)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压,其作用是　　　　　　　　。与诱导动物细胞融合相比,②过程不宜采用的诱导方法是　　　　　　　　;③④过程中需添加的两种关键性植物激素是　　　　　　　　。
(2)(4分)非对称细胞融合过程中,染色体丢失的程度在同一组合不同的杂种中是不一致的,导致融合后再生后代中的　　　　数量变化很大。影响细胞融合染色体丢失程度的因素,除了紫外线还可能与　　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　(答两点)等有关。
(3)(2分)对杂种植株进行　　　　　　　　接种实验,可筛选出对黑腐病具有高抗性的杂种植株。
19.(14分)(2025·四川摸底)DHA有许多重要的生理功能,利用微生物发酵法生产DHA逐渐成为研究的热点。研究人员为了优化裂殖壶菌(从海洋中分离)的培养基,选择4 g/L的酵母粉、大豆蛋白胨、豆粕水解液和硫酸铵进行实验,结果如下图1。
回答下列问题:
(1)(4分)本研究中的酵母粉、大豆蛋白胨在微生物培养中的主要作用是　　　　　　　　。本实验的培养基中还需要加入　　　　　　　　。
(2)(2分)据图1分析,本实验选用酵母粉和大豆蛋白胨作为发酵生产DHA的培养基成分,原因是　　　　　　　　　　　　　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
(3)(4分)研究人员对酵母粉和大豆蛋白胨进行进一步实验,结果如下图2和图3。与4 g/L酵母粉质量浓度时相比,高酵母粉质量浓度会对裂殖壶菌的生长和DHA的积累产生　　　　(填“抑制”或“促进”)作用。结合本实验的结果,有人认为图3的实验数据的培养条件是在酵母粉为4 g/L时,再添加大豆蛋白胨,请阐述你的观点和理由　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　。
(4)(4分)据图分析,研究人员进行一系列实验的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。
20.(14分)(2025·重庆沙坪坝联考)某些种类癌细胞表面有高表达膜蛋白PD-L1,PD-L1能与T细胞表面的PD-1结合,抑制T细胞的活化,使癌细胞实现免疫逃逸。临床上可利用抗PD-1的单克隆抗体进行癌症治疗。制备过程如下:
(1)(6分)将等量的纯化PD-1蛋白分别注射到4只小鼠体内,经过二次免疫后测定小鼠抗PD-1抗体的免疫效果。实验中常用半抑制浓度(IC50)评价抗体灵敏度:即取同样浓度的不同来源抗体,分别检测一半抗体被同一种抗原结合时所需抗原的最低浓度。下图为4只小鼠的血清抗体相对浓度和IC50值。
据图分析,制备抗PD-1单克隆抗体时应选择　　　　号小鼠用作细胞融合的供体,依据是　　　　　　　　　　　。取对应小鼠的脾脏细胞用　　　　　　　　试剂诱导与骨髓瘤细胞融合,用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。
(2)(6分)一段时间后,将(1)所得细胞接种到多孔培养板上,进行抗体阳性检测,检测原理如下图。
①在检测时需要将PD-1蛋白固定于载体表面制成固相抗原,并加入多孔板培养槽中的　　　　(填“细胞”或“上清液”),待充分反应后洗脱。
②加入酶标抗体,一段时间后需要用洗脱液将未与　　　　　　结合的酶标抗体洗去。
③加入相应酶促反应底物显色后,颜色越深代表　　　　　　。
(3)(2分)选择抗体检测阳性且产量较高的杂交瘤细胞,可注射入小鼠腹腔,从　　　　　　中提取、分离抗PD-1抗体。
单元检测卷(十二)　发酵工程与细胞工程
1.A　[如果米酒呈酸味,是由于醋酸菌利用酒精生成了醋酸,而这是在有氧的条件下进行的,与封闭的酿酒容器无关,A错误;酵母菌在密闭酿酒容器内初期由于空间和资源都比较充裕,所以种群呈“J”形增长,B正确;客家人用稻草为酿酒容器“保暖”,为酵母菌提供适宜的温度,促进酵母菌增殖,C正确;根霉、毛霉与酵母菌在同一空间中都利用有机物生存,构成竞争关系,因此应控制酒曲中各种微生物的比例,D正确。]
