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（4）动物细胞工程
——高二生物学苏教版（2019）选择性必修三期末易错题集训
【易错点分析】
一、动物细胞培养
对培养条件理解不透彻：误认为 CO 的作用只是维持气体平衡或用于细胞呼吸，实际上动物细胞培养时加入 5% CO 主要是为了维持培养液的 pH
混淆原代培养和传代培养：原代培养是从机体取出后立即进行的培养，而传代培养是将原代培养的细胞分瓶继续培养。不清楚在传代培养到 10 - 50 代时，部分细胞的细胞核型可能会发生变化，遗传物质稳定性降低
细胞来源及特点易错：一般选择动物胚胎或出生不久的幼龄动物组织进行培养，因为其细胞生命力旺盛、增殖能力强，而不是随意选择动物组织
二、动物细胞核移植
对受体细胞的选择原因不清楚：核移植时通常选 MⅡ 期（减数分裂 Ⅱ 中期）的卵母细胞，原因是此类细胞体积大，易于操作；卵黄多，营养物质丰富；其细胞质中存在激发细胞核全能性表达的物质
认为克隆动物与供体动物性状完全相同：克隆动物的性状与供体动物基本相同，但不完全相同。因为克隆动物细胞质中的遗传物质来自去核卵母细胞，会对其性状产生影响，而且性状还受环境影响，在个体发育过程中也可能发生基因突变
三、动物细胞融合
误认诱导方法通用：灭活病毒诱导法是动物细胞融合特有的方法，植物体细胞杂交一般不用该方法诱导融合
对融合细胞类型判断错误：动物细胞融合后会得到多种类型的细胞，如未融合的细胞、同种细胞融合形成的细胞（“B - B” 细胞、“瘤 - 瘤” 细胞）和杂交瘤细胞（“B - 瘤” 细胞），需要用特定的选择培养基进行筛选
四、单克隆抗体的制备
两次筛选的目的和方法混淆
第一次筛选是用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，淘汰未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞
第二次筛选是通过多孔培养皿进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞
对单克隆抗体特点理解不准确：单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高、能大量制备的特点，与血清抗体相区别。血清抗体由浆细胞分泌，一般从血清中分离，产量低、纯度低、特异性差
【易错点练习】
1.下列关于动物细胞培养的叙述正确的是( )
A.动物细胞培养与植物组织培养依据的原理都是细胞的全能性
B.动物细胞培养时，定期更换培养液的目的是防止杂菌污染
C.在将组织分散成单个细胞时，可采用机械法，或利用胃蛋白酶进行的酶解法
D.在进行传代培养时，悬浮培养的细胞一般采用离心法收集
2.体细胞核移植技术最初是用玻璃微型吸管将供体细胞的细胞核吸出，再注入去核卵母细胞内，后来发展出了另外一种方法，即直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，然后用病毒介导或者电脉冲等方式使两个细胞融合,下列有关叙述错误的是( )
A.与最初的方法相比,第二种方法操作简便，对卵母细胞和细胞核损伤较小
B.在最初的方法中，也需要利用某种方式诱导去核卵母细胞与体细胞核的融合
C.在第二种方法中，两个细胞融合形成的重构胚在体外可发育成克隆动物
D.用上述两种方法得到的克隆动物都不只具备一个亲本的遗传特性
3.下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是( )
A．培养液中通常需要添加血清等天然成分
B．传代培养前可用胃蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散
C．分瓶培养前需用培养液稀释调整到合适的细胞密度
D．培养过程中通过定期更换培养液以保证无毒环境
4.噬菌体抗体库技术可制备人源单克隆抗体，其核心步骤为:将人源抗体基因插入噬菌体衣壳蛋白基因中,使噬菌体表面展示抗体蛋白，再通过抗原结合筛选获得特定抗体。这种方式不仅可以获得具有人源性质的单抗，还可以利用抗原直接从库中筛选出所需基因，不需要细胞融合，甚至不经过免疫动物，实验周期短，过程相对简单,是人源抗体制备技术的重大突破。下列有关叙述正确的是( )
A.噬菌体抗体库技术需要将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合
B.噬菌体表面展示的抗体可直接用于人体疾病治疗，无需进一步纯化
