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2024-2025学年度第二学期高二年级生物学科第二次考试
一、单选题
1．在制作泡菜时，利用的微生物主要是（　　）
A．酵母菌 B．乳酸菌 C．醋酸菌 D．青霉菌
2．利用传统发酵技术制作食品是我国传统饮食文化的重要组成部分。下列有关叙述正确的是（ ）
A．腐乳发酵时，风味的产生与微生物分泌胰蛋白酶将蛋白质等物质分解有关
B．酿制果酒时，各阶段均需严格控制无氧条件以保证酵母菌产生更多的酒精
C．泡菜发酵时，坛装八成满可防止发酵初期酵母菌等的活动造成发酵液溢出
D．酸奶发酵时，溶液pH值逐渐降低，是乳酸菌无氧呼吸产生的CO2造成的
3．关于杂交瘤细胞的叙述不正确的是（　　）
A．有双亲细胞的遗传物质 B．不能无限增殖
C．可产生分泌特异性抗体 D．可体内外培养获得单抗
4．下列有关发酵工程及其相关应用的说法，错误的是（ ）
A．啤酒的工业化生产过程中，焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚并进行灭菌
B．用纤维素的水解液为原料，通过发酵工程从微生物菌体中提取单细胞蛋白
C．啤酒生产过程中，加入啤酒花可提供发酵菌种
D．发酵过程中，要随时取样检测培养液中的微生物数目、产物浓度
5．下列有关无菌技术的说法，其中正确的有几项（　　）
①无菌技术的关键是杀灭实验室中所有的微生物 ②煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子 ③经巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底消灭，所以不能在常温长期保存 ④高压蒸汽灭菌时若不将锅内冷空气排出则达不到预期的灭菌效果 ⑤将接种环直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌 ⑥培养皿、吸管可用干热灭菌法灭菌
A．2项 B．3项 C．4项 D．5项
6．下列为达成实验目的而进行的相应实验操作，不正确的是（ ）
选项 实验目的 实验操作
A 观察花生子叶细胞中的脂肪颗粒 用苏丹Ⅲ染色后，再用酒精洗去浮色
B 除去粗提DNA中的蛋白质杂质 在DNA溶液中加入等体积预冷的酒精
C 观察洋葱根尖分生区细胞有丝分裂 将解离后的根尖放入龙胆紫染液染色
D 诱导外植体脱分化为愈伤组织 在MS培养基中添加所需植物激素
A．A B．B C．C D．D
7．果酒和果醋制作过程中，发酵条件的控制至关重要，下列相关措施正确的是（　　）
A．为了防止发酵过程中发酵液溢出，葡萄汁装入发酵瓶时不能装满，要留约1/4的空间
B．制葡萄酒时每隔12h左右要将瓶盖拧松一次，排出多余的CO2
C．缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇直接转化为醋酸
D．在果醋发酵过程中，要密封发酵装置，以利于醋酸菌的代谢
8．下列各种传统发酵食品的制作过程中，没有酵母参与的是（ ）
A．酸奶 B．奶酪 C．泡菜 D．黄酒
9．CD47是一种在多种细胞中广泛表达的跨膜糖蛋白，能抑制巨噬细胞的吞噬作用。结肠癌等多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1．6-5倍。科研人员尝试合成抗CD47的单克隆抗体，并进一步验证其对巨噬细胞吞噬作用的影响。过程如下图所示，下列分析不正确的是（ ）
A．经多次重复步骤①，小鼠脾脏内目标B细胞的占比上升
B．步骤②中利用灭活的病毒诱导产生的融合细胞有多种类型
C．可利用CD47糖蛋白筛选目标杂交瘤细胞
D．对照组：肿瘤细胞＋单克隆抗体培养体系
10．如图为早期胚胎发育过程中某一时期示意图。下列叙述正确的是（ ）
A．可分离图中的滋养层细胞进行性别鉴定
B．图示胚胎已经出现胚层分化，为原肠胚
C．从任意角度分割图示胚胎均不影响胚胎的后续发育
D．该图表示透明带已破裂，胚胎发育也开始出现异常
11．我国科学家利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”，研究流程如图所示。下列相关叙述正确的有（ ）
A．猴的成纤维细胞和胚胎干细胞功能不同是由于细胞的基因组成发生了改变