2.D　[中药基质作为药用真菌生长的培养基,为其生长提供水、无机盐、碳源和氮源等,A正确;优良药用真菌可以从自然界中筛选出,也可以通过诱变育种或基因工程育种获得,B正确;药用真菌在药性基质上的生长过程中,通过一系列复杂的代谢反应过程产生新的活性成分,故发酵产品中新的活性成分可能是真菌的某代谢产物,C正确;在发酵过程中,温度、pH和溶解氧等发酵条件不仅会影响微生物的生长繁殖,而且会影响微生物代谢物的形成,D错误。]
3.C　[该实验研究的是芽孢杆菌对尖镰孢菌的抑制作用,因此对照组设置与图中实验组的区别是平板上只接种尖镰孢菌或在接种芽孢杆菌处接种等量的蒸馏水,A错误;据图可知,这三组实验中,N1菌株组中平板中央的尖镰孢菌菌落最小,说明N1菌株抑制尖镰孢菌增殖的效果最强,B错误;为了确保所使用的菌株是纯净的,不含有其他杂菌,挑选出抑制效果最强的菌株后,需对其进行纯化培养,C正确;依题意,芽孢杆菌主要是通过产生几丁质酶等物质来抑制尖镰孢菌的增殖,因此可利用芽孢杆菌发酵生产几丁质酶等物质,利用这些物质防治枯萎病,D错误。]
4.C　[根据题意,谷氨酸棒状杆菌发酵的过程中,将小麦预处理以后,再用淀粉水解酶处理获得葡萄糖,与谷氨酸棒状杆菌混合进行发酵,因此谷氨酸棒状杆菌的主要碳源、氮源分别是葡萄糖、尿素,A错误;谷氨酸棒状杆菌的呼吸方式为有氧呼吸,与乳酸菌不同,乳酸菌进行的是无氧呼吸,B错误;谷氨酸的发酵生产在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸,在酸性条件下则容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺,C正确;味精是发酵产物谷氨酸和碳酸氢钠反应经过结晶得到的,而谷氨酸是谷氨酸棒状杆菌的代谢产物,可通过提取、分离和纯化获得,D错误。]
5.B　[嗜盐单胞菌是一类嗜盐好氧微生物,能够在高pH、高盐和高温等极端条件下生长,所以使用嗜盐单胞菌能够节约淡水资源,即便在没有灭菌的情况下也很难感染杂菌,使用嗜盐单胞菌发酵可建立抗杂菌污染的开放式发酵系统,A正确;嗜盐单胞菌是一类嗜盐好氧微生物,需要提供有氧发酵条件,B错误;PHA是嗜盐单胞菌的代谢产物,在发酵后应采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品,C正确;PHA具有类似于合成塑料的物化特性及合成塑料所不具备的生物可降解性等许多优良性能,利用嗜盐单胞菌生产PHA有利于对自然环境的保护,D正确。]
6.C　[利用动物细胞融合技术将免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生特异性抗体,利用该细胞制备单克隆抗体,A正确;ADC中抗体的作用是特异性识别肿瘤细胞表面的抗原并与之结合,发挥靶向运输作用,药物发挥治疗效应,B正确;ADC与肿瘤细胞识别后,被肿瘤细胞以胞吞的方式吸收进入细胞,C错误;抑制细胞内信息传递或细胞分裂的药物可以抑制细胞增殖,选择它们作为“弹头”可选择性杀伤肿瘤细胞,D正确。]
7.B　[愈伤组织属于未分化状态,A错误;培养液中蔗糖可做碳源,能为植物细胞提供营养,并能维持一定的渗透压,B正确;脱分化形成愈伤组织过程中,不需要提供光照,C错误;利用悬浮培养技术生产次生代谢物不需要培育出胚状体,培养到愈伤组织即可,D错误。]
8.C　[根尖分生区细胞分裂能力强,易于诱导形成愈伤组织,A正确;①②未发育成完整植株或分化为各种细胞,故不能体现植物细胞具有全能性,B正确;愈伤组织无叶绿体,不能进行光合作用,应添加蔗糖等有机碳源,C错误;大规模培养高产细胞群时,应向培养液中通入无菌空气,保证细胞的有氧呼吸,D正确。]
9.B　[由题干可知,将豆腐渣烘干的主要目的是散失适量的水分,不一定能达到灭菌效果,A错误;流程图中的拌霉是将干净的稻草覆盖在豆腐渣上面,利用空气中和稻草上附带的毛霉进行发酵,家庭酿制葡萄酒时利用葡萄皮上自带的菌种进行发酵,都采用了自然接种的方法,B正确;毛霉为好氧微生物,霉豆腐渣制作的发酵阶段不需要密封,C错误;在发酵过程中,豆腐渣中的蛋白质被分解成小分子的肽和氨基酸,D错误。]
10.C　[图中可以看出甲、乙过程主要是梯度稀释,②是在Ⅰ号培养基用稀释涂布平板法进行的接种,A正确;图2中淀粉是唯一碳源,能产生淀粉酶分解淀粉的菌落周围不会出现蓝色,所以周围不显蓝色的菌落含有所需菌种,B正确;在Ⅱ号培养基用接种环挑菌划线时,第一次划线后,灼烧接种环,待其冷却后,从第一次划线的末端开始作第二次划线。重复以上操作,作第三、四、五次划线,注意不要将最后一次的划线与第一次的划线相连,通过这样划线后培养可分离得到单菌落,C错误;丙是液体培养基,无琼脂,嗜热菌可以在高温环境中生存,因此接种后放入适宜的较高温度培养箱中扩大培养,D正确。]