C.筛选过程中需用特定抗原与噬菌体表面的抗体进行特异性结合
D.该技术需将人源抗体基因插入噬菌体基因中进行基因克隆
5.甲状旁腺激素（PTH）水平是人类多种疾病的重要诊断指标。研究者制备单克隆抗体用于快速检测PTH,制备过程如图所示。下列叙述错误的是( )
A.过程②需在培养箱中提供一定浓度的CO2,其作用是维持培养液的pH
B.过程①用化学方法诱导融合时可选用PEG,能得到三类两两融合的细胞
C.将细胞甲在选择培养基筛选获得的杂交瘤细胞，注入小鼠腹腔即可生产抗PTH的抗体
D.经过程③专一抗体检测可获得抗PTH的杂交瘤细胞
6.三特异性抗体（简称“三抗”）可靶向治疗小鼠多发性骨髓瘤（MM）,显著提高机体对MM细胞的杀伤力，其作用机理如图所示。下列相关叙述错误的是( )
A.单克隆抗体可通过杂交瘤技术制备，三特异性抗体可能由其加工而成
B.利用蛋白质工程可以直接将三种抗体融合获得三抗
C.三抗与TCR结合可保持较高的T细胞活性
D.三抗与CD28结合可抑制T细胞死亡从而提升T细胞的持久性
7.传统鼠源单抗可被人体免疫系统识别而产生免疫反应，导致单抗失效。科研人员对小鼠的相关基因进行改造，制备了人源化的HER2（人表皮生长因子受体2）单抗，该单克隆抗体可特异性结合乳腺癌细胞。下列叙述错误的是( )
A.人源化HER2单抗制备时可多次给小鼠注射HER2
B.鼠源HER2单抗进入人体后可能会诱导人体产生抗HER2单抗的抗体|
C.荧光标记的人源化HER2单抗可用于乳腺癌细胞的定位诊断
D.人源化HER2单抗制备利用了基因工程、核移植技术
8.杂交瘤细胞容易出现B淋巴细胞的染色体丢失问题，科学家利用EBV（一种病毒）刺激B淋巴细胞，从而获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞。EBV转化细胞能够在HAT培养基中存活，但骨髓瘤细胞不能，操作过程如图所示。下列叙述错误的是( )
A.①可以用PEG诱导EBV转化细胞和骨髓瘤细胞融合
B.HAT培养基的作用是筛选出杂交细胞
C.图示操作过程均需要用到二氧化碳培养箱
D.杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生抗EBV的抗体
9.T细胞表面的受体(CTLA-4)可阻断T细胞的抗原呈递，从而抑制细胞毒性T细胞增殖。抗CTLA-4的抗体可解除细胞毒性T细胞增殖的抑制，从而提高机体的免疫力。科研人员通过动物细胞融合技术制备抗CTLA-4单克隆抗体的过程如图所示，只考虑细胞的两两融合。下列叙述错误的是( )
A.多次给小鼠注射CTLA-4后获取已免疫的B细胞
B.过程①通过PEG或灭活病毒诱导可得到多种细胞
C.第一次筛选的过程中需要进行抗体检测
D.培养杂交瘤细胞的培养基通常需要加入血清
10.为了检测药物X、Y和Z的抗癌效果，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肺癌细胞，使其贴壁生长。实验组分别加入等体积、相同浓度溶于二甲基亚砜(溶剂)的药物X、Y或Z,培养过程及结果如图所示。下列叙述错误的是( )
A.细胞培养液中通常需要加入一定量的抗生素防止细菌污染
B.对照组中应加入等体积的二甲基亚砜排除体积和溶剂等无关因素的影响
C.计数时用胃蛋白酶处理贴壁细胞,使肺癌细胞脱落下来
D.根据实验结果,药物X的抗癌效果比Y好,药物Z没有抗癌作用
11.如图是科研人员将药物与单克隆抗体连接形成的抗体－药物偶联物 (ADC) 的示意图，它由抗体、接头和小分子药物三部分组成，能实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。例如用于治疗乳腺癌的Kadcyla是由阿多曲妥珠单抗和药物美坦新偶联的ADC。下列叙述错误的是( )
A.单克隆抗体由杂交瘤细胞以胞吐方式释放体现了细胞膜的流动性
B.药物美坦新识别并杀伤乳腺癌细胞体现了抗原－抗体的特异性结合
C.ADC中接头稳定性偏低会导致药物分子容易脱落对正常细胞造成损伤
D.ADC设计需综合考虑抗体选择、药物分子大小及其细胞毒性等问题
12.人体干细胞包括胚胎干细胞和成体干细胞，具有很强的分裂能力，在一定条件下，还可以分化成其他类型的细胞。成体干细胞是成体组织或器官内的干细胞，如造血干细胞。下列叙述正确的是( )
A.成体干细胞的分化程度低于胚胎干细胞，分裂能力高于胚胎干细胞
B.骨髓移植治疗白血病利用了造血干细胞分化成各种血细胞的能力
C.同一个体的小肠上皮细胞和胚胎干细胞的蛋白质种类都不相同
D.成体干细胞中基因都不表达时，细胞开始凋亡