B．移植前细胞和囊胚的培养都要放在充满CO2的培养箱中进行
C．诱导后的胚胎干细胞必须培养至囊胚期，才能移植到代孕母体
D．移植后胚胎的发育受母体激素影响，也影响母体激素分泌
12．脂肪酶被广泛应用于制药、食品、饮料、化妆品、医疗诊断等多个领域，但天然脂肪酶催化效率低，对非天然底物的选择性差。通过蛋白质工程获取高效脂肪酶是满足工业需求的重要措施，已知酶的活性中心包含催化位点和结合位点。下列叙述正确的是（　　）
A．脂肪酶可为脂肪水解为甘油和脂肪酸的过程提供活化能
B．通过蛋白质工程改造脂肪酶可以直接对脂肪酶的活性中心进行改造
C．改造脂肪酶的前提是根据预期脂肪酶的功能设计预期的蛋白质结构
D．若通过氨基酸替换改造脂肪酶，则可通过碱基对的增添或缺失改造基因
13．白酒中含有适量的乳酸能够减轻酒体刺鼻的味道，增加甜度，使酒体协调醇厚。为获得产乳酸能力较强的乳酸菌菌株，某科研工作者从鑫香型白酒发酵醅、窖泥中初步分离纯化出8株产酸菌株，如图所示。下列相关叙述错误的是（ ）

A．筛选乳酸菌的培养基应具备选择性，且能鉴别出乳酸菌的产酸能力
B．接种后，应将接种平板倒置于无氧且温度适宜的环境中进行培养
C．由图示结果可知，不同乳酸菌产酸能力不同的根本原因是它们所含相关酶的活性不同
D．由图示结果可知，对筛选菌株进行产酸特性的研究时，应该选择菌种L1进行发酵培养菌种编号
14．《齐民要术》记载了许多古人在生产中运用发酵技术加工食品积累的宝贵经验，下列对记载的理解，错误的是
食品加工 历史记载
酿酒 浸曲发，如鱼眼汤，净淘米八斗，炊作饭，舒令极冷。
制醋 大率酒斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成。
泡菜制作 作盐水，令极咸，于盐水中洗菜，即内（纳）瓮中。其洗菜盐水，澄取清者，泻著瓮中，令没菜把即止，不复调和。
A．“浸曲发”目的是活化酵母菌，此时酵母菌通过有氧呼吸和无氧呼吸释放CO2
B．“舒令极冷”是为了防止蒸熟的米温度过高而杀死酒曲中的酵母菌等微生物
C．“用水三斗”为避免酒精浓度过高杀死醋酸菌而不易形成醋酸菌衣膜
D．“令没菜把即止”主要目的是让蔬菜充分吸收盐分，使风味品质更佳
15．新型冠状病毒是一种 RNA 病毒，极易发生变异，其通过表面棘突蛋白（S 蛋白） 的受体结合域（RBD）与人体细胞表面的ACE2受体相互作用而感染人体细胞。科学家设计了一种自然界中不存在的蛋白质LCB1，可与S蛋白RBD紧密结合，以干扰新型冠状病毒的感染。下列有关说法，错误的是（ ）
A．LCB1的作用效应与抗S蛋白抗体类似
B．可用蛋白质工程进行LCB1的生产
C．新型冠状病毒侵入人体后可在内环境中大量增殖
D．易感人群即使注射疫苗也仍然具有被感染的可能
二、多选题
16．1881年，科赫在第七届全球医学大会展示了用固体培养基进行平板涂布分离微生物的技术，该技术深刻地影响和促进了整个微生物学的发展。平板涂布部分操作如图所示，下列相关叙述错误的是（ ）
A．稀释涂布平板法可用于分离纯化大肠杆菌
B．平板涂布时，涂布器在灼烧后应立即进行涂板，以免杂菌污染
C．图中的平板涂布操作中的唯一不规范之处是培养皿的盖完全打开
D．稀释涂布平板法计数得到的结果往往会比实际活菌数目要高
17．在传统发酵技术中，果醋的制作往往在果酒制作基础上进行。下图甲是醋酸发酵装置，乙是培养液pH变化曲线图，下列叙述正确的是（ ）
A．发酵初期不通气，溶液中没有气泡产生
B．中期可以闻到酒香，说明进行了酒精发酵
C．后期接种醋酸菌，适当通气并提高发酵温度
D．图乙中能正确表示pH变化的曲线是③
18．红细胞生成素（EPO）是人体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病。由于天然EPO来源极为有限，某科研团队采用基因工程培育转基因羊作为乳腺生物反应器，使其能合成EPO。下列叙述正确的是（　　）
A．用显微注射技术将含EPO基因的表达载体导入羊的乳腺细胞中，可得到乳腺生物反应器
B．构建基因表达载体时，需将EPO基因与乳腺蛋白基因的启动子重组在一起
C．该转基因羊中的EPO基因可在羊的乳腺细胞中表达
D．可通过PCR技术检测EPO基因是否插入山羊基因组
19．骨关节炎是犬类常见的疾病，导致软骨损伤和疼痛。神经生长因子（NGF）通过与细胞表面受体（NGFRs）的相互作用，调节骨关节炎的疼痛感知。科研人员利用杂交瘤细胞技术，开发出能结合NGF 并阻断其与受体结合的单克隆抗体（mAb）。下列相关叙述正确的有（　　）