11.D　[过程①用含血清的液体培养基,置于95%空气和5%CO2培养箱中培养,这是常见的动物细胞培养条件,A正确;过程②表示的卵母细胞去核,实际去除的是纺锤体—染色体复合物,这是核移植技术中去核的关键操作,B正确;可用Ca2+载体或乙醇激活重构胚,使其完成分裂和发育进程,这是激活重构胚的常见方法,C正确;提供去核的卵母细胞含有细胞质基因,也会遗传给食蟹猴,因此食蟹猴性状表现和提供卵母细胞的雌性食蟹猴有关,D错误。]
12.C　[克隆动物的生殖方式为无性生殖,试管动物的生殖方式为有性生殖,A错误;卵母细胞的去核方法有显微操作法、梯度离心、紫外线短时间照射和化学物质处理等,Ca2+载体是激活重构胚的方法,B错误;胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移,胚胎移植时,受体母牛需要和供体处于相同的生理状态,需进行同期发情处理,C正确;水牛克隆过程涉及的技术有核移植、细胞融合和激活、早期胚胎培养、胚胎移植等,没有体外受精,D错误。]
13.C　[由题干可知,乳腺癌细胞的HER2蛋白是正常组织中的100倍以上,因此HER2蛋白不是乳腺癌细胞特有的蛋白,A正确;动物细胞培养技术可用于培养B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,动物细胞融合技术可将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,从而制备抗HER2抗体,B正确;据图可知,ADC被溶酶体酶降解,释放出的是药物,药物使乳腺癌细胞裂解死亡,C错误;荧光标记的抗HER2单克隆抗体能特异性地与乳腺癌细胞表面的HER2蛋白结合,从而可用于乳腺癌的定位诊断,D正确。]
14.A　[植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性,即细胞经分裂分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能,A正确;第3、4组和第6、7组随6-BA/NAA浓度比值上升,不定芽的再生率也在升高,B错误;诱导生根和诱导生芽所需的培养基成分和比例通常是不同的,后续诱导生根的培养中,培养基中各成分的含量需要做出相应的变化,C错误;作为外植体的叶片诱导培养前需要用酒精消毒,然后用无菌水清洗2~3次,而不是立刻用清水清洗,D错误。]
15.A　[该项技术是将模型植入肋骨的软骨周围,诱导软骨再生,并不需要体外培养细胞,A错误;耳朵模型植入肋骨的软骨周围,这个特定的空间结构诱导了再生耳形软骨,可能影响细胞的分裂和分化,B正确;骨膜组织定向生成软骨组织,既没有形成完整的个体,也不是分化形成各种组织细胞,故并不能体现骨膜细胞的全能性,C正确;自体再生形成的耳形软骨,细胞全部来自自身,用于自体移植时,可以避免免疫排斥反应,D正确。]
16.A　[细胞分化的实质是基因的选择性表达,A错误;目前已采用多种方法来制备多能干细胞,包括借助载体将特定的基因导入细胞中,直接将特定的蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成多能干细胞,B正确;模型猪通常去除或敲除特定的肾脏发育相关基因,以确保其自身无法发育正常的肾脏,在这样肾脏缺陷模型的猪早期胚胎中注入人类干细胞或其他人源化细胞后,这些细胞可以在猪体内生长和发育,形成具有相似功能的人源化肾脏,D正确。]
17.(1)使相关分解酶失活　(2)形成相对缺氧的环境
C6H12O62C2H5OH(酒精)+2CO2　(3)停止微生物发酵、减少茶叶霉变　(4)释涂布平板　维持培养基pH至中性偏酸
解析　(1)高温使催化茶多酚等分解的酶失活,从而减少茶叶中茶多酚等营养成分的分解。(2)渥堆时将茶坯堆积并覆盖棕垫、麻袋的目的是形成相对缺氧的环境,从而有利于相关微生物进行无氧呼吸,因此会产生酒糟气,相关反应式为:C6H12O62C2H5OH(酒精)+2CO2。(3)烘焙干燥可进一步排出多余水分,水分降低,有利于停止微生物发酵,同时减少茶叶霉变。(4)筛选并计数风味物质相关菌种应选用稀释涂布平板法,平板划线法不能计数;在筛选相关菌种时在培养基中添加乳酸的目的是维持培养基pH至中性偏酸,起到抑制细菌生长,促进霉菌等真菌生长的作用。