13.通过动物细胞融合技术获得的杂交瘤细胞,可以产生单克隆抗体。在此基础上,科研人员继续进行实验,获得双杂交瘤细胞以产生双特异性抗体,双特异性抗体可以同时结合两种不同的抗原,其制备过程如图所示。图中融合细胞经过多次检测和筛选,才能得到少量能产生双特异性单克隆抗体的单克隆杂交一杂交瘤细胞,不可能的原因是( )
A.融合细胞随机丢失部分染色体,缺少与抗体合成有关的基因
B.组成抗体的不同多肽链有多种组合,能够形成的抗体类型较多
C.融合处理时条件不适宜,单克隆杂交瘤细胞和脾脏细胞融合率较低
D.单克隆杂交瘤细胞和B细胞融合后,形成一种融合细胞
14.下列有关植物组织培养和动物细胞培养的比较，正确的是( )
植物组织培养 动物细胞培养
原理 植物细胞的全能性 细胞增殖
培养前的处理 离体 将组织细胞分散开
特有成分 植物激素 血清
特殊环境条件 再分化需光 气体环境
主要过程 脱分化、再分化 原代培养、传代培养
A.后者没有体现细胞的全能性，是因为细胞核中没有本物种全套的遗传物质
B.将动物组织细胞分散开时只能使用胶原蛋白酶或胰蛋白酶
C.两者的培养过程都只涉及有丝分裂，不进行减数分裂
D.植物组织培养时也有将组织细胞分散开的操作
15.利用杂交瘤技术制备针对特定抗原的单克隆抗体的过程如图所示。下列叙述正确的是( )
A.用于融合的B淋巴细胞应从未受外界抗原刺激的动物中提取
B.筛选1过程通过鉴别培养基能够分离出杂交瘤细胞
C.筛选2过程通过抗体检验以获得所需的特定杂交瘤细胞
D.选出的杂交瘤细胞只能通过体外培养获得大量单克隆抗体
16.亚麻酸（LA）能够促进卵母细胞体外成熟和囊胚发育。为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据，科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响。分析回答：
①卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在5%CO2的培养箱中培养22~24h。
②卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，其培养到减数第二次分裂中期视为成熟，统计结果如表1。
③体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微镜观察判断是否完成受精。
④早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养44~48h后检查分裂情况，每隔48h更换一次培养液，第5~9天观察囊胚发育情况，统计结果如表2（未标明的单位均为“个”）。
表1亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟的影响
LA浓度（μ.mol L-1） 培养卵数 囊胚数
0 229 137
10 201 133
50 227 166
100 215 137
200 215 135
表2亚麻酸对水牛早期胚胎发育的影响
LA浓度（μ.mol L-1） 培养卵数 分裂数 囊胚数
0 309 171 75
10 325 182 82
50 292 185 97
100 310 185 84
200 231 145 68
（1）步骤①中，细胞培养箱中加5%CO2的作用是_______________________。
（2）步骤②中，成熟卵母细胞内染色体的行为特征是_______________。步骤③中，体外受精过程主要包括_______________和受精等主要步骤。
（3）步骤④中，受精卵在经过_______________（填一个时期）期后发育成囊胚。
（4）根据实验数据分析，亚麻酸溶液浓度为200μmol·L-1时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起______________（填“促进”或“抑制”）作用。
（5）实验结果表明，______________μmol·L-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都最有利，判断依据是_________________________________________________________________。
17.恶性肿瘤往往先向淋巴结初始转移形成淋巴结转移瘤,再经淋巴结实现远端转移。科学家开展实验探索肿瘤初始转移的机制以及淋巴结转移对远端转移的影响。