A．制备单克隆抗体（mAb）的过程中至少要经过两次筛选，其原理和目的均不同
B．杂交瘤细胞无需识别 NGF 就能产生mAb
C．体外扩大培养能产生 mAb的杂交瘤细胞需要用胰蛋白酶处理以防止发生接触抑制
D．在实际应用中还应对 mAb 进行一定程度的改造以减轻可能对犬产生的副作用
20．甘薯由于能增强免疫功能、防癌抗癌而越来越被人们喜爱。但甘薯具有自交不育和杂交不亲和性，这使甘薯生产和育种存在诸多难以解决的问题。下列有关植物细胞工程的说法，合理的是（ ）
A．利用植物组织培养技术可以高效、快速地实现种苗的大量繁殖
B．利用培养的愈伤组织进行诱变育种，可以显著提高基因突变率，定向获得有用的突变体
C．利用原生质体的融合实现体细胞杂交，可以克服杂交不亲和的障碍，充分利用遗传资源
D．利用茎尖分生组织培育脱毒苗，能使植株具备抗病毒的能力，同时使产品质量得到提高
三、解答题
21．请回答下列与生物技术实践相关的问题。
(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌这两种方法来避免杂菌的污染，用酒精棉球擦拭操作者双手和用酒精灯火焰灼烧接种环分别属于 （方法）和 （方法）。
(2)利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中筛选出能分解纤维素的细菌，这类细菌经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。土壤中富含各种微生物，将土壤浸出液接种到特定培养基上，可得到能分解纤维素的细菌，实验室中获取纯净菌种常用的接种方法有 和 。
(3)虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、 、 。
22．尿素[CO（NH2）2]含氮量高，化学性质相对稳定，是现代农业生产中一种重要的氨肥，但只有当其被细菌分解成铵态氮后，才能更好地被植物吸收。回答下列问题：
(1)某研究小组认为根据下表成分配制的培养基不能用于筛选分离尿素分解菌，理由是 ，若要筛选并鉴定该种细菌，需要对下表培养基的成分进行修改，具体修改措施为 ，并根据菌落周围出现 鉴定该菌。
KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4 7H2O 蛋白胨 葡萄糖 尿素 蒸馏水
1.4g 2.1g 0.2g 1.0g 10.0g 1.0g 定容至1000mL
(2)下图表示该研究小组对尿素分解菌进行分离、计数的实验流程，经适当培养后，5个平板上的菌落数分别为155、175、150、41、160个，分析第四个平板菌落数较低的原因可能是 ，1g土壤中的活菌数约为 个（保留小数点后两位），用这种方法统计得到的数值往往 （填“偏大”或“偏小”）。
(3)该研究小组将分离到的尿素分解菌在最适培养温度条件下进行振荡培养，并测定其生长曲线如上图所示。（注：OD600为样品中蛋白质、核酸的浓度，用此指标来代表细菌浓度；A点为培养10h时的细菌浓度）。
振荡培养的目的是 ，通常在培养末期细菌的数量会显著减少，但图中研究人员实际测得的细菌浓度下降较慢，最可能的原因是 。
23．研究人员采用酶联免疫法检测大鼠海马组织中5-HT的水平，检测原理如下图所示。
(1)据图分析，特异性抗体的获得可通过将5-HT 作为抗原，利用 技术制备。洗涤的目的是 。加底物后经酶催化显色，在一定范围内，溶液颜色的深浅与 成正比，因此用酶联免疫检测仪对其进行定量测定。
(2)利用该方法检测时，待测抗原 （需要/不需要）事先纯化；该方法涉及的生物学原理有 （写出两点）。
24．紫杉醇是红豆杉合成的一种重要抗癌物质。请回答下列相关问题：
（1）进行红豆杉愈伤组织的诱导和培养时，最好取春季新长出的茎叶，经 处理后再接种到诱导培养基中培养。形成的愈伤组织细胞在显微镜下观察通常是呈现出许多不同形态的原因是 。诱导愈伤组织的形成时常进行避光培养，此时植物细胞的代谢类型为 型。
（2）为了筛选出紫杉醇含量高的品种，可将诱导出的愈伤组织接种至含液体培养基的三角瓶中振荡培养，影响细胞的生长速度和紫杉醇含量的因素除了培养条件如温度、pH、光照等，培养基的营养物质及细胞遗传特性外，还受 （答出2点即可）等影响。除了培育出高产红豆杉植株外，还可通过 技术形成细胞系，实现紫杉醇的工业化生产。