18.(1)保持原生质体的完整性(正常形态)　灭活病毒诱导　生长素和细胞分裂素　(2)染色体　不同物种细胞融合的细胞亲缘关系、细胞所处的分裂时期　(3)黑腐病菌
解析　(1)原生质体无细胞壁,原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压,其作用是维持原生质体的形态和功能,从而保持原生质体的完整性。诱导动物细胞融合与诱导植物细胞融合的方法相同的是都可用化学法和物理法,此外动物细胞融合还可用灭活的病毒作为诱导剂,因此与诱导动物细胞融合相比,②过程不宜采用的诱导方法是灭活病毒诱导;③④过程分别表示脱分化和再分化,③④过程中需添加的两种关键性植物激素是生长素和细胞分裂素。(2)非对称细胞融合过程中,染色体丢失的程度在同一组合不同的杂种中是不一致的,导致融合后再生后代中的染色体数量变化很大。非对称细胞融合技术利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与另一原生质体融合,从而实现有限基因的转移,在保留亲本之一全部优良性状的同时,改良其某个不良性状,因此影响细胞融合染色体丢失程度的因素,还可能与不同物种细胞融合的细胞亲缘关系有关;由于紫外线使染色体发生变异,分裂的细胞更容易发生染色体变异,因此影响细胞融合染色体丢失程度的因素,还可能与细胞所处的分裂时期等有关。(3)对杂种植物进行鉴定最简单的方法是从个体水平上进行检测,即进行黑腐病菌接种实验,可筛选出对黑腐病具有高抗性的杂种植株。
19.(1)提供氮源　碳源和海水　(2)酵母粉相比于其他3种氮源更有利于菌体的生长,而大豆蛋白胨作为氮源有利于DHA的积累　(3)抑制　大豆蛋白胨是单独添加的,因为在大豆蛋白胨质量浓度为4 g/L时的菌体干重和DHA含量与图1是一样的,表明是大豆蛋白胨单独添加的实验　(4)确定哪种氮源及浓度最适合培养裂殖壶菌及DHA生产,从而优化氮源
解析　(1)酵母粉、大豆蛋白胨在微生物培养中主要是作为氮源,培养基中除了氮源还需要碳源和无机盐,由于本实验中培养的微生物来自海洋,所以需要加入海水,海水中就有相应的无机盐,即本实验的培养基中还需要加入碳源和海水。(2)从图1可以看出,酵母粉相比于其他3种氮源,菌体的生长是最快的,而大豆蛋白胨作为氮源,DHA的积累是最多的,故本实验选用酵母粉和大豆蛋白胨作为发酵生产DHA的培养基成分。(3)从图2可以看出酵母粉浓度在4 g/L时菌体干重最多,DHA产量也最高,浓度升高后两者反而都下降,表现出抑制作用。图2和图3都是单独检测两者不同浓度的培养效果,图3在大豆蛋白胨质量浓度为4 g/L时,菌体干重和DHA含量和图1中是一样的,表明都是单独培养的结果,可见图3的实验数据的培养条件是大豆蛋白胨单独添加的实验。(4)本实验都是围绕着氮源的优化展开的,探究选择哪一种氮源,需要什么浓度,即确定哪种氮源及浓度最适合培养裂殖壶菌及DHA生产,从而优化氮源。
20.(1)Ⅳ　其抗体相对浓度较高且IC50值最低　PEG　(2)①上清液　②抗PD-1抗体　③抗PD-1抗体含量越高　(3)腹水
解析　(1)IC50值低说明抗体与抗原的结合效率高,即灵敏度高,因此制备抗PD-1单克隆抗体时应选择Ⅳ号小鼠用作细胞融合的供体,依据是其抗体相对浓度较高且IC50值最低。诱导动物细胞融合应选择PEG(聚乙二醇)试剂。(2)①在检测时需要将PD-1蛋白固定于固相载体表面制成固相抗原,并加入多孔板培养槽中的上清液(其中含有相应的抗体),即待测样本。②加入酶标抗体后一段时间,需要用洗涤剂将未与抗PD-1抗体结合的酶标抗体洗去,在载体上留下的是带有酶标抗体的抗原-抗体复合物。③加入相应酶促反应底物显色后,颜色的深浅可代表抗PD-1抗体的量,颜色越深说明待测样液中抗体含量越多。(3)若将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔中,则应从腹水中提取、分离抗体。

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