(1)正常情况下,原位瘤细胞转移至淋巴结会激活NK细胞和细胞毒性T细胞,前者非特异性杀伤瘤细胞,后者则在辅助T细胞分泌的_____________的作用下,经_____________过程产生新的细胞毒性T细胞裂解瘤细胞。
(2)将原位瘤细胞FO和淋巴结转移的瘤细胞LN6等量接种于同一健康小鼠体内进行研究,过程如图1。

①已知FO和LN6的增殖能力无显著差异,图1结果说明_____________向淋巴结转移的能力更强。
②为排除红绿荧光蛋白可能存在的检测差异干扰实验结果,需增设一组实验,大致思路为____________。
(3)为探究原位瘤细胞初始转移的机制,科研人员又开展了如下实验:
①将FO中编码MHC-1分子关键蛋白的基因敲除,再将其接种于小鼠体内,发现其向淋巴结转移的能力降低,但去除该小鼠的NK细胞后其转移能力恢复。说明NK细胞通过识别_____________(高表达/低表达)的MHC-1杀伤瘤细胞。
②PD-L1可与T细胞表面的特定蛋白结合,抑制其杀伤作用。进一步研究表明原位瘤细胞通过调节MHC-1分子和PD-L1的表达量,抑制NK和T细胞的杀伤作用,以增强转移能力。请在表格中填写“高”或“低”,将支持上述结论的实验结果补充完整______。
肿瘤细胞的类型 MHC-1分子表达量 PD-L1分子表达量
来自于正常小鼠的淋巴结转移瘤 A C
来自于T细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤 B 低
来自于T和NK细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤 低 D
答案以及解析
1.答案：D
解析：A、植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性，而动物细胞培养的原理是细胞的增殖，A错误；
B、动物细胞培养时定期更换培养液的主要目的是清除代谢产物，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害，而不是防止杂菌污染，B错误；
C、用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理剪碎的动物组织，可使其分散成单个细胞，也可采用机械方法获得单个细胞，胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。而多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，因此胃蛋白酶并不适用于此过程，C错误；
D、进行传代培养时，悬浮培养的细胞处于游离状态，因而可直接用离心法收集，D正确。
故选D。
2.答案：C
解析：直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内,然后用病毒介导或者电脉冲等方式使两个细胞融合,避免了吸取细胞核和注入去核卵母细胞内等操作,故与最初的方法相比,第二种方法操作简便,对卵母细胞和细胞核损伤较小,A正确。在最初的方法中,需要利用某种方式诱导体细胞核与去核卵母细胞的融合,B正确。利用核移植技术获得的重构胚需要移植给受体,才能发育成克隆动物,C错误。最初的方法获得的重组细胞中存在供体细胞细胞核中的遗传物质和卵母细胞细胞质中的遗传物质;第二种方法获得的重组细胞中存在供体细胞中的遗传物质和卵母细胞细胞质中的遗传物质,故用这两种方法得到的克隆动物都不只具备一个亲本的遗传特性,D正确。
3.答案：B
解析：培养液中通常需加入血清、血浆等天然成分，为动物细胞增殖过程提供必需的成分，A正确；传代培养前可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散，不用胃蛋白酶，B错误；分瓶培养前需用培养液稀释调整到合适的细胞密度，有利于细胞增殖，C正确；细胞培养液应定期更换，以便清除代谢废物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，D正确。
4.答案：C
解析：噬菌体抗体库技术无需细胞融合,A错误。噬菌体表面展示的抗体需从噬菌体表面分离纯化后才能用于疾病治疗,B错误。噬菌体抗体库技术的筛选依赖于抗原与抗体特异性结合,通过固定抗原筛选出对应抗体,C正确。该技术无需克隆抗体基因,D错误。
5.答案：C