（3）如要将外源基因导入红豆杉细胞进行遗传改造，主要途径有：以经改造的农杆菌 为载体，通过 的农杆菌感染受体植物的途径导入；也可通过显微注射法将外源基因直接导入；还可以将外源DNA包裹在人工合成的脂质体中，通过与 融合，再通过 方法分离纯化受体细胞，以便后续的筛选操作。
25.某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析回答下列问题。
（1）培养基中加入化合物A的目的是 ，这种培养基属于 培养基。
（2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的 。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的呼吸作用类型是 。
（3）转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是 ，操作时采用 灭菌的方法。
（4）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是 。
（5）某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用10-4、10-5、10-6稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是 ，此对照实验的目的是证明 过程中是否被杂菌污染。
26．白菜、甘蓝均为二倍体，体细胞染色体数目分别为20、18。“白菜甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强、易于贮藏等优点。如图为“白菜甘蓝”的培育过程，请回答下列问题：
(1)由原生质体A和原生质体B形成原生质体C的过程中，常使用的诱导剂是 ，该过程体现了细胞膜具有 性。
(2)由细胞D得到愈伤组织的过程叫作 ；由愈伤组织得到根、芽等器官的过程叫作 。由细胞D得到一个完整的杂种植株，需要采用的细胞工程技术是 ，该过程体现了细胞D具有 性。
(3)经花粉培育的二倍体“白菜甘蓝”植株，体细胞的染色体数为 。这种植株通常不育，为使其可育，可通过人工诱导产生四倍体“白菜甘蓝”，这种变异属于 。
(4)上述育种方法与传统杂交育种方法相比较其优点在于 。
参考答案
题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 B C B D C C B A D A
题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案 D C C D C BCD BC BCD ABD AC
21．(1) 消毒 灭菌
(2) 平板划线法 稀释涂布平板法
(3) 无机盐 氮源
22．(1) 培养基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源（培养基中含蛋白胨，蛋白胨中含氮元素） 去掉蛋白胨、添加琼脂和酚红 红色
(2) 涂布器灼烧灭菌后未冷却，导致涂布时部分菌体死亡 1.60×108 偏小
(3) 增加培养液中溶解氧的含量，利于菌体与营养液的接触 死亡菌体中的蛋白质、核酸没有分解（或测得的是蛋白质、核酸浓度而不是细胞浓度；或死亡菌体没有自溶，不能与活菌区分）
23．(1) 单克隆抗体制备 洗去未结合的材料，以免干扰实验结果 样品中5-羟色胺（或 5-HT）的含量（或浓度）
(2) 不需要 抗原与抗体的识别具有特异性（或抗原与抗体发生特异性结合）、酶（的催化功能）具有专一性
24． 消毒 细胞壁薄 异养需氧型 振荡速度或气体浓度 传代培养 Ti质粒 重组质粒 原生质体 稀释涂布平板法
25． 筛选目的菌 选择 化合物A 有氧呼吸 接种环 灼烧 防止造成环境污染 不接种的空白培养基（或接种无菌水的培养基） 培养基制备
26．(1) 聚乙二醇(PEG)　 流动
(2) 脱分化　 　 再分化 植物组织培养 全能
(3) 19　 染色体变异
(4)能克服远缘杂交的不亲和性(障碍)

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