解析：动物细胞需在95%空气和5%CO2的培养箱中培养,CO2的作用是维持培养液的pH。过程①为两种动物细胞融合,可选用化学方法诱导融合,PEG为融合剂,能得到B细胞一B细胞、骨髓瘤细胞一骨髓瘤细胞和B细胞一骨髓瘤细胞三类两两融合的细胞。制备单克隆抗体的过程中至少需要两次对细胞进行筛选；第一次是在特定的选择性培养基上,将杂交瘤细胞筛选出来;由于筛选出的杂交瘤细胞有很多种,因此第二次筛选的目的是通过专一抗体检测阳性和克隆化培养,从很多种杂交瘤细胞中将既能大量增殖、又能产生抗PTH抗体的杂交瘤细胞筛选出来。
6.答案：B
解析：可通过杂交瘤技术制备单克隆抗体,三特异性抗体可结合三种抗原,可能由单克隆抗体加工而成,A正确；蛋白质工程是通过改造或合成基因来改造现有蛋白质或制造一种新蛋白质的技术,不是直接对蛋白质进行改造,B错误；由题图可知,三抗能结合MM细胞表面抗原CD38,同时结合T淋巴细胞表面受体CD28,抑制T细胞死亡,再同时结合T淋巴细胞表面受体TCR,促进T细胞活化,产生并释放细胞因子,从而提高机体对MM细胞的杀伤力,C、D正确。
7.答案：D
解析：
选项 题干信息 分析 正/误
A - 制备HER2单抗需要多次给小鼠注射HER2 A正确
B 鼠源单抗可被人体免疫系统识别而产生免疫反应 鼠源HER2单抗进入人体后会诱导人体产生抗HER2单抗的抗体 B正确
C 人源化的HER2单抗可特异性结合乳腺癌细胞 荧光标记的人源化HER2单抗可用于乳腺癌细胞的定位诊断 C正确
D 对小鼠的相关基因进行改造,制备了人源化的HER2单抗 利用了基因工程,未利用核移植技术 D错误
8.答案：D
解析：可采用化学诱导剂PEG诱导动物细胞融合,A正确；细胞融合后需要将杂交细胞筛选出来,然后通过抗体检测筛选出分泌特异性抗体的杂交瘤细胞,因此推测HAT培养基的作用是筛选出杂交细胞,B正确;图示操作过程均涉及动物细胞培养,培养动物细胞需要利用二氧化碳培养箱,C正确;杂交瘤细胞既能无限增殖又能产生针对特定抗原的抗体,而不是产生抗EBV的抗体,EBV(一种病毒)用来刺激B淋巴细胞,从而获得“染色体核型稳定”的EBV转化细胞,D错误。
9.答案：C
解析：
10.答案：C
解析：抗生素具有抑制细菌作用,为防止培养液被细菌污染,可在培养液中加入一定量的抗生素,A正确；加入等体积的二甲基亚砜溶剂作为空白对照,可以排除体积和溶剂等无关因素的影响,B正确;要使贴壁细胞从瓶壁上脱离下来,需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理,C错误;分析实验结果,加入药物X的组癌细胞个体数是6.7×104个/孔,加入药物Y的组癌细胞个体数是5.3×105个/孔,说明药物X的抗癌效果比Y好,加入药物Z的组癌细胞个体数是8.0×106个/孔,高于空白对照组,说明药物Z无抗癌作用,D正确。
11.答案：B
解析：单克隆抗体由杂交瘤细胞合成并分泌，分泌过程为胞吐过程，体现了细胞膜的流动性，A正确；药物美坦新并不具有识别作用，单克隆抗体具有识别作用，B错误；ADC中接头的作用是连接药物分子，其稳定性偏低可能会导致药物分子脱落，进而与正常细胞接触，造成正常细胞的损伤，C正确；ADC由药物与单克隆抗体连接形成，其设计需考虑抗体选择，选择能与靶细胞(或器官)结合的抗体，还需考虑药物分子大小及其细胞毒性，使药物分子能被顺利带到靶细胞处发挥作用，D正确。
12.答案：B
解析：A、成体干细胞的分化程度高于胚胎干细胞，分裂能力低于胚胎干细胞，A错误；
B、骨髓移植治疗白血病利用了造血干细胞分化成各种血细胞的能力，B正确；
C、同一个体的小肠上皮细胞和胚胎干细胞的蛋白质种类不完全相同，C错误；
D、细胞凋亡是由基因所决定的细胞自动结束生命的过程，所以细胞凋亡时，与凋亡相关的基因表达导致细胞凋亡，D错误。
故选B。
13.答案：D
解析：第一步:整体浏览选项,与图示信息进行匹配;第二步:深入分析选项正误由图中细胞染色体数可知,动物细胞融合时会发生染色体的随机丢失,若丢失与抗体合成有关的染色体,则会影响融合细胞合成抗体,A符合题意。由图可知,抗体由两条重链和两条轻链组成,不同的多肽链组合可以形成的抗体类型较多,故部分融合细胞产生的抗体可能不是双特异性单克隆抗体,B符合题意。若融合处理时条件不适宜,单克隆杂交瘤细胞和脾脏细胞融合率较低,则形成所需的融合细胞较少,C符合题意。单克隆杂交瘤细胞和B细胞融合后,形成多种融合细胞,其中能产生双特异性单克隆抗体的占比较小,D不符合题意。
14.答案：C
解析：动物细胞培养的原理是细胞增殖，该过程没有体现细胞的全能性，但动物细胞核中有本物种全套的遗传物质，A错误;将动物组织细胞分散开，除使用胶原蛋白酶或胰蛋白酶外，还可使用机械法，B错误；植物组织培养和动物细胞培养的原理分别是植物细胞的全能性和细胞增殖，这两个过程都只涉及有丝分裂，细胞不进行减数分裂，C正确；植物组织培养时设有将组织细胞分散开的操作D错误。
15.答案：C
解析：A、用于融合的B淋巴细胞应从受特定抗原刺激的动物中提取，A错误；B、要分离出杂交瘤细胞，应该用选择培养基进行筛选，B错误；C、为获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，可以通过抗体检验进行筛选，C正确；D、选出的杂交瘤细胞可通过植入小鼠腹腔中增殖或体外培养获得大量单克隆抗体，D错误。故选C。
16.答案：（1）维持培养液pH的相对稳定
（2）染色体的着丝粒排列在赤道面上；卵母细胞的采集、精子的获取
（3）桑椹胚
（4）促进
（5）50；该浓度下核成熟卵子数占卵母细胞数的比例最高，囊胚数占培养卵数的比例最高
解析：（1）动物细胞培养时，细胞培养箱中加5%CO2的作用是维持培养液pH的相对稳定。
（2）根据题意，卵母细胞培养到减数第二次分裂中期时视为成熟，而减数第二次分裂中期的染色体行为特征是染色体的着丝粒排列在赤道面上。哺乳动物的体外受精过程主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等主要步骤。
（3）早期胚胎发育过程为：受精卵→桑椹胚→囊胚→原肠胚。
（4）分析表格可知，与亚麻酸溶液浓度为0umol·L-1的组别（对照组）相比，亚麻酸溶液浓度为200umol·L-1时，核成熟卵子数占卵母细胞数的比例较高，囊胚数占培养卵数的比例较高，说明此浓度的亚麻酸溶液对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起促进作用。
（5）分析表格可知，亚麻酸溶液浓度为50umol·L-1时，核成熟卵子数占卵母细胞数的比例最高，囊胚数占培养卵数的比例最高，因此50umol·L-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都最有利。
17.答案：(1)细胞因子;分裂(增殖)分化
(2)LN6;对F0转入红色荧光蛋白基因,对LN6转入绿色荧光蛋白基因,重复上述实验。
(3)低表达
肿瘤细胞的类型 MHC-1分子表达量 PD-L1分子表达量
来自于正常小鼠的淋巴结转移瘤 高 高
来自于T细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤 高 低(给出)
来自于T和NK细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤 低(给出) 低
解析：(1)辅助性T细胞能分泌细胞因子,加强免疫效应,细胞毒性T细胞在辅助性T细胞分泌的细胞因子的作用下,经分裂(增殖)分化过程产生新的细胞毒性T细胞裂解瘤细胞。
(2)①由图1可知,每组小鼠的红色荧光细胞的百分比都比绿色荧光蛋白细胞的百分比高,FO和LN6的增殖能力无显著差异,图1结果说明LN6向淋巴结转移的能力更强。
②为排除红绿荧光蛋白可能存在的检测差异干扰实验结果,需增设一组实验,大致思路为对FO转入红色荧光蛋白基因,对LN6转入绿色荧光蛋白基因,重复上述实验。
(3)①FO中编码MHC-1分子关键蛋白的基因敲除,MHC-1分子关键蛋白减少,发现其向淋巴结转移的能力降低,但去除该小鼠的NK细胞后其转移能力恢复。说明NK细胞通过识别低表达的MHC-1杀伤瘤细胞。
②NK细胞通过识别低表达的MHC-1杀伤瘤细胞。所以来自于T细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤和来自于正常小鼠的淋巴结转移瘤中MHC-1分子表达量高,从而抑制NK细胞的杀伤作用,PD-L1可与T细胞表面的特定蛋白结合,抑制其杀伤作用,所以来自于T细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤和来自于T和NK细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤中PD-L1分子表达量,来自于正常小鼠的淋巴结转移瘤中PD-L1分子表达量高。表格如下所示。
肿瘤细胞的类型 MHC-1分子表达量 PD-L1分子表达量
来自于正常小鼠的淋巴结转移瘤 高 高
来自于T细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤 高 低(给出)
来自于T和NK细胞缺失小鼠的淋巴结转移瘤 低(给出) 低